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高效液相色谱技术在药物分析中的应用导语：药物分析是药学领域中的重要分支，它涉及到药物的质量控制、研究与开发等方面。
而高效液相色谱技术（High Performance Liquid Chromatography，简称HPLC）由于其高灵敏度、高分辨率、高选择性和广泛适用性等特点，在药物分析领域得到了广泛的应用。
一、HPLC技术原理HPLC技术是一种液相色谱分离方法，其原理是将待测样品通过一定方式注入到固定相柱中，再通过流动相的作用下，样品成分在固定相上发生分离。
在HPLC 系统中，流动相的选择和条件的控制对于药物分析具有重要的意义。
二、药物分析中常用的HPLC技术1. 反相色谱法反相色谱法是药物分析中应用最广的HPLC技术之一。
常用的反相色谱固定相包括C18、C8、C4等。
反相色谱法适用于疏水性药物的分析，其分离效果好，分析时间短。
2. 离子对色谱法离子对色谱法适用于具有阴、阳离子特性的药物分析。
通过加入适当的离子对试剂，可以改变流动相的离子性，使某些离子化合物在色谱柱上发生离子对形成，从而实现对药物的选择性分离。
3. 手性色谱法手性色谱法主要用于对具有手性结构的药物进行分析。
由于手性药物对于人体的作用机制存在差异，因此对药物的手性分析具有重要意义。
手性色谱可通过手性固定相或手性添加剂来实现对手性化合物的选择性分离。
三、HPLC技术在药物质量控制中的应用药物质量控制是药物研究与开发的重要环节，而HPLC技术在药物质量控制中起到了关键作用。
通过HPLC技术，可以对药物的纯度、含量、残留物等进行准确测定，确保药物的质量安全。
四、HPLC技术在药物研究与开发中的应用在药物研究与开发过程中，HPLC技术发挥了重要的作用。
通过HPLC技术，可以对药物的代谢产物、药代动力学等进行研究，从而了解药物在体内的转化和效应。
此外，HPLC技术还可用于药物配方的优化和稳定性研究等方面。
五、HPLC技术在中药分析中的应用中药是我国传统文化的重要组成部分，在现代药物分析中，HPLC技术被广泛应用于中药的质量控制和成分分析。
高效液相色谱法及其在药物分析中的应用以液体为流动相的色谱法称为液相色谱法。
用常压输送流动相的方法为经典液相色谱法，这种色谱法的柱效能低、分离周期长。
高效液相色谱法（highperformanceliquidchromatography，简称HPLC）是在经典液相色谱的基础上发展起来的一种色谱方法。
与经典的液相色谱法相比，高效液相色谱法具有下列主要优点：①应用了颗粒极细（一般为10µm以下）、规则均匀的固定相，传质阻抗小，柱效高，分离效率高；②采用高压输液泵输送流动相，流速快，一般试样的分析需数分钟，复杂试样分析在数十分钟内即可完成；③广泛使用了高灵敏检测器，大大提高了灵敏度。
目前，已经发展了多种不同的固定相，有多种不同的分离模式，使高效液相色谱法的应用范围不断扩大。
下面介绍高效液相色谱法的有关知识，新的方法和技术以及在药物分析中的应用。
一、分类高效液相色谱法按分离机理的不同可分为以下几类：（一）吸附色谱法（adsorptionchromatography）以吸附剂为固定相的色谱方法称为吸附色谱法。
使用最多的吸附色谱固定相是硅胶，流动相一般使用一种或多种有机溶剂的混合溶剂。
在吸附色谱中，不同的组分因和固定相吸附力的不同而被分离。
组分的极性越大、固定相的吸附力越强，则保留时间越长。
流动相的极性越大，洗脱力越强，则组分的保留时间越短。
（二）液-液分配色谱法（liquid-liquidchromatography)液-液分配色谱的固定相和流动相是互不相溶的两种溶剂，分离时，组分溶入两相，不同的组分因分配系数（K)的不同而被分离。
