大孔吸附树脂吸附法分离甜菊糖甙的研究

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AB-8大孔吸附树脂说明书

AB—8大孔吸附树脂说明书AB—8树脂是一种球状、弱极性聚合物吸附剂。

该树脂是一个交联聚合物，它与早期的憎水吸附剂不同，在其骨架结构中附加了亲水基团，又与一般离子交换树脂不同，在其结构中仅有非离子化功能基。

基于独特的加工方法，使其具有相当大的比表面和适宜的孔径，对甜菊糖甙有特殊的选择性。

该树脂适于从水溶液中提取甜菊糖甙和某些有机物质。

一、性能指标外观乳白色不透明球状颗粒粒度（粒径范围0.3~1.25mm），% ≥95含水量，% 65~75湿真密度，g/ml 1.00~1.10湿视密度，g/ml 0.60~0.70比表面，m2/g 480~520骨架密度，g/ml 1.13~1.17平均孔径，nm 13~14孔隙率，% 42~46孔容，ml/g 0.73~0.77最高使用温度℃150二、吸附及解吸（再生）吸附：吸附操作自上而下(或自下而上)通液，可采用不同流速，以选取最佳条件，一般流速sV 2—8。

流出液每间隔一段时间取样检测，达泄漏点停止吸附，或多柱串联达饱和后解吸。

解吸(再生)：解吸剂选择：吸附饱和后的树脂应选用最能溶解吸附质的溶剂进行解吸或洗脱再生。

解吸剂沸点要低以便回收处理。

典型的解吸剂有甲醇、乙醇、丙酮、二氧六环、苯、甲苯或稀酸、稀碱及有机溶剂与水、酸、碱的混合物、还有混合溶剂。

解吸操作自上而下(或自下而上)通解吸剂，单柱吸附时，解吸效果与吸附操作对流为佳。

一般流速可控制在0.5～2SV，解吸剂用量约为树脂体积的2～3倍。

三．在食品加工中的预处理1．工业级新树脂使用前必须进行预处理，以去除树脂中所含少量的低聚物、有机物及有害离子。

2．装柱前清洗设备及管道，以防有害物对树脂的污染。

并排净设备内的水。

3．先于吸附柱内加入相当于装填树脂体积0.4~0.5倍的乙醇或甲醇，然后将新树脂投入柱中。

使其液面高于树脂层约0.3m处，并浸泡24小时。

4．用2BV乙醇或甲醇，以2BV/h的流速通过树脂层，并浸泡4~5小时。

HPLC法测定不同产地甜叶菊中糖苷含量

（Ａ、Ｄ）甜菊双糖苷（Ｂ）Ｓ的含量较少，由于Ａ３甜度高于ｓＴ且
口味优于ｓ，Ｔ因此将Ａ３的含量及Ａ３所占比例作为甜叶菊品
种和甜菊糖苷质量评价的主要指标一。目前关于甜叶菊中甜菊糖昔的测定方法有质量法、碱量
燥箱中烘２ｈ分别精密称取１ｇ用乙腈一水（８：２体，０ｍ，７２，积比）溶液溶解并定容至１，０ｍＬ摇匀置于棕色瓶中。即配成
表１不同产地的甜叶菊中所含５中糖苷的量、总糖苷量及Ａ所占比例
３结论
对策［］Ｊ．广西蔗糖，０（）４４．２６４：０２— ３［］７韩玉林，黄苏珍，张坚勇，等．甜菊良种的单株选育［］Ｊ．植物资
取上述供试样品溶液连续进样４次，进样量为ｌ５
录峰面积，计算Ａ、ＣＳ、ＢＤ３Ｒ、ＴＳ、Ａ的ＲＤ值分别为２１％、Ｓ．３１０％、．９、．９、．５．４２５％１４％２０％。表明ＨＬＰＣ法测定甜菊糖
ＬＣ一１Ａ高效液相色谱仪（日本岛津公司产品）ＳＤ一０；Ｐ
１Ａ紫外检测器（０日本岛津公司产品）Ｐｅｉ９Ｓ一２２；ｒｃｓ２Ｍａ０Ａ电子天平（瑞士Ｐｅｉｒｃａ仪器有限公司产品）ＳｔｕＢ２Ｓ电ｓ；ａｆｓＳ１ｏｉ子天平（北京多利斯天平有限公司产品）儿一７０；２Ｄ超声波
（Ｂ－）Ａ８的层析柱，甜菊糖苷几乎全部被树脂吸附，弃去滤液。

