分枝杆菌

分枝杆菌分离培养和药敏试验引言分枝杆菌（Branchiobdella）是一类无脊椎动物寄生虫，常见于淡水环境中。

它们具有扁平的身体和分枝状的触手，因此得名。

分枝杆菌对环境条件非常敏感，因此分离培养和药敏试验对其研究具有重要意义。

分枝杆菌分离培养的方法1.样品采集：在淡水环境中选择活跃的分枝杆菌寄生体作为样品。

2.样品处理：将样品置于理化条件适宜的培养基中，如R2A培养基等。

以适宜的温度和光照条件下培养。

3.分离纯培养：利用无菌技术将分枝杆菌从其他微生物分离出来。

常用方法包括稀释涂布法、均匀涂布法等。

4.单菌种培养：将分离得到的单个分枝杆菌菌落接种到新的培养基上进行单菌种培养。

5.培养基优化：根据菌株特性，优化培养基组成、温度、光照和其他环境条件。

通过观察菌落形态、生长速度等指标，选择适宜的培养条件。

分枝杆菌药敏试验的方法1.制备药敏试验板：选择适宜的培养基，如Mueller-Hinton琼脂、肉汤琼脂等。

将药物分别加入琼脂中，并制备成不同浓度的试验板。

2.培养分枝杆菌：将分枝杆菌菌液均匀涂布在药敏试验板上，培养在适宜的温度下。

3.药敏试验观察：观察菌落的生长情况和抑菌效果。

记录最小抑菌浓度（MIC）。

4.药敏结果解读：根据国际标准或相关研究的参考值，判断分枝杆菌对药物的敏感性和抗药性。

可以根据MIC值进行药物分类，如敏感、中度敏感和耐药。

5.药敏结果分析：根据实验结果，分析分枝杆菌的药物抗性特征，为临床治疗提供参考。

结论分枝杆菌分离培养和药敏试验是研究该虫寄生虫的重要手段。

合理的分离培养方法可以得到纯种菌落，为后续研究和药敏试验提供可靠的基础。

药敏试验能够判断分枝杆菌对药物的敏感性，为临床治疗提供重要参考。

参考文献： 1. Johnston, D.J. (2000). A new family of Branchiobdellidan (Annelida: Clitellata) ectosymbiontic on freshwater crayfishes: The Evansobdellidae. Proceedings of the Biological Society of Washington, 113(3): 842-850. 2. Erséus, C. (2001). Chapter 25 PhylumAnnelida: Clitellata, Branchiobdellida. In: Animal biodiversity: an outline of higher-level classification and survey of taxonomic richness (ed. by Z.Q. Zhang). pp. 281-282. 3. Erséus, C. (2005). Order Branchiobdellida. In: Annelida: Polychaeta, Myzostomida, Branchiura and Vestimentifera (ed. by J. B. Hutchings, S. P. Nimis, and C. Reish). pp. 97-100.。

第15章分枝杆菌表15-1 分枝杆菌的分类分类生长速度菌落和色素产生代表菌种致病性结核分枝杆菌复合群生长缓慢结核分枝杆菌、牛分枝杆菌结核病非结核分枝杆菌RunyonⅠ组生长缓慢菌落不见光时为淡黄色,光照后则变为黄色或橙色堪萨斯分枝杆菌(M.kansasii)、海分枝杆菌(M. marinum ) 肺结核样病变；皮肤丘疹、结节与溃疡RunyonⅡ组在37℃生长缓慢在暗处培养时菌落呈橘红色瘰疠分枝杆菌(M. scrofulaceum)儿童淋巴结炎RunyonⅢ组40～42℃下生长慢通常不产生色素鸟-胞内分枝杆菌(M.avium)结核样病变，多见于肺与肾RunyonⅣ组在25～45℃快速生长。

培养5～7天即可见到菌落个别种产生色素偶发分枝杆菌(M.fortuitum)极少致病麻风分枝杆菌人工培养基上不生长麻风第一节结核分枝杆菌俗称结核杆菌，是结核病的病原菌。

