液相色谱仪原理及使用操作规程、原子吸收仪使用规程
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液相色谱仪操作规程液相色谱仪操作规程1. 开机准备:1.1启动计算机:打开计算机电源,登陆windows 操作系统1.2启动液相:打开Agilent 1200 各模块电源。
待Agilent 1200 各模块自检完成后(各模块右上角指示灯为黄色或者无色),双击“仪器 1 联机”图标,或者“开始->所有程序->Agilent Chemstation->仪器 1 联机”1.3开启工作站:工作站打开,点击“方法和运行控制”或者在“视图”中选择“方法和运行控制”。
打开仪器控制视图:选择“视图->系统视图”,即可显示仪器控制视图,选择“视图->样品视图”,即可显示样品信息视图1.4 配置流动相:将流动相装入溶剂瓶中。
设置溶剂瓶参数,在溶剂瓶图形上单击鼠标左键,出现图形,点击“溶剂瓶填充量”设置溶剂瓶中流动相实际体积1.5冲洗流动相管路:旋开溶液排空阀。
左键单击泵图标,点击“设置泵”,设置“流速”为5ml/min,分别将A,B,C,D 四个通道设置“溶剂”为100%(点击中灰色按钮,即可开启“%”设置框,输入需要设置的数值百分比后,单击右侧的空白框,A 相即可自动配置为100%-(%B+%C+%D)的百分比),冲洗;对于G1312A/B(二元泵),冲洗A、B 两个通道;对于G1310A(单元泵),冲洗一个通道即可1.6 开启模块:单击每个模块右下角的按钮,可以单独启动模块,或者单击检测器按钮灯未点亮,检测器图形为黄色或者单击“启动”按钮,启动全部模块,检测器灯也将点亮1.7 监视基线:点击按钮或者“视图->在线信号”打开“在线图谱”。
点击“改变”按钮,选择“可选信号”中需要监视的信号,“添加”到“选定信号中”。
调整“窗口”中“X 范围”,如需要画“0”点基线,请选择“画零线”。
调整Y 轴“Y 轴范围”与“偏移量”或者选择“Y 轴自动调整”来选择合适的监视图形1.8平衡色谱柱、进样分析:关闭溶液排空阀(确认泵流量为1ml/min),监视压力基线等待平稳后,可以进样采集分析2.样品分析1.1新建完整方法:选择“方法->新建方法”后,点击“方法->编辑完整方法”编辑新方法分别设置自动进样器参数,泵参数,检测器参数,柱温箱参数保存方法:选择“方法->保存方法/方法另存为”保存即时改变的方法:通过在线改变数据采集或者在线/离线改变数据分析参数而变更方法,可以通过选择“方法->保存方法/方法另存为”或者保存新的参数到现在的方法中或者另存为新方法调用方法:通过选择“方法->调用方法”或者调用已有的方法。
液相色谱仪操作规程一、仪器介绍1.液相色谱仪是一种利用固定相和流动相对样品中的化合物进行分离和检测的仪器。
2.仪器包括主要部件:进样系统、色谱柱、检测器、数据处理系统等。
3.操作人员需要熟悉仪器的基本原理和结构。
二、实验前准备1.检查液相色谱仪是否正常工作,如有故障需要及时报修。
2.准备好所需的试剂、标准品、溶剂等。
3.安全操作,穿戴实验室必需的防护设备。
三、进样系统的使用1.打开试剂瓶盖前,先进行试剂瓶标识确认,避免误用。
2.根据实验需要,选择进样方式(自动或手动)。
3.对于自动进样方式,需要设置样品体积、流速等参数。
4.使用手动进样方式时,注意避免气泡进入进样器中。
四、色谱柱的使用1.色谱柱的选择需要根据样品的性质和分离效果进行合理选择。
2.在进行柱操作前应检查柱头是否完好,柱温是否正常。
3.进样之前应先进行空白试样,记录基线值。
五、检测器的操作1.根据实验需要选择合适的检测器类型(如紫外检测器、荧光检测器等)。
