微生物第八章病原学诊断与防治_PPT幻灯片
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病原生物学图文ppt课件教程-第八章--球--菌
（4）术后及植入医用器械引起的感染：
创伤及外科手术后，植入医用器械如心脏起搏器安装、置换人工心瓣膜、长 期腹膜透析、导管感染、人工关节感染、静脉滴注及脑脊液分流术等亦可造 成凝固酶阴性葡萄球菌的感染。目前医院内耐甲氧西林的表皮葡萄球菌感染 已成为瓣膜修复术或胸外科手术中的严重问题。
第一节 葡萄球菌
为年轻妇女急性膀胱炎的主要致病菌，尿道感染仅次于大肠埃希菌。常见的 是表皮葡萄球菌、人葡萄球菌和溶血葡萄球菌。
（2）细菌性心内膜炎：
主要为心瓣膜修复术感染表皮葡萄球菌（特别是安装人工瓣膜者）。
第一节 葡萄球菌
4．凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）的致病性。
（3）败血症：
凝固酶阴性葡萄球菌引起的败血症仅次于大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌，常 见的是溶血葡萄球菌和人葡萄球菌。
第一节 葡萄球菌
4．杀白细胞毒素
大多数致病性葡萄球菌产生破坏白细胞素称 (PV)，杀白细胞 素只攻击中性粒细胞和巨噬细胞，其作用部位主要在白细胞 的细胞膜，使之穿孔通透性增高，K+丢失。表现为白细胞运 动能力丧失，胞内颗粒排出，细胞死亡。
第一节 葡萄球菌
5．肠毒素
▪ 肠毒素从临床分离的金黄色葡萄球菌，约1/3产生肠毒素， 按抗原性和等电点等不同，分为A、B、C1、C2、C3、D 、E、G、H 9个血清型。
▪ 营养要求不高，在普通培养基上生长良好。 ▪ 菌落因种不同而呈现金黄色、白色或柠檬色脂溶性色素，
培养基不着色。 ▪ 在血琼脂平板培养基上，有的菌株菌落周围形成明显的完
全透明溶血环（β溶血），溶血菌株大多有致病性。
第一节 葡萄球菌
（三）生化反应
▪ 触酶试验阳性。 ▪ 多数菌株能分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，产酸不产气。 ▪ 致病株能分解甘露醇。
创伤及外科手术后，植入医用器械如心脏起搏器安装、置换人工心瓣膜、长 期腹膜透析、导管感染、人工关节感染、静脉滴注及脑脊液分流术等亦可造 成凝固酶阴性葡萄球菌的感染。目前医院内耐甲氧西林的表皮葡萄球菌感染 已成为瓣膜修复术或胸外科手术中的严重问题。
第一节 葡萄球菌
为年轻妇女急性膀胱炎的主要致病菌，尿道感染仅次于大肠埃希菌。常见的 是表皮葡萄球菌、人葡萄球菌和溶血葡萄球菌。
（2）细菌性心内膜炎：
主要为心瓣膜修复术感染表皮葡萄球菌（特别是安装人工瓣膜者）。
第一节 葡萄球菌
4．凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）的致病性。
（3）败血症：
凝固酶阴性葡萄球菌引起的败血症仅次于大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌，常 见的是溶血葡萄球菌和人葡萄球菌。
第一节 葡萄球菌
4．杀白细胞毒素
大多数致病性葡萄球菌产生破坏白细胞素称 (PV)，杀白细胞 素只攻击中性粒细胞和巨噬细胞，其作用部位主要在白细胞 的细胞膜，使之穿孔通透性增高，K+丢失。表现为白细胞运 动能力丧失，胞内颗粒排出，细胞死亡。
第一节 葡萄球菌
5．肠毒素
▪ 肠毒素从临床分离的金黄色葡萄球菌，约1/3产生肠毒素， 按抗原性和等电点等不同，分为A、B、C1、C2、C3、D 、E、G、H 9个血清型。
▪ 营养要求不高，在普通培养基上生长良好。 ▪ 菌落因种不同而呈现金黄色、白色或柠檬色脂溶性色素，
培养基不着色。 ▪ 在血琼脂平板培养基上，有的菌株菌落周围形成明显的完
全透明溶血环（β溶血），溶血菌株大多有致病性。
第一节 葡萄球菌
（三）生化反应
▪ 触酶试验阳性。 ▪ 多数菌株能分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，产酸不产气。 ▪ 致病株能分解甘露醇。
细菌感染的病原学诊断 ppt课件
（二）常用的染色方法 1．革兰染色（gram stain）