目前广泛使用的化学键合固定相是将固定液的官能团键合在载体上而制成的，使用化学键合固定相的色谱方法（简称键合相色谱法）可以用分配色谱的原理加以解释。
键合相色谱法在HPLC中占有极其重要的地位，是应用最广的色谱法。
按照固定相和流动相极性的不同，分配色谱法又可分为正相色谱法和反相色谱法两类。
高效液相色谱技术在药物分析中的应用与优化随着现代医学的发展，药物分析在医药领域中越来越重要。
其中，高效液相色谱技术（HPLC）是一种非常有效的方法，被广泛应用于药物分析。
本文将介绍HPLC技术的原理和应用，并分析其优化方法。
一、HPLC技术原理HPLC技术是一种利用液相在高压下进行分离和分析的技术。
它主要由一个高压泵、一台进样器、一根柱子、一个检测器和一个数据处理系统组成。
在HPLC柱中，液相通过样品经过一系列的化学反应，进而达到分离的目的。
其中，柱子是一个关键的部分。
柱子的材质、直径、长度和填充物都会对分离产生影响。
HPLC柱通常有一些选择性，即某些物质会更容易被保留，而某些物质会更容易被分离。
此外，参数的选择还要考虑到某些物质的解析度和灵敏度。
检测器是HPLC技术中另一个重要的组成部分。
检测器用于检测所分离物质的特定性质，并将数据输出到计算机上，以便对数据进行进一步处理。
检测器一般可以根据不同的原理进行分类，包括紫外线检测器、荧光检测器、电导率检测器、质谱检测器等。
二、HPLC技术应用HPLC技术被广泛应用于药物分析。
它不仅可以检测药物的纯度、含量、结构等，还可以检测药物与其他化合物的相互作用，以及药物在体内的代谢和排泄。
1.药物纯度检测药物纯度是药品安全性和治疗效果的关键。
因此，检测药物纯度是药物研究和开发中至关重要的一步。
利用HPLC技术可以测定药物的纯度，同时还可以测定可能出现的其他杂质。
2.药物含量检测药品的含量是药品的一种质量指标。
药品管理员可以通过对样品进行定量分析，确定其含量和质量，并根据该含量情况对药品的使用进行精确管理。
利用HPLC技术可定量测定样品中药物的含量，以得出所需的药物剂量。
3.药物结构分析对于药物研发的需要，了解药物分子结构是至关重要的一步。
HPLC技术的体积和分离能力可用于探究药物分子的组成和结构。
这种方法还可以研究药品反应过程中分子的不同参数。
4.药物代谢与排泄通常将药物在体内的代谢和排泄视为药物作用的重要部分。
高效液相色谱技术在药物分析中的应用随着现代医学的发展，药物研发得到了大幅度提升。
在药物研发与生产中，药物分析是非常关键的环节。
药物分析的目的是确定药物的成分、组成以及质量，保证药物品质符合国家相关标准。
而高效液相色谱技术，作为药物分析的重要手段之一，能够高效、准确地分析复杂药物体系中的成分，得到越来越广泛的应用。
1. 高效液相色谱技术的基本原理高效液相色谱是一种利用液相作为移动相，利用在固体表面上固定的较细小的粒子作为固定相，将化学样品分离的技术。
具体原理是将混合物通过高效液相色谱仪的色谱柱，各成分分别被不同类型的固定相吸附，发生不同程度的速度差异从而实现分离。
2. 高效液相色谱在药物分析中的应用(1) 成分分析：通过高效液相色谱技术可以快速、准确地鉴定药物成分。
目前，许多药物的成分具有多强制的性质，因此利用高效液相色谱技术可以大大提高鉴定的准确性。
(2) 药物代谢物分析：在药物代谢的过程中，药物会被分解成不同的代谢产物。
通过高效液相色谱技术可以对不同的药物代谢产物进行分离和检测，从而更好地掌握药物的代谢过程。
(3) 药物稳定性分析：药物在制备、贮存、使用过程中，可能会遇到各种不同的环境改变，例如温度、湿度等。
由于不同的药物成分和环境条件所致，药物会出现降解和分解，并且会对药物的质量和稳定性产生不良影响。
