基于核酸适配体化学发光检测新技术(精)

新型核酸适配体技术在基因编辑中的应用在科学技术不断进步的今天，基因编辑技术已经越来越成为研究和治疗疾病的新方向。

随着新型核酸适配体技术(Nucleic Acid Adaptor Technology, NAAT)的应用，基因编辑技术进一步提高了其准确性和效率，为人类健康带来前所未有的利益。

一、新型核酸适配体技术的原理新型核酸适配体技术是一种依赖于纳米粒子的生物荧光探针，它是由核酸序列和适配体组成的。

适配体是一种异氰酸铵基团修饰的化合物，它可以与靶分子结合，发生生物荧光反应并实现生物检测。

在基因编辑中，适配体的基本作用是有效识别和准确捕捉目标DNA序列，从而调控基因的表达和功能。

二、新型核酸适配体技术的优点相较于传统的CRISPR/Cas9系统和TALENs系统，新型核酸适配体技术具有以下优点：1. 更高的精确度新型核酸适配体技术具有更高的精确度，因为它可以更准确地锁定目标DNA序列，避免无意识地改变非目标DNA序列。

因此，它比其他技术更安全和可靠，能够避免错误的基因编辑导致的突变或损伤。

2. 更广泛的适用性新型核酸适配体技术具有更广泛的适用性，因为它不仅能够编辑基因组DNA序列，还能编辑RNA序列和蛋白质序列，从而实现更多的生物功能调控。

3. 更高的效率新型核酸适配体技术在基因编辑过程中具有更高的效率，因为它可以更快地识别和捕捉目标DNA序列，从而减少基因编辑的时间和成本。

三、新型核酸适配体技术在基因编辑中的应用1. 编辑细胞基因新型核酸适配体技术已经应用于编辑细胞基因，从而改变细胞的功能和表达。

例如，在肝癌治疗中，研究人员已经成功使用新型核酸适配体技术编辑了多个关键基因，从而抑制了癌细胞的生长和扩散。

2. 治疗遗传疾病新型核酸适配体技术可以用来治疗遗传疾病，例如囊性纤维化、血友病和镰状细胞贫血。

在这些疾病中，病因都是由基因突变导致的。

通过使用新型核酸适配体技术，可以精确地修复基因突变，从而治疗疾病。

基于核酸适配体化学发光检测新技术核酸适配体是近年来发展起来的一类经体外人工合成筛选出的单链寡核苷酸,能高效、特异性地结合各种生物目标分子,故它的出现为化学生物学界和生物医学界提供了一种新的高效快速识别的研究平台。

目前生物分子检测通常采用抗原抗体特异相互作用识别模式,但由于受到抗体易失活、制备时间较长等因素的影响,在一定程度上限制了抗体检测技术的广泛应用。

相比之下,核酸适配体自身稳定性好、制备合成相对简单、快速、易获得、易功能化修饰与标记,且在生物传感器设计中应用灵活等优点,近几年在生物分析检测方面备受关注。

目前已经成为临床诊断、环境监测、药学研究等许多领域中的研究热点。

化学发光(CL)分析法具有不需光源,避免了杂散光的干扰,仪器设备简单、操作简便,具有极高的灵敏度,较宽的检测范围,可实现全自动化等特点,正逐渐成为分析检测中极为有用的工具,随着与众多学科交叉研究和应用领域的扩展,目前已成功地应用在药学、生物学、分子生物学、临床医学和环境学等诸多领域。

在本论文中,我们采用化学发光分析法,利用核酸适配体对目标分子的高分辨识别,发展了多种具有创新意义的化学发光适配体生物传感器,也实现了同一份样品中双组分的同时检测。

整个论文由以下五部分构成:第一章:绪论本绪论由两节构成,第一节介绍了核酸适配体技术检测生物分子的研究进展,包括了三部分。

第一部分中简单介绍了核酸适配体的制备、特点、优势以及在分析领域中的应用;第二部分中介绍了基于核酸适配体识别模式的单组分检测技术的研究进展及其意义,主要内容包括:光检测、电化学检测以及其他检测方法,并列举了近年来分析领域中的部分典型示例;第三部分中介绍了基于核酸适配体识别模式的多组分检测技术的研究进展及其意义,也列举了近年来它们在该分析领域中的部分典型示例。