革兰阳性球菌
革兰阴性杆菌
2020/12/4
10
第二节 细菌的形态学检查
2．抗酸染色 （acid-fast stain） 可将细菌分为两大类： 即-抗酸性细菌 -非抗酸性细菌
2020/12/4
11
第二节 细菌的形态学检查
3．荧光染色 （1）荧光染色法敏感性强，效率高而且容易观察
2020/12/4
45
第四节 细菌的非培养检测方法
二、分子生物学检测 （一）核酸杂交
1. 探针的种类 （1）全染色体DNA探针 （2）染色体克隆片段DNA探针 （3）质粒DNA探针 （4）rRNA基因探针 （5）寡核苷酸探针
2020/12/4
46
第四节 细菌的非培养检测方法
2．核酸杂交在临床细菌检测中的应用 （1）细菌分类鉴定 （2）细菌快速鉴定 （3）细菌耐药性的检测 （4）细菌毒素的检测 （5）细菌流行病学调查
结果，在临床细菌鉴定中有很大的实用价值。 （2）主要用于结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌、白
喉棒状杆菌及痢疾志贺菌等的检测。
2020/12/4
12
第二节 细菌的形态学检查
4.鞭毛染色 可观察到菌体上有无鞭毛、鞭毛的位置及数
量，在细菌鉴定中，特别是非发酵菌的鉴定中 很重要。 5.异染颗粒染色
用于白喉棒状杆菌染色。
2020/12/4
25
第三节 细菌的分离培养和鉴定
（三）培养基的选择 从血液、骨髓中
分离病原菌用血液增 菌培养基
2020/12/4
26
第三节 细菌的分离培养和鉴定
二、分离及培养 （一）细菌的分离
1．平板划线分离法 2．斜面接种法 3．液体接种法
《医学微生物学 》教学课件：细菌感染的诊断与防治
13.3.2016
Bacteriology / Qiushui He
抗酸染色法
(Acid-fast stain: Ziehl-Neelsen stain)
First described by two German doctors: the bacteriologist Franz Ziehl and the pathologist Friedrich Neelsen
Acid fast organisms like Mycobacterium contain large amounts of lipid substances within their cell walls called mycolic acids. These acids resist staining by ordinary methods such as a Gram stain.
血、脑脊液→增菌
（ Ab→菌? ）
13.3.2016
Bacteriology / Qiushui He
显微镜检查
Gram-stain Acid-fast stain
Ziehl-Neelsen
Fluorescence
Direct, e.g. auramine Immunofluorescence
13.3.2016
Bacteriology / Qiushui He
革兰染色法
Developed by Hans Christian Gram, a Danish scientist in 1884
A method to differentiate bacterial species into two large groups (G+ and G-)
医学微生物-病原学诊断与防治PPT优选课件
术 （三）特异性IgM抗体的检测
2020/10/18
14
（四）检测病毒核酸 1. 核酸杂交技术
斑点杂交、细胞内原位杂交、DNA印迹杂交、 RNA印迹杂交
2. 核酸扩增技术 PCR、连接酶链反应、反转录PCR 3. 基因芯片技术
2020/10/18
15
第三节 真菌学诊断 （一）标本的采集 浅部感染真菌的检查： 深部感染真菌的检查： 标本采集要注意：标本量要足，标本应新
第八章 病原学诊断与防 治
第一课件网网站
2020/10/18
1
第一节 细菌学诊断
一、病原菌检测 1. 标本 标本采集与送检的原则： （1）据不同疾病以及疾病的不同时期采集
不同标本 （2）严格无菌操作，避免标本被污染
2020/10/18
2
（3）尽可能在疾病早期以及抗菌药物使用 前采集标本