2.设置检测器的波长、增益等参数。
3.进行检测之前先对检测器进行暗噪声调零。
六、数据处理系统的使用1.打开数据处理系统前需要先进行登录和用户验证。
2.设置分析方法,包括样品名称、浓度范围等信息。
3.分析数据时对峰面积、峰高等进行计算和记录。
七、实验操作注意事项1.实验操作过程中需注意实验室卫生和个人安全,如佩戴实验手套、护目镜等。
2.严格按照实验操作步骤进行操作,不可随意更改实验参数。
3.禁止将未知物质试样直接注入色谱柱,应遵循进样规程。
八、实验后处理1.完成实验后关闭仪器电源和气源,并及时清理仪器和实验台面。
2.将试剂瓶盖盖好,防止蒸发和污染。
3.检查实验记录,整理数据和结果,制作实验报告。
九、仪器维护和保养1.定期对液相色谱仪进行维护和保养,包括清洁仪器表面、更换耗材等。
2.仪器异常时应及时报修,并配合维修人员进行维修操作。
以上为液相色谱仪操作规程,操作人员在使用液相色谱仪时需严格按照规程进行操作,确保实验的准确性和安全性。
液相色谱质谱仪操作及原理一、液相色谱仪简介液相色谱仪,作为现代分析化学的重要工具,广泛应用于生物、医药、环境、食品等多个领域。
它根据固定相的不同,可分为液-液色谱(LLC)和液-固色谱(LSC)。
液相色谱仪主要由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器和信号记录系统等部分组成,具有高效、快速、灵敏等特点。
二、液相色谱仪的特点高压:液相色谱法使用液体作为流动相,为了迅速通过色谱柱,需要对载液施加高压,通常可达150~300×10^5Pa。
高速:流动相在柱内的流速远超经典色谱,一般可达1~10ml/min,因此分析时间大大缩短,通常少于1小时。
高灵敏度:液相色谱广泛采用高灵敏度的检测器,如荧光检测器,其灵敏度可达10^-11g。
此外,样品用量小,通常只需几个微升。
适应范围宽:与气相色谱法相比,液相色谱法不受试样挥发性的限制,只要试样能制成溶液,就可以进行分析。
三、液相色谱仪操作五步骤准备:准备好所需流动相并过滤、脱气,更换合适的色谱柱和定量环,配制样品标准溶液并过滤,检查仪器各部件连接情况。
开机:接通电源,依次打开检测器、输液泵等,更换流动相并排气泡,设定流速等参数。
设计参数:根据实验需求设定流速、波长等参数,启动数据采集系统,确保基线稳定后进行进样。
进样:将样品注入进样阀,进行在线工作站自动采集数据。
系统清洗:分析结束后,使用适当的溶剂清洗系统,关闭仪器。
四、液相色谱仪工作原理在液相色谱仪中,流动相被高压泵打入系统,携带样品溶液进入色谱柱。
由于各组分在固定相和流动相之间的分配系数不同,在移动过程中会产生速度差异,从而实现组分的分离。
分离后的组分依次从柱内流出,通过检测器时转换为电信号,记录并打印出图谱。
高效液相色谱仪主要由进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统组成,可根据工作原理分为吸附柱色谱法、分配柱色谱法、离子交换柱色谱法和凝胶柱色谱法等。
五、质谱仪简介及工作原理质谱仪是一种测量离子质荷比(质量-电荷比)的分析仪器,广泛应用于化学、生物学、医学等领域。
液相色谱仪操作规程液相色谱仪操作规程一、安全操作要求1. 液相色谱仪为高压设备,请严格按照操作规程进行操作,避免发生安全事故;2. 操作过程中,严禁将手指或其他物体放入色谱仪中,以免发生伤害;3. 操作人员需穿戴实验服装,并戴上防护眼镜和手套,以确保实验安全;4. 在操作设备之前,必须先了解设备的构造和使用方法,熟悉仪器的功能和原理,避免误操作。
