透析袋实验前处理
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透析袋安全操作及保养规程一、操作前准备1.1 环境准备在进行透析袋操作前,首先要做好环境准备。
准备好物品:•消毒液•手套•医用酒精或医用清洁剂•透析袋及相关的器具准备好环境:•操作环境应保持清洁卫生•需要有充足的光线•需要防止操作区域受到外部污染1.2 操作者准备必须满足以下条件,方可从事透析袋操作:•操作者必须进行透析袋操作培训,了解透析袋的安全使用规程。
•操作前应洗手并戴上手套•操作前应对个人卫生做好措施,如佩戴口罩•如患有传染病,不能从事透析袋操作二、安全操作2.1 打开透析袋包装打开透析袋包装时,需确保不损坏透析袋及其配件。
步骤如下:1.从手套盒内取出手套2.打开操作桌,并将透析袋取出3.仔细检查透析袋及其配件是否有损坏,如果有损坏,则不能使用4.正确佩戴手套,并将透析袋退到手套内,以避免手上沾染污物5.用医用酒精或医用清洁剂擦拭透析袋包装外部,防止污染2.2 准备透析袋操作者应仔细查阅透析袋使用手册,直到完全理解使用规程后,才能开始操作。
步骤如下:1.泡热水:取一容器,加水,水的温度应在35℃~40℃之间,太冷会影响药剂的溶解,太热会影响透析袋的质量。
2.加入透析液:将透析袋剪开,取出内袋,将透析袋的透析液倒入容器中,严格按照透析液的配方加入。
3.等待透析液溶解:加入透析液后,轻轻搅拌,等待10~30分钟让药物完全溶解。
4.准备药物:根据医嘱,在另一个容器中将所需的药物加入,轻轻搅拌。
5.加入药物:将药物倒入透析液的容器中,轻轻搅拌至完全混合。
6.准备治疗:将透析液从容器中倒入透析袋中,轻轻捏住封口,将透析液挤压至透析袋只剩下需要的数量。
7.实验室指标检查:在完成透析液后,需要将其送往实验室进行指标检查,以确定治疗效果。
2.3 给药过程在给药过程中,必须遵守规范操作程序,并根据医嘱进行操作。
步骤如下:1.预处理:在给药前,需要用消毒液进行预处理,防止污染。
将手套、消毒液(酒精棉或擦布)、透析袋的透析出口和输液袋的输液口进行消毒。
透析袋原理、分子量的选择、使用方法步骤透析袋原理自1861年发明透析方法至今已有一百多年。
透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内。
分子量的选择透析是一个简单的扩散过程,溶质中小分子物质从高浓度溶液通过半透性膜扩散到低浓度溶液中,直至渗透压达到平衡。
由于多孔膜的选择性,使得溶质中小分子物质可以通过,而较大物质则被截留,从而分离出不同大小分子量的物质,依据分子量大小截留,可高效用于分离工艺,改变或控制透析的条件,可在多种透析应用中得到预期效果,通过截留分子量(MWCO)可使目标分子得到分离。
所以透析袋分子量的选择就决定了实验的成败。
这篇文章就详细介绍了如何选择合适的透析袋。
透析膜的材质透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,主要有再生纤维素(RC)、纤维素酯(CE)、聚偏二氟乙烯(PVDF)。
但随着生物技术发展,对透析袋处理样品更多更严格的要求,根据生产工艺有可以分为标准膜和生物技术级膜。
生物技术纤维素酯(CE)膜生物学惰性和超纯的生物技术CE膜,用于带电荷分子的分离及大分子纯化。
生物技术CE膜对条件及溶剂要求较高。
一般而言,CE膜能够抗弱的或稀的酸碱溶液和轻微乙醇,MWCO只有轻微改变。
**直接与有机溶剂接触会破坏CE膜。
生物技术CE膜能在pH2-9与4-37℃下使用。
即用透析装置中也可使用CE膜。
生物技术再生纤维素(RC)膜生物技术RC膜通过再生过程制得,物理抗性与化学相容性得到改良,具有与生物技术CE膜一样高纯度与均一的MWCO。
RC膜能够与高浓度的弱酸碱、低浓度的强酸碱、大多数醇类及一些温和的或低浓度有机溶剂共用,**直接与强极性或有机溶剂接触会破坏RC膜。
自Thomas Graham 1861年发明透析方法至今已有一百多年。
透析已成为生物化学实验室最简便最经常使用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不竭扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保存在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保存液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,目前经常使用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO)通常为1 万左右。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为23 mm~50 mm不等。
为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
可先用50%乙醇煮沸1小时,再依次用50%乙醇、0.01 mol/L碳酸氢钠和0.001 mol/L EDTA 溶液洗涤,最后用蒸馏水冲洗即可使用。
实验证明,50%乙醇处理对除去具有紫外吸收的杂质特别有效。
使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水中,若长时间不必,可加少量NaN2,以防长菌。