第二节阐述了化学发光多组分酶检测研究进展以及本课题研究的目的、意义、主要研究内容以及创新之处,即核酸适配体在化学发光领域中应用与展望。

基于磁性微球分离技术的核酸适体化学发光检测可卡因严喜鸾;童丽;肖义陂;鲁卢;肖鉴谋【摘要】设计了一种基于磁性微球与核酸适体的夹心式化学发光适体传感器,建立了高灵敏度的可卡因分析方法.实验考察了反应所用羧基磁性微球、捕获探针、可卡因适体、生物素标记的报告序列以及链霉亲合素修饰的辣根过氧化物酶用量对化学发光信号的影响.优化条件下,在1.0×10-8～1.0×10-4mol/L范围内,化学发光信号与可卡因浓度的对数呈线性相关(r2=0.9897),检出限为3.2×10-9mol/L.考察了共存物质中适体对可卡因的特异性识别能力,方法显示了较好的选择性.【期刊名称】《分析测试学报》【年(卷),期】2013(032)012【总页数】5页(P1472-1476)【关键词】磁性微球;核酸适体;可卡因;化学发光【作者】严喜鸾;童丽;肖义陂;鲁卢;肖鉴谋【作者单位】南昌大学环境与化学工程学院,江西南昌330031;南昌大学环境与化学工程学院,江西南昌330031;南昌市洪都中医院,江西南昌330008;南昌大学环境与化学工程学院,江西南昌330031;南昌大学环境与化学工程学院,江西南昌330031【正文语种】中文【中图分类】O657.3微米级的超顺磁性颗粒，即磁性微球，在微观生物反应中能表现较好的均相反应，而在外加磁场作用下可高效实现异相分离，故磁性微球在微观分析检测领域中具有极大的应用潜力［1］。

可卡因既是麻醉药品，也是当今世界滥用最广泛的毒品之一，与之相关的社会问题也较为突出［2］。

因此，建立准确、灵敏的定性定量检测可卡因的方法具有重要意义。

目前，临床用来检测可卡因的方法很多［3－7］，化学发光免疫分析法以其快速、敏感、特异以及试剂无毒、安全稳定、价廉易得而成为一种很有发展前途的免疫分析技术，而以化学发光作为换能器的化学发光生物传感器不但继承了化学发光高灵敏度的优点，且大大提高了其选择性［8］。

基于核酸适配体的热荧光分析方法及其在乳铁蛋白检测中的应用基于核酸适配体的热荧光分析方法及其在乳铁蛋白检测中的应用摘要：近年来，核酸适配体作为一种特异性与目标分子结合的分子探针，在生物医学领域得到了广泛应用。