一种甜菊糖苷分离纯化的吸附树脂的制备方法及应用技术[发明专利]

专利名称：一种甜菊糖苷分离纯化的吸附树脂的制备方法及应用技术
专利类型：发明专利
发明人：袁长荣,廖春龙,余桂春,谢芳,肖娟,胡启胜,郁军,李善汪
申请号：CN201610012940.1
申请日：20160108
公开号：CN105440197A
公开日：
20160330
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及树脂合成领域，尤其涉及一种甜菊糖苷分离纯化的吸附树脂的制备方法及应用技术。

本发明要解决的技术问题是提供一种能够对甜菊糖苷特定组分进行选择性吸附的甜菊糖苷分离纯化的吸附树脂的制备方法及应用技术。

一种甜菊糖苷分离纯化的吸附树脂的制备方法，其步骤为：将原料混合，加入引发剂和制孔剂，加到处于搅拌中的分散介质中，进行悬浮聚合反应，再固化反应得到大孔吸附树脂，即为甜菊糖苷分离纯化的吸附树脂。

一种甜菊糖苷分离纯化的吸附树脂的应用技术，该应用技术利用上述方法制备出的大孔吸附树脂，通过层析柱吸附、乙醇洗脱、浓缩干燥，所制得的甜菊糖苷与普通甜菊糖苷相比，达到了产品甜度更高、口感更纯正、无不良余味的效果。

申请人：谱赛科(江西)生物技术有限公司
地址：341100 江西省赣州市赣县茅店镇洋塘工业区
国籍：CN
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大孔吸附树脂分离甜菊糖甙的研究

大孔吸附树脂吸附法分离甜菊糖甙的研究一、实验目的和要求1. 掌握大孔吸附树脂吸附法的基本原理。

2. 掌握用大孔吸附树脂分离生物活性物质的操作过程。

3. 了解树脂吸附分离技术在发酵工业中的应用。

二、实验原理大孔吸附树脂为具有立体结构的多孔性海绵状聚合物，是以苯乙烯和丙酸酯等为单体，加入乙烯苯为交联剂，甲苯、二甲苯为致孔剂，它们相互交联聚合形成了多孔骨架结构。

是一类含离子交换集团的交联聚合物，它的理化性质稳定，不溶于酸、碱及有机溶剂，不受无机盐类及强离子低分子化合物的影响。

大孔吸附树脂的吸附性是由于范德华引力或产生氢键的结果，分子筛性是由于其本身多孔性结构的性质所决定。

大孔吸附树脂以范德华力从很低浓度的溶液中吸附有机物，其吸附性能主要取决于吸附剂的表面性质。

大孔树脂的多孔性，使其具有巨大的比表面积，能够依靠和被吸附分子之间的范德华力或氢键进行物理吸附；同时，其多孔性还对分子量大小不同的化合物具有筛分作用。

因此，大孔树脂为吸附性和筛分性相结合的分离材料，根据有机化合物吸附力的不同及分子量的大小，在大孔树脂上经一定的溶剂洗脱而分开。

三、实验器材与试剂1. 器材层析柱，天平，烘箱，烧杯，量筒，漏斗和表面皿等。

2. 试剂大孔吸附树脂，甜菊糖甙，乙醇等。

四、操作方法1. 树脂的预处理和再生（略）。

2. 装柱在层析柱内加入约30~50 mL水，用记号笔做好标记（此即为装入树脂体积）。

装柱过程：层析柱中加入约1/4柱体积的去离子水，然后用漏斗将树脂小心沿壁倒入柱中，装柱时应注意不使树脂层中有气泡，控制柱底出水速度，不能让柱中水流干或溢出来。

装柱完成后，将水位控制至树脂面上，加入少量去离子水，保持一段液柱。

3. 水洗利用重力作用加入约2倍柱体积去离子水，流速控制在柱体积的5~7%（5~7%vvm），洗至流出液中无乙醇味，将水位控制至树脂面上，加入少量待测液，保持一段液柱。

4. 吸附取定量（约为树脂体积的两倍）固形物含量为U1的甜菊糖甙溶液缓慢注入树脂柱内，流速为5~7%vvm ，流出液用量筒收集，并不断取样分析，直到流出液含显著甜味为止，停止上柱。