二、仪器准备1. 检查色谱仪是否适宜工作,各部件是否接好;2. 检查色谱柱是否完好,废止已过期的色谱柱;3. 检查试剂、溶剂是否充足,必要时补充;4. 检查移液器、压力表、紫外可见光谱检测器等是否正常运行;5. 检查液氮容器是否充足,如不足应及时补充。
三、操作步骤1. 打开色谱仪电源,等待仪器启动,加载系统软件;2. 在样品管中加入待测样品,以确保测定结果准确;3. 打开移液器,吸取样品,然后将样品注入色谱柱;4. 打开液氮气源,调节液氮气流速,保持液氮温度稳定;5. 打开溶剂泵,调节流速,使溶剂流经色谱柱;6. 打开紫外可见光谱检测器,选择适当的检测波长;7. 调节检测器灵敏度,并记录基线数值;8. 记录样品在色谱图上的峰值时间和峰面积,并进行结果分析;9. 关闭液氮气源,停止溶剂泵;10. 关闭仪器电源,彻底停止运行。
四、仪器维护1. 每次使用后,清洗液相色谱仪的各部件,确保清洁;2. 经常检查仪器的运行状态,及时发现并排除故障;3. 定期更换色谱柱,以确保分析结果的准确性;4. 保持液相色谱仪所在环境的整洁和干燥,避免灰尘和异物对仪器造成损害;5. 仪器长期不使用时,须进行维护保养,包括清洗仪器、润滑部件等。
五、事故处理1. 如发生仪器故障或液氮泄漏等紧急情况,应立即停止操作,关闭电源,并及时报告相关人员;2. 如出现样品泄漏,应立即进行封堵,将有关人员撤离,采取相应的紧急处置措施。
六、操作记录和数据处理1. 所有操作过程和结果应记录在操作日志中,包括样品名称、浓度、样品编号、色谱柱使用情况等;2. 将数据导出并进行统计和分析,得出相应的结论和建议。
液相色谱仪的使用操作规程
一、液相色谱仪的启动
1.开启电脑,进入电脑操作界面
2.打开液相色谱仪输液泵电源
3.打开紫外检测器电源二、液相色谱仪的使用
1.打开液相工作站进入主界面
2.连接泵,连接紫外检测器,点亮lamp灯
3.按“Purg”钮,排空泵内及流路中的气泡。
排空结束即可正常使用色谱仪
4.设定测定波长,流动相流速
5.建立批处理文件:①建立program文件;②建立sequence 文件。
建立完毕后运行批处理文件
三、液相色谱仪的关闭
1.样品分析结束后需用流动相继续冲洗分离柱,直至基线平稳。
2.更改流动相,将流动相换成甲醇,继续冲洗分离柱,直
至基线再次平稳。
3.清洗结束后,关闭紫外检测灯,关闭输液泵,最后关闭电脑。
液相色谱仪操作及原理色谱是一种分离和分析化合物的重要方法,其中液相色谱仪是常用的一种设备。
本文将介绍液相色谱仪的基本操作和工作原理。
操作步骤1.准备工作:首先,确保色谱柱已经安装在仪器中,并连接好所有管路。
检查溶剂和样品的准备情况。
2.启动仪器:打开色谱仪的电源,启动相关软件程序。
等待仪器自检完成。
3.设置参数:根据实验需要,在软件中设置流速、温度、检测波长等参数。
4.平衡系统:进行系统平衡,使得溶剂能够稳定流动,避免干扰。
5.进样样品:使用进样器将待分析的样品加入系统中,确保样品的浓度在检测范围内。
6.开始运行:点击软件上的运行按钮,开始进行实验分析。
观察色谱图谱,记录分析结果。
7.数据分析:根据色谱图谱和相应的数据,进行数据处理和结果分析。
工作原理液相色谱仪基本原理是利用物质在流动液相中的分配系数不同而实现分离。
液相色谱仪由流动相系统、分离柱、检测器和数据处理系统等组成。
1.流动相系统:包括溶剂瓶、泵和进样器等部分,用于将样品溶液以流动方式送入分离柱中。
2.分离柱:是分离样品的核心部件,根据不同化合物的亲和性和分配系数,将其分离开来。
3.检测器:用于检测流过分离柱的不同化合物,并生成相应的信号。
4.数据处理系统:将检测到的信号转换为数据图谱,方便用户进行数据分析和结果输出。