洗净凉干的透析袋弯折时易裂口,用时必须仔细检查,不漏时方可重复使用。
新透析袋如不作如上的特殊处理,则可用沸水煮五至十分钟,再用蒸馏水洗净,即可使用。
透析袋的使用方法透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,这种由半透膜制成的袋状容器即透析袋。
将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析袋预处理:透析袋一般制成管状,其扁平宽度为16 mm~50 mm不等。
为防干裂,已用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
可先用50%乙醇煮沸1小时,再依次用50%乙醇、0.01 mol/L碳酸氢钠和0.001 mol/L EDTA溶液洗涤,最后用蒸馏水冲洗即可使用。
新透析袋如不作如上的特殊处理,则可用沸水煮五至十分钟,再用蒸馏水洗净,即可使用。
使用时,一端用橡皮筋或线绳扎紧,也可以使用特制的透析袋夹夹紧,由另一端灌满水,用手指稍加压,检查不漏,方可装入待透析液,通常要留三分之一至一半的空间,以防透析过程中,透析的小分子量较大时,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。
含盐量很高的蛋白质溶液透析过夜时,体积增加50%是正常的。
实验过程小技巧:检查透析效果可用1% BaCl2检查(NH4)2SO4,用1% AgNO3 检查NaCl、KCl等。
为了加快透析速度,除多次更换透析液外,还可使用磁子搅拌。
透析的容器要大一些,可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。
小量体积溶液的透析,可在袋内放一截两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管,以使透析袋沉入液面以下。
使用者也可以自行设计与制作各种简易的透析装置。
透析袋用后处理:使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水中,若长时间不用,可加少量NaN2,以防长菌。
洗净凉干的透析袋弯折时易裂口,用时必须仔细检查,不漏时方可重复使用。
透析袋处理及透析操作protocol 代谢物组学团队操作指南protocol,1透析袋处理与蛋白透析操作指南版本: v1.0整理时间 2010-4-16整理者:崔球透析原理一.透析常用于蛋白质样品的除盐或更换缓冲液。
自Thomas Graham 1861年发明透析方法至今已有一百多年。
透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。
在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4?透析,升高温度可加快透析速度。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,目前常用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO)通常为1 万左右。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为23 mm,50 mm不等。
为防干裂,出厂时都用10,的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须进行预处理除去。
使用注意事项:1某些化学物质会破坏透析袋微孔且不可逆转。
计有:烃、卤化烃、醇、酮、酯、胺、丙酮、甲基乙基酮、二氧杂环乙烷、环已烷等。
酸(甲酸、乙酸、稀强酸如5%HCI),10%苯酚,30%双氧水。
北京索莱宝科技有限公司
透析袋使用说明
产品介绍
高精度、即用型透析袋,使用前无需特殊处理,满足对截留分子量精确性和膜纯度的应用。
优点:
1,韧性膜材料,不易破损
2,孔径标准均一
3,对溶质的吸附性小
4,可选分子量范围广100-300000
5,多种扁平宽度可选
6,特有生物技术膜,不含硫化物及金属杂质
透析袋使用方法:
①把透析袋剪成适当长度(10cm左右)的小段。
②用60℃去离子水中水浴30分钟,再用去离子水内冲洗3次,洗掉甘油。
③使用时,一端用下沉透析袋夹子夹紧,灌满水后,用手指适当加压,检查不漏,方可装入样品。
通常要留三分之一至一半的空间,以防透析过程中,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。
装完样品后,用上浮夹子夹紧袋口,可在袋内放一玻璃珠,以使透析袋处于悬浮状态,即可进行透析。
为了加快透析速度,除多次更换透析液外,还可使用磁力搅拌器。
透析的容器要大一些,可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。
保质期:两年。
第1页,共1页。
透析袋的规格和使用方法
默认分类2009-12-16 12:11:02 阅读1751 评论0 字号:大中小订阅
直径mm 压平宽度(半周长)mm 截留分子量Da
22 34 3500
22 34 7000
6 10 14000
16 25 14000
22 34 14000
28 44 14000
