细胞系来源的异体移植肿瘤模型

2015年中国新诊断食管癌47.8万人，37.5万人死于食管癌，分别占2015年癌症新诊断人数和死亡人数的11.1%和13.3%［1］。

对于食管癌的治疗，手术仍是主要治疗方法［2］，大多数患者预后较差，5年生存率不到20%［3］。

放、化疗仍是治疗食管鳞癌患者（ESCC ）的主流方法，然而药物有效率低且并发症大［4-6］。

近年来，以分子为靶标的治疗已发展成为食管癌中一种有希望的有效治疗方法。

主要是抗EGFR 抑制剂［5］，很多药物仍处于临床试验阶段，对于ESCC 患者是否安全有效仍有待评估。

因此建立模拟患者来源的ESCC 特异性的模型对临床前研究、药物评估、治疗和预后具有重要的转化意义。

目前已知的研究食管癌的动物模型不少，许多已进入主流研究平台［7-9］。

患者来源的移植瘤（PDX ）模型，PDX 模型是将患者手术切除的肿瘤组织移植到免疫缺陷小鼠体内，这不仅能够高度保留患者肿瘤组织的异质性、病理特征，还保存了肿瘤细胞间相互作用及肿瘤微环境［10］。

PDX 模型可以直接携带患者身上肿瘤靶标的模型，并且药效反应与临床结果一致［11］，因此PDX 模型对于ESCC 患者精准用药的筛选具有很大的优势。

目Comparison of B-NDG ®and BALB/c mouse models bearing patient-derived xenografts of esophageal squamous cell carcinomaGUAN Liuliu 1,2,ZOU Qingqing 1,2,LIU Qian 2,3,CHEN Size 1,2,31Department of Oncology,3Scientific Research Center,First Affiliated Hospital of Guangdong Pharmaceutical University;2Guangdong Provincial Engineering Research Center for Esophageal Cancer Precise Therapy,Guangzhou 510080,China摘要：目的探讨不同品系的小鼠对于食管鳞癌患者来源的异种移植瘤（ESCC PDX ）成瘤率的影响，为ESCC 的临床个体化治疗建立更优势的临床前动物模型。