液相色谱仪通过调节流速、温度、溶剂组成等参数,实现对不同化合物的高效分离和分析。
它在药物研究、食品安全监测等领域有着广泛的应用。
结语液相色谱仪是一种重要的分析仪器,掌握其操作方法和工作原理对于科研工作者和实验人员至关重要。
通过本文的介绍,希望读者能够更好地了解液相色谱仪的基本知识,提高实验操作的效率和准确性。
原子吸收仪操作规程原子吸收光谱仪是一种检测和分析物质中金属元素含量的仪器。
一、仪器概述原子吸收光谱仪是一种基于原子吸收现象的检测分析仪器,用于测定物质中金属元素的含量。
它通过光源产生的特定波长的光束照射样品,然后测量样品吸收光的强度,从而得到金属元素的含量信息。
二、安全注意事项1. 使用前必须检查仪器的电源、电缆和接地是否正常。
2. 使用过程中应戴上防护眼镜和防护手套,以防止样品溅出伤人。
3. 禁止将试剂直接接触皮肤和黏膜,避免有毒物质的接触。
4. 当仪器长时间不使用时,请关闭电源并断开电源线。
三、仪器的操作流程1. 打开实验室门窗,保证通风良好的环境。
2. 打开仪器电源,并等待仪器自检完成。
3. 将样品制备好,确保样品符合标准要求。
4. 将样品置于样品台上,并调整样品台的位置和角度,使样品能够被光束照射均匀。
5. 打开光源开关,并选择需要的波长。
6. 调整火焰或石墨炉参数,使其适合当前样品的特性。
7. 调节光源,使其适应当前的样品需求。
8. 校正仪器的零点,并进行基线校正。
如果基线不平滑,可能需要进行光谱纠正。
9. 测量样品:将样品插入样品台,关闭样品室门,开始测量。
10. 根据仪器的测量结果计算出样品中金属元素的含量,并进行记录。
四、仪器的维护和保养1. 定期清洁仪器的光路系统,避免灰尘和污渍对测量结果的影响。
2. 定期更换和校准光源,保证测量的准确性。
3. 定期检查样品室门和样品台的密封情况,确保仪器的稳定性。
4. 定期检查火焰或石墨炉的使用情况,及时更换和维修损坏的部件。
5. 定期进行仪器的校准和验证,确保仪器的准确性和可靠性。
五、操作注意事项1. 使用仪器前,应先阅读仪器的说明书,并熟悉仪器的操作步骤。
2. 仪器的使用和维护必须由专业的人员进行,非专业人员严禁操作。
3. 操作过程中,应严格遵守仪器的安全操作规程,确保自身的安全。
4. 使用前应检查所需试剂和标准品的有效期和保存条件,确保其可靠性。
液相色谱仪操作及原理液相色谱仪(Liquid Chromatography,LC)是一种常用的分析技术,用于分离和测定混合物中的化合物。
它的操作原理基于样品在流经填充物时与填充物相互作用,并以不同的速度移动。
以下是液相色谱仪的操作步骤及其原理:操作步骤:1. 准备样品:将待测样品准备成溶液,并以适当的方法预处理,如稀释、萃取等。
2. 准备填充物:选择合适的填充物,并将其装填进色谱柱中。
填充物的选择根据分离物质的性质和需求。
3. 装载样品:将样品溶液使用注射器加载到色谱柱中,通常通过自动进样器进行。
4. 运行液相色谱仪:启动液相色谱仪,使流动相从色谱柱中流经。
流动相可以是不同溶剂或缓冲溶液的混合物。
流动相的选择也取决于待测物质的性质。
5. 检测和记录数据:样品分离过程中,通过检测器(如紫外可见光灯、荧光检测器、质量分析仪等)检测分离出的各组分,记录并分析检测结果。
操作原理:液相色谱仪的操作原理基于样品与填充物的相互作用以及溶剂的选择。
填充物通常是一种多孔性材料,具有大量的表面积,可与样品中的分离物质发生化学或物理相互作用。
在运行液相色谱仪时,样品中的化合物在与填充物相互作用的同时,也与流动相相互作用。
由于不同分离物质与填充物和流动相之间的相互作用不同,它们在色谱柱中的停留时间也不同。