35 55 14000
49 77 14000
透析袋:
技术参数:
◎PH 稳定范围:5-9
◎污染物水平:硫化物<0.3%,重金属<50ppm
◎化学兼容性:与很多盐兼容,比如CaCl2,(NH4)2SO4,还可与分子生物学及酶学中常用的水溶剂、有机溶剂兼容,如异丙醇、乙醇和丙酮。
◎温度抵抗性:可煮沸,可高压灭菌
◎蛋白吸附:每克透析袋吸附蛋白量小于1ng
使用前处理:
1、将透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段
2、在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(PH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟
3、用蒸馏水彻底清洗透析袋
4、放在1mmol/L EDTA(PH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟
5、冷却后,存放于4度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。
从此时起取用透析袋是必须带手套的。
6、用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。
储存条件:
透析袋可存放于10-29度;每次使用后将余下的膜放回袋子并密封好,以防干裂。
透析袋处理及透析操作透析只需要使用专用的半透膜即可完成。
通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。
保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为"保留液",袋(膜)外的溶液称为"渗出液"或"透析液"。
透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。
透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜,目前常用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司)和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量,缩写为MwCO)通常为1万左右。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为23 mm~50 mm不等。
为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物(0.1%)、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
透析袋的处理:可先用50%乙醇煮沸1小时,再依次用50%乙醇、0.01 mol/L碳酸氢钠和0.001 mol/L EDTA溶液洗涤,最后用蒸馏水冲洗即可使用。
实验证明,50%乙醇处理对除去具有紫外吸收的杂质特别有效。
(也可先在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟,用蒸馏水彻底清洗后,再放在1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。
)使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水中,确保透析袋始终浸没在溶液内。
若长时间不用,可加少量NaN2,以防长菌。
从此时起取用透析袋必须戴手套。
透析袋使用说明产品介绍一、高精度、即用型透析袋,使用前无需处理(生物级,去除了硫化物和重金属离子,保存于防腐液中)即用型透析袋的制造过程没有重金属污染及硫化物,无需预处理,只需用去离子水清洗即可使用,满足对截留分子量精确性和膜纯度的应用。
优点:1. 韧性膜材料,不易破损2. 杂质含量极少,可无需预处理,只需用去离子水清洗即可使用3. 孔径标准均一4. 对溶质的吸附性小5. 可选分子量范围广 100-3000006. 多种扁平宽度可选7. 特有生物技术膜,不含硫化物及金属杂质二、普通干型透析袋(美国联合碳化,甘油涂层,使用前需处理)技术参数:1. PH 稳定范围 : 5-92. 污染物水平: 硫化物<0.3%; 重金属<50ppm3. 化学兼容性: 与很多盐兼容,比如 CaCl2, (NH4)2SO4;还可与分子生物学及酶学中常用的水溶剂、有机溶剂兼容,比如异丙醇、乙醇和丙酮。
4. 温度抵抗性:可煮沸,可高压灭菌。
5. 蛋白吸附:每克透析袋吸附蛋白量小于 1ng。
干型透析袋使用前处理方法:1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。
2. 在大体积的 2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸 10 分钟。
3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸 10 分钟。
5. 冷却后,存放于 4 度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。
从此时起取用透析袋是必须戴手套。
