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侵袭性真菌感染实验室诊断的临床应用 PPT

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侵袭性真菌感染(ifi,ifd)的诊治策略-PPT文档

侵袭性真菌感染(ifi,ifd)的诊治策略-PPT文档
Fungitec G , 中华鲎, 判定折点：> 20 pg/μL阳性 Fungitell, 美洲鲎, 判定折点：> 80 pg/μL 阳性
聚合酶链反应（PCR）
循环 n
循环 2
循环 1
合成 延长
n循环后的基因丝链数量 = 2n
由基因组开始＝ DNA
杂交引物 ( )
变性 DNA
检测 探针 可视的增亮剂
2007
高危患者侵袭性真菌病的诊断
高危患者
IFD临床证据
是
否
培 养 + 半乳甘露聚糖 +
IFD微生物证据
是
否
是
否
“拟诊” IFD
“疑似” IFD
抗真菌治疗
“不像” IFD
主要内容
EORTC/IFICG和NIAID/MSG对 IFI（IFD）的诊断 标准
我国侵袭性肺真菌病的诊断标准与治疗原则 真菌感染的变迁 真菌感染的治疗药物
1
2
3
4
半乳甘露聚糖
大鼠单克隆抗 体 EB-A2 + 过氧化酶
色原体
大鼠单克隆抗 体 EB-A2
血液标本中真菌细胞壁成分 曲霉菌半乳甘露聚糖抗原(GM)
GM检测可在临床症状和影像学尚未出现前数天表 达阳性, 对高危患者连续动态监测具有早期诊断的价 值
GM检测需连续2次阳性 同样的试剂与方法测定曲霉抗原, 美国判定的阳性结
临床特 征
真菌学
组织. BAL or 痰培养霉菌 窦吸物培养霉菌 组织或无菌体液可检测真菌 血液、BAL、CSF 真菌抗原 BAL、CSF、血液，Beta-D-glucan
2007 EORTC/ MSG
侵袭性真菌病（IFD）诊断和治疗策略

重症患者侵袭性真菌感染ppt课件

重症患者侵袭性真菌感染ppt课件
2019 10
一、重症患者IFI的流 行病学
2019
-
11
(一)发病率
不断增加，约占医院获得性感染的8～ 15% 器官移植受者真菌感染的发病率为20%～ 40% 艾滋病患者发生真菌感染的可能性高达 90%
2019
-
12
（二）重要病原菌
ICU患者IFI的病原菌主要包括念珠菌和曲霉 ICU患者IFI仍以念珠菌为主，其中白色念珠 菌是最常见的病原菌(占40%～60%) 近年来非白念珠菌感染的比例在逐渐增加 侵袭性曲霉感染的发生率也在逐渐上升,占所 有IFI的5.9%～12%
2019
-
41
1、无免疫功能抑制的基础疾 病的患者
经抗生素治疗72-96小时仍有发热等感染征象， 并满足下列条件之一的属于高危人群: （1）患者因素： ① 老年（大于65岁）、营养不良、肝硬化、胰 腺炎、糖尿病、COPD等肺部疾病、肾功能不 全、严重烧伤/创伤伴皮肤缺损、肠功能减退 或肠麻痹等基础情况。 ② 存在念珠菌定植，尤其是多部位定植或某一 部位持续定植。
2019
-
37
（三）拟诊
2019
-
38
至少符合1项危险（宿主）因素 具备1项微生物学检查的阳性结果，或 者具有可能感染部位的1项主要或2项次 要临床特征。
2019
-
39
（四）诊断IFI的参照标准
危险（宿主）因素 临床特征 微生物学检查
2019
-
40
（一）危险（宿主） 因素
侵袭性真菌感染指南工作组 中国 成都 07.5
2019 8
IFI(invasive fungal infection,IFI)
IFD(invasive fungal disease,IFD)? 尚有争 论