该菌可侵1/3感染了结核分枝杆菌。

特别是近年来世界范围内艾滋病的流行，结核病作为最多见的一种机会性感染，成为HIV阳性者死亡的主要原因，因此，结核病已成为全球重大公共卫生问题。

一、生物学性状（一）形态与染色在感染的组织中，结核分枝杆菌细长且直，大小约0.4×3 m（图15-1）；在人工培养基上，不同种呈现丝状、球状、串珠状等多形性。

由于结核分枝杆菌细胞壁中含有大量的脂质，不易着色，一旦被碱性染料着色后能够抵抗盐酸乙醇（含95%的乙醇和3%的盐酸）的脱色作用，被定性为抗酸菌（acid-fast bacteria），一般不用革兰染色法分类为革兰阳性或革兰阴性。

常用齐尼抗酸染色法（Ziehl-Neelsen acid-fast stain），以5%石碳酸复红加温染色后再经3%盐酸乙醇脱色，结核分枝杆菌被染成红色，而其他非抗酸菌及背景则被美蓝复染呈蓝色。

此外，结核分枝杆菌在药物如异烟肼的影响下，亦可变为抗酸染色阴性。

图15-1 痰标本中的结核分枝杆菌（箭头所指）（Brooks et al, 2004）（二）培养和生长特性结核分枝杆菌的初代分离培养应使用选择和非选择培养基。

分枝杆菌属的特点分枝杆菌属（Bacillus）是一类革兰氏阳性的芽孢杆菌，其中包括许多常见的细菌种类。

以下是分枝杆菌属的一些主要特点：1. 形态：分枝杆菌属的细菌是革兰氏阳性细菌，通常呈现为长杆状的细胞形态，有时会有分枝的外观，因此得名“分枝杆菌”。

2. 芽孢形成：这类细菌有很强的芽孢形成能力。

在适宜条件下，它们会形成芽孢，这是一种耐受恶劣环境的休眠状态，可以保护细菌免受极端温度、干旱、紫外线等条件的伤害。

3. 好氧性：大多数分枝杆菌属细菌是好氧生物，也就是说它们需要氧气来生存和进行代谢。

然而，有一些分枝杆菌属细菌也可以在缺氧条件下生长。

4. 好热性：分枝杆菌属有一些细菌种类在高温下生长能力强，甚至可以在70°C以上的温度下生存。

5. 好盐性：部分分枝杆菌属细菌对盐的耐受力较强，可以在含盐的环境中生活。

6. 常见食源细菌：分枝杆菌属的一些细菌是常见的食源细菌，例如肉毒杆菌和炭疽杆菌。

它们会引起食物中毒或其他食源性疾病。

总的来说，分枝杆菌属细菌的特点包括形态特征、芽孢形成能力、好氧性、热耐受性、盐耐受性等。

不同的分枝杆菌属细菌种类可能具有不同的特点。

当然，还有一些其他特点：7. 嗜酸性：某些分枝杆菌属细菌能够在酸性环境中生存和繁殖，这使得它们在一些发酵食品（如酸奶）的制作过程中发挥重要作用。

8. 广泛存在：分枝杆菌属细菌广泛分布于自然界中的土壤、水体、空气等环境中，同时也存在于宠物、农产品和人体等生物体表面和内部。

9. 产生酶和代谢产物：分枝杆菌属的许多细菌能够产生多种酶，例如淀粉酶、蛋白酶和纤维素酶，以利用和分解广泛的有机物质。

此外，一些分枝杆菌属细菌还能产生抗生素等代谢产物。

10. 重要的工业应用：由于其特殊的生理特性和代谢功能，分枝杆菌属细菌在食品加工、饲料添加剂、环境修复和生物工程等领域中具有重要的应用价值。

需要注意的是，尽管分枝杆菌属细菌中的一些种类对人类和环境具有积极作用，但也有一些种类是致病菌，可以引起人类和动物的疾病。

分枝杆菌属分枝杆菌属（Bacillus）是一类芽孢杆菌科中的细菌属，是一种常见的细菌。

分枝杆菌属细菌的形态为革兰氏阳性，有芽孢，不运动。

分枝杆菌属细菌存在于自然界中的土壤、水、空气、动植物沙门氏菌以及人体消化道中等地方。

此外，分枝杆菌属细菌还是许多纤维素降解菌之一，有着重要的应用价值。

