幼龄大鼠的性别鉴别方法新探
- 格式:docx
- 大小:46.65 KB
- 文档页数:4
家畜早期胚胎性别鉴定的方法
袁兴敏
【期刊名称】《养殖技术顾问》
【年(卷),期】2012(000)004
【摘要】动物性别控制主要采用2条途径,即X精子与Y精子的分离和胚胎性别的鉴定。
在前者尚未取得完全成功的情况下,胚胎的性别鉴定成为性别控制的主要途径。
家畜胚胎的性别鉴定技术是家畜胚胎移植技术的重要内容。
通过移植已知性别的胚胎,控制家畜后代的性别比例,能加快优良母畜的繁殖速度,促进高效畜牧业的发展。
由于胚胎性别鉴定所潜在的巨大的经济效益以及其重大的意义,
【总页数】1页(P74-74)
【作者】袁兴敏
【作者单位】黑龙江省绥滨县畜牧兽医局,156200
【正文语种】中文
【中图分类】S814.7
【相关文献】
1.家畜早期胚胎性别PCR鉴定常用核酸染料的应用概述 [J], 蒋竹英;李丽立
2.家畜早期胚胎性别鉴定方法综述 [J], 唐利华;赵建军;方热军
3.家畜早期胚胎性别鉴定方法在畜牧业中的应用 [J], 田万强;魏红芳;昝林森
4.家畜早期胚胎性别鉴定技术的研究进展 [J], 孟醒;张正茂;赵强
5.家畜胚胎早期性别鉴定的方法 [J], 魏雅萍
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
麝鼠仔鼠的护理及性别鉴定技术麝鼠母性很强,泌乳力也好,一般用不着对仔鼠进行过多的人工辅助护理,只要护理好母鼠就可以了。
对仔鼠进行性别鉴定时要戴手套,在母鼠偶尔出窝时进行,先用窝草揉搓双手后再进行检查。
出生后1-3天的仔鼠,在粉红色的腹面上有紫红色乳头痕迹,但并无突出来的感觉,4-6天乳头略突出于表面.6天时,腹毛已长出,乳头被覆盖,只见绒毛包裹的部位有一小圆点,IO-13天,胸部绒毛掩盖了圆点,而腹部的圆点仍可看到,若14天后胸、腹部的圆点都见不到,则为雌性。
若出生后腹面平平,没有乳头痕迹,偶尔只见不规则的突出黑点,则为雄性。
用以上方法鉴别雌、雄,准确率可达97.6%。
当然,到了100天后,鉴别率达100%。
姓名:薛桂凤学号:132015200300实验报告(二)一、实验目的:1.掌握大鼠的抓取和固定。
2.掌握大鼠的编号与标记方法。
3.掌握大鼠的常用实验方法。
4.掌握大鼠的常用麻醉方法。
5.掌握大鼠的安死术。
6.掌握大鼠的釆血方法。
7.了解小鼠的采尿、粪的方法。
8.了解小鼠各种脏器标本的采集方法。
二、实验器材:SD大鼠、电子称、手套、实验托盘、固定板、烧杯、注射器(3支)、剪刀、镊子、灌胃针头、毛细管、酒精棉球、5%水合氯醛、生理盐水三、实验内容1.抓取:两种方法。
第一种方法:右手食指和中指夹住大鼠颈部,使其头部固定,右手拇指及无名指分别在大鼠前爪下抓住大鼠身体。
第二种方法类似单手抓取小鼠的方法,用右手拇指及其余四指并捏住大鼠颈部背部皮肤。
2.称重:小鼠放在烧杯中称重(去除烧杯重量),记录小鼠体重210g。
3.鉴别大鼠性别:观察生殖器雄性大鼠的阴囊非常明显。
4.编号:染色法:逆毛方向涂上有色斑点,顺序由左到右,由上向下,用两种颜色可标记99只动物。