甜菊糖大孔吸附树脂吸附分离工艺条件的正交设计优化

甜菊糖大孔吸附树脂吸附分离工艺条件的正交设计优化陈振斌;邸多隆;刘永峰;黄新异【期刊名称】《应用化工》【年(卷),期】2011(040)006【摘要】Based on the previous works of steviosides separation and orthogonal design optimization, the separation conditions of steviosides were improved by the macroporous adsorption resin using orthogonal design method, and the experiment was designed according to the orthogonal array L18 (37). After this work , the influence order and the optimal value of each fact or that affect the recovery and the purities were obtained respectively. The final separation conditions were found out on the basis of comprehensive analysis and experiment. The product obtained under the optimal conditions presented the purity of 76. 3％ , and a recovery of 95. 6％ .%以产品纯度和提取率为评价指标,通过正交设计实验,以L18(37)安排实验.根据实验结果,利用矩阵分析法对正交实验设计进行优化.建立正交实验的三层结构模型和层结构矩阵,将各层矩阵相乘得出实验指标值的权矩阵,并计算得出影响实验结果的各因素各水平的权重;根据权重的大小,确定最优方案以及各个因素对正交实验的指标值影响的主次顺序.在最优工艺条件下所制得产品的纯度为76.3%,回收率为95.6%.【总页数】5页(P945-948,951)【作者】陈振斌;邸多隆;刘永峰;黄新异【作者单位】中国科学院兰州化学物理研究所,西北特色植物资源化学重点实验室和甘肃省天然药物重点实验室,甘肃兰州,730000;兰州理工大学材料科学与工程学院不锈钢材料国家重点实验室,甘肃兰州,730050;中国科学院兰州化学物理研究所,西北特色植物资源化学重点实验室和甘肃省天然药物重点实验室,甘肃兰州,730000;中国科学院兰州化学物理研究所,西北特色植物资源化学重点实验室和甘肃省天然药物重点实验室,甘肃兰州,730000;中国科学院兰州化学物理研究所,西北特色植物资源化学重点实验室和甘肃省天然药物重点实验室,甘肃兰州,730000【正文语种】中文【中图分类】TQ32【相关文献】1.正交设计优化大孔吸附树脂提取分离刺山柑中总黄酮的研究 [J], 包晓玮;曹锐;韩海霞;李睿;王颖2.正交试验优化新型大孔吸附树脂分离葛根素的的工艺研究 [J], 王亚红;王亚丽3.正交试验优化大孔吸附树脂分离纯化杜仲绿原酸 [J], 熊硕;崔丽;刘仲华;张盛;肖文军4.大孔吸附树脂分离葛根总多酚的工艺条件优化 [J], 符智荣;李雪峰;欧阳玉祝;何升5.大孔吸附树脂分离纯化广山楂总黄酮的最佳工艺条件及参数探讨 [J], 陈洪涛;刘源焕;覃学谦;蔡丹昭因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

甜叶菊苷的提取与结晶工艺研究

２．１．３离子交换树脂交换容量的测定阳离子交换树脂交换容量的测定［７］：树脂在测定前按国标
ＧＢ２８８５－７６指定方法进行预处理；阴离子树脂交换容量的测定［８］：树脂含水量的测定按国标ＧＢ５７５７－８６的方法测定，阴离子交换树脂含水量按国标ＧＢ５７５９－８６方法测定，树脂交换容量的计算参见文献［９］。２．２甜叶菊苷的提取２．２．１甜叶菊苷的浸提
将滤液通过大孔型吸附树脂（ＡＢ－８），甜叶菊苷几乎全部
ＰＨＳ－２型酸度计，离子交换柱，ＵＶ－２００紫外可见分光光度被树脂所吸附，其滤液不含有甜叶菊苷，弃掉滤液。
计（日本岛津），ＧＴ－２Ｅ真空冷冻干燥机（德国产），
用７０％的乙醇洗脱树脂（ＡＢ－８）所吸附的甜叶菊苷，到树
100 2002,Vol.23,No.8
吸附柱：脱盐柱：脱色柱＝ＡＢ－８：００１×１４．５：Ｄ２８０＝３：２：１。采用梯度洗脱方法以及反洗效果较为理想。３．２树脂的洗脱与活化树脂的洗脱与活化是提高树脂寿命的关键，它也关系到工厂生产的直接经济效益，本实验采用４％稀酸洗，水洗至中性，４％稀碱液洗，水洗至中性，４％稀酸洗，如此重复３次。Ｄ２８０以碱洗开始，以碱液再生水洗ｐＨ为８￣９结束；００１ × １４．５则以稀酸洗开始，以酸洗再生水洗至中性结束；ＡＢ－８树脂则先用乙醇浸泡，水洗至中性再用５％稀酸洗，水洗，２％稀碱液洗，水洗至中性结束。在树脂活化结束时用蒸馏水水封，以防止树脂因干燥失水而开裂。树脂使用前先分别用９５％乙醇分柱洗脱，再分别用７０％乙醇依顺序洗脱。３．３沉淀剂的选择和用量的确定
的量为滤液中不含有沉淀剂且能很好除去杂质的最大用量，采
用ＦｅＳＯ和Ｃａ（ＯＨ）的质量比为３：５。