高效液相色谱技术可以对药物稳定性进行分析，找出影响药物稳定性的因素，并针对性地采取措施进行保护和稳定。
(4) 药品质量控制：药品质量控制是保证药品质量的关键手段。
通过高效液相色谱技术对药物样品进行检测，可以依据检测结果对药品的质量进行监控，及时排除不合格的药品，从而保证药物的稳定性和有效性。
3. 高效液相色谱技术在药物分析中的优势高效液相色谱技术在药物分析中具有许多优势，主要有以下几点:(1) 高分辨率：高效液相色谱技术具有出色的分离能力，因此能够准确地检测药物中微小成分的变化。
(2) 高效性：高效液相色谱技术具有快速的分析速度和高度的自动化程度，因此可以实现高效的分析。
高效液相色谱技术在药物分析中的应用研究摘要：高效液相色谱（HPLC）技术是一种广泛应用于药物分析领域的分离和检测技术。
随着药物的快速研发和市场需求的不断增长，药物的质量控制和分析要求越来越高。
本文将重点探讨高效液相色谱技术在药物分析中的应用，包括药物的分离、纯化和检测等方面。
引言：药物分析是指对药物原料、中间体、制剂及其代谢产物等进行分离、纯化和定量的过程，是药物研发、生产和质量控制的重要环节。
高效液相色谱技术以其高分离效果、快速和灵敏的检测特点，成为现代药物分析领域的主要分析方法之一。
本文将以具体的实例来阐述高效液相色谱技术在药物分析中的应用研究。
一、药物的分离与纯化：高效液相色谱技术在药物分离与纯化方面具有很大的优势。
以某种具有药理活性的天然产物为例，通过高效液相色谱技术可以对其进行有效的分离和纯化。
首先，通过样品的前处理，如提取、萃取等，得到药物中的目标成分。
然后，选择合适的色谱柱和流动相，根据上样体积、流速等参数进行条件优化，以实现对复杂样品的高效分离。
最后，通过检测器对分离出的药物成分进行定性和定量分析。
高效液相色谱技术可以快速准确地分离出含有药理活性成分的纯品，并为后续的生物学活性研究提供可靠的样品。
二、药物的质量控制：高效液相色谱技术在药物质量控制方面发挥着重要作用。
药物的质量控制包括对原料药和制剂的纯度分析、含量测定和杂质检测等方面。
通过高效液相色谱技术可以对药物的成分及其相对含量进行快速准确的分析。
例如，对于某种含有多个成分的制剂，可以通过高效液相色谱技术对每个成分进行定量分析，并计算出其相对含量。
同时，高效液相色谱技术还可以用于药物杂质的检测，如有毒杂质、掺假成分等，确保药品的质量和安全性。
三、药物代谢产物的分析：药物代谢产物的分析是药物研发和临床应用中重要的环节之一。
通过分析药物代谢产物可以了解药物在人体内的代谢途径和药效学特性。
高效液相色谱技术在药物代谢产物的分析方面具有较高的灵敏度和选择性。
高效液相色谱在药物分析中的应用1. 引言高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种常用的分析技术，在药物分析中具有广泛的应用。
本文将重点讨论HPLC在药物分析中的应用。
2. HPLC原理HPLC是一种基于液相色谱理论的分析方法。
它通过将待测样品溶解于流动相中，然后经过色谱柱进行分离。
在流动相的作用下，不同组分在色谱柱中的分配系数不同从而分离出来。
最后，通过检测器对溶液中各成分进行检测和定量。
3. HPLC在药物质量控制中的应用药物质量控制是药物研究的重要环节，也是保证药物质量安全和有效的关键。
HPLC作为一种高效的分析方法，广泛应用于药物质量控制中。
3.1 药物纯度分析HPLC可以对药物的纯度进行准确、灵敏的分析。
通过对药物样品进行分离和检测，可以确定药物中的各组分含量及其相对含量。
这对于判断药物的纯度和品质非常重要。
3.2 趋近分析在药物制剂中，常常需要确定目标化合物的含量。
HPLC可以通过与外部标准品对照，从而定量分析出样品中目标化合物的含量，以评估药物制剂的质量。