《侵袭性真菌病》PPT课件

《侵袭性真菌病》PPT课件
症状、体征
X 线表现
经验 治疗
治疗的早期性 预防的必要性 两者的统一性
Clinical Infectious Diseases 2008;46:327–360
谢谢！
较典型的X线表现：
支气管肺炎型—— X线特点：密度高、界限相对清、沿支气管分布
肺炎型——
X线特点：密度高、界限相对清、支气管充气征阳性、
以胸膜为基底 小结节型—— X线特点：多发、靠外下、界清 间质型——以肺间质改变为主 粟粒型——X线呈粟粒改变 胸膜炎型
念珠菌感染的不典型临床表现
• 各种抗菌治疗无效的发热或再次发热 • 病原体不明的发热 • 粒细胞减少患者的发热 • 鹅口疮, 食道炎, 阴道炎(危重病人) • 非典型的肺部侵润 • 原因不明的肝功能障碍 • 不明原因的精神或神志障碍 • 眼内炎、脉络膜视网膜炎 • 干咳、血痰 • 发热、皮疹和肌肉触痛
念和曲菌）。
积极早期治疗要点 （先发治疗） （针对临床诊断的治疗 ）
宿主因素
临床特征
病原依据
时机：符合临床诊断标准后刻不容缓的抗真菌治疗 选择药物：针对病原学检查结果
系统性连续监测： 每周2次真菌培养，或真菌抗原检测，如果 发现阳性结果，立即开始抗真菌治疗。
痰培养霉菌阳性
复查痰培养阴性
复查痰培养阳性
临床疾病。非寄 生、过敏和毒性 反应
侵袭性真菌病临床病原真菌
条件致病菌
致病性双相真菌
念珠菌 类酵母样菌
组织胞浆菌 双相样菌
曲霉菌 霉菌组
球孢子菌
毛霉菌 接合菌
芽生菌
隐球菌 酵母菌
马尼菲青霉
肺孢子菌 卡氏肺孢子虫 孢子丝菌
镰刀菌
暗色真菌
毛孢子菌

侵袭性真菌感染实验室诊断与临床应用-PPT

侵袭性真菌感染实验室诊断与临床应用-PPT
8
大家有疑问的，可以询问和交流
可以互相讨论下，但要小声点 9
侵袭性真菌感染现状-确诊困 难
ICU患者侵袭性曲霉感染尸检检出率高达59%，远 高于临床所见。
Meersseman W et al. Am J Respir Crit Care Med .2004;170:621–625
10
百分比
侵袭性真菌感染现状-需及时治疗
微生态学杂志, 2016, 28(10):1152-1156.
G试验与GM试验试验联合检测 有助于真菌属的鉴别
31
结果判读
➢ 阳性：GM≥0.95μg/L ➢ 阴性：GM<0.75μg/L ➢ 灰区：0.75≤GM<0.95μg/L，建议连续多
次检测并应结合临床资料综合评价
32
GM试验干扰因素
念珠菌甘露聚糖 （Mannan, Mn试验）
曲霉菌 IgM/IgG抗体 （ELISA，胶体金）
念珠菌 IgM/IgG抗体 （ELISA，胶体金）
真菌筛查 曲霉菌 隐球菌 念珠菌 曲霉菌 念珠菌
14
隐球菌感染
隐球菌为圆形菌体，外周有荚膜， 内有反光孢子，但无菌丝。
隐球菌属已知有37个不同的种， 但具致病性的多为新型隐球菌， 其特点是菌体由一层很厚的多糖 荚膜所包被。
确诊需侵入性手段获得组织标本 但侵入性操作常常难以实施
真菌检测项目开展相对不足或滞后
12
真菌传统检测方法及局限性
13
基于血清学的非培养检测技术
抗原 检测
血清学检测
抗体 检测
（1-3）-β-D葡聚糖 （Glucan, G试验）
曲霉半乳甘露聚糖 (Galactomannan ,GM试验)
隐球菌荚膜多糖 （ GXM试验，ELISA，胶体金）