大孔吸附树脂纯化甜菊糖苷的工艺研究

大孔吸附树脂纯化甜菊糖苷的工艺研究赵兴华，张全香，苑晓威，皮国沛*沧州宝恩吸附材料科技有限公司，河北沧州 061000摘要：目的筛选出对甜菊糖苷纯化性能较好的大孔吸附树脂，优化树脂吸附、解吸工艺。

方法采用静、动态吸附、解吸的方法对5种树脂进行筛选；对吸附液pH值、吸附流量、树脂用量、解吸剂流量及用量等工艺参数进行优化，并考察工艺稳定性。

结果所选大孔树脂中，HPD-T01树脂对甜菊糖苷的纯化效果较好，其纯化甜菊糖苷的最优工艺条件为甜叶菊提取物与干树脂质量比为1∶1，上柱液质量浓度为提取物10 g/L时，pH值为7，吸附流量为0.1 BV/min；以70%乙醇为解吸剂，用量为4 BV，解吸流量为0.04 BV/min。

结论HPD-T01树脂对甜菊糖苷纯化效果最佳，操作工艺简单，具有工业化生产应用价值。

关键词：甜菊糖苷；大孔吸附树脂；吸附-解吸；工艺优化；HPD-T01树脂中图分类号：R284.2 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2012)10 - 1971 - 04Purification technology of steviol glycosides by macroporous adsorption resinZHAO Xing-hua, ZHANG Quan-xiang, YUAN Xiao-wei, PI Guo-peiCangzhou Bon Adsorbing Material Technology Co., Ltd., Cangzhou 061000, ChinaKey words: steviol glycosides; macroporous adsorption resin; adsorption-desorption; technology optimization; HPD-T01 resin甜叶菊Stevia rebaudiana Bertoni，又称甜菊、甜草、糖草，为菊科植物，原产于南美地区。

甜菊糖苷的提取纯化工艺研究

独创性声明
本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包括其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得西北师范大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的资料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。签名：日期： 2010.06.01
I
硕士研究生毕业论文
甜菊糖苷的提取纯化工艺研究
2.4.1 色谱条件 .................................................................................................... 22 2.4.2 对照品溶液的制备 .................................................................................... 22 2.4.3 甜菊糖苷提取率的测定 ............................................................................ 22 2.5 结果与讨论 ....................................................................................................... 23 2.5.1 不同提取方法实验结果 ............................................................................ 23 2.6 几种甜菊糖苷提取方法的比较 ....................................................................... 26 2.7 结论 ................................................................................................................... 26 参考文献: .................................................................................................................... 27 第三章甜菊糖苷除杂工艺的研究............................................................................ 28 3.1 前言 ................................................................................................................... 28 3.2 仪器与材料 ....................................................................................................... 28 3.3 提取液不同除杂方法考察 ............................................................................... 29 3.3.1 化学絮凝剂絮凝除杂 ................................................................................ 29 3.3.2 改性凹凸棒石吸附除杂 ............................................................................ 29 3.3.3 乙醇沉淀除杂 ............................................................................................ 29 3.4 样品测定 ........................................................................................................... 29 3.4.1 损失率的测定 ............................................................................................ 29 3.4.2 除杂率的测定 ............................................................................................ 30 3.5 结果与讨论 ....................................................................................................... 30 3.6 结论 ................................................................................................................... 31 参考文献: .................................................................................................................... 32 第四章甜菊糖苷的纯化和精制工艺研究................................................................ 33 4.1 前言 ................................................................................................................... 33 4.2 仪器、试剂与材料 ........................................................................................... 33 4.3 甜菊糖苷纯度和提取率的测定 ....................................................................... 34 4.3.1 对照品溶液的制备 .................................................................................... 34 4.3.2 供试品溶液的制备 .................................................................................... 34 4.4 甜菊糖苷的纯化工艺研究 ............................................................................... 34 4.4.1 大孔吸附树脂的选择 ................................................................................ 34 4.4.2 大孔吸附树脂的前处理 ............................................................................ 35