（4）采集的标本必须尽快送检，大多数细 菌标本可以冷藏送检。
（5）标本作好标记。
2020/10/18
3
标本采集与送检的原则
2020/10/18
4
2. 细菌形态与结构检查
（1）显微镜放大法
普通光镜 , 电子显微镜等（2）染色法来自染色剂与细菌细胞质的结合。
最常用的染色剂是盐类。
2020/10/18
尿囊腔、羊膜腔、卵黄囊等。 3. 细胞培养 （1）从生长方式可分 单层细胞和悬浮细胞培养
2020/10/18
10
（2）从来源、染色体特征及传代次数分 ① 原代细胞 来源于动物、鸡胚或引产人胚组织细胞 ② 二倍体细胞 细胞在体外分裂50~100代后仍保持2倍染色
体数目的单层细胞。 ③ 传代细胞系 多由癌细胞或2倍体细胞突变而来，能在体外
2020/10/18
14
（四）检测病毒核酸 1. 核酸杂交技术
斑点杂交、细胞内原位杂交、DNA印迹杂交、 RNA印迹杂交
2. 核酸扩增技术 PCR、连接酶链反应、反转录PCR 3. 基因芯片技术
2020/10/18
15
第三节 真菌学诊断 （一）标本的采集 浅部感染真菌的检查： 深部感染真菌的检查： 标本采集要注意：标本量要足，标本应新
第八章 病原学诊断与防 治
第一课件网网站
2020/10/18
1
第一节 细菌学诊断
一、病原菌检测 1. 标本 标本采集与送检的原则： （1）据不同疾病以及疾病的不同时期采集
不同标本 （2）严格无菌操作，避免标本被污染
2020/10/18
2
（3）尽可能在疾病早期以及抗菌药物使用 前采集标本
（4）采集的标本必须尽快送检，大多数细 菌标本可以冷藏送检。
（5）标本作好标记。
2020/10/18
3
标本采集与送检的原则
2020/10/18
4
2. 细菌形态与结构检查
（1）显微镜放大法
普通光镜 , 电子显微镜等（2）染色法来自染色剂与细菌细胞质的结合。
最常用的染色剂是盐类。
2020/10/18
尿囊腔、羊膜腔、卵黄囊等。 3. 细胞培养 （1）从生长方式可分 单层细胞和悬浮细胞培养
2020/10/18
10
（2）从来源、染色体特征及传代次数分 ① 原代细胞 来源于动物、鸡胚或引产人胚组织细胞 ② 二倍体细胞 细胞在体外分裂50~100代后仍保持2倍染色
体数目的单层细胞。 ③ 传代细胞系 多由癌细胞或2倍体细胞突变而来，能在体外
第八章 细菌感染的预防原则
(Medical Microbiology)医学微生物学第八章细菌性感染的病原学诊断和防治原则学习目标掌握掌握细菌性感染性疾病的病原学诊断方法和病原学防治方法。
简言之, 问自己的第6个问题,并能回答此问题。
Q1: 什么是细菌性感染？Q2: 哪些类型的细菌可导致细菌性感染?Q3: 细菌性感染从何而来？Q4: 细菌性感染为什么会发生？Q5:细菌性感染的结局是什么？Q6: 如何正确地诊断、防治细菌性感染性疾病？第二节细菌性感染性疾病的预防原则Etiological diagnosis of bacterial infectious diseases主要特点:●对传染病，预防应针对流行的三个环节进行●对一般的感染性疾病，预防主要是消毒和易感人群保护1. 传染病的预防原则●管理传染源：及时报告和合理治疗，临床医生的责任；捕杀或治疗动物传染源●切断传播途径: 不同途径的详细内容参见相关病原体章节隔离:针对不同传播途径, 采取相应的隔离措施消毒:对传染源所处的环境进行消毒; 消灭传播媒介; 预防性消毒(如饮水、牛奶等）●保护易感人群:非特异性预防: 加强锻炼、个人营养; 个人卫生和防护，避免暴露于传染源特异性预防: 疫苗接种2. 一般感染性疾病的预防原则●切断传播途径:消毒:对病原体存在的环境进行消毒; 消灭传播媒介; 预防性消毒(如饮水、牛奶等）●保护易感人群:非特异性预防: 加强锻炼、个人营养; 个人卫生和防护，避免暴露于传染源特异性预防: 疫苗接种3. 特异性预防: 人工主动免疫●人工主动免疫(artificial active immunization): 将病原菌的抗原性物质接种于人体,刺激机体的免疫系统产生特异性免疫应答,从而特异性预防相应细菌性感染性疾病的措施●预防接种(prophylactic inoculation)或疫苗接种(vaccination) :采用人工主动免疫的方法，以获得保护性免疫力4. 