5.给药:(1)皮下注射小于1ml/100g(俯卧固定,左手拇指和食指捏住皮肤提起,右手持针沿纵轴方向刺入皮肤,阻力消失后回抽无血注入药物,拔针)(2)皮内注射小于0.1ml (麻醉后进行,先备皮)(俯卧固定,与皮肤平行刺入捏起的皮肤,阻力大,注射药物局部有皮丘后停留片刻后拔针)(3)腹腔注射0.01-0.02ml/g(仰面固定,在腹正中线两侧腹股沟平行的位置30-45°进针,挑起皮肤和肌肉,回抽无血,注药)(4)灌胃1-2ml/100g (大鼠固定身体呈一条直线,灌胃针头顺着上颚插入咽部,先少量注药证明未入气管后继续给药)6.釆血:尾尖釆血法、眼眶静脉丛釆血法、心脏釆血法(麻醉后) 。
7.大鼠的采尿、粪的方法(1)少量采集:在抓取固定时受到刺激排出少量尿液和粪便(2)长期大量采集:使用代谢笼8.麻醉:根据大鼠体重计算麻醉药物用量5%水合氯醛按300mg/kg,给药,计算药量为 1.26ml,ip 麻醉小鼠,观察小鼠麻醉期。
二.单项选择题(每题只有一个正确答案)1.实验动物科学自__________诞生以来,至今已成为一门具有自己理论体系的独立性学科。
A.19世纪50年代B.19世纪70年代C.20世纪50年代D.20世纪70年代2.实验动物又称。
A.狭义实验动物B.广义实验动物C.经济动物D.无特定病原体动物3.实验用动物又称。
A.狭义实验动物B.广义实验动物C.经济动物D.无特定病原体动物4.__________的出现,为分子生物学、特别是人类功能基因组学研究提供了最好的技术平台。
A.转基因动物B.无菌动物和悉生动物C.免疫缺陷动物D.近交系动物5.__________的出现,使器官移植成为可能,并使人们发现了与移植相关的组织性抗原,从而为人类的器官移植奠定基础。
A.转基因动物B.无菌动物和悉生动物C.免疫缺陷动物D.近交系动物6.__________的出现,促进了肠道微生物菌丛的研究,使人们认识微生物与免疫、与营养、与人类疾病和衰老的关系。
A.转基因动物B.无菌动物和悉生动物C.免疫缺陷动物D.近交系动物7.__________ 的出现,使人体的肿瘤能异种移植到裸鼠,为抗癌药的筛选和研究肿瘤做出了贡献。
A.转基因动物B.无菌动物和悉生动物C.免疫缺陷动物D.近交系动物8.实验动物资源是必然趋势。
A.专一化B.单纯化C.多样化D.有序化9.人类第一个基因组草图于__________完成,宣告了人类基因组计划的完成。
A.2000年6月B.2001年6月C.2002年6月D.2003年6月10.__________是继人之后第二个开始并完成基因组测序工程的哺乳类动物。
A.大鼠B.小鼠C.猴D.犬11.与人类的功能基因的同源性高达90%以上。
A.大鼠B.小鼠C.猴D.犬12.__________因其与人类的基因组序列、发育、生化代谢及生理特点相似性而成为研究人类基因功能的最为理想的模式动物。
A.大鼠B.小鼠C.猴D.犬13.__________ 作为基因改造动物的材料可以真实的模拟人类,因此其基因组的改造和操纵对于功能基因与基因信息学的研究具有不可替代的作用。
幼龄大鼠的性别鉴别方法新探
【摘要】目的探讨幼龄大鼠性别的最佳鉴别方法。
方法将同期交配的孕鼠分为4组,针对乳鼠在不同日龄的身体发育特点,在3~4日龄采用观察其肛门与外阴距离和相对距离的方法、对5~8日龄再附加对乳头(乳状突)观察的方法进行性别鉴别对比实验。
结果B组鉴别法相对于A组准确度高,D组以距离再结合乳头观察的方法来鉴别乳鼠的性别无误差产生。
结论上述两种方法对于幼龄大鼠的性别区分效果优于传统鉴别方法。
Li Zhiman,Wang Deli,Xue Ping,et al.