甜叶菊中甜菊糖苷高效分离吸附剂的制备及研究

甜叶菊中甜菊糖苷高效分离吸附剂的制备及研究甜叶菊中甜菊糖苷高效分离吸附剂的制备及研究摘要：甜叶菊是一种富含甜菊糖苷的天然植物，具有很高的甜味，被广泛应用于食品和饮料的甜味剂。

本研究旨在制备一种高效分离甜菊糖苷的吸附剂，为甜菊糖苷的生产和应用提供技术支持。

通过优化制备条件，得到了一种具有较高吸附性能的吸附剂，并对其进行了性能研究和应用评价。

结果表明，该吸附剂具有较高的吸附容量和选择性，可用于甜菊糖苷的分离纯化。

1. 引言甜叶菊（Stevia rebaudiana Bertoni）是一种带有高度甜味的植物，其中包含有甜菊糖苷等多种天然甜味成分。

甜菊糖苷是一种具有强甜味和低热值的天然甜味剂，被广泛应用于食品、饮料、保健品等领域。

由于甜菊糖苷含量较低，生产中需要对其进行提取和纯化。

因此，寻找一种高效的分离吸附剂对甜菊糖苷进行纯化和提取具有重要意义。

2. 材料与方法2.1 实验材料所使用的甜叶菊样品为在山东地区采集的新鲜叶片，经过清洗、破碎和干燥处理后得到。

2.2 吸附剂制备以天然黄麻纤维为原料，经过表面改性处理得到吸附剂。

首先将天然黄麻纤维进行破碎并过筛，然后采用柠檬酸和硫酸的混合酸处理，将表面改性为羧基化纤维素吸附剂。

2.3 吸附剂性能研究通过扫描电子显微镜（SEM）对吸附剂表面形貌进行观察，并采用傅里叶变换红外光谱（FT-IR）对其结构进行分析。

利用静态吸附实验，研究甜菊糖苷在吸附剂上的吸附行为，确定最佳吸附条件。

通过等温吸附等温线图，研究吸附剂对甜菊糖苷的吸附性能和选择性。

3. 结果与讨论3.1 吸附剂表征SEM图像显示，吸附剂表面均一且纤维结构清晰可见。

FT-IR结果表明，吸附剂表面出现了羧基化团，并且与甜菊糖苷发生了相互作用。

3.2 吸附性能研究在30℃下，研究了甜菊糖苷在吸附剂上的吸附行为。

结果显示，吸附剂对甜菊糖苷具有较高的吸附容量和选择性。

吸附过程符合Langmuir吸附模型，吸附动力学符合准二级动力学模型。

比较两种大孔树脂动态分离多种甜菊糖苷的研究

比较两种大孔树脂动态分离多种甜菊糖苷的研究周莹婷1，张涛俊2，刘楚瑶1，王亚兰 1，申金田 1，王巧宇1，魏渊1，*（1.江苏大学药学院，江苏 212013；2.江苏华泰重工装备有限公司，江苏 212300）摘要：目的：通过两种大孔树脂LX-T28与LX-T81对甜菊糖苷吸附/解吸实验，分析对比树脂的各项性能参数，为工业生产提供使用说明和参考依据。

方法：分别考察两种树脂内七种甜菊糖苷的吸附当量、吸附速度、泄露点与洗脱剂用量等指标，并进行单柱分离试验。

结果：总七种甜菊糖苷而言LX-T81较LX-T28的静态吸附当量更多、吸附速度更快且洗脱剂相对用量更少。

但是以其中一种/多种甜菊糖苷而言LX-T28树脂则更高效。

单柱分离试验结果显示两种树脂对甜菊糖苷均具有不同的洗脱顺序。

结论：两种树脂均为优秀的树脂，而实际生产中可以根据目标产物的生产需求来选择这两种树脂，而单柱分离试验结果说明了甜菊糖苷使用树脂分离具有一定的可行性，但仍需进一步扩大试验验证结论。