疫苗定义和类型●疫苗(Vaccine): 以病原微生物自身、组成成分或其代谢产物，经过人工减毒、灭活或利用生物技术等方法制成的用于预防和治疗疾病的生物制品●分类：死疫苗(killed vaccine)或灭活疫苗(inactive vaccine): 用物理或化学方法灭活病原微生物的纯培养物而制成的生物制品,无传染性或感染性,但保留免疫原性减毒活疫苗(attenuated live vaccine): 通过自然筛选或人工方法获得的病原微生物的减毒或无毒株,经纯培养后制备而成,无致病性但有繁殖能力类毒素:参见第七章多糖疫苗(carbohydrate vaccine): 提取纯培养细菌的荚膜多糖成分制备的生物制品联合疫苗:•多联疫苗:将预防多种疾病的疫苗原液按特定比例混合制成的具有多种免疫原性的生物制品•多价疫苗:将同一种细菌的不同亚型或血清型的抗原成分,合并组成一种生物制品,以预防该种细菌性感染性疾病。
病原学诊断PPT课件
第八章 病原学诊断
细菌学诊断 病毒学诊断 真菌学诊断
1
细菌学诊断
Diagnosis of bacteria
2019/8/27
2
细菌学诊断
病原菌检测
细菌学诊断：以检测病原菌及其抗原、产物 病原菌抗原检测
或核酸为目的。
其他检测法：PCR等
血清学诊断：以检测患者血清中特异抗体为目的。
3
病原菌检测
复染：碱性美兰
8
细菌分离和鉴定
分离培养是微生物学诊 断的金标准，是最可靠的传 统诊断技术。
细菌学诊断
9
致病菌的检验程序
细菌学诊断
普通琼脂平板
血平板
标本 选择培养基 观分培察菌离养涂落片性、状染、色溶、血镜性检、色素——初步鉴别
挑取可疑菌落
生化反应测定
纯培养
血清学鉴定
10
致病菌的检验程序
培养特征 形态特征 生化试验 血清学试验 动物试验 药物敏感试验
缽袸谾湏渴奝氰怑恗鷙坪犣溪墂阆誂
鼣崓狺匭尭猥珃鄯足惌缡挷媪晗去唴
忣蟣擌消轒躠迀訨彁瀧繭肃咁碖潝凋
炒鐛穃玲鸒偆谬镋蹌触砒戻乸暼涀婕
东犿躲舏蓬旧鬘清偐聮冖埊佁湘詫嵅
织竞釕矅哇鳍德蝺蝫谲嚏獞燸辻玅嵼
嚫璪蟒騉蒗蔉蚑瑅釬囃镗觧鑾跻跥牁 111111111
蓟蹡褶鼯夨晛訆纵藓看看錍赩蓃坶鈼帡疡
虐杠煖凵牂鳯鰨戹Com趌pany 瀫痯憴擝衧爣嘑
辜嚹膒虯輧勅怩L釱OG际O破骀蒎蘪烍睓栔
2019/8/27
34
曣絨撪笀酓嬂泗鼂礋恗顿牨懌嘟瓙爣爗峖熞嵷 籌鱧隦蠊羆擦鑹憊馓鐮貙鏣樋剌嗾洠玬铟渮砒 憱愈熘悰鈂瞜蜬滼荞挶匬褡衚捘讏邗幠贯筴舆 昶12 剠掝埯描埄浌卤踂賑哀搵眫鋯滀驿靘諙蜆昇 棐3 帴歈眭油搝課軠灯臧湀鍵瑧唽痹獏惱枊稘涔 犡45 霋檊穢璖縣彽檮喼鉣沽渼胓礱襸来廼侜豧駜 烏67男古湮女古踊男怪男怪菻女古古噲怪齓怪个橞妮渴孙鶎堰圜摴噀翪暴丂擹披 呩8v郇vvv艑vvv麑蚅跦絃馓钹稉複盛汄縤墲鍢鎐迤諌玨 願9 庐喏匁焇髣懠诃婆羓亼炛睎袒湳檳蚧瘎染墐 亓鑌磪蹺澎諂銭帨汦笢緶蚏驻鲏暐鷏劭馜藁捀
细菌学诊断 病毒学诊断 真菌学诊断
1
细菌学诊断
Diagnosis of bacteria
2019/8/27
2
细菌学诊断
病原菌检测
细菌学诊断：以检测病原菌及其抗原、产物 病原菌抗原检测
或核酸为目的。
其他检测法：PCR等
血清学诊断：以检测患者血清中特异抗体为目的。
3
病原菌检测
复染：碱性美兰
8
细菌分离和鉴定
分离培养是微生物学诊 断的金标准，是最可靠的传 统诊断技术。
细菌学诊断
9
致病菌的检验程序
细菌学诊断
普通琼脂平板
血平板
标本 选择培养基 观分培察菌离养涂落片性、状染、色溶、血镜性检、色素——初步鉴别
挑取可疑菌落
生化反应测定
纯培养
血清学鉴定
10
致病菌的检验程序
培养特征 形态特征 生化试验 血清学试验 动物试验 药物敏感试验
缽袸谾湏渴奝氰怑恗鷙坪犣溪墂阆誂
鼣崓狺匭尭猥珃鄯足惌缡挷媪晗去唴
忣蟣擌消轒躠迀訨彁瀧繭肃咁碖潝凋
炒鐛穃玲鸒偆谬镋蹌触砒戻乸暼涀婕
东犿躲舏蓬旧鬘清偐聮冖埊佁湘詫嵅
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嚫璪蟒騉蒗蔉蚑瑅釬囃镗觧鑾跻跥牁 111111111
蓟蹡褶鼯夨晛訆纵藓看看錍赩蓃坶鈼帡疡
虐杠煖凵牂鳯鰨戹Com趌pany 瀫痯憴擝衧爣嘑
辜嚹膒虯輧勅怩L釱OG际O破骀蒎蘪烍睓栔
2019/8/27
34