侵袭性真菌感染的诊断与治疗PPT参考幻灯片共89页

侵袭性真菌感染的诊断与治疗PPT参考幻灯片共89页

56、书不仅是生活，而且是现在、过 去和未 来文化 生活的 源泉。 ——库 法耶夫 57、生命不可能有两次，但许多人连一 次也不 善于度 过。— —吕凯 特 58、问渠哪得清如许，为有源头活水来 。—— 朱熹 59、我的努力求学没有得到别的好处， 只不过 是愈来 愈发觉 自己的 无知。 ——笛 卡儿
侵袭性真菌感染的诊断与治 疗PPT参考幻灯片
31、别人笑我太疯癫，我笑他人看不 穿。(名 言网) 32、我不想听失意者的哭泣，抱怨者 的牢骚 ，这是 羊群中 的瘟疫 ，我不 能被它 传染。 我要尽 量避免 绝望， 辛勤耕 耘，忍 受苦楚 。我一 试再试 ，争取 每天的 成功， 避免以 失败收 常在别 人停滞 不前时 ，我继 续拼搏 。
33、如果惧怕前面跌宕的山岩，生命 就永远 只能是 死水一 潭。 34、当你眼泪忍不住要流出来的时候 ，睁大 眼睛， 千万别 眨眼!你会看到 世界由 清晰变 模糊的 全过程 ，心会 在你泪 水落下 的那一 刻变得 清澈明 晰。盐 。ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ定 要融化 的，也 许是用 眼泪的 方式。
35、不要以为自己成功一次就可以了 ，也不 要以为 过去的 光荣可 以被永 远肯定 。
拉
60、生活的道路一旦选定，就要勇敢地 走到底 ，决不 回头。 ——左

侵袭性真菌感染诊断与治疗课件

侵袭性真菌感染诊断与治疗课件

手术治疗
对于某些侵袭性真菌感染，如 肺部真菌感染、中枢神经系统 真菌感染等，手术治疗也是一 种重要的治疗手段。
手术治疗的目的在于清除病灶、 减轻患者症状、缩短病程以及 降低并发症的发生率。
手术治疗需在合适的时机进行， 同时需结合药物治疗和其他支 持治疗措施，以提高治疗效果。
支持治疗与护理
支持治疗与护理在侵袭性真菌感 染的治疗中同样重要，包括维持 水电解质平衡、控制体温、改善
质和免疫力。
充足休息
保证充足的睡眠时间， 有助于身体恢复和免疫
力提升。
避免过度劳累
合理安排工作和休息时 间，避免长期过度劳累
导致免疫力下降。
控制基础疾病
积极治疗慢性疾病
如糖尿病、慢性阻塞性肺疾病等，控制病情发展，降低感染风险。
预防和控制并发症
对于已经存在的并发症，如肺炎、心脏疾病等，应积极预防和控制， 降低感染风险。
提高患者自我管理能力
教育患者自我监测病情，定期进行检查和评估，及时发现并处理问 题。
切断传播途径
加强个人卫生
勤洗手、洗脸、洗澡等，保持个 人卫生习惯，避免接触感染源。
避免接触污染环境
尽量避免接触可能存在真菌的环境， 如潮湿、霉变等地方。
做好家庭卫生
保持家庭环境清洁卫生，定期进行 消毒和清洁工作。
06
THANKS
感谢观看
对于疑似侵袭性真菌感染的患者，还 可以进行脑脊液、胸腹水等体液样本 的培养，以明确诊断。
呼吸道分泌物培养
采集患者的痰液、支气管灌洗液等呼 吸道分泌物样本进行培养，检测呼吸 道中的真菌成分。
组织病理学诊断
组织活检
通过手术或穿刺获取患者的组织样本，进行病理学检查，观 察组织中是否存在真菌成分，是确诊侵袭性真菌感染的金标 准。