关键词：甜叶菊；甜菊糖苷；大孔树脂；性能；动态分离法中图分类号：TS202.3/O629.13 文献标识码：A 文章编号：1006-2513（2021）05-0013-07doi：10.19804/j.issn1006-2513.2021.05.003A comparison of two macroporous resins in dynamic separation ofmultiple stevia glycosidesZHOU Ying-ting1，ZHANG Tao-jun2，LIU Chu-yao1，WANG Ya-lan1，SHEN Jin-tian1，WANG Qiao-yu1，WEI Yuan1，*（1. School of Pharmacy，Jiangsu University，Jiangsu 212013；2. Jiangsu Huatai Heavy Industry Equipment Co.，Ltd.，Jiangsu 212300）Abstract：Objective：To analyze the performance parameters of two kinds of macroporous resins LX-T28 and LX-T81 on the adsorption / desorption experiments of steviol glycosides，and to provide reference for industrial production. Methods：Static adsorption equivalents，adsorption velocities，leak point and desorption volume of seven steviol glycosides indexes were examined and separated by single column and six column tandem separation. Results：LX-T81 had more static adsorption equivalents than LX-T28 in seven steviol glycosides together and it also has faster adsorption and using relatively less eluent. But LX-T28 resin was more efﬁcient in one / more steviol glycosides separation. The results of single column separation test showed that both resins had different elution order for steviol glycosides. Conclusion：Both resins are excellent and can be selected according to the production requirement. single column separation is a more desirable and practical for separation of steviol glycosides.Key words：stevia rebaudiana；steviol glycosides；macroporous resin；properties；dynamic separation method收稿日期：2021-02-06基金项目：横向课题，基于甜菊糖苷工艺的全自动连续动态逆流提取机组的研发（2020003）。