CT26细胞系移植瘤模型、高淋巴转移肿瘤模型的建立及评价的开题报告一、研究背景癌症是一种常见的疾病，其中部分癌症具有高度的转移性。

目前，对于高淋巴转移肿瘤的研究尚不够深入。

CT26细胞系是一种分化程度低、高度转移的结直肠癌细胞系，具有广泛的应用价值。

因此，建立CT26细胞系移植瘤模型以及高淋巴转移肿瘤模型，对于研究高淋巴转移肿瘤的机制以及建立有效的治疗方案具有重要意义。

二、研究目的本研究的主要目的是建立CT26细胞系移植瘤模型以及高淋巴转移肿瘤模型，并评价其模型的可靠性和适用性。

其中，移植瘤模型用于研究CT26细胞系在体内形成转移瘤的过程，而高淋巴转移肿瘤模型则用于深入探究高淋巴转移肿瘤的生物学特性以及制定有效的治疗方案。

三、研究内容1.建立CT26细胞系移植瘤模型将CT26细胞根据细胞密度的需要，注射入小鼠皮下或肌肉内，观察移植瘤的生长情况，记录生长曲线，并测定体积和重量。

2.建立高淋巴转移肿瘤模型将CT26细胞注射到小鼠尾静脉中，随后观察淋巴结转移和肝、肺等远处转移的情况。

通过对小鼠血清和淋巴液中肿瘤标志物的检测，评估肿瘤转移的程度。

3.模型评价对模型进行数据统计和分析，评价模型的可靠性和适用性，并比较两种模型的差异。

同时，利用CT检查和病理学检测对模型进行确认，确保结果的准确性。

四、研究意义建立CT26细胞系移植瘤模型以及高淋巴转移肿瘤模型，有利于研究高淋巴转移肿瘤的机制，探究转移及其发生机制，同时有助于筛选新的治疗方法和药物。

该研究有望为临床治疗提供新的思路和手段，为结直肠癌及其他高淋巴转移性肿瘤的治疗和治疗监测提供新的方法和参考依据。

这些肿瘤免疫小鼠模型，别说你不知道订阅号APExBIO要说当今社会哪种癌症治疗手段最火热，癌症免疫疗法（Cancer Immunotherapy）当之无愧。

科学家们热衷于从免疫系统着手消灭肿瘤细胞。

自美国詹姆斯·艾利森（James P. Allison）和日本免疫学家本庶佑（Tasuku Honjo）因其开创性的癌症治疗方法获得2018年诺贝尔医学奖后，更是为癌症的免疫治疗增添了热度。

虽说免疫检查点抑制剂、癌症疫苗和细胞治疗等方面取得的成就为患者带来了希望，然而建立可以模拟人类疾病的免疫活性小鼠模型仍是一个重大挑战。

免疫疗法的临床前研究需要具有完整功能免疫系统的体内模型。

当前的临床前免疫治疗小鼠模型包括同源肿瘤模型、基因工程小鼠模型和人源化肿瘤模型，本文将浅谈这几种模型。

一、同源肿瘤模型▲同源肿瘤模型（Syngeneic tumor models）。

利用在体外生长和扩增的鼠肿瘤细胞系，将其注射（通常皮下或原位）到免疫活性（Immune-competent）宿主中。

这是最早出现和最常使用的临床前模型。

同源肿瘤模型是将永生化的小鼠肿瘤细胞系接种到近交品系小鼠中形成的同种移植模型。

肿瘤细胞系可以是自发性的、致癌物诱导的或转基因的。

受体小鼠拥有完整的鼠源免疫系统，具有完全的免疫活性（immuno-competent），且该免疫系统与同种移植肿瘤组织相容。

▲常见的同源肿瘤小鼠模型整理（包括鼠肿瘤细胞系、癌症类型、鼠宿主和使用的药物）同源模型易于建立，且有良好的免疫应答。

可以用免疫检查点抑制剂（例如抗PDL-1，抗PD-1，抗-CTLA-4）等药物来评估荷瘤小鼠中肿瘤免疫疗法的效果。

同源细胞系可以在实验室中轻松培养和大量扩增，这种模型价格低廉，操作起来相当简单且重复性强。

同系模型的另一个优点是宿主的免疫系统是正常的，这可能最大化模拟肿瘤微环境的真实生活情况。

缺点是移植的小鼠组织可能无法完全代表临床情况下人类肿瘤的复杂性。

免疫疗法相关肿瘤模型介绍导读前两期我们介绍了常见的肿瘤动物模型，考虑到肿瘤免疫疗法不同于普通抗癌药物的作用方式和评价体系，有必要在此单独介绍一下肿瘤免疫疗法研究领域常用的肿瘤动物模型。

为此，笔者专门搜集和整理了一些相关资料，以当前较为成熟的CAR-T/TCR-T以及免疫检查点阻断技术为例，对免疫疗法肿瘤模型的特点、常用实验动物及细胞株、建立方法以及药物评价方式等关键点做个简要介绍，以期为有志于从事肿瘤免疫疗法研究的同行们提供些许参考。

背景在当今众多的癌症治疗手段中，免疫疗法无疑是近年来最为吸引人们眼球的“明星”治疗手段，普遍引起学术界及医学界的强烈关注和研究兴趣。

随着以T细胞受体T细胞技术（TCR-T）、嵌合抗原受体T细胞技术（CAR-T）以及免疫检查点阻断技术（Immune Checkpoint Blockade）为代表的新兴肿瘤免疫疗法不断取得临床上的突破和成功，奇迹频现，捷报频传，持续更新着人们对机体免疫系统潜在的强大肿瘤杀伤能力的认知，进一步提高人们战胜恶性肿瘤的信心，当然也持续激发着科研人员对“肿瘤免疫疗法”这一强大抗癌利器的研究和开发热情。

