分子生物学试卷(含答案)
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大学分子生物学考试(试卷编号151)1.[单选题]决定各种蛋白质在细胞中的最终定位的是多肽链本身所具有的A)特定 氨基酸序列B)DNA序列C)RNA序列D)特定的氨基酸修饰答案:A解析:2.[单选题]在DNA损伤时激活,可诱导细胞凋亡或转录因子,被称为真核细胞基因组守护神的蛋白是( )A)p50B)p51C)p52D)p53答案:D解析:3.[单选题]DNA半保留复制使子代保留了亲代DNA的全部遗传信息,其表现形式是()A)DNA互补双链碱基序列的一致性B)代与代之间DNA碱基序列的一致性C)偶数链DNA碱基序列的一致性D)对应链DNA碱基序列的一致性答案:B解析:4.[单选题]核酸的紫外吸收性质是其中的碱基赋予的,最大吸收峰为_____nm。
A)230B)260C)280D)290答案:B解析:5.[单选题]在原核生物复制子中以下哪种酶除去RNA引发体并加入脱氧核糖核苷酸?A)DNA聚合酶IIIB)DNA聚合酶IIC)DNA聚合酶I6.[单选题]以下关于增强子的叙述错误的是A)增强子只在个别真核生物中存在,无普遍性B)增强子作用无方向性C)增强子无论在基因的上游或下游都对基因的转录具有增强作用D)增强子为基因表达正性调控的顺式作用元件答案:A解析:7.[单选题]DNA-pol Ⅲ合成DNA链的最高速度是()A)5 nt/秒;B)10 nt/秒;C)50 nt/秒;D)1000 nt/秒答案:C解析:8.[单选题]可美容美颜的胶原蛋白中脯氨酸或赖氨酸常发生下列哪种修饰A)甲基化B)羟基化C)羧基化D)乙酰化答案:B解析:9.[单选题]在培养TrpR缺失突变菌株的培养基中添加色氨酸,检测其TrpEDCBA五种蛋白的表达量,最可能得到的结果是 ( )A)五种蛋B)五种蛋C)五种蛋白的表达量变为0.D)五种蛋白中有的升高,有的降低。
答案:A解析:10.[单选题]下列组蛋白中,不参与形成组蛋白八聚体核心的是_______。
大学分子生物学考试(试卷编号121)1.[单选题]动物细胞mRNA的帽子结构通常的形式是A)m7ApppNmPB)m7GpppNmPC)m7GpNmPD)m7CpppNmP答案:B解析:2.[单选题]常染色质与异染色质的区别是A)染色质的折叠压缩程度不同B)基因的表达活性不同C)存在的位 置不同D)基因的数量不同答案:A解析:3.[单选题]人类线粒体基因组中A)产生唯一一个大的转录产物,然后剪接加工,释放出各种RNA分子B)几乎所有的DNA不编码基因产物C)大多数编码蛋白的基因产物是连续的D)几乎所有的编码蛋白质的基因都从不同的方向进行转录答案:C解析:4.[单选题]P53基因是一种:( )A)细胞原癌基因B)抑癌基因C)病毒癌基因D)操纵子调节基因答案:B解析:5.[单选题]DNA的二级结构是:A)螺旋B)β片层C)双螺旋结构D)超螺旋结构6.[单选题]外显子可( )A)促进DNA复制B)启动基因转录C)调节基因转录D)编码蛋白质答案:D解析:真核生物的基因为断裂基因,即外显子被内含子隔开,外显子即编码序列,内含子则在转录后加工过程中被切除。
故选D7.[单选题]组蛋白的乙酰化是表观遗传调控中的一种常见调控方式,下列关于它的作用正确的是A)激活基因表达B)抑制基因表达C)促进基因复 制D)抑制基因复 制答案:A解析:8.[单选题]mRNA5’端帽子结构为()。
A)pppmGB)GpppGC)m7GpppGD)GpppmG答案:C解析:9.[单选题]PCR合成的步骤不包括A)显色B)变性C)延伸D)退火答案:A解析:10.[单选题]可帮助转录因子可以探测到外部特殊信号,并传递给转录复合物的结构域为 ( )A)信号感应结构域B)DNA结合结构域C)效应器结构域D)多聚化结构域答案:A11.[单选题]染色体骨架的主要成分是A)组蛋白B)非组蛋白C)DNAD)RNA答案:C解析:12.[单选题]用作DNA合成的模板不包括 ()A)tRNAB)细菌染色体DNAC)病毒RNAD)线粒体DNA答案:A解析:13.