3.3 配方的优化HPLC可以通过分析各成分的保留时间和峰面积，来优化药物制剂的配方。
比如，可以通过调整溶剂体系、流速等参数，对药物的各组分进行优化，从而提高药物的质量和效果。
4. HPLC在药代动力学中的应用药代动力学是研究药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄等过程的学科。
HPLC在药代动力学中的应用主要包括：4.1 药物吸收动力学研究HPLC可以通过测量药物在生物体内的浓度改变，研究药物的吸收动力学过程。
比如，通过分析血浆或尿液中的药物浓度变化，可以评估药物在体内的吸收速度和吸收率。
4.2 药物代谢动力学研究HPLC可以通过测量药物在生物体内的代谢产物，研究药物的代谢动力学过程。
通过分析血浆、尿液或其他生物样品中的代谢产物，可以评估药物的代谢速率和代谢途径。
5. HPLC在药物质量控制和研究中的挑战与发展方向虽然HPLC在药物分析中有广泛的应用，但仍然存在一些挑战和问题。
高效液相色谱分析技术在药物研究中的应用高效液相色谱（HPLC）是一种常用的分析技术，广泛应用于药物研究领域。
本文将介绍HPLC技术在药物研究中的应用，包括质量控制、新药研发和药代动力学等方面。
一、质量控制中的HPLC应用在药品生产过程中，质量控制是必不可少的环节。
而HPLC技术的高灵敏度和选择性使其成为药物质量控制的重要手段之一。
首先，HPLC可以用于药物含量的测定。
药物的含量决定了药品的疗效和安全性。
HPLC通过分离和检测药物中的成分，可以准确地确定药物中有效成分的含量，从而保证药品的质量。
其次，HPLC可以用于药物残留的检测。
在药物生产过程中，可能会存在未完全反应的原料或辅料残留。
这些残留物可能对人体健康造成潜在的风险。
通过HPLC技术，可以对药品中的残留物进行分离和定量分析，确保药品的安全性。
二、新药研发中的HPLC应用HPLC技术在新药研发过程中扮演着重要的角色。
在药物的研发过程中，需要对药物的结构和性质进行全面的分析和评价，而HPLC提供了一个高效、准确的工具。
首先，HPLC可用于药物代谢产物的分离和检测。
在药物代谢过程中，药物会被转化为不同的代谢产物。
这些代谢产物可能对药物的药效和安全性产生影响。
通过HPLC技术，可以将药物代谢产物与其他物质进行分离，从而进行详细的分析和鉴定。
其次，HPLC可用于活性成分的分离和纯化。
在新药研发过程中，需要从大量的化合物中筛选出具有药理活性的成分。
HPLC可以通过分离和纯化目标成分，从而提供纯净的化合物用于进一步的药效评价。
三、药代动力学中的HPLC应用药代动力学研究关注药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄等过程。
HPLC在药代动力学研究中的应用，有助于了解药物在体内的行为和代谢途径。
首先，HPLC可以用于血浆药物浓度的测定。
血药浓度是了解药物在体内的吸收和代谢过程的重要指标。
通过HPLC技术，可以对血浆中的药物进行分离并进行定量分析，进而推断药物在体内的代谢速率和消除速率等关键参数。
高效液相色谱技术在药物分析中的应用第一章：引言高效液相色谱技术（HPLC）是一种目前常用的分离和分析药物的技术。
药物分析是药学领域一个重要的研究方向，药物的治疗作用和副作用是药物研究的重要内容。
因此，对药物分析技术的研究是药学研究的重要组成部分。
在本文中，我们将介绍HPLC技术在药物分析中的应用。
第二章：HPLC技术的原理HPLC技术是一种高效的分离和分析技术，其原理是将样品通过高压力泵加入进样口，然后经过固定相柱，移动相将不同成分分离出来，最终通过检测器检测分离出的成分。
HPLC技术相比传统的分离技术，具有分离速度快、分离效率高、灵敏度高等优点。