而对于肿瘤免疫疗法的研究，离不开相关动物模型的选择和建立。

事实上，目前已经取得临床成功的肿瘤免疫疗法中，无一例外都已经过大量严格的临床前动物实验进行验证、评估和预测。

可见，相关动物模型的建立对于肿瘤免疫疗法的开发和应用是至关重要且必不可少的。

免疫疗法相关肿瘤模型一、以CAR-T/TCR-T为代表的细胞过继性疗法（Adoptive Transfer）常用肿瘤动物模型细胞过继性疗法是指将供体（donor）细胞（此处主要是T淋巴细胞）经体外刺激活化或者基因修饰后再次回输入受者（Recipient）体内，从而达到相关治疗目的的治疗方式。

供体细胞可以是来源于受者自身，也可以来自于其他个体，前者称为自体移植（Autograft），后者则有两种情况，如果受者与供者属于相同种属，称为同种异体移植（Allograft），反之则为异种移植（Heterograft）。

肿瘤小鼠造模方法肿瘤小鼠模型是研究肿瘤发展、治疗和预防的重要工具。

通过模拟人类肿瘤的形成和发展过程，可以更好地了解肿瘤的病理生理特征，并为肿瘤的早期诊断和治疗提供有益的信息。

下面我们将介绍几种常用的肿瘤小鼠造模方法。

1. 异种移植模型异种移植模型是最常用的肿瘤小鼠模型。

它通过将人类肿瘤细胞或肿瘤组织移植到小鼠体内形成肿瘤。

该方法可以用于研究肿瘤的生长、转移、侵袭和药物敏感性等方面。

在异种移植模型中，首先需要获取人类肿瘤细胞或肿瘤组织样本。

常用的来源包括人类肿瘤细胞株、肿瘤切片、肿瘤移植瘤等。

然后，将这些样本注射到小鼠体内，通常是通过皮下注射、腹腔注射或静脉注射的方式。

注射后，观察肿瘤的生长情况，定期测量肿瘤体积，并进行影像学检测以评估肿瘤的进展和治疗效果。

2. 转基因小鼠模型转基因小鼠模型是通过改变小鼠基因组中的特定基因，使其表达或缺失某种特定基因，从而模拟人类特定基因异常引起的肿瘤。

这种模型常用于研究特定基因对肿瘤发生和发展的影响。

转基因小鼠模型的制备通常分为两个步骤：基因敲除和基因敲入。

基因敲除是指将目标基因从小鼠基因组中彻底删除，而基因敲入是指将目标基因导入小鼠基因组中，使其表达或缺失。

基因敲除通常采用胚胎干细胞技术。

首先，通过体外培养的方法获得小鼠胚胎干细胞，然后，通过基因编辑技术，将目标基因从胚胎干细胞基因组中删除。

最后，将这些基因敲除的胚胎干细胞注入到小鼠的早期胚胎中，使其发育成为具有目标基因敲除的小鼠。

基因敲入通常采用质粒转染、病毒载体转染或基因修复等方法。

通过以上方法，将目标基因导入小鼠的基因组中，使其表达或缺失。

这种模型的制备过程比较复杂，需要专业的实验条件和技术支持。

3. 化学诱导模型化学诱导模型是通过给予小鼠特定的诱癌物，如化学物质或药物，来诱发肿瘤的形成。

这种模型可以模拟某些环境因素或生理机制与肿瘤发生的关系。

在化学诱导模型中，首先选择合适的诱癌物，如DMBA（二甲基苯并[a]芘）、DEN（二乙胺）等。

侧群细胞与卵巢癌干细胞赵玲;邱倩【摘要】@@ 侧群细胞(side population,sP)是一类具有干细胞特性,能够排出活性污染Hoechst33342而具有弱荧光染色特性的细胞.利用这一特性,sP细胞可以通过免疫荧光激活细胞法结合流式细胞仪被分选,目前在人、鼠多种卵巢癌细胞株及患者腹水中成功分选、鉴定、培养,证实了sP细胞的存在,并证实其与肿瘤干细胞之间存在一致性.基于对sP细胞生物学特性的研究,进一步了解肿瘤干细胞在基因调控、信号转导等方面的研究,并且为研究卵巢癌干细胞创造有价值的细胞模型.本文就sP细胞在卵巢癌干细胞中的研究进展作一综述.【期刊名称】《重庆医学》【年(卷),期】2011(040)028【总页数】4页(P2891-2894)【关键词】肿瘤干细胞;侧群细胞;卵巢癌【作者】赵玲;邱倩【作者单位】第三军医大学新桥医院妇产科,重庆,400037;河南开封市第155医院内二科,475000【正文语种】中文侧群细胞(side population,sP)是一类具有干细胞特性,能够排出活性污染Hoechst33342而具有弱荧光染色特性的细胞。