较强的相互作用会导致较长的停留时间,而较弱的相互作用会导致较短的停留时间。
通过控制流动相的组成和流动速度,可以使待测物质在色谱柱中以不同的速率移动,从而实现样品中各成分的分离。
检测器可以检测到每个组分的浓度,进而得到分离出的组分的浓度和峰面积等信息。
根据这些信息,可以定量分析样品中各组分的含量或确定未知化合物的结构。
需要注意的是,在实际操作中,操作条件和仪器设置可能会因分析需要而有所不同。
因此,在使用液相色谱仪进行操作时,应根据具体实验要求和仪器特性进行适当调整和操作。
液相色谱操作规程一、引言液相色谱(Liquid Chromatography)是一种广泛应用的分离和分析技术。
本文旨在介绍液相色谱的操作规程,包括仪器准备、样品处理、色谱条件设置以及数据分析等方面。
二、仪器准备在进行液相色谱实验之前,需要对仪器进行准备和检查。
首先,确认色谱柱状态和可用性。
检查色谱柱的状态,如是否有裂缝、堵塞或损坏。
接下来,准备并确认流动相溶液的浓度和pH值,并校准流速控制器。
最后,确认检测器和记录仪的正常工作状态。
三、样品处理在样品处理前,需要根据需要选择适当的样品前处理方法,如稀释、提取或净化。
确保样品处理步骤不会影响分析结果。
此外,还需检查样品的浓度、pH 值、溶剂性质和溶解度等因素,并选择合适的内标物。
四、色谱条件设置1. 流动相选择:根据分析物的特性选择合适的流动相。
常用的流动相包括纯水、有机溶剂或它们的混合物。
2. 色谱柱选择:根据分析物的极性和分离要求选择合适的色谱柱。
常见的色谱柱包括反相色谱柱、离子交换色谱柱、尺寸排阻色谱柱等。
3. 柱温选择:根据需要选择合适的柱温。
柱温的改变可以改善分离效果和峰形。
4. 流速控制:根据柱的尺寸和类型,选择适当的流速控制。
一般情况下,流速应控制在合适的范围内,以获得较好的分离效果。
五、样品进样在样品进样前,需尽可能减少或消除进样时的空气泡对结果的影响。
确保样品进入进样器之前,样品的溶液均匀混合并排除气泡。
另外,注意根据样品特性设置适当的进样量,并保证进样操作的准确性。
六、数据分析待分离完成后,根据所使用的检测器记录色谱峰的面积或高度,并进行相对峰面积或高度的计算。
在进行数据分析时,注意排除干扰和背景噪声,并根据需要进行峰的识别和定性。
七、结果解释和汇报根据数据分析的结果,进行结果的解释和整理。
在解释结果时,考虑样品的浓度、相对保留时间、峰面积、高度等因素。
同时,遵循实验要求和规范,撰写实验报告或形成结果汇报。
八、实验操作注意事项1. 安全注意事项:操作过程中需要注意安全规范,如佩戴手套和安全眼镜,避免化学品直接接触皮肤或眼睛。
液相(紫外)色谱仪操作规程
1 、日常操作步骤
1.1 检查仪器各部件的电源线、数据线是否连接良好,检查仪器液路是否正常。
1.2打开稳压电源,打开液相各部件开关,放置好流动相。
1.3待仪器各部件自检通过,电脑开机,打开色谱在线工作站,设置好方法(检测波长、流速可修改),旋开泵开关,按“purge”键可以排除管路气泡,结束后旋回泵开关,开始走基线。
1.4在进样阀处于inject位置时,插入进样器,扳动进样阀手柄到load
位置,打入样品并快速将进样阀切换至inject位置,工作站将同步采集数据。
数据采集完成后,处理并保存图谱。
1.5按上述步骤继续进样,直到测试完成。
1.6进样结束后,关闭检测器电源,按pump键停泵,换上甲醇做流
动相,按pump键启动泵冲洗系统30min左右,用针筒抽取纯净水清洗进样口,停泵,关机,切断电源。
2、注意事项
2.1 所有流动相必须经过0.45μm的滤膜进行过滤,避免使用对不锈钢有腐蚀性的溶剂。