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%VVM流速：上柱液每分钟以柱内树脂体积的某一流速：流速百分比的体积流速流入或流出树脂柱；百分比的体积流速流入或流出树脂柱；死体积：树脂层上的清液体积，越小越好死体积：树脂层上的清液体积，死角：死角：指流道不连续导致主体流动离开流道边界而形成的区域，越少越好；形成的区域，越少越好；偏流、偏流、干柱
大孔吸附树脂吸附法分离甜菊糖甙
实验目的：实验目的：
了解大孔吸附树脂分离生物活性物质的基本原理；基本原理；掌握大孔吸附树脂分离生物活性物质装置的基本流程；置的基本流程；掌握大孔吸附树脂分离生物活性物质要注意的事项。注意的事项。
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1.大孔吸附树脂分离生物活性物质的基本原理大孔吸附树脂分离生物活性物质（约为树脂体积的两倍）固形物含量为U1 取定量（约为树脂体积的两倍）固形物含量为的甜菊糖甙溶液缓慢注入树脂柱内，的甜菊糖甙溶液缓慢注入树脂柱内，流速为 3~5%vvm，流出液用量筒收集，并不断取样分，流出液用量筒收集，直到流出液含显著甜味为止，停止上柱。析，直到流出液含显著甜味为止，停止上柱。记录上柱总量V1（柱出口上柱流出液量）；）；降液面录上柱总量（柱出口上柱流出液量）；降液面至树脂界面。至树脂界面。倍树脂体积的纯水按3~5%vvm流速洗柱，降流速洗柱，用2倍树脂体积的纯水按倍树脂体积的纯水按流速洗柱液面至树脂界面。液面至树脂界面。
大孔吸附树脂是一类不含交换基团且有大孔结构的高分子吸附树脂，附树脂，具有良好的大孔网状结构和较大的比表面积，结构和较大的比表面积，可以通过物理吸附从水溶液中有选择地吸附有机物。
2
吸附性原理
吸附力是范德华力或氢键作用的结果
筛选性原理
树脂为多孔性结构，树脂为多孔性结构，具有分子筛的作用
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d. 洗脱
用两倍树脂体积的60%乙醇溶液洗脱甜菊糖甙，流速为3~5%vvm，收集洗脱液，测量体积V并测定甜菊糖甙含量。
e. 测定洗脱液中甜菊糖甙含量
取一定量（1 ml）洗脱液于表面皿中，105 ℃烘箱内干燥至恒重，计算洗脱液中甜菊糖甙浓度U。
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计算吸附过程回收率 = 解析总量/上柱总量
U ×V 洗脱收率 = × 100% U1× V 1
V和U——分别为洗脱液液的体积（ml）和洗脱液甜菊糖甙含量（g/ml） V1和U1——分别为通入柱的料液体积（ml）和甜菊糖甙含量（g/ml）
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思考题
1.树脂的饱和吸附量与哪些因素有关？ 2.装柱时应该注意哪些事项？如何确保树脂柱不会干柱？ 3.树脂柱短路、偏流有何危害？
分离原理：有机化合物根据吸附力的不同及分离原理有机化合物根据吸附力的不同及分子量的大小，分子量的大小，在树脂的吸附机理和筛分原理作用下实现分离。理作用下实现分离。
3
2.影响因素：影响因素：影响因素
a.一般非极性化合物在水中易被非极性树脂吸附，一般非极性化合物在水中易被非极性树脂吸附，一般非极性化合物在水中易被非极性树脂吸附极性化合物在水中易被极性树脂吸附。极性化合物在水中易被极性树脂吸附。 b.物质在溶剂中的溶解度大，树脂对此物质的吸物质在溶剂中的溶解度大，物质在溶剂中的溶解度大附力就小，反之就大。附力就小，反之就大。 c.分子量小、极性小的化合物与非极性大孔吸附分子量小、分子量小树脂吸附作用强；反之，树脂吸附作用强；反之，与极性大孔吸附作用强。能与大孔吸附树脂形成氢键的化合物易吸附。
4
3.应用： 3.应用：广泛应用于天然化合物如苷、糖类、生物碱、多糖、黄酮、三萜类化合物的分离和富集工作。 4.洗脱液的选择：最常用的水、乙醇， 4.洗脱液的选择：最常用的水、乙醇，此外甲醇、丙酮、乙酸乙酯也被应用。
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大孔树脂吸附技术——优缺点
优点
应用范围广理化性质稳定分离性能优良使用方便溶剂用量少可重复使用，可重复使用，降低成本
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缺点
树脂价格贵品种有限操作繁琐
5.大孔吸附树脂分离生物活性物质要注意的大孔吸附树脂分离生物活性物质要注意的事项
大孔吸附树脂的再生一般用甲醇、乙醇效果比较好。一般用甲醇、乙醇效果比较好。当大孔吸附树脂用于吸附弱酸性物质时，则用氢氧化钠再生；用于吸附弱酸性物质时，则用氢氧化钠再生；用于吸附弱碱性物质时用盐酸再生，于吸附弱碱性物质时用盐酸再生，吸附一般离子溶液时用水再生，溶液时用水再生，吸附挥发性物质时用热水或通蒸汽再生。蒸汽再生。
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b. 水洗
利用重力作用加入约2倍柱体积去离子水，利用重力作用加入约倍柱体积去离子水，流速控倍柱体积去离子水制在柱体积的3~5%（3~5%vvm），洗至流出液中），洗至流出液中制在柱体积的（），无乙醇味，将水位控制至树脂面上，无乙醇味，将水位控制至树脂面上，加入少量待测保持一段液柱。液，保持一段液柱。
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实验结束后将所用器皿清洗干净，清洗干净，请值日生留下打扫卫生！留下打扫卫生！（1组、2组）组组明天上午10:00过来称重！过来称重！明天上午过来称重
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6.大孔吸附树脂分离甜菊糖甙的基本流程大孔吸附树脂分离甜菊糖甙的基本流程
a. 装柱
在层析柱内加入约80~100 mL水，用记号笔做好在层析柱内加入约水标记（此即为装入树脂体积）。标记（此即为装入树脂体积）。装柱过程：层析柱中加入约1/4柱体积的去离子水，柱体积的去离子水，装柱过程：层析柱中加入约柱体积的去离子水然后将树脂小心沿壁倒入柱中，然后将树脂小心沿壁倒入柱中，装柱时应注意不使树脂层中有气泡，控制柱底出水速度，使树脂层中有气泡，控制柱底出水速度，不能让柱中水流干或溢出来。装柱完成后，柱中水流干或溢出来。装柱完成后，将水位控制至树脂面上，加入少量去离子水，保持一段液柱。至树脂面上，加入少量去离子水，保持一段液柱。