第三章：HPLC技术在药物分析中的应用3.1 药物成分的分离使用HPLC技术可以很好地分离药物中不同的成分。
药物常常含有多种成分，这些成分之间的分离十分复杂。
HPLC技术可以通过对移动相和固定相的优化，将药物中的不同成分分离出来。
这对于了解药物的成分组成和副作用很重要。
3.2 药物代谢产物的检测HPLC技术可以检测到药物代谢产物，这对于了解药物的代谢过程和药物在体内的作用也很重要。
药物代谢产物是药物在体内代谢后的物质，有时会比药物本身更具有生物活性。
因此，药物代谢产物的检测对药物研究有着重要的意义。
3.3 药物含量的测定使用HPLC技术可以准确地测定药物中活性成分的含量，这对于药物的质量控制和药物治疗效果的评估都很重要。
HPLC技术可以通过对移动相、固定相等操作的优化，准确地测量药物中活性成分的含量。
3.4 药物安全性评估药物的安全性评估是药物研究中的重要内容，使用HPLC技术可以对药物的代谢产物、副作用产物等进行检测和分析，对药物在体内的安全性进行评估。
这是药物研究中不可或缺的环节。
第四章：总结本文简要介绍了HPLC技术在药物分析中的应用。
HPLC技术在药物分析中具有分离速度快、分离效率高、灵敏度高等优点。
使用HPLC技术可以对药物成分分离、代谢产物检测、药物含量测定、药物安全性评估等进行检测和分析，对药物研究有着重要的意义。
高效液相色谱法在药物分析中的应用高效液相色谱法作为一种分离、纯化、分析化合物的非常有效的工具，广泛应用于药物分析领域。
在药物开发过程中，试验和分析是必不可少的环节。
高效液相色谱法是现代药物分析领域中最常用的分析方法之一。
本文将介绍高效液相色谱法在药物分析中的应用。
一、简介高效液相色谱法是一种通过将样品与流动相混合以分离分析样品的技术。
在该方法中，样品是以液体形式注入到含有一定浓度的溶剂混合物（流动相）的色谱柱中。
高效液相色谱发展至今已经非常成熟，其技术已经广泛应用于药物分析、环境检测、化学品分析、生物学等领域。
相较于传统的色谱技术，高效液相色谱法具有分离效果好、分离速度快、灵敏度高、装置操作方便等优点。
二、高效液相色谱在药物分析中的应用高效液相色谱法在药物分析领域的应用非常广泛，包括药物结构鉴定，药物纯度分析，药物代谢产物分析等。
1. 药物结构鉴定高效液相色谱法可以用于药物分子的结构鉴定。
该方法可以通过准确地测量药物相关化合物的分子质量、极性、分子结构等参数来鉴定药物分子的结构。
通过对不同药物分子的分离和分析，研究人员可以更好地了解药物分子的化学特征，为药物的研发提供有价值的信息。
2. 药物纯度分析药物的纯度对于药物的疗效、药物的耐受性等有重要影响。
高效液相色谱法可以通过分离、检测药物中的杂质物质，准确地测量药物的纯度。
该方法可以对药物站仪硅树脂进行验证，从而保证药物的质量符合标准、安全的规定。
3. 药物代谢产物分析药物代谢产物是药物分子在体内代谢过程中形成的化合物。
该过程一般由体内酶所调节，可以为药物的生物利用提供关键信息。
通过高效液相法有助于了解药物的代谢产物，从而帮助科研人员评估药物在体内转化代谢的能力，分析药物的代谢途径，为药物研发提供更加细致的信息。
4. 药物残留分析药物残留分析是指通过系统地分析和检测药物在环境、食品、农产品、水等中存在的残留量，以评估药物是否安全使用的一种分析方法。
高效液相色谱法在药物成分测定中的运用
高效液相色谱法（HPLC）是一种常用的分离和测定化合物的方法。
在药物成分测定中，HPLC被广泛应用于药物、中间体和杂质的定量或定性分析。
以下是HPLC在药物成分测定中的运用实例：
1. 药物含量测定：HPLC可用于测定药物中的含量和纯度，以确保药物的制备质量。
例如，利用HPLC测定阿司匹林、布洛芬、甲硝唑等常用药物的含量。