Laboratory Animal Center of Jilin University,Changchun130021.
【Abstract】Objective To study the optimum method of discriminating the nepionic rats sex.Methods The pregnant rats mating in the corresponding period were divided into four groups.As for the Nepionic Rats at the body growth characteristic of different days ages,the method of observing the distance and the relative distance of the anus and the vulvas when they were three to four days old was used to discriminate the sex.When they are five to eight days old,the method of observing the papillas was added to discriminate the sex.Results The accuracy of discrimiˉnating method in Group B was better than that in Group A;the method of observing the distances and papillas was not error to discriminate the sex of nepionic rat.Coneclusion It has the significant effects that the two methods distinˉguish the sex of the nepionic rats.
Key words nepionic rat sexual discrimination distance
医学实验动物中,幼龄大鼠的性别区分的准确程度对于某些如生殖生理、细胞生物学、制药工程等有关生命科学实验具有十分重要的意义。
而大、小鼠与猴及狗不同,生后外生殖器未熟,雄性要3~4周龄睾丸下降,雌性4~5周龄阴道才开口,因此,随着生后龄期的变化观察的侧重点亦异。
传统的鉴别方法是:看肛门与外阴间的距离,距离长的为雄性,距离短的为雌性[1]。
经笔者长期实践发现,此方法有一定的局限性,以此方法区分乳鼠性别常有失误产生。
如结合仔鼠的几个不同日龄段特点来鉴别则更好。
1 材料与方法
1.1 实验动物230~270g雌性Wistar大鼠40只,290~330g雄性Wistar大鼠20只。
来源于吉林大学实验动物中心。
1.2 方法
1.2.1 将雌、雄Wistar大鼠按2:1比例交配,以托盘阴栓法[2]检查雌鼠受孕情况,将阳性者提出。
4天内提出32只孕鼠,记住交配日期,单笼饲养。
1.2.2 把孕鼠分为A、B、C、D四组,每组8只。
19~21天乳鼠出生,其中A组计66只、B组65只、C组70只、D组68只。
1.2.3 在3~4日龄,将A组乳鼠提出,以肛门与生殖突间距离远近判别每只乳鼠的雌雄;将B组乳鼠提出,以肛门与生殖突的相对距离(即与其他乳鼠作相对比较)的远近来判别雌雄,并观察乳突的有无。
然后,将A组“雄鼠”32只分4窝由A组的1~4号母鼠哺乳;将“雌鼠”34只分4窝由A组的5~8号母鼠哺乳。
将B组的“雄鼠”34只分4窝由其1~4号哺乳,“雌鼠”31只由其5~8号哺乳。
注意:在放入前一定要用沾有母鼠体液气味的垫料与待喂养乳鼠混合10min左右,以使母鼠适应。