本文针对乳铁蛋白的检测问题，详细介绍了基于核酸适配体的热荧光分析方法，并探讨了该方法在乳铁蛋白检测中的应用优势。

研究结果表明，该方法具有高灵敏度、高选择性和高实时性的特点，可为乳铁蛋白的检测与分析提供重要支持。

1. 引言乳铁蛋白是一种高度保守的蛋白质，它在乳汁中起着重要的运输和抗菌作用。

乳铁蛋白的异常表达与许多疾病的发生和发展相关，因此对乳铁蛋白的准确检测具有重要意义。

传统的乳铁蛋白检测方法存在着操作复杂、耗时长、灵敏度低等缺点。

为了解决这些问题，基于核酸适配体的热荧光分析方法应运而生。

2. 核酸适配体的特性和应用核酸适配体是一种以核酸序列为基础的人工寡核苷酸，具有高度的特异性和亲和力。

核酸适配体通过特异性识别杂交的形式与目标分子结合，形成稳定的配对。

这种配对能力使核酸适配体成为一种重要的分子探针，可在生物医学领域进行靶点探测、药物传递等应用。

3. 基于核酸适配体的热荧光分析方法基于核酸适配体的热荧光分析方法是一种结合了核酸适配体特异性识别和热荧光技术的分析方法。

该方法首先将核酸适配体与目标分子结合形成复合物，然后通过温度升高使复合物解离，并同时检测解离过程中引起的荧光信号变化。

通过分析荧光信号的特点和变化规律，可以确定目标分子的存在和浓度。

4. 乳铁蛋白检测中的应用乳铁蛋白的检测对于乳汁样品的质量控制和乳房疾病的诊断具有重要意义。

基于核酸适配体的热荧光分析方法在乳铁蛋白检测中具有一定的应用优势。

研究表明，选择合适的核酸适配体可以实现对乳铁蛋白的高选择性识别，同时该方法具有较高的灵敏度，可以检测到极低浓度的乳铁蛋白。

此外，该方法的实时性较好，操作简便，可以进行实时监测和分析。

5. 结论基于核酸适配体的热荧光分析方法在乳铁蛋白检测中具有显著优势。

核酸适配体功能化金纳米探针识别-共振光散射法检测腺苷王周平;段诺;彭晓丽;乐国伟【期刊名称】《食品与生物技术学报》【年(卷),期】2010(029)006【摘要】将纳米探针技术、核酸适配体识别与共振光散射检测技术有机结合,以腺苷为模式分析物,通过均相体系中腺苷与其特异结合核酸适配体识别反应,使形成网络聚集结构的金纳米结构解聚,从而引起共振光散射信号强烈变化.基于此,建立了核酸适配体识别的均相检测腺苷的新方法.该方法对腺苷检测的浓度线性范围为0.1～10 μmol/L,检测限为0.04 μmol/L(3S/N).该方法对腺苷的检测灵敏度高、选择性好,鸟苷、胸苷、胞苷、尿苷等对检测不产生干扰.【总页数】6页(P889-894)【作者】王周平;段诺;彭晓丽;乐国伟【作者单位】食品科学与技术国家重点实验室,江南大学,江苏,无锡,214122;江南大学食品学院,江苏,无锡,214122;食品科学与技术国家重点实验室,江南大学,江苏,无锡,214122;江南大学食品学院,江苏,无锡,214122;食品科学与技术国家重点实验室,江南大学,江苏,无锡,214122;江南大学食品学院,江苏,无锡,214122;食品科学与技术国家重点实验室,江南大学,江苏,无锡,214122;江南大学食品学院,江苏,无锡,214122【正文语种】中文【中图分类】TL271.5【相关文献】1.纳米金核酸适配体共振瑞利散射光谱检测卡那霉素的研究 [J], 陈效兰;张慧;刘冰;李云宇2.基于功能化的金纳米的共振瑞利散射方法手性识别肉碱对映体 [J], 赵艳梅;吴环;曾小清;郭媛;袁海燕;黄云梅;谭选平;张雷;杨季冬3.核酸适配体纳米金共振散射光谱检测血清中钾离子 [J], 刘庆业;范燕燕;李廷盛;梁爱惠;蒋治良4.基于镉特异性功能化核酸适配体测定痕量镉的共振光散射新方法 [J], 唐律;李贵荣;徐梦媛;杨洋5.基于核酸适配体识别-时间分辨荧光共振能量转移检测牛奶中培氟沙星兽药残留[J], 宋亚宁;胡超琼;霍秋宇;王力均;陈祥贵;黄玉坤因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

基于适配体的荧光生物传感器对Hg^(2+)的检测技术研究马莉萍;马生龙;李云霞;聂莹莹;左显维【期刊名称】《甘肃科学学报》【年(卷),期】2023(35)1【摘要】工业迅速发展所带来的重金属污染,是目前威胁人类健康的重要环境问题之一。

Hg^(2+)是一种毒性强且污染较为普遍的重金属离子,较低浓度Hg^(2+)就会对人体造成很大危害。

基于核酸适配体错配结合Hg^(2+)的原理,以特异性双链核酸染料SYBR GreenⅠ为荧光指示探针,构建了新型的无标记核酸适配体荧光生物传感器,建立了一种高灵敏度、快速检测Hg^(2+)的方法,实现了Hg^(2+)高效检测。