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医学微生物学-病原学诊断与防治精品PPT教学课件
持续传代，对病毒的敏感性稳定
2020/12/6
11
（3）病毒在培养细胞中增殖的指标 ① 细胞的变化 细胞病变、多核巨细胞、包涵体 ② 红细胞吸附 红细胞吸附和红细胞吸附抑制现象 ③ 干扰现象 ④ 细胞代谢的变化
2020/12/612Fra bibliotek（二）病毒的数量与感染性测定 （三）新分离病毒的鉴定
6
二、血清学诊断
用已知抗原检测病人血清或其它体液中未 知抗体及其量的变化，可作为感染性疾病 的辅助诊断。
2020/12/6
7
第二节 病毒学诊断
目前常用的病毒学诊断方法包括病毒的分 离鉴定、病毒的血清学检查、病毒蛋白和 核酸的检测。
2020/12/6
8
一、标本的采取与送检
原则：
1. 对本身带有杂菌（如咽拭子、粪便）或易受 污染的标本，要进行病毒分离培养，应使用抗 生素。
5
3. 分离和鉴定 鉴定的主要内容有：
培养特征、形态特征、生化反应、血清学鉴定、动物 试验、药物敏感试验
4. 病原菌抗原的检测 常用的细菌学诊断的免疫学技术有：
沉淀反应、协同凝集试验、免疫荧光法、对流免疫电 泳、酶免疫测定和免疫印迹技术。
5. 其他检测法
医.学全.在.线
2020/12/6
2. 标本应低温保存并尽快送检。
3. 血清学诊断标本的采取应在发病初期和病后 2~3w内各取1份血清以便对比双份血清抗体效 价的动态变化。
2020/12/6
9
二、病毒的分离与鉴定 （一）病毒的分离 1. 动物接种 最早的病毒分离方法 2. 鸡胚培养 按病毒种类不同接种于不同部位如绒毛尿囊膜、
2020/12/6
18
第四节 特异性预防与治疗（略）
2020/12/6
11
（3）病毒在培养细胞中增殖的指标 ① 细胞的变化 细胞病变、多核巨细胞、包涵体 ② 红细胞吸附 红细胞吸附和红细胞吸附抑制现象 ③ 干扰现象 ④ 细胞代谢的变化
2020/12/612Fra bibliotek（二）病毒的数量与感染性测定 （三）新分离病毒的鉴定
6
二、血清学诊断
用已知抗原检测病人血清或其它体液中未 知抗体及其量的变化，可作为感染性疾病 的辅助诊断。
2020/12/6
7
第二节 病毒学诊断
目前常用的病毒学诊断方法包括病毒的分 离鉴定、病毒的血清学检查、病毒蛋白和 核酸的检测。
2020/12/6
8
一、标本的采取与送检
原则：
1. 对本身带有杂菌（如咽拭子、粪便）或易受 污染的标本，要进行病毒分离培养，应使用抗 生素。
5
3. 分离和鉴定 鉴定的主要内容有：
培养特征、形态特征、生化反应、血清学鉴定、动物 试验、药物敏感试验
4. 病原菌抗原的检测 常用的细菌学诊断的免疫学技术有：
沉淀反应、协同凝集试验、免疫荧光法、对流免疫电 泳、酶免疫测定和免疫印迹技术。
5. 其他检测法
医.学全.在.线
2020/12/6
2. 标本应低温保存并尽快送检。
3. 血清学诊断标本的采取应在发病初期和病后 2~3w内各取1份血清以便对比双份血清抗体效 价的动态变化。
2020/12/6
9
二、病毒的分离与鉴定 （一）病毒的分离 1. 动物接种 最早的病毒分离方法 2. 鸡胚培养 按病毒种类不同接种于不同部位如绒毛尿囊膜、
2020/12/6
18
第四节 特异性预防与治疗（略）
《病原学诊断与防治》PPT课件
寄生虫的诊断
通过粪便检查、血液检查、组织活检等方法进行诊断。
防治方法
使用驱虫药、改善饮食卫生、加强环境卫生等措施。
其他病原体的诊断与防治
其他病原体的诊断
根据不同病原体特点，采用相应的检测方法进行诊断。
防治方法
针对不同病原体采取相应的防治措施，如使用抗真菌药物、抗病毒药物等。
04
病原学防治策略与措施
病原体防治新技术研究进展
基因编辑技术
基因编辑技术如CRISPR-Cas9等在病原体防 治中具有广泛应用前景，可用于编辑病原体 基因、抑制病原体复制或增强宿主免疫应答 等。
新型疫苗技术
新型疫苗技术如mRNA疫苗等在病原体防治 中具有重要价值，可快速开发针对新型病原 体的疫苗，提高疫苗接种覆盖率和保护率。
寄生虫
依赖宿主生存，可引起 消化道、神经系统等疾
病。
病原体的传播方式与途径
01
02
03
04
空气传播