[单选题]如果将色氨酸前导序列中的4个重要互补碱基序列按照5'-3'的方向依次编号为1、2、3和4,那么哪两段之间形成发夹结构后可以构成终止子? ( )A)1和4B)1和2C)2和3D)3和4答案:D解析:14.[单选题]催化真核生物mRNA生物合成的RNA聚合酶II对α-鹅膏覃碱A)不敏感B)敏感C)高度敏感D)低度敏感答案:C解析:15.[单选题]判断-种核酸是RNA还是DNA,其标准是A)戊糖的2'位OH是否脱氧B)是否含有UC)是否含有TD)能否形 成双螺旋答案:A解析:A)DNA序列没有变化但染色体变化产生的稳定可遗传的表型B)由DNA序列变化产生的稳定可遗传的表型C)染色体数量 变化产生的稳定可遗传的表型D)染色体倍数 变化产生的稳定可遗传的表型答案:A解析:17.[单选题]mRNA中的遗传信息可来自()。
大学分子生物学考试(习题卷9)第1部分:单项选择题,共79题,每题只有一个正确答案,多选或少选均不得分。
1.[单选题]DNA复制中RNA引物的主要作用是A)合成冈崎片段B)作为合成冈崎片段的模板C)为DNA合成原料dNTP提供3'-OH末端D)激活DNA聚合酶答案:C解析:2.[单选题]下列哪一项不是大肠杆菌RNA聚合酶全酶中的σ因子的功能?A)负责模板链的选择和转录的起始;B)启动子识别。
C)催化中心D)提高RNA聚合酶对启动子区DNA序列的亲和力答案:C解析:3.[单选题]tRNA的作用是()。
A)将一个氨基酸连接到另一个氨基酸上B)把氨基酸带到mRNA位置上C)将mRNA接到核糖体上D)增加氨基酸的有效浓度答案:B解析:4.[单选题]DNA复制时, 合成5'-TAGATCC-3'的互补序列是 ()A)5'-GGAUAGA-3'B)5'-GGAUCUA-3'C)5'-CCTAGAT-3'D)5'-GGATCTA-3'答案:D解析:5.[单选题]1953 年,James D . Wastson 和 Francis Crick 提出了 DNA 的双螺旋结构模型是 __。
A)A型B)B型C)C型D)Z型答案:B解析:6.[单选题]在乳糖操纵子调控模式中,乳糖或其类似物被称作 ( )D)阻遏蛋白答案:A解析:7.[单选题]组蛋白乙酰化的基团受体是A)精氨酸B)赖氨酸C)组氨酸D)丝氨酸答案:B解析:8.[单选题]染色体骨架的主要成分是A)组蛋白B)非组蛋白C)DNAD)RNA答案:C解析:9.[单选题]指导蛋白质合成的结构基因大多数为A)单拷贝序列B)中度重复序列C)高度重复序列D)回文结构答案:A解析:10.[单选题]关于DNA复制终止时叙述错误的为A)在DNA聚合酶II催化下切除RNA引物B)留下的空隙由DNA聚合酶催化合成一段DNA填补上C)在DNA连接酶作用下,连接相邻的DNA链;修复掺入DNA链的错配碱基D)以修复方式填补终止区50-100bp的空缺答案:A解析:11.[单选题]肾上腺素作用于受体后产生的第二信使是( )A)DAGB)cGMPC)两者均有D)两者均无答案:D解析:12.[单选题]关于基因的说法错误的是 ( )A)基因是贮存遗传信息的单位B)基因的一级结构信息存在于碱基序列中C)真核生物的基因是断裂基因13.[单选题]胰高血糖素的信号转导( )A)特异性受体位于靶细胞膜上B)可由G蛋白介导C)两者均有D)两者均无答案:C解析:14.[单选题]下列哪种RNA的拼接需要拼接体参与A)真核生物细胞mRNAB)线粒体mRNAC)rRNADD)tRNA答案:A解析:15.[单选题]如果以15N标记的DNA双链作模板,NH4Cl作氮源进行复制,对子一代DNA分子做密度梯度离心分析,其密度带应位于()A)重DNA带B)普通DNA带C)普通DNA带上方D)普通带与重DNA带之间答案:D解析:16.[单选题]组蛋白的乙酰化是表观遗传调控中的一种常见调控方式,下列关于它的作用正确的是A)激活基因表达B)抑制基因表达C)促进基因复 制D)抑制基因复 制答案:A解析:17.[单选题]规范化的临床基因扩增检验实验室工作区域不包括A)试剂储存和准备区B)标本制备区C)隔离区D)扩增区E)产物分析区答案:C解析:18.