1. 发现历史分枝杆菌属的物种首先被德国微生物学家F. Cohn于1872年所描述。

分枝杆菌属名称来源于拉丁语Baculum（杆子）而得名。

起初，包括芽孢杆菌属（Sporolactobacillus）和马铃薯杆菌属（Solanum）在内的多个属别被归于分枝杆菌属之下。

到了20世纪30年代，随着生物学的发展以及生物化学研究的深入，分枝杆菌属内部结构不断明朗起来。

1953年，福克勒（Foukceler）首次使用荧光染色技术，证实了分枝杆菌属细胞内有芽孢的产生，并为之制定了现代概念。

目前，分枝杆菌属内部物种的划分还在持续调整之中。

2. 特征2.1 形态学特征分枝杆菌属细菌形态为革兰氏阳性菌杆，大小为0.5 ~ 1.2 µm × 2 ~ 10 µm，杆状或为不规则形状。

除了胶孢杆菌属之外，其他细菌均不产生胶质囊或鞭毛等结构，而且周围亦不具有较多的纤毛或糖胶成份。

芽孢的形成是分枝杆菌属的一个显著特征。

分枝杆菌属细胞在恶劣环境条件下，通过细胞内分裂并将核质分割成若干形状不一、结构各异的小体，然后将其包裹在亚细胞层次的膜结构内，最终形成成熟的芽孢。

2.2 生理生化特征分枝杆菌属细胞在吸取营养和能量方面非常多样化，能够利用许多有机物和少数无机物。

分枝杆菌属能产生许多酶，包括外排酶、代谢酶、溶解酶等，具有泛酸稳定性。

此外，分枝杆菌属能抵抗许多化学物质和物理条件的影响，能生长于广泛的嗜酸或嗜碱环境中，也能在较高的温度下繁殖。

2.3 分类根据细胞结构、代谢特征及生命周期等特征，目前分枝杆菌属细菌被分为16个物种。

微生物第章：分枝杆菌属一、概述分枝杆菌属（Bacillus）是革兰氏阳性的芽孢杆菌科中最常见的属之一。

其名称来源于其在培养基上形成的分枝的菌体形态。

该属菌体大小相对较大，形态多样，包括直形、杆形、梭形或球形等不同类型。

分枝杆菌属包括很多种类的细菌，一些种类在自然环境中很常见，有着重要的生态、工业和医学应用价值。

二、生态学和鉴定分枝杆菌属中的细菌生活在许多不同的环境中，包括土壤、水、植物、食品和动物的肠道中。

细菌在自然环境中存在着极为广泛的分布，在枯萎的植物、渣滓、泥炭、海水和河流等地方都可以发现其存在。

在实验室条件下，分枝杆菌属可以通过形态特征、代谢特性和生长特点等鉴定方法进行分离和鉴定。

最常用的方法是通过对分枝杆菌在特定培养基上的生长型态观察和菌落形态分析来确定其种属。

三、病原学分枝杆菌属在人类和动物中可以引起多种疾病，包括但不限于食物中毒、牲畜疾病和人类疾病。

尽管其中很多细菌是无害的或有益的，但某些菌株却可以对人类或动物健康构成威胁。

常见的分枝杆菌病原体包括：芽孢杆菌（B. anthracis）, 糖原芽胞杆菌（B. cereus），乳酸吸收性芽胞杆菌 (B. coagulans) 和枯草杆菌（B. subtilis）等。

分枝杆菌的病原性与其产生的细胞外毒素和内毒素有关，而这些毒素的分泌与生长环境和条件有很大关系。

四、工业应用除了在疾病治疗上的作用外，分枝杆菌属在工业生产中还有广泛的应用。

例如，在饮食加工业中，分枝杆菌可以用于制造豆腐、酱油等食品。

同时，分枝杆菌的一些菌株也可以进行微生物发酵生产出某些化合物，如抗生素、植酸酶、纤维蛋白溶酶等。

这些化合物在医药和普通日常生活中也被广泛使用。

五、分枝杆菌属在自然环境、医学、动物和食品加工业、以及其他工业领域都存在着广泛的应用和研究价值。

随着科学技术的发展和研究范围不断扩大，分枝杆菌属的多样性和作用将会得到更深入的了解和研究。