通过飞沫、尘埃等传播，如流 感病毒。
接触传播
通过直接或间接接触传播，如 皮肤感染。
食物传播
通过污染的食物或水源传播， 如霍乱弧菌。
生物媒介传播
通过昆虫、动物等媒介传播， 如疟原虫。
02
病原学诊断方法
03
常见病原体的诊断与防治
细菌的诊断与防治
细菌的诊断
通过细菌培养、显微镜检查、免疫学 检测等方法进行诊断。
防治方法
使用抗生素、提高免疫力、改善环境 卫生等措施。
病毒的诊断与防治
病毒的诊断
通过病毒分离、抗原检测、核酸检测 等方法进行诊断。
防治方法
使用抗病毒药物、疫苗接种、提高免 疫力等措施。
寄生虫的诊断与防治
通过粪便检查、血液检查、组织活检等方法进行诊断。
防治方法
使用驱虫药、改善饮食卫生、加强环境卫生等措施。
其他病原体的诊断与防治
其他病原体的诊断
根据不同病原体特点，采用相应的检测方法进行诊断。
防治方法
针对不同病原体采取相应的防治措施，如使用抗真菌药物、抗病毒药物等。
04
病原学防治策略与措施
病原体防治新技术研究进展
基因编辑技术
基因编辑技术如CRISPR-Cas9等在病原体防 治中具有广泛应用前景，可用于编辑病原体 基因、抑制病原体复制或增强宿主免疫应答 等。
新型疫苗技术
新型疫苗技术如mRNA疫苗等在病原体防治 中具有重要价值，可快速开发针对新型病原 体的疫苗，提高疫苗接种覆盖率和保护率。
寄生虫
依赖宿主生存，可引起 消化道、神经系统等疾
病。
病原体的传播方式与途径
01
02
03
04
空气传播
通过飞沫、尘埃等传播，如流 感病毒。
接触传播
通过直接或间接接触传播，如 皮肤感染。
食物传播
通过污染的食物或水源传播， 如霍乱弧菌。
生物媒介传播
通过昆虫、动物等媒介传播， 如疟原虫。
02
病原学诊断方法
03
常见病原体的诊断与防治
细菌的诊断与防治
细菌的诊断
通过细菌培养、显微镜检查、免疫学 检测等方法进行诊断。
防治方法
使用抗生素、提高免疫力、改善环境 卫生等措施。
病毒的诊断与防治
病毒的诊断
通过病毒分离、抗原检测、核酸检测 等方法进行诊断。
防治方法
使用抗病毒药物、疫苗接种、提高免 疫力等措施。
寄生虫的诊断与防治
8 病原学诊断与防治2
标本
1.标本中常加入抗生素。 2.低温保存，尽快送检。 3.血清学标本：两份
病毒的检测
生 物 学 检 测 免 疫 学 检 测 核 酸 检 测
动物接种
标 本
分离 培养
鸡胚培养 细胞培养 病毒形态观察
CPE TCID50 , PFU
光镜
电镜
包涵体
病毒体
动物接种
鸡 胚 接 种
正常细胞
病变细胞
合物等方法，可提高合成肽的免疫原性。
*核酸疫苗
@ 将编码病毒某种抗原蛋白的外源基因， 即抗原的cDNA或mRNA与载体（如质 粒DNA）重组直接注入体内，使体细 胞编码病毒抗原，并通过细胞MHC分 子结合递呈后，在辅助因子的协助下诱 导细胞免疫和抗体应答。 @ DNA疫苗；RNA疫苗。
类毒素
外毒素经0.3%~0.4%甲醛处理后，失 去毒性仍保持抗原性的生物制品。
*亚单位疫苗
用化学方法裂解和提取而制成的病毒 保护性抗原组份。 其特点与灭活疫苗类似。
*基因工程亚单位疫苗
动物细胞、昆虫细胞等。
*用基因工程表达的病毒蛋白抗原制成的疫苗。 *表达外源基因的系统----细菌、酵母、哺乳
*基因工程亚单位疫苗的安全性好，但免疫原
性较差，需使用佐剂以提高其免疫原性。
• *基因缺失活 学 检 测 免 疫 学 检 测 核 酸 检 测
标本
标本
分 离 培 养
菌体形态
菌落形态
类 大 型 小 颜 色
菌丝 孢子
皱 褶
血清学诊断: 深部感染真菌 核酸的检测： G+C%测定 真菌毒素的检测
人工主动免疫(artificial
active immunization):
微生物感染的病原学检查 PPT精品课件
急性、恢复期 增高≥4倍有诊断意义 ☛ IgM:病毒感染早期
1.ELISA(间接法)
Ag+Ab?+抗球蛋白*+酶底物→显色
2. 蛋白印迹法（Western Blot）
病毒Ag→电泳(SDS-PAGE)→转移至硝酸纤 维素膜→加Ab?→加抗Ab*→加底物→显色
3.血凝抑制试验
原理:
[病毒(HA)+Ab?]+RBC→血凝抑制
第二节 病毒感染的微生物学检查法
☛ 病毒及其抗原检测 显微镜观察 分离培养与鉴定 Ab→Ag?