[单选题]关于基因表达调控的说法错误的是A)转录起始是调控基因表达的关键B)环境因素影响管家基因的表达C)在发育分化和适应环境上有重要意义D)表现为基因表达的时间特异性和空间特异性19.[单选题]人基因重组技术中使用质粒的主要目的是:( )A)促进宿主DNA合成器B)携带目的DNA进入受体细胞C)使宿主基因发生重组D)携带工具酶对宿主RNA剪切E)以上都不对答案:B解析:20.[单选题]PAGE最有效的分离范围为A)50bp~500bpB)500bp~5000bpC)5bp~500bpD)50bp~10MbE)300bp~30000bp答案:C解析:21.[单选题]由脱氧三核苷酸串联重复扩增而引起疾病的突变为A)移码突变B)动态突变C)片段突变D)转换E)颠换答案:B解析:22.[单选题]完整的无降解或降解很少的总RNA电泳图谱中,3个条带的荧光强度积分应呈特定的比值,下列表达错误的是A)沉降系数大的核酸条带分子量大,电泳迁移率低B)分子量小,电泳迁移率高,荧光强度积分低C)28SRNA的荧光强度比18SRNA的荧光强度高D)原核生物总RNA电泳结果,荧光强度由高到低为:23SRNA,16SRNA, 5SRNAE)RNA中以mRNA的含量为最多答案:E解析:23.[单选题]基因表达中的诱导现象是指( )A)阻遏物的生成B)细菌利用葡萄糖作碳源C)由底物的存在引起酶的合成D)细菌不用乳糖作碳源E)低等生物可以无限制地利用营养物答案:C解析:24.[单选题]下列哪一种结构与断裂基因的组成和功能的关系最小?D)冈崎片段E)倒位重复顺序答案:D解析:25.[单选题]PKA所磷酸化的氨基酸主要是( )A)酪氨酸B)甘氨酸C)酪氨酸/甘氨酸D)甘氨酸/丝氨酸E)丝氨酸/苏氨酸答案:E解析:26.[单选题]关于反转录酶的叙述错误的是( )A)作用物为四种dNTPB)催化RNA的水解反应C)合成方向3′→5′D)催化以RNA为模板进行DNA合成E)可形成DNA-RNA杂交体中间产物答案:C解析:27.[单选题]进行PCR 时,TaqDNA 聚合酶参与的步骤是A)变性B)解链C)退火D)解聚E)延伸答案:E解析:28.[单选题]β-氧化第一次脱氢反应的辅酶是A)NAD+B)NADP+C)FMND)FADE)TPP答案:D解析:29.[单选题]标记的参与杂交反应的核酸分子称为A)变性B)复性C)复杂性D)杂交E)探针答案:EA)长链和短链DNA的5端位置是固定的,短链3’端的位置是可变的B)长链和短链DNA的3’端位置是固定的,短链5’端的位置是可变的C)短链DNA的3’端位置是固定的,长链和短链5’端的位置是可变的D)短链DNA的5’端位置是固定的,长链和短链3’端的位置是可变的E)长链DNA的5’端位置是固定的,长链和短链3’端的位置是可变的答案:A解析:31.[单选题]影响DNA 分离纯化效果的是A)材料新鲜,低温保存B)加核酸酶抑制剂C)剧烈震荡D)除净蛋白质E)除净多糖答案:C解析:32.[单选题]与DNA结合并阻止转录进行的蛋白质称为( )A)正调控蛋白B)反式作用因子C)诱导物D)分解代谢基因活化蛋白E)阻遏物答案:E解析:33.[单选题]已知某mRNA的部分密码子的编号如下:127 128 129 130 131 132 133GCG UAG CUC UAA AGC UGA UUC以此mRNA为摸板,经翻译生成的多肽链含有的氨基酸数目为A)127B)128C)129D)130E)131答案:A解析:34.[单选题]关于反密码子的描述,正确的是( )A)由tRNA中相邻的3个核苷酸组成B)由mRNA中相邻的3个核苷酸组成C)由DNA中相邻的3个核苷酸组成D)由rRNA中相相邻的3个核苷酸组成E)由多肽链中相邻的3个氨基酸组成答案:A解析:35.[单选题]下列不属于分离纯化质粒DNA的方法的是D)SDS裂解法E)牙签少量裂解法答案:B解析:36.[单选题]细胞内受体的性质是:( )A)转录因子B)激素反应元件C)酪氨酸激酶D)表皮生长因子E)增强子答案:A解析:37.[单选题]mRNA的转录后加工不包括( )A)5’加入7-甲基鸟苷三磷酸B)3’端加 poly AC)切除内含子,连接外显子D)碱基修饰E)加CCA尾答案:E解析:38.[单选题]基因克隆所需DNA载体的最基本性质是A)青霉素抗性B)卡那霉素抗性C)自我复制能力D)自我转录能力E)自我表达能力答案:C解析:39.[单选题]一个原本应该转运半胱氨酸的tRNA(tRNAcys),活化时错误地携带上了丙氨酸,生成了ala-tRNAcys。