2.2 吸滤头定期清洗,保证液路通畅。
2.3 色谱柱必须与仪器连接好,减少死体积。
2.4使用缓冲盐做流动相时,实验结束后先用纯化水冲洗,再换成
甲醇清洗。
清洗时可关闭氘灯节省灯能量。
液相色谱仪原理及使用操作规程原理液相色谱法就是同一时刻进入色谱柱中的各组分,由于在流动相和固定相之间溶解、吸附、渗透或离子交换等作用的不同,随流动相在色谱柱中运行时,在两相间进行反复多次(103~106次)地分配过程,使得原来分配系数具有微小差别的各组分,产生了保留能力明显差异的效果,进而各组分在色谱柱中的移动速度就不同,经过一定长度的色谱柱后,彼此分离开来,最后按顺序流出色谱柱而进入信号检测器,在记录仪上或色谱数据机上显示出各组分的色谱行为和谱峰数值。
测定各组分在色谱图上的保留时间(或保留距离),可直接进行组分的定性;测量各峰的峰面积,即可作为定量测定的参数,采用工作曲线法(即外标法)测定相应组分的含量。
液相色谱仪工作原理图高效液相色谱仪是实现液相色谱分离分析过程的装置,如上图所示。
贮液器中存贮的载液(用作流动相的液体常需除气)经过过滤后由高压泵输送到色谱柱入口(当采用梯度洗脱时,一般需用双泵系统来完成输送)。
样品由进样器注入载液系统,而后送到色谱柱进行分离。
分离后的组分由检测器检测,输出信号供给记录仪或数据处理装置。
如果需收集馏分作进一步分析,则在色谱柱出口将样品馏分收集起来,对于非破坏型检测器,可直接收集通过检测器后的流出液。
其中输液泵,色谱柱及检测器是仪器的关键部件。
仪器使用操作步骤1、打开主机(Waters1525泵);待泵稳定后(大约需要2~5秒钟,即有两次“嘀”的响声)打开紫外检测器;检测器预热需要6~10min钟的时间,在此时间内你可以执行第2步操作。
2、打开电脑(电脑必须进入英文界面)待检测器稳定后,方可打开Breeze应用程序,应用程序有个自检过程(需要1~2分钟)。
3、建立新方法(打开Breeze程序时,系统默认为上次使用的方法和文件名。
如果需要建立新的文件名和方法,你可以继续下一步操作):(1)点击“Manage Breeze”按钮→“Make a new project”→“Next”→在“project Name”框内输入新的文件名,也可以在“comment”内输入需要说明的一些注释,也可以不填→“Finish”;(2)建好新的文件夹后,还要转换到该文件夹中,即在“Manage Breeze”界面下点击“change project/user”按钮→在project内选择刚建立的或是需要的文件名→“OK”;(3)此时已经在刚建立的新文件夹下,那么,现在应该再建立一个新的方法,操作步骤是:①、点击“View Method”→选择“LC或GPC”→点OK→点击“pump”在“Isocratic<等度> Flow A/B”内输入A/B流动相的比值(例如:A:B=70:30 且流速为1ml/min,那么,就在A下输入0.7,在B下输入0.3;再如A:B=70:30 且流速为0.8mL/min,那么,就在A下输入0.56,在B下输入0.24;依此类推);②、点击“UV Det(紫外检测器)”→选择“Channel1”→在“wavelength/nm”框内输入检测波长;(4)保存新方法,点击菜单栏中的“File”选择“save As...”→在“Name”框内输入刚建立的新方法的名称,如“LC method1”,然后点击“save”按钮,即可保存刚刚设立的各项色谱条件。
4、用新建的方法平衡系统:单击左下角的“Equilibrate”→在“method for Equilibrate”内选择新建立的方法(如:LC method 1)→点击“Equilibrate”即开始基线平衡(基线平衡大约需要20min)。