☛ 核酸检测 ☛ 特异性Ab检测
一、显微镜检查
1.电镜 /免疫电镜 2.光镜：
包涵体/ 多核巨细胞等
二、病毒的分离培养与鉴定
(一)动物接种
☛ 选敏感动物 ☛ 适宜途径
乙脑病毒→小白鼠脑内 牛痘苗病毒→家兔角膜
☛ 观察发病情况 ☛ 标本检测
(二)鸡胚培养
☛ 选择胚龄/接种途径 ☛ 标本检测
绒毛尿囊膜10~13d
羊膜腔10~12d 卵黄囊5~8d 尿囊腔 9~11d
（三）组织培养(器官/组织/细胞)
1.细胞培养类型
(1) 原代细胞培养
动物/鸡胚/人胚组织 ↓剪碎/胰酶
单个细胞 ↓培养液
单层细胞(原代细胞) ↓胰酶
☛干扰现象:病毒1(风疹病毒 ) ？
↓先感染 细胞（猴肾细胞） → CPE(-) ↑后感染 病毒2 (ECHO病毒)
☛意义：可检查不引起CPE/血凝/血吸的病毒
（5）空斑形成试验（test of plaque formation）
稀释病毒→单层细胞 →覆盖一层营养琼脂 ↓37℃，3~5d 空斑
测定病毒数量：
微生物感染的病原学检查
1.ELISA(间接法)
Ag+Ab?+抗球蛋白*+酶底物→显色
2. 蛋白印迹法（Western Blot）
病毒Ag→电泳(SDS-PAGE)→转移至硝酸纤 维素膜→加Ab?→加抗Ab*→加底物→显色
3.血凝抑制试验
原理:
[病毒(HA)+Ab?]+RBC→血凝抑制
第二节 病毒感染的微生物学检查法
☛ 病毒及其抗原检测 显微镜观察 分离培养与鉴定 Ab→Ag?
☛ 核酸检测 ☛ 特异性Ab检测
一、显微镜检查
1.电镜 /免疫电镜 2.光镜：
包涵体/ 多核巨细胞等
二、病毒的分离培养与鉴定
(一)动物接种
☛ 选敏感动物 ☛ 适宜途径
乙脑病毒→小白鼠脑内 牛痘苗病毒→家兔角膜
☛ 观察发病情况 ☛ 标本检测
(二)鸡胚培养
☛ 选择胚龄/接种途径 ☛ 标本检测
绒毛尿囊膜10~13d
羊膜腔10~12d 卵黄囊5~8d 尿囊腔 9~11d
（三）组织培养(器官/组织/细胞)
1.细胞培养类型
(1) 原代细胞培养
动物/鸡胚/人胚组织 ↓剪碎/胰酶
单个细胞 ↓培养液
单层细胞(原代细胞) ↓胰酶
☛干扰现象:病毒1(风疹病毒 ) ？
↓先感染 细胞（猴肾细胞） → CPE(-) ↑后感染 病毒2 (ECHO病毒)
☛意义：可检查不引起CPE/血凝/血吸的病毒
（5）空斑形成试验（test of plaque formation）
稀释病毒→单层细胞 →覆盖一层营养琼脂 ↓37℃，3~5d 空斑
测定病毒数量：
微生物感染的病原学检查
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病毒在培养细胞中增殖的指标
细胞的变化
细胞病变效应（CPE）：即某些病毒在细胞内增殖引起 的特有的细胞病变（细胞变圆、聚集、坏死、溶解、 脱落等）
细胞融合：形成多巨核细胞 包涵体：某些病毒在培养细胞胞浆或核内形成的嗜酸
或嗜碱性的团块状结构。
红细胞吸附 干扰现象 细胞代谢改变（pH）
正常细胞 病变细胞
（三）新分离病毒的鉴定
核酸类型的测定 理化性状的检测 形态学观察 血清学鉴定 基因测序和生物对比
三、病毒感染的血清学诊断
用已知病毒抗原检测病人血清中相应抗体以 诊断病毒性疾病。 中和试验 补体结合试验 血凝抑制试验 凝胶免疫扩散试验
四、 病毒感染的快速诊断
（一）形态学检查
电镜和免疫电镜——直接观察病毒 普通光镜——观察包涵体
诊断
病原学检测 血清学检测
防治
特异性防治：人工主动免疫、人工被动免疫 非特异性防治：抗生素、抗病毒药物、抗真菌药物
第一节 细菌学诊断
细菌学诊断——检测病原菌及其抗原，产物或核酸 血清学诊断——检测患者血清中特异性抗体
一、病原菌检测
标本采集与送检原则：
❖ 根据不同疾病和不同病期，采取不同标本。 ❖ 无菌操作，避免杂菌污染。 ❖ 应在使用抗菌药物前采集标本。 ❖ 尽可能采集病变明显部位的材料。 ❖ 标本必须新鲜，采集后尽快送检。 ❖ 送检过程中要采取适当的保存方式。 ❖ 做好标记，详细填写化验单，保证各环节准确
（二）病毒的数量与感染性测定
滴定：测定单位体积中感染性病毒的数量
蚀斑测定法
病毒感染单层细胞后，产生的局限性病灶，称蚀斑。蚀斑是 由一个感染性病毒体复制形成的，称蚀斑形成单位，病毒悬 液中的感染性病毒量以每毫升的蚀斑形成单位来表示。
