c18色谱柱冲洗方法

c18色谱柱冲洗方法

C18色谱柱是一种常用于分离和纯化化合物的色谱柱。为了确保其最

佳效果和延长使用寿命，定期进行冲洗是必要的。下面将介绍C18色谱柱

常用的冲洗方法。

首先，为了减少样品残留和交叉污染，每次使用C18色谱柱之前，都

应该进行初期冲洗。一般来说，可以使用有机溶剂（如乙醇、醋酸乙酯等）进行30分钟的初始冲洗，以除去柱内的杂质和保留剂。

接下来是定期的背压测试。将高压端连接一个压力表，用缓冲溶液

（例如水/乙腈混合物）进行一段时间的流动，观察背压情况。如果背压

过高，可能意味着柱内部堵塞，需要进行彻底的冲洗。

彻底冲洗C18色谱柱时，可以选择不同的方法。以下是一些常用的冲

洗方法：

1.酸碱洗涤法：使用酸和碱溶液交替冲洗柱子。首先，用酸性溶液

（如1M的盐酸）冲洗1小时，然后用纯水冲洗至中性pH值。然后使用碱

性溶液（如1M的氢氧化钠）冲洗1小时，最后用纯水冲洗至中性pH值。

这种方法可以有效地去除有机污染物和离子。

2.有机溶剂洗涤法：使用强极性和非极性有机溶剂进行冲洗。首先，

用极性溶剂（如乙醇）冲洗1小时，然后用非极性溶剂（如甲苯）冲洗1

小时。这种方法适用于去除富集在柱内的极性和非极性杂质。

3.氨水洗涤法：在柱中注入5%氨水溶液，进行一段时间的洗涤，然

后进行纯水冲洗至中性pH值。这种方法适用于去除酸性物质和颗粒。

无论使用哪种冲洗方法，都应该始终检验冲洗效果。可以使用标准样品测试分离效果和恢复率，并使用色谱仪监测峰形和噪音水平。如果发现任何异常，可能需要重复冲洗步骤或更换色谱柱。

总结起来，C18色谱柱的冲洗方法包括初期冲洗、定期背压测试和彻底冲洗。彻底冲洗可以采用酸碱洗涤法、有机溶剂洗涤法或氨水洗涤法。通过定期冲洗，可以确保C18色谱柱的最佳性能和延长其使用寿命。