5、待基线平衡后即可进行单次进样:(1)点击单次进样按钮→在“Sample Name”内输入样品名称,或备注(可不填)→注意:在“method”内一定要选定需要的方法(如“LC method 1”)→“vial”内选1,表示这是第1次进样(用于自动进样器)→在“run time”内输入所要运行的时间→单击“inject(进样)”按钮;(2)待进样图示出现后,方可进样(若发现进样时的方法选错了,可以点击图示右下方的“abort inject”来取消这次进样操作,然后重新点击进样按钮,确保进样时method选择的是你所需要的方法);(3)在进样过程中,要注意的是:a、取样要力保一致;b、在将进样环从“Load”位移到“inject”位时间要停留1.2秒以上,因为在1ml/min的流速下,样品完全脱离定量环所需要的时间0.02min(1.2秒);c、要保证运行时间的一致性,每次进样后将“Load”位移到“inject”位时间要停留的时间必须一致;6、每次进样后,都要对运行的结果进行数据处理:(1)点击“View Data”→点击“Precessing Parametery Wigard”或点击采集栏右下角的“send data to review”;(2)选择“start new processing porameters”如果是进行同一个样品且在此之前有过数据处理可以选择第二项,点OK;(3)在“start”内输入要处理峰值的开始时间,在“end”内输入结束时间,然后单击下一步;(4)确保“clear peak width and threshold”不被选中,然后多次点击“下一步”直到对话框结束。
7、若要更换洗脱剂,必需要对泵、检测器进行冲洗(点击冲洗灌注按钮按照提示一步一步操作):(1)将需要更换的洗脱剂,先超声20min后换上;(2)用注射器,抽出两泵内原有洗脱剂大约各10mL,然后打开参考阀进行冲洗灌注;(3)冲洗灌注后,关紧参考阀;(4)用新的方法平衡系统(大约需要20min)。
8、梯度洗脱程序的设置:在第3步(3)项①步骤中点击“pump”栏内选择“Gradent(梯度)”后,将出现一个表格,在“时间”栏内输入要开始梯度洗脱的时间和结束时间,在“A、B“内输入开始洗脱时的“A、B”流动相的比例和结束时的比例。
在最后一栏内输入所需要的洗脱程序的变化曲线。
9、样品组方法的建立及运行:在建立样品组方法前必须先建立好所需要的洗脱程序并命名:(1)点击命令栏内的“sample queue”,将出现样品组工作窗口;(2)点击样品组工作窗口左上角的“wizard”按钮,出现“select location of standards”页面,在此页面中,可选择“No standards”或其他,“start loading vials in tray position”可选择1,然后单击“下一步”;(3)是手动进样,必须确保“Each stardard vial contains a different level standard”被选中(默认选项),然后单击“下一步”;(4)在Number of standard vials in each group 中输入1(默认值);在Number of injections per vial 内输入一个数(自动进样器用);在Run time 内输入每一个样品所需要运行的时间;在injection volume 内输入需要进样的的量如10ul;在method 内选择需要的洗脱方法,然后点击“下一步”;(5)可输入所用分析柱的型号和规格,如“KF-C18 7um”也可不填,点击“下一步”;(6)可以什么都不管,各项均采用默认值,点击“下一步”;(7)选择运行模式:如果只运行而不需要报告可以选择“run only”;如果既想运行且需要打印出过程可以选择“run and process”;如果既想运行且需要打印出结果可以选择“run and report”。