2. 杂质分析：HPLC可用于分离和定量药物中的杂质、不纯物和附加成分。
例如，可用HPLC分析药物中的重金属、农药残留、色素、氨基酸等杂质。
3. 药物代谢产物分析：HPLC可用于分析药物代谢产物。
例如，利用HPLC测定三环类抗抑郁剂阿米替林代谢产物的含量和代谢动力学。
4. 生物样品分析：HPLC可用于药物在生物样品（例如血浆、尿液、组织）中的测定。
例如，利用HPLC测定西妥昔单抗在肿瘤患者血浆中的浓度。
总之，HPLC在药物成分测定中的运用非常广泛，可以提高药物制备质量和治疗效果，保障患者用药安全。
高效液相色谱法及其在药物分析中的应用3031901074 何梦泽以液体为流动相的色谱法称为液相色谱法。
用常压输送流动相的方法为经典液相色谱法，这种色谱法的柱效能低、分离周期长。
高效液相色谱法（high performance liquid chromatography，简称HPLC）是在经典液相色谱的基础上发展起来的一种色谱方法。
与经典的液相色谱法相比，高效液相色谱法具有下列主要优点：①应用了颗粒极细（一般为10µm以下）、规则均匀的固定相，传质阻抗小，柱效高，分离效率高；②采用高压输液泵输送流动相，流速快，一般试样的分析需数分钟，复杂试样分析在数十分钟内即可完成；③广泛使用了高灵敏检测器，大大提高了灵敏度。
目前，已经发展了多种不同的固定相，有多种不同的分离模式，使高效液相色谱法的应用范围不断扩大。
下面介绍高效液相色谱法的有关知识，新的方法和技术以及在药物分析中的应用。
一、分类高效液相色谱法按分离机理的不同可分为以下几类：（一）吸附色谱法（adsorption chromatography）以吸附剂为固定相的色谱方法称为吸附色谱法。
使用最多的吸附色谱固定相是硅胶，流动相一般使用一种或多种有机溶剂的混合溶剂。
在吸附色谱中，不同的组分因和固定相吸附力的不同而被分离。
组分的极性越大、固定相的吸附力越强，则保留时间越长。
流动相的极性越大，洗脱力越强，则组分的保留时间越短。
（二）液-液分配色谱法（liquid- liquid chromatography)液-液分配色谱的固定相和流动相是互不相溶的两种溶剂，分离时，组分溶入两相，不同的组分因分配系数（K)的不同而被分离。
目前广泛使用的化学键合固定相是将固定液的官能团键合在载体上而制成的，使用化学键合固定相的色谱方法（简称键合相色谱法）可以用分配色谱的原理加以解释。
键合相色谱法在HPLC中占有极其重要的地位，是应用最广的色谱法。
按照固定相和流动相极性的不同，分配色谱法又可分为正相色谱法和反相色谱法两类。
1.正相色谱法（normal phase chromatography)固定相极性大于流动相极性的分配色谱法称为正相分配色谱法，简称为正相色谱法。
氰基键合硅胶、氨基键合硅胶等极性的化学键合固定相是正相色谱常用的固定相，正相色谱的流动相一般为极性较小的有机溶剂。
在正相色谱中，极性小的组分由于K值较小先流出，极性较大的组分后流出。
正相色谱法用于溶于有机溶剂的极性及中等极性的分子型物质的分离。
2.反相色谱法（reversed phase chromatography）流动相极性大于固定相极性的分配色谱法称为反相分配色谱法，简称为反相色谱法。
反相色谱法使用非极性固定相，最常用的非极性固定相是十八烷基硅烷键合硅胶，还有辛烷基硅烷键合硅胶等。
流动相常用水与甲醇、乙腈或四氢呋喃的混合溶剂。
在反相色谱中极大的组分因K值较小先流出色谱柱，极性较小的组分后流出。
流动相中有机溶剂的比例增加，流动相极性减小，洗脱力增强。
反相色谱法是目前应用最广的高效液相色谱法。
（三）离子交换色谱法(ion exchange chromatography)离子对交换色谱法是以离子交换剂为固定相的色谱方法，组分因和离子交换剂亲和力的不同而被分离。