侵袭性真菌感染实验室诊断与临床应用ppt课件

侵袭性真菌感染实验室诊断与临床应用ppt课件
7
侵袭性真菌感染现状-确诊困难
时间（天）
20
入院至确诊侵袭性念珠菌感染
的时间中位数为15.5天
15
10
5
15.5
0
入院至确诊IFI 的中位数时间
10.0
入住ICU至确诊侵袭性念珠菌 感染的时间中位数为10.0天
入住ICU至确诊IFI 的中位数时间
Guo Fengmei, et al. J Antimicrob Chemother 2013 Jul; 68(7):1660-8.
推荐用于念珠菌血症，侵袭性念珠菌病及慢性播 散性念珠菌病的诊断
血液病/恶性肿瘤患者侵袭性真菌病的 诊断标准与治疗原则（第五次修订版）
推荐用于IFD早期诊断的重要筛选指标。
中国实体器官移植受者侵袭性真菌病临 床诊治指南（2016年版）
侵袭性真菌病诊断的微生物学标准
重症患者侵袭性真菌感染诊断与治疗指 南 （2007）
发生
3
早期症状无 特异性，往 往被原发病 掩盖，病程 长，发现较 晚，死亡率
高
4
感染菌种变 化， 白色念 珠菌感染率 下降，曲霉 菌感染率明
显上升
6
侵袭性真菌感染的现状
医学及 相关科 学的进
步
危重 病人 的存 活期 延长
患者人数进一步 扩大
延长了真菌感染 的高危期
真菌感染率日趋升高， IFI已成为院内感染的主 要危险，占医院获得性感染的8-15%。
肺部是隐球菌侵入的门户
19
适用科室及临床意义
〉 皮肤黏膜隐球菌病-皮肤科
10%～15%的隐球菌病患者出现皮肤损害，比如出现丘疹、水疱、脓疱、传染性软疣样丘疹、 痤疮样脓疱等症状。
〉 儿童脑膜炎-儿科

侵袭性真菌感染诊断治疗医学PPT【79页】

侵袭性真菌感染诊断治疗医学PPT【79页】

病例四
• 患者苗西平，女性，52岁，主因发热3天入 院 。入院时查体：T 39.2℃ ，咽部充血， 双侧扁桃体Ⅰ°肿大，口腔内可见多处白 斑。双肺呼吸音清，未闻及干湿性罗音。 心率116次/分，律齐，各瓣膜听诊区未闻及 杂音。腹软，无压痛、反跳痛及肌紧张， 肝脾未触及肿大。双下肢无水肿。
• 入院后查血常规示：WBC：1.60×109/L，尿常规 示：红细胞：94.40/ul，蛋白质：+1，便常规未 见明显异常，血沉示：96mm/h，肝功能示：ALT： 203U/L，AST：94U/L，TBil：36.6umol/l，DBil： 17.4umol/l，IBil：19.2umol/l，Glu：6.68mmol/l。 肺CT示：1.左肺上叶及右肺中叶纤维索条；2.两 侧胸膜肥厚。口腔分泌物涂片示：可见大量真菌
染治疗无效
• 高分辨CT的影像学特征（对肺曲菌诊断意 义较大）
晕轮征
空气新月征
浸润及空洞
空洞病变
团块及空洞
贴胸壁块状影
贴胸壁块状影、空洞
肺感染 CNS感染
鼻窦感染
鼻窦感染
1例VSAA患者
左上颌窦鼻内开窗、左筛窦开放、左中甲部分切除术 手术病理回报：见大量霉菌及坏死组织 培养：曲霉菌属
• 患者王xx，女，20岁，学生，住院号 D016465 , 主因确诊急性淋巴细胞白 血病20天，高热2周于2011-9-7入院。
• 2011-8-17于“中国医学科学院天津血 液病医院”确诊“ALL伴髓系表达”， 予VTCP方案化疗第七天（8月24日）出 现高热，先后予舒普深、去甲万古霉素 等药物静点无效。
• 血液科侵袭性真菌经验性治疗首选 伏立康唑或两性霉素B
病例一
患者亢XX，男，34岁，诊断AML-M1