(注:“run and report”只是将图打印出来,并不给出峰值。
)(8)单击“Next”后出现“summary”界面,点击此界面中的“options”按钮,在出现的对话框中需要在“Function”栏中选择“Equilibrate”,在“method”中选择需要的方法,在“Run time”内输入平衡系统的时间(一般为20min);(注:此步可以不做,但在运行样品组前,必需先平衡系统。
)(9)点击“完成”,并保存样品组方法;(10)运行样品组方法[注:如果没有做第(8)步必需先平衡基线,待基线平衡后才可以进行此步操作]:点击采集栏中的“run current sample set method”(在单次进样按钮的下方)按钮,在“Name for this sample set”内输入样品组方法名(默认为刚建立的样品组方法),在run mode内选择运行模式,然后点击“Run”,待出现进样图示后,按第5步(2)、(3)项操作。
参照〈Waters Breeze 入门指南,P53〉。
(附:打开您建立的样品组方法,点击样品组工作栏上方的“Open sample set method”按钮,选择您需要的方法,点击“Open”。
)10、分析结束后,必须充分冲洗色谱柱:先用原A、B两相洗脱液的比例,再逐步增大甲醇比例,直到甲醇占冲洗液的100%,例如:原洗脱液A:B=甲醇:水=50:50,则分别用A:B=:50:50、60:40、70:30、80:20、90:10、100:0,每个梯度均要冲洗至基线稳定(一般要20min左右)方可改换下一个梯度,直到完全冲洗净为止。
再关泵、检测器和主机。
特别注意:1、任何物质测定完后,都不得不冲洗泵而直接关机!2、溶剂多为挥发性有机溶剂,易燃,故室内严禁吸烟!WFX—110A型火焰原子吸收分光光度计操作步骤1.确保气路、电路连接正确,主机与电脑信号连接好。
2.打开电脑,打开主机开关,运行其专用程序(WFXSTOP 图标)。
3.待主机各机构自检完成后,自动进入条件设置页面;4. 设置各项仪器条件:文件→创建→主页面,选择测定元素→波长、光谱带宽(狭缝)、灯号位置→选择火焰法→选择仪器参数,编辑项目信息等内容→输入标准曲线各浓度参数(如:S1:0.0,S2:10.0,S3:20.0……),选择浓度单位为:mg/L→选择是否做样品空白→输入完后点“确定”。
5.点“Start”按键→设置灯电流等参数:灯类型为HCL,灯电流为x(mA),(可设置预热灯号)。
参数输好后点击“设置”(这时所选灯点亮),→点击“寻峰”,等待仪器完成。
6.等基线稳定后再点火,可以点开“signal(原始信号图)”对话框,可以点“zero”按钮调零,待信号图框下数字显示在0.000左右即为基线稳定。
7.点火。
点火前仔细检查气路,并确保水封完好(即废液排液管中留一段水柱)打开空气压缩机,将其出口压力调至0.3Mpa,打开乙炔钢瓶总阀门,再慢慢打开减压阀,使减压阀指示输出压力为0.1MPa→按主机上“点火”开关,听到电磁阀响一声后,缓慢逆时针旋转乙炔流量旋钮,并调至乙炔流量1~1.5L/min左右,若管道中有空气,一次点不着火,听到报警声后立即关闭点火开关,待几秒钟后再开(可能需要几次),直到点着火→调节乙炔流量,使其符合测定要求到大小,同时打开仪器上方的排气扇排废气。