利用这一特性,sP细胞可以通过免疫荧光激活细胞法结合流式细胞仪被分选,目前在人、鼠多种卵巢癌细胞株及患者腹水中成功分选、鉴定、培养,证实了sP细胞的存在,并证实其与肿瘤干细胞之间存在一致性。

基于对sP细胞生物学特性的研究,进一步了解肿瘤干细胞在基因调控、信号转导等方面的研究,并且为研究卵巢癌干细胞创造有价值的细胞模型。

本文就sP细胞在卵巢癌干细胞中的研究进展作一综述。

1 侧群细胞的发现1996年Goodell等[1]在研究鼠造血干细胞(hemaopoies stem cells,HSCs)的过程中,用荧光染料 Hoechst33342染色小鼠骨髓细胞后,经流式细胞仪检测,在流式二维分析点阵图上发现一小群具有弱荧光染色或拒染特性的细胞,呈彗星状分布在细胞主群的一侧,他们将这群细胞称为侧群细胞(side population,sP),也称边群细胞。

2024肝癌类器官的研究进展要点（全文）肝癌在各类致死癌症中位居第四位，是我国第六大常见癌症疾病。

我国肝癌的发病率位居世界前列，患者预后效果差且致死率高。

肝癌治疗一般以手术切除和化疗联合为主，多数患者由于其发现病症时已经处于肝癌中晚期，治疗效果并不理想。

近年来，尽管肝癌治疗方式不断完善，如手术、微创介入、免疫、靶向治疗等，患者5年生存率有了一定提高，但整体治疗效果仍不理想。

因此，开发新型抗肿瘤药物以及个体化药物迫在眉睫，而抗肿瘤药物从研发到临床应用肿瘤模型的选择至关重要。

肝癌研究的传统模型包括体内模型和体外模型两种，由于肝脏疾病存在明显的异质性，而传统肝癌研究模型对于细胞真实形态、空间结构和细胞微环境无法完全准确反映及表达，故研究结果无法应用到临床实践；动物模型的种属差异性限制了其在临床研究的延续性。

致力于反映人体真实情况的肝癌模型是研究者梦寐以求的目标，类器官作为一种新型体外模型，不仅弥补了传统模型不准确、不全面、不稳定的缺点，还为肝癌免疫研究和血管生成等微环境研究提供了可能性，并可用于高通量药物筛选和生物样本库的构建。

类器官模型将在精准治疗与再生医学方面提供更大的潜力。

1.肝癌的发病机制目前已知肝癌的发生和发展是一个多基因、多步骤、多阶段的复杂过程，肝癌通常由慢性肝炎、肝硬化逐渐发展而来，是一种典型的炎症驱动的肿瘤。

肝脏长期处于刺激环境（HBV、过度饮酒等）会产生炎症反应，经长期积累最终导致肝癌发生。

肝癌发病机制主要由两方面导致，其一是原癌基因的激活，在正常生物体内均存在原癌基因，但一般处于低表达或不表达状态，而在病毒感染或者辐射的作用下，原癌基因就会被激活转变成为癌基因，诱导细胞发生癌变。

其二是抑癌基因失活，抑癌基因的作用是具有潜在抑癌作用，抑癌基因与原癌基因相互制约，如果抑癌基因发生突变导致其调控细胞增殖和分化作用失活，则最终造成细胞恶性增殖进而发展成为肿瘤。

近年来发现多种信号通路异常也会导致癌变，例如在动物胚胎发育早期、Wnt信号通路（形成器官）活化异常可能会促进肝癌的发生。