侵袭性深部真菌病的实验室诊断PPT课件

侵袭性深部真菌病的实验室诊断PPT课件
47 85
特异性 (%)
93 100
阳性预测 (%) 阴性预测 (%)
73
82
100
88
Becker et al. Br J Haematol 2003; 121: 448
Musher et al. J Clin Microbiol 2004: 42(12): 5517-22
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14
关于GM试验与G试验
GM (%) 92 94 73 98 BG (%) 57 84 42 91
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17
CONCLUSIONS The incidence of IFD correlated directly and significantly (x2 p=0.0005) with risk stratification group: highest proportion in the high-risk group. Since all the biomarkers have inherent limitations, a better diagnosis yield is achieved combining the biomarkers. All three biomarkers share high negative predictive value and can exclude reasonably IFD in haematology adult patients treated with wide spectrum antifungals.
可作为推定诊断的标准;
GM: 检测半乳甘露聚糖，对曲霉感染诊断特 异性强，假阳性反应可以在青霉菌属中出现； 部分含青霉烷砜衍生物的抗菌药物可以诱发 阳性反应；
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〉 肺隐球菌病-呼吸科
肺部是隐球菌侵入的门户
适用科室及临床意义
〉 皮肤黏膜隐球菌病-皮肤科
10%～15%的隐球菌病患者出现皮肤损害，比如出现丘疹、水疱、脓疱、传染性软疣样丘疹、 痤疮样脓疱等症状。
〉 儿童脑膜炎-儿科
儿童由于免疫系统不健全，也容易被隐球菌感染，一般儿童的脑脊液样本都会做隐球菌筛查
〉 免疫缺陷人群-感染科、器官移植、ICU等
侵袭性真菌感染现状-确诊困难
ICU患者侵袭性曲霉感染尸检检出率高达59%，远 高于临床所见。
Meersseman W et al. Am J Respir Crit Care Med .2004;170:621–625
百分比
侵袭性真菌感染现状-需及时治疗
n=14
n=9
患者死亡率随起始治疗 时间延迟显著上升
n=12
十二小时内有效抗真菌治疗能够显著降低患者的死亡率
ANTIMICROBIALAGENTS AND CHEMOTHERAPY, Sept. 2005, p. 3640–3645.
侵袭性真菌感染现状-诊断困难原因
诊断困难
临床表现不典型 易被基础疾病掩盖
确诊需侵入性手段获得组织标本 但侵入性操作常常难以实施
高
4
感染菌种变 化， 白色念 珠菌感染率 下降，曲霉 菌感染率明
显上升
侵袭性真菌感染的现状
医学及 相关科 学的进
步
危重 病人 的存 活期 延长
患者人数进一步 扩大
延长了真菌感染 的高危期
真菌感染率日趋升高， IFI已成为院内感染的主 要危险，占医院获得性感染的8-15%。
侵袭性真菌感染现状-确诊困难
3. 抗原检测试验： 脑脊液和血清样本抗原检测的敏感性可达到97% 和87%*，能实现早期快速诊断
隐球菌抗原检测——胶体金法
【特点】
操作程序简单； 快速检测：30分钟出结果； 灵敏度高：最低检出限1.2ng/ml；
快速检测 方法高效
灵敏度高 特异性强
性能可靠 结果准确
检测方法比较
隐球菌荚膜抗原检测 墨汁染色 真菌培养
侵袭性真菌感染实验室诊断的临床应用侵袭性 Nhomakorabea菌感染概述