在优化条件下,传感器对Hg^(2+)的检测线性范围为10 nmol/L~1μmol/L,相关系数(r2)为0.99,检出限为1 nmol/L。

5种干扰离子(Ca^(2+)、Fe^(2+)、Cu^(2+)、Ni^(2+)、Ag^(+))的存在不影响Hg^(2+)检测,表明该方法对Hg^(2+)检测具有较好的特异性。

在自来水样的Hg^(2+)加标检测实验中,平均回收率达到95.8%,具备分析实际样品的能力。

【总页数】6页(P10-14)【作者】马莉萍;马生龙;李云霞;聂莹莹;左显维【作者单位】甘肃省科学院传感技术研究所;甘肃省传感器与传感技术重点实验室【正文语种】中文【中图分类】O657.1【相关文献】1.基于核酸适体的Hg^2＋荧光光谱分析法2.基于罗丹明-高半胱氨酸荧光探针对Hg^2+的检测3.基于金纳米簇荧光猝灭-恢复的Hg^(2+)检测新方法4.基于碳点的OFF-ON型荧光传感器检测Hg^(2+)和S^(2-)5.基于G-四链体/硫黄素T的荧光生物传感器检测Pb^(2+)因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

基于核酸适配体探针和荧光信号放大的高灵敏蛋白检测新方法研究的开题报告一、选题背景和研究意义蛋白质是细胞中最基本的生物分子之一，它们参与了几乎所有的生物过程。

因此，对蛋白质的高灵敏检测一直是生命科学领域的重要研究方向之一。

传统的蛋白质检测方法包括酶联免疫吸附法、荧光标记法等，但这些方法存在样品处理复杂、检测时间长、准确性不高等缺点。

近年来，基于核酸适配体探针和荧光信号放大的蛋白质检测新方法受到研究者的关注，具有快速、灵敏、准确等优点。

二、研究内容和目标本次研究旨在开发一种基于核酸适配体探针和荧光信号放大的高灵敏蛋白检测新方法。

具体包括以下几个方面的内容：1.根据目标蛋白设计核酸适配体探针，优化适配体探针的结构和长度，提高探针的特异性和灵敏度。

2.利用核酸适配体与目标蛋白的结合产生信号，通过适当的信号放大技术（如扩增反应），进一步提高检测的灵敏度。

3.优化样品的前处理方法，减少样品处理时间和样品损伤。

4.建立一种高通量、高灵敏、高选择性的蛋白质检测平台，应用于生物医学研究和临床检测。

三、预期成果和创新性本次研究的预期成果包括：1.建立一种基于核酸适配体探针和荧光信号放大的高灵敏蛋白检测新方法，具有快速、灵敏、准确等优点。

2.优化适配体探针的结构和长度，提高探针的特异性和灵敏度。

3.建立一种高通量、高灵敏、高选择性的蛋白质检测平台，应用于生物医学研究和临床检测。

本研究的创新点在于利用核酸适配体探针和荧光信号放大的方法进行蛋白质检测，优化适配体探针的结构和长度，提高探针的特异性和灵敏度，利用信号放大技术进一步提高检测灵敏度，建立高通量、高灵敏、高选择性的蛋白质检测平台。

该方法具有快速、灵敏、准确等优点，可以成为生物医学研究和临床检测领域中一种重要的蛋白质检测新方法。

四、研究方法和技术路线1. 样品前处理对于不同类型的样品，采用不同的前处理方法，例如：对于血清、尿液等液态样品，通过超滤、离心等方法将样品中的杂质去除；对于组织、细胞等固态样品，采用切片或细胞分离等方法进行前处理。

项目名称：基于核酸适配体的蛋白质研究新技术和新方法首席科学家：谭蔚泓湖南大学起止年限：2011.1至2015.8依托部门：教育部二、预期目标总体目标:本项目针对当前蛋白质研究中存在的瓶颈问题，发展基于核酸适配体的蛋白质研究新技术新方法；以肝癌和食管癌为研究对象，面向我国社会发展中提高人类健康的重大需求，通过建立肝癌和食管癌相关蛋白的发现、分离分析、检测表征等新技术，探索肝癌和食管癌发生发展的分子机制，为恶性肿瘤等重大疾病早期诊断提供新技术和新方法。