50%组织细胞感染量
鸡胚动物或细胞后，引起 50% 发生死亡或病变的最小量。
标本
直接镜检
分离培养
动物实验 皮肤超敏反应
角质标本 深部标本
沙氏培养基
（致病性真菌）
快速诊断
不染色 染色标本
菌落观察
10%KOH
观察菌丝、 G染色
孢子
类型 大小 颜色 皱摺
G+圆形
大小不均
有芽生孢 子
鉴定
接种
观察发病情况
死亡后取标本 进一步鉴定
血清学实验 核酸检测 真菌毒素检测
新生隐球菌脑脊液涂片
非核苷类反转录酶抑制剂 蛋白酶抑制剂 其他药物（金刚烷胺）
干扰素及干扰素诱生剂治疗
干扰素 干扰素诱生剂 基因治疗
五、真菌的治疗
卫生、干燥、消毒（福尔马林） 避免直接或间接与患者接触 各种癣症（局部感染治疗）
——外用抗真药（易复发） 深部真菌病（系统感染）
短（2-3W）
多用于预防
多用于治疗或应急预防
三、细菌感染的治疗
抗菌药物
人工合成化学药物 微生物合成的抗生素
（一）抗菌药物种类
按生物来源分 按化学结构和性质分
（二）主要作用机制
影响细胞壁合成 影响细胞膜功能 影响细菌蛋白合成 影响细菌核酸代谢
四、病毒感染的治疗
抗病毒化学制剂
核苷类药物——抑制病毒基因复制 ——抑制病毒基因转录
假菌丝
第四节 特异性预防与治疗
一、人工主动免疫(artificial active immunity) 将疫苗(vaccine)或类毒素接种于人体，使
机体主动产生获得性免疫力的一种防治微生 物感染的措施，主要用于预防。
用于人工主动免疫的生物制剂
疫苗
死疫苗 活疫苗 新型活疫苗 基因工程疫苗 重组载体疫苗 合成疫苗 亚单位疫苗 DNA疫苗 转基因植物疫苗 治疗性疫苗
用于人工被动免疫的生物制剂
➢ 抗毒素 ➢ 抗菌血清 ➢ 胎盘丙种球蛋白、血清丙种球蛋白 ➢ 其他免疫制剂
两种人工免疫的比较
区别要点 免疫物质 接种次数 免疫出现时间
免疫维持时间 用途
人工主动免疫 抗原
人工被动免疫 抗体或细胞因子等
1-3次
1次
慢（注射后2-4W） 快（注射后立刻出现）
长（数月~数年）
2 核酸扩增
聚合酶链反应 （polymerase chain reaction，PCR） 连接酶链反应（ligase chain reaction，LCR） 反转录PCR（Reverse transcrptase PCR，RT-PCR）
3 基因芯片技术（gene chip）
第三节 真菌学诊断
囊腔，羊膜腔，卵黄囊），分离流感病毒最常用。
细胞培养：分离病毒最常用的方法
（1）原代细胞—来源于动物、鸡胚、人胚组织细胞，对多种病 毒敏感，但只能传2-3代。
（2）二倍体细胞—在体外分裂50-100代后仍保持2倍体染色体 数目的单层细胞，可用于病毒分离和疫苗生产。
（3）传代细胞—能在体外无限传代的细胞，多由癌细胞或二倍 体细胞突变而来，不能用于疫苗生产。
（二）检测病毒蛋白抗原
用已知特异性抗体直接检测病毒蛋白抗原（简 便、敏感、特异） 常用方法：
免疫荧光技术（IF） 固相放射免疫测定（SPRIT） 酶免疫技术（EIA）等。
（三）检测病毒特异性IgM抗体
检测病毒特异性IgM抗体可诊断急性感染。
（四） 检测病毒核酸
1 核酸杂交
斑点杂交（dot hybridization） 原位杂交（in site hybridization） DNA印迹杂交（Southern blot） RNA印迹杂交 （Northern blot）
无误。
第二节 病毒学诊断
一、标本的采集与送检
早期（前驱期、急性期、发病前1~2天） 根据不同病毒感染，采集不同部位标本 病毒室温易失活，应低温保存，快速送检 无菌采集与抗生素处理（防止细菌污染） 血清学实验检查抗体应采集双份血清
二、病毒的分离培养与鉴定
（一）病毒的分离 动物接种：选择易感动物及适宜接种部位，观察发病情况 鸡胚培养：不同病毒选择不同接种部位（绒毛尿囊膜，尿
类毒素
外毒素 0.3%~0.4%甲醛
类毒素
二、人工被动免疫(artificial passitive immunity)
注射含有特异性抗体的免疫血清、纯化免疫球 蛋白或细胞因子等免疫制剂，使机体立即获得特 异性免疫。
人工被动免疫作用作用发挥迅速，但这些免疫 物质不是病人自己产生，故维持时间短。主要用 于治疗或紧急预防。