引起侵袭性真菌病的三种主要真菌：
➢ 念珠菌
➢ 曲霉菌
➢ 隐球菌
2019年2季度病原菌中细菌与真菌比例
4% 96%
细菌
1319株
真菌
59株
2019年2季度真菌分布
36%
51%
白假丝酵母菌 光滑假丝酵母菌
87%
近平滑假丝酵母菌
新生隐球酵母
热带假丝酵母菌
真菌检测项目开展相对不足或滞后
真菌传统检测方法及局限性
传统诊断方法
问题
培养 镜检
无菌体液培养阳性为诊断“金标准” 血培养阳性率低、时间长，对曲霉临床价值低 非无菌部位/体液培养难以区分定植和感染 无菌部位/体液阳性率更低 无法区分定植与感染 技术/经验要求
组织病理学/细胞学
检查
诊断“金标准” 有创性检查，病人的依从性差，有风险 阳性率低，对仪器及检验人员的技术要求较高
指标。 ➢ 与G试验和GM试验联合检测，实现真菌全面筛查。
真菌筛查试验——G试验
G试验是以真菌细胞壁特有的（1-3）-β-D葡聚糖为标记物的检测方法。
影像学检查
影像学检查特异性差 对IFD的诊断时间较晚 影像学检查对侵袭性真菌血流感染无诊断价值
基于血清学的非培养检测技术
抗原 检测
血清学检测
抗体 检测
（1-3）-β-D葡聚糖 （Glucan, G试验）
曲霉半乳甘露聚糖 (Galactomannan ,GM试验)
隐球菌荚膜多糖 （ GXM试验，ELISA，胶体金）
灵敏度 95% 86% 60%
特异性 99% 100% 100%
适用科室及临床意义
新型隐球菌感染可发生于全身多个部位，最常见的感染主要发生在中枢神经系统、肺 部、皮肤等。
适用科室及临床意义
〉 中枢神经系统隐球菌病-神经内科
隐球菌侵犯中枢神经系统最常见，包括脑膜炎或亚急性脑膜炎、散播型脑膜炎等。
临床症状：首发症状间歇性头痛、恶心及呕吐，伴低热、周身不适、精神不振 等非特异性症状。随病情发展，头痛渐加重转为持续性、精神异常、躁动不安， 严重者出现不同程度意识障碍。
时间（天）
20
➢ 入院至确诊侵袭性念珠菌感染
的时间中位数为15.5天
15
10
5
15.5
0
入院至确诊IFI 的中位数时间
10.0
➢ 入住ICU至确诊侵袭性念珠菌 感染的时间中位数为10.0天
入住ICU至确诊IFI 的中位数时间
Guo Fengmei, et al. J Antimicrob Chemother 2013 Jul; 68(7):1660-8.
念珠菌甘露聚糖 （Mannan, Mn试验）
曲霉菌 IgM/IgG抗体 （ELISA，胶体金）
念珠菌 IgM/IgG抗体 （ELISA，胶体金）
真菌筛查 曲霉菌 隐球菌 念珠菌 曲霉菌 念珠菌
隐球菌感染
隐球菌为圆形菌体，外周有荚膜， 内有反光孢子，但无菌丝。
隐球菌属已知有37个不同的种， 但具致病性的多为新型隐球菌， 其特点是菌体由一层很厚的多糖 荚膜所包被。
无名假丝酵母菌
侵袭性真菌感染(IFI)的诱因
1.
长期使用广谱抗生素
2. 抗肿瘤药物和免疫抑制剂治疗
3.
插管等侵袭性治疗
4.
骨髓和实体器官移植
5.
AIDS感染、基础类疾病
6.
使用使激用素激治素疗治的疗病的人病人
侵袭性真菌感染的特点
1
不产生内毒 素和外毒素
2
致病力一般 较弱，机体 免疫低下时
发生
3
早期症状无 特异性，往 往被原发病 掩盖，病程 长，发现较 晚，死亡率
新型隐球菌作为一种机会性感染真菌，主要侵犯免疫缺陷人群，如器官移植患者以及AIDS患 者及使用免疫抑制剂人群等。
适用科室及临床意义
➢ 荚膜多糖抗原是隐球菌特有的分泌物，是隐球菌感染确诊的依据。 ➢ 在感染的初期，荚膜多糖抗原就被检测到，因此是隐球菌病早期诊断的标志物。 ➢ 随着病情的发展，荚膜多糖抗原的含量会随之发生变化，还可作为病情监测的
新型隐球菌主要包括新生变种、 格特变种等
荚膜多糖抗原是隐球菌特有的分泌物，可以作为隐 球菌感染的诊断依据
传统检测手段
现有检测手段：
墨汁染色（菌体） 真菌培养（活菌） ELISA（荚膜多糖抗原） 乳胶凝集法（荚膜多糖抗原） 胶体金法 （荚膜多糖抗原）
1. 印度墨汁染色： 敏感性差，阳性检出率低
2. 脑脊液或血液培养（金标准）： 阳性检出率低，培养（2-10天）及鉴定时间长， 易误诊