柱填料含有极性可离子化的基团，如羧酸、磺酸或季铵离子，在合适的PH值下，这些基团将解离，吸引相反电荷的物质。
由于离子型物质能与柱填料反应，所以可被分离。
样品中不同的组分因离子交换平衡常数的不同而分离。
离子交换色谱的流动相一般为一定PH值的缓冲溶液，有时也加入少量的有机溶剂，如乙醇、四氢呋喃、乙腈等，以增大组分在流动相中的溶解度。
流动相的PH值影响离子交换剂的交换容量。
对弱酸或弱碱性的被分离组分，流动相的PH值还会影响其电离状况，流动相的PH值必须使待分离组分处于离解状态，才能被分离。
离子交换色谱法用于分离在测定条件下呈离解状态的组分，如具有酸性或碱性的化合物，反相离子对色谱法在药物分析中的应用非常广泛，例如生物碱、磺胺类药物、某些抗生素及维生素等的分析均可采用此方法。
（四）空间排斥色谱法（steric exclusion chromatography）空间排斥色谱也称为凝胶色谱。
其固定相是具有一定孔径范围的多孔性物质，即凝胶。
被分离组分因分子空间尺寸大小的不同而被分离。
当组分被流动相携带进入色谱柱时，体积大的分子不能进入固定相表面的孔穴中，而随流动相直接通过色谱柱，保留时间最短。
体积较小的分子可以进入孔穴内，在色谱柱中所走的途径较长，保留时间也较长。
分子的尺寸越小，可进入的孔穴越多，所走的路径越长，保留时间也越长。
因此，凝胶色谱中，在一定范围内，体积不同的分子保留时间不同，从而达到分离的目的。
凝胶色谱法主要用来分离高分子化合物，如蛋白质、多糖等。
由于分子量和分子体积有关，凝胶色谱还可以用来测定组分的分子量。
（五）亲和色谱法（ligh performance affinity chromatography）亲和色谱法是利用或模拟生物分子之间的专一性作用，从生物样品中分离和分析一些特殊物质的色谱方法。
生物分子之间的专一作用包括抗原与抗体，酶与抑制剂，激素和药物与细胞受体，维生素与结合蛋白，基因与核酸之间的特异亲和作用等。
亲和色谱的固定相是将配基连接于适宜的载体上而制成的，利用样品中各种物质与配基亲和力的不同而达到分离。
当样品溶液通过色谱柱时，待分离物质X与配基L形成X-L复合物，而被结合在固定相上，其他物质由于与配基无亲和力而直接流出色谱柱，用适宜的流动相将结合的待分离物质洗脱，如采用一定浓度的醋酸或氨溶液为流动相，减小待分离物质与配基的亲和力，使复合物离解，从而将被纯化的物质洗脱下来。
HPAC可用于生物活性物质的分离、纯化和测定，还可以用来研究生物体内分子间的相互作用及其机理等。
（六）手性色谱法（chiral chromatography）不少有机药物的结构中有不对称碳原子，又称手性碳原子，有手性碳原子的药物具有旋; 光性。
立体构型不同的一对对映体，其药效、毒副作用往往不相同。
例如抗高血压药物а-甲基多巴是S-（-）体；又如氯霉素（含有二个手性碳原子），只有D-（-）异构体有效．而L-（+）异构体完全无效。
沙利度胺（反应停）的两个对映体对小鼠镇静作用的效价相近，但只有左旋异构体才有胚胎毒及致畸作用。
因此，对映体的分离，在药物的制备和质量控制方面，都具有重要的意义。
对映体在普通条件下的理化性质是相同的，因此分离对映体需要在手性条件下进行。
分离对映体的色谱方法称为手性色谱法。
手性色谱法分为间接法和直接法两种。
间接法是将对映体与一定的手性衍生化试剂反应，使其由对映体转变为非对映体，再利用他们理化性质的差异，用一般的色谱条件进行分离。
直接法不需作衍生化反应，直接利用手性色谱柱或手性流动相进行分离，应用较多，以下主要介绍直接法。
1.手性固定相（chiral stationary Phase，CSP）手性药物拆分前的对映体通常以镜象存在，即以外消旋体形式存在。