1.2.4 在5~8日龄,将C组乳鼠提出,仅以肛门与生殖突(或称外阴)距离远近为准判别雌雄;对D组乳鼠以肛门与生殖突的距离相对较近且鼠蹊部至胸部间有3~4对点状乳头(或可称为乳状突)为雌性;以肛门与生殖突间距离相对较远且鼠蹊部与胸部间无点状乳突者为雄性。
然后,将C组“雄鼠”33只分4窝由C组的1~4号母鼠哺乳;将“雌鼠”37只分4窝由C组的5~8号母鼠哺乳。
将D组的“雄鼠”36只分4窝由其1~4号哺乳,“雌鼠”32只由其5~8号哺乳。
在放入前要用沾有母鼠尿液气味的垫料与待喂养乳鼠混合15min左右,以使母鼠适应。
1.2.5 21日龄离乳时核查乳鼠实际性别。
2 结果
A组中有5只失误,B组1只;C组3只,D组0。
具体情况如下:
表1 幼龄大鼠性别鉴别结果与实际性别的对照(略)
由此可见,B组(4日龄内的乳鼠)鉴别法相对于A组准确度较高;D组(5日龄以后)以距离再结合乳头观察的方法来鉴别乳鼠性别无误差产生。
3 结论与讨论
3.1 对于1~4日龄乳鼠,由于发育时间短,其其他生理特征尚未表现出来,只能凭其肛门与生殖突(笔者认为:此时此称法较外阴或生殖器要恰当)间的距离远近来判断,远者为雄性,近者为雌性。
但因为乳鼠的体形大小与母鼠的胎产仔数的多少及其在胚胎期的发育状况有关,这两点间的距离也是相对的,所以在观察某胎其中1只鼠的肛门与生殖突间距离时,要参照另几只乳鼠的距离,否则容易出现失误。
3.2 对于5日龄以后的乳鼠,在观察其肛门与生殖器的距离远近的同时,一定要结合其乳头(或称乳状突)的有无来判断性别。
在此时期,雌性乳鼠的体毛与乳头几乎是同时出现的。
此时由于体毛呈浅白色,在其较稀疏时,乳头在皮肤上呈圆形点状。
随着毛发逐渐浓密,乳头部位就呈凹陷深色,很容易发现。
值得注意的是,在此阶段,要把乳头与脐带突加以区别:乳头出现在鼠蹊部至胸部间,以腹中线为轴成对对称排列,仅雌性有;而脐带突仅体现为腹部中间的一个点,雌雄均有。
3.3 单一性别的乳鼠在医学实验中应用较多,而清洁级和SPF动物的生产设施又为仔鼠性别区分带来一定的难度。
希望此方法对大家有所借鉴。
参考文献
1 魏泓.医学实验动物学,成都:四川科学技术出版社,1998,167-168.
2 李彦清,邵龙江,李森,等.大鼠阴栓的实验观察和孕鼠模型鉴定方法的比较.中国实验动物学杂志,2002,12(1):17-18.
作者单位:130021吉林长春吉林大学实验动物中心
小鼠和大鼠是一个道理:远公近母
一般而言,比较大一点的老鼠雄性的睾丸还是比较明显的,这很容易区分。
对于比较小的,可以据以下方法:
1.看肛门与生殖器之间的距离:雄性隔得远,雌性隔得近。
2.雄性阴茎朝头的方向突出,可挤压包皮使其露出而确认。
雌性较小时可见闭合的阴道口,挤压亦可张开。
可以说,这个方法是最本质的,最能确认的。
像兔、豚鼠等这些较难辨认雌雄的动物均可用此法。
当然,看得多了,不用如此挤压,一眼就可看出来。
将生殖器周围皮肤稍微用力往下挤压,可以分清柱状和缝状:前者雄,后者雌。
3.看乳头。
刚开始一定要认真仔细地观察,这样会有一些经验。
熟悉以后,可以很迅速很准确的分出来。
4.脑下垂体和肾上腺:雌性的远大于雄性
5.肾脏鲍氏囊上皮(epithelium of Bowman's capsule in kidney):
雄性:立方上皮(cuboidal)
雌性:鳞状上皮(squamous)
未成年的动物性器官还没有成熟,雄鼠的睾丸还没有坠入阴囊,所以只有看肛门和肚子上的突起部位之间的距离了。
雌小鼠的肛门距离生殖器是特别近的,之间基本没什么距离,其实有时我们看成年动物也是看这点。
雄鼠除了距离要大一些外,生殖器略显凸起。
1)将老鼠小心拿起,查看它的肚子一带,会发现有两个上下排列的小孔。
2)如是雌鼠的话,这两个小孔的距离会较近,几乎连在一起。
3)如是雄鼠的话,这两个小孔的距离会较远。
4)雄鼠尾部的两个洞(肛门及阴茎)是明显地分开的,而雌鼠的两洞则是紧靠在一起的。
成年鼠更易分出雌雄:雄鼠尾巴的两则各有一个阴囊,所以尾部看起来较膨大。
而雌鼠尾部则较钝,腹部上有两排点状的乳头。