通过开展多学科交叉与综合研究，形成具有原始创新的方法学突破及自主知识产权的蛋白质研究支撑平台，获得具有国际影响的重要研究成果，培养造就一支具有多学科知识和创新研究能力的研究队伍，促进我国在蛋白质研究领域达到国际领先水平。

五年预期目标：1. 阐明核酸适配体筛选过程的进化规律，建立针对蛋白质、细胞、组织等不同层次蛋白质靶标体系的高效率核酸适配体筛选技术平台，并筛选出针对肝癌和食管癌特异性标志物的核酸适配体15-30种。

2．揭示核酸适配体与蛋白质相互作用的分子机制，发展2-4种具有自主知识产权的系统研究核酸适配体分子识别的方法，为核酸适配体分子探针的设计、筛选、构/效关系和性能评价提供理论指导。

3. 发展高灵敏、高通量、高准确度的蛋白质定量检测的新原理、新方法，提出高效率、高重现性的蛋白质分离富集的新方法、新技术，研制出相应高通量、自动化的蛋白质分离及检测系统，对低丰度蛋白检测的灵敏度达到1 pg/mL及更低水平，为肿瘤的蛋白质生物标志物的发现、重大疾病的分子机制研究与早期诊断提供研究工具。

4. 建立肝癌、食管癌等恶性肿瘤体系的特征核酸适配体分子识别指纹图谱，发现4-5种特异性高的癌症标志物，并完成核酸适配体分子识别体系在癌症早期诊断中的临床意义评估, 开发具有自主知识产权的诊断系统。

5. 取得有国际影响的重要基础研究成果，提出有自主知识产权的新理论和新方法。

核酸适配体荧光探针在生化分析和生物成像中的研究进展黄子珂;刘超;付强强;李进;邹建梅;谢斯滔;邱丽萍【期刊名称】《应用化学》【年(卷),期】2018(035)001【摘要】核酸适配体是指通过体外筛选技术从核酸文库中筛选出来,能够高特异性、高亲和力识别靶标物的寡核苷酸序列,具有靶标类型广泛、合成简单、相对分子质量小、化学稳定性高、易于进行生物化学修饰等优点.核酸适配体能够通过折叠成特定的二维或三维构型与靶标物特异性结合,加上合适的信号转导机制,为重要靶标物的研究提供理想的分子识别与分子检测探针.荧光检测技术具有高灵敏、高分辨率、易于实现多元分析等优点.将核酸适配体的分子识别特性与荧光优异的光学检测性能相结合,在生命科学研究领域有着广泛的应用空间.本文主要综述了核酸适配体荧光探针常见的分子设计和信号响应方式,及其在细胞成像、亚细胞成像中的应用研究,并对核酸适配体探针目前面临的一些挑战进行了讨论,最后对其未来的发展方向进行了展望.%Aptamers are oligonucleotides selected through an in vitro method known as systematic evolution of ligands by exponential enrichment ( SELEX ) , which can recognize target with high specificity and high affinity.Aptamers have attracted wide attention because of their intrinsic advantages including simple synthesis , low molecular mass , high chemical stability , easy biochemical modification and so on .Aptamers can fold into specific two-dimensional or three-dimensional configurations and specifically bind with their targets.With appropriate signal transduction mechanism , aptamers can provide ideal molecular recognition anddetection probes for biological research .Fluorescence is a type of detection technology that has several superiorities of high sensitivity , high resolution and easy multiplex detection .With the combination of the molecular recognition capability of aptamers and the outstanding detection performance of fluorescence technology , the aptamer-based fluorescence probes have been widely used in the study of lifescience .This review highlights the major progress of aptamer-based fluorescence probes in both bioanalysis and bioimaging area, and discusses the current limitations of aptamer probe for applications .【总页数】12页(P28-39)【作者】黄子珂;刘超;付强强;李进;邹建梅;谢斯滔;邱丽萍【作者单位】湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室长沙410082;湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室长沙410082;湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室长沙410082;湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室长沙410082;湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室长沙410082;湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室长沙410082;湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室长沙410082【正文语种】中文【中图分类】O657.3【相关文献】1.基于分子工程能量转移构建的比率型双光子荧光探针在生物成像中的应用 [J], 周礼义;龚亮;李学强;胡舜钦2.基于Cell-SELEX的核酸适配体在生化分析与生物成像中的应用 [J], 堵玉林;莫柳婷;易娅莎;邱丽萍;谭蔚泓3.基于荧光素硫代酰肼类Hg2+荧光探针的合成及在生物成像中的应用 [J], 刘大海;张雪妍;冯玉沙;杜显龙;薛龙启;杜建时;张桂荣;杨清彪;李耀先4.近红外二区荧光探针在生物成像领域的研究进展 [J], SU Zhe;QIN Wenjing;BAI Lei;SUN Pengfei;YU Changmin;FAN Quli;LI Lin5.聚集诱导发光荧光探针在生物成像中的研究进展 [J], 张玉权;黄渊余因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