用常规分析和制备方法不能将其拆分，需引入不对称（即手性）环境，使欲拆分的对映体（样品）、手性作用物（比如固定相）和手性源形成一个非对映异构分子的络合物。
为了形成这样一种分子络合物，分子之间要有一种同时相互存在的作用力，以保持分子的空间定位。
Dalgliesh认为至少要有三个作用力，其中一个要有立体选择性，可以是吸引的，也可以是排斥的。
这就是“三点相互作用”理论。
如果对映体中某一种对映体正好与此三个作用点配对，相互作用较强，保留时间就长。
而另一种对映体因空间构型不同，不能完全配对，作用相对较弱，保留时间就短，从而可以得到分离。
固定相的作用可以是氢键、偶极一偶极作用、π-π作用、静电作用、疏水作用或空间作用等。
l 常用的手性固定相有以下几种。
(1); Pirkle型手性固定相Pickle型手性固定相是由美国学者Pirkle主持研制的，主要有π-碱性（斥电子基）手性固定相和π-酸性（吸电子基）手性固定相。
在分离的过程中，化合物与固定相之间发生π-π电荷转移相互作用，此类固定相为电荷转移型手性固定相。
(2); 蛋白质类手性因定相蛋白质是由手性亚基团氨基酸组成的大分子物质，蛋白质类手性固定相是将蛋白质通过氨基酸键合到硅胶上而制成的。
常用的蛋白质类手性固定相有牛血清蛋白（RSA）和人血a1-酸性糖蛋白（AGP）的手性固定相，商品有Chiral AGP，Resolvosil， Enantio Pac等。
蛋白质类手性固定相应用范围较广，效果良好，但该类固定相的谱柱容量较小。
常用洗脱系统是磷酸盐缓冲溶液（PH4～7），离子强度为0～500mmol，有机改性剂不得超过5%。
用蛋白质类手性固定相拆分酸性和碱性倾倒物对映体时，流动相内可分别加少量离子对试剂，如N，N-二甲基辛胺，叔丁胺氢溴酸盐和辛酸，以获得理想的分离结果。
(3); 多糖类手性固定相多糖类手性固定相中应用最多的是环糊精。
环糊精（cyclodextrin, CD)是一类环形寡聚糖，为手性高分子物质，。
根据分子中葡萄糖单元的个数不同，环糊精可分为α、β、γ三类，他们分别由6、7、8个D-吡喃葡萄糖组成，将CD分别通过硅烷链连接在硅胶表面就构成环糊精手性固定相。
环糊精分子成锥桶状，内腔的直径由组成环糊精的葡萄糖个数决定，如常用的β-环糊精由7个葡萄糖分子组成，内腔直径为0.8nm。
用环糊精手性固定相进行分离时，首先要求被拆分的组分进人洞穴，形成包合物，保留时间以组分能否进人洞穴及其紧密的程度而定，环糊精环上还有多个手性中心，能选择性地; 与对映体作用，从而导致对映异构体的保留不同而被分离。
如用β-环糊精手性固定相已经成功地分离了二茂铁等金属有机络合物、氨基酸以及生物碱等。
除环糊精外，多糖类的手性固定相还可以用纤维素、直链淀粉作成，如纤维素三醋酸醋手性固定相、纤维素三苯甲酸醋手性固定相和纤维素氨基甲酸酯手性固定相等。
(4）冠醚（Grown ether）类手性固定相冠醚与环糊精类似，是本身具有手性的低聚糖，是含醚键的环状化合物，呈王冠状结构，外层是亲脂性的乙撑基，环的内层是富电子的杂原子，如氧、氮、硫等。
通常使用的是18-冠-6的衍生物，健合在聚苯乙炜骨架或硅胶上，形成冠醚手性固定相。
用冠醚手性固定相分离对映体时，不同对映异构体因与冠醚环腔形成的主客体络合物的稳定性不同而被分离。
在冠醚上引人双萘基，双萘基可以形成“手性墙”，增加固定相的立体选择性。
能质子化的氨基化合物，特别是氨基酸对映体在冠醚手性固定相上可以得到很好的分离。
除以上手性固定相外，还有模拟酶手性固定相、配位交换手性固定相等。
2.手性流动相（chiral mobile phase ，CMP）拆分法手性流动相拆分法是将手性试剂添加到流动相中，利用手性试剂与对映异构体结合的稳定常数不同或结合物在固定相上分配的差异进行分离。
