d) 弃去原培养液，每孔加入100μL的空白对照液，阴性 对照液，阳性对照液，100％ 和50％浓度的试验样品 浸提液。每组至少设8孔。 e) 置含5％二氧化碳的二氧化碳培养箱, 在7℃±2℃温度 下进行培养。培养间期可分为24h、48h、72h。 f) 每个培养间期后,每孔加入MTT溶液20μl，置含5％二 氧化碳的二氧化碳培养, 在37℃±2℃温度下培养5小 时。 g) 弃去孔内液体，每孔分别加入200μl DMSO，将培养 板放置10分钟，水平振摇使孔内溶液颜色均匀。 h) 用酶标仪测定吸光度，可采用双波长测定，选用的波 长可为570nm和630nm。
试验材料：仪器
超净工作台、CO2培养箱、冰箱、倒置光 学显微镜、光学显微镜、蒸汽灭菌器、液 氮瓶、抽滤瓶、电热恒温水浴锅、96孔培 养板、可调式微量加样器、酶标仪纯水机、 液氮罐、天平、离心机等。
试验材料：耗材
培养瓶、培养板、吸管、冻存管、离心管、 ห้องสมุดไป่ตู้器等。
与供试品接触的所有器具置压力蒸汽灭菌 器内 121℃灭菌 20分钟。
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试验步骤:MTT法
a) 培养细胞直至达到其对数生长期末细胞趋于融合， 用细胞消化液消化分散细胞，用细胞培养液配制成 1×104个/mL的细胞悬液。 b) 取96孔培养板，每孔中加入100μL的细胞悬浮液。轻 轻水平转动培养板使细胞均匀地分散在皿孔的表面。 c) 置含5％二氧化碳的二氧化碳培养箱内, 在37℃±2℃ 温度下培养24小时。
MTT、XTT法：利用线粒体内部酶的活性，可以将特定的四唑盐类进行 转化，然后通过酶标仪进行检测 LDH的方法：通过检测细胞培养上清中LDH的酶活性，来检测细胞毒性 其它酶方法：如检测上清中碱性磷酸酶、酸性磷酸酶的活性等