基于Cell-SELEX的核酸适配体在生化分析与生物成像中的应用堵玉林;莫柳婷;易娅莎;邱丽萍;谭蔚泓【摘要】Aptamers are single-stranded oligonucleotides ( DNA or RNA ) selected through a technology termed "Systematic evolution of ligands by exponential enrichment" ( SELEX ) . In addition to high affinity and high specificity for their target molecules, aptamers have some advantages such as low molecular weight, easy synthesis, high chemical stability, low immunogenicity, and convenient modification. Based on the Cell-SELEX technique, a panel of aptamers which can specifically recognize target cell lines has been generated. By targeting specific membrane proteins in their native state, these aptamers can identify subtle molecular differences among different cell lines, thus have attracted a broad interest in biomedical research. In this review, we summarized the development of aptamers and their use in detection, profiling and imaging of tumor cells. Also, their perspectives were discussed.%基于Cell-SELEX的核酸适配体是指以活细胞为靶标物,通过指数富集的配基系统进化技术(Systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)从人工合成的DNA/RNA文库中筛选得到的单链寡核苷酸.它能够与靶标细胞高亲和性、高特异性结合,具有分子量低、合成简单、化学稳定性好、免疫原性低、易于功能化修饰等优点,已广泛应用于生命科学研究领域.本文综述了基于Cell-SELEX技术筛选的核酸适配体在肿瘤细胞检测、分析和成像方面的研究进展,并对核酸适配体研究的发展前景和趋势进行了展望.【期刊名称】《分析化学》【年(卷),期】2017(045)012【总页数】9页(P1757-1765)【关键词】核酸适配体;Cell-SELEX;生化分析;生物成像;肿瘤细胞【作者】堵玉林;莫柳婷;易娅莎;邱丽萍;谭蔚泓【作者单位】分子科学与生物医学实验室,化学生物传感与计量学国家重点实验室,湖南大学化学化工学院,生命科学学院,核酸适配体湖南省工程实验室,长沙410082;分子科学与生物医学实验室,化学生物传感与计量学国家重点实验室,湖南大学化学化工学院,生命科学学院,核酸适配体湖南省工程实验室,长沙410082;分子科学与生物医学实验室,化学生物传感与计量学国家重点实验室,湖南大学化学化工学院,生命科学学院,核酸适配体湖南省工程实验室,长沙410082;分子科学与生物医学实验室,化学生物传感与计量学国家重点实验室,湖南大学化学化工学院,生命科学学院,核酸适配体湖南省工程实验室,长沙410082;分子科学与生物医学实验室,化学生物传感与计量学国家重点实验室,湖南大学化学化工学院,生命科学学院,核酸适配体湖南省工程实验室,长沙410082【正文语种】中文近年来，癌症的发病率和死亡率不断上升，已成为我国居民最主要的死亡原因之一。