6. 用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。
实验要求不高的可以用简易处理方法:在沸水中煮 10min 即可使用。
透析袋的应用:去除盐类、表面活性剂和溶剂样品溶液的缓冲液置换和 PH 值的调节浓缩蛋白质、多肽和抗体 DNA 电洗脱电泳前稀释蛋白的制备小分子污染物清除结合研究组织培养的提取纯化透析袋的选择1.正确选择合适的截留分子量截留分子量的选择是以预留在膜内的大分子的分子量和将要被除去的小分子污染物的分子量为基础的。
实验室透析操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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①把透析袋剪成适当长度(10cm左右)的小段。
②取适量透析袋处理液(Fast-Tre Solution)稀释100倍,将透析袋放于其中煮沸10分钟。
③取出用蒸馏水彻底清洗透析袋。
④暂不使用的话需要将透析袋完全浸泡到稀释100倍后的透析袋储存液(Long-Sav Solution)中,存放于4度。
从此时起取用透析袋是必须戴手套。
⑤浸泡在透析袋储存液中的透析袋取出使用前,须将透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净,冲洗三次即可。
实验要求不高的可以用简易处理方法:在沸水中煮10min即可使用
⑥使用时,一端用下沉透析袋夹子夹紧,灌满水后,用手指适当加压,检查不漏,方可装入样品。
通常要留三分之一至一半的空间,以防透析过程中,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。
装完样品后,用上浮夹子夹紧袋口,可在袋内放一玻璃珠,以使透析袋处于悬浮状态,即可进行透析(详见下页透析袋装置简图)。
为了加快透析速度,除多次更换透析液外,还可使用磁力搅拌器。
透析的容器要大一些,可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。
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①PH稳定范围:5-9;②污染物水平:硫化物<0.3%,重金属<50ppm;③化学兼容性:与很多盐兼容,比如CaC12,(NH4)2SO4;还可与分子生物学及酶学中常用的水溶剂、有机溶剂兼容,如异丙醇、乙醇和丙酮;④温度抵抗性:可煮沸,可高压灭菌;⑤蛋白吸附:每克透析袋吸附蛋白量<1ng。
处理方法:
1.将透析管剪成适当长度(10-20cm)的小段,即成透析袋。
2.在大体积的2%(m/v)碳酸氢钠和1mmol/LEDTA(PH=8)中将透析袋煮沸10min。
3.将透析袋用蒸馏水彻底漂洗。
4.将透析袋置1mmol/LEDTA(PH=8)中煮沸10min。
5.透析袋冷却后存放于4度,应确保透析袋始终浸没在液体中。
注:从此步起用透析袋时一定要戴手套操作。
6.在使用之前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗。
注:也可以将透析袋放在广口瓶中充满水,松动瓶盖,于20psi(1.40kg/cm2)高压灭菌10min,代替第四步用1mmol/LEDTA(PH=8)中煮沸10min的操作。
实验要求不高的可以用简易处理方法:在沸水中煮10min即可使用
使用前处理:
1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。
2. 在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透
析袋煮沸10分钟。
3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4. 放在1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。
5. 冷却后,存放于4度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。
从此
时起取用透析袋是必须戴手套。
6. 用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。
说明:
透析液的配置:10g NaHCO3 + 186.6mg EDTA.2Na + 500mL蒸馏水
1 mmol/L EDTA.2Na:即373.2mg/L
说明:
1.
EDTA煮主要是为了除去生产时附着在透析袋上的金属离子。
使用后的透析袋保存方法:
1.用生理盐水浸泡以去掉蛋白,并用蒸馏水清洗干净,然后置于50%乙醇中保存即可;
2.用完以后,要彻底洗干净,透析袋也可以保存在0.1%叠氮钠(可防止微生物生长)里;0.05%-0.1%叠氮钠,或者1mM EDTA,或者50%甘油中4度保存,公司的人建议前两种保存比较好!
3.使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水或者30%乙醇中,确保透析袋始终浸没在溶液内。
若长时间不用,可加少量NaN2,以防长菌。
从此时起取用透析袋必须戴手套。
洗净凉干的透析袋弯折时易裂口,用时必须仔细检查,不漏时方可重复使用。