一、术语解释(20分,每题2分)1、操纵子2、增强子3、启动子4、内含子5、外显子6、顺式作用元件7、反式作用因子8、转录因子9、单顺反子mRNA 10、多顺反子mRNA二、选择题 (20分)1.指导合成蛋白质的结构基因大多数为: ( ) A.单考贝顺序 B.回文顺序 C.高度重复顺序 D.中度重复顺序2. 下列有关Shine-Dalgarno 顺序(SD-顺序)的叙述中错误的是: ( )A.在mRNA 分子的起始密码子上游7-12个核苷酸处的顺序B.在mRNA 分子通过SD 序列与核糖体大亚基的16s rRNA 结合C.SD 序列与16s rRNA 3'端的一段富含嘧啶的序列互补D. SD 序列是mRNA 分子结合核糖体的序列 3.原核生物中起始氨基酰-tRNA 是: ( ) A.fMet-tRNA B.Met-tRNA C.Arg-tRNA D.leu-tRNA4.下列有关TATA 盒(Hognessbox)的叙述,哪个是错误的: ( ) A. 保守序列为TATAAT B.它能和RNA 聚合酶紧密结合 C. 它参与形成开放转录起始复合体 D.它和提供了RNA 聚合酶全酶识别的信号 5. 一个mRNA 的部分顺序和密码的编号是 140 141 142 143 144 145 146 CAG CUC UAU CGG UAG AAC UGA以此mRNA为模板,经翻译生成多肽链含有的氨基酸为: ( )A.141B.142C.143D.1446. DNA双螺旋结构模型的描述中哪一条不正确:( )A.腺嘌呤的克分子数等于胸腺嘧啶的克分子数B.同种生物体不同组织中的DNA碱基组成极为相似C.DNA双螺旋中碱基对位于外侧D. 维持双螺旋稳定的主要因素是氢键和碱基堆集力。
7. DNA聚合酶III的描述中哪条不对:( )A.需要四种三磷酸脱氧核苷酸作底物B.具有5′→3′外切酶活性C. 具有5′→3′聚合活性D. 是DNA复制中链延长反应中的主导DNA聚合酶8.与mRNA的GCU密码子对应的tRNA的反密码子是: ( )A.CGAB.IGCC.CIGD.CGI9.组蛋白在生理pH条件下的净电荷是:()A. 正 B . 负 C. 中性 D. 无法确定10.转录需要的原料是( )A. dNTPB. dNDPC. dNMPD. NTP11.DNA模板链为 5’-ATTCAG-3 ’, 其转录产物是: ( )A. 5 ’ -GACTTA-3 ’B. 5 ’ -CTGAAT-3 ’C. 5 ’ -UAAGUC-3 ’D. 5 ’ -CUGAAU-3 ’12.DNA复制和转录过程有许多相同点,下列描述哪项是错误的? ( )A.转录以DNA一条链为模板,而以DNA两条链为模板进行复制B. 在这两个过程中合成均为5`-3`方向C. 复制的产物通常情况下大于转录的产物D. 两过程均需RNA引物13.下面那一项不属于原核生物mRNA的特征() A:半衰期短 B:存在多顺反子的形式C:5’端有帽子结构 D:3’端没有或只有较短的多聚A.结构14.真核细胞中的mRNA帽子结构是()A. 7-甲基鸟嘌呤核苷三磷酸B. 7-甲基尿嘧啶核苷三磷酸C. 7-甲基腺嘌呤核苷三磷酸D. 7-甲基胞嘧啶核苷三磷酸15.下面哪一项是对三元转录复合物的正确描述()A.σ因子、核心酶和双链DNA在启动子形成的复合物B.全酶、模板DNA和新生RNA形成的复合物C.三个全酶在转录起始点形成的复合物D.σ因子、核心酶和促旋酶形成的复合物16.下列哪组氨基酸只有一个密码子?() A.苏氨酸、甘氨酸B.脯氨酸、精氨酸C.丝氨酸、亮氨酸D.色氨酸、甲硫氨酸E.天冬氨酸和天冬酰胺17.tRNA分子上结合氨基酸的序列是()A.CAA-3′B.CCA-3′C.AAC-3′D.ACA-3′E.AAC-3′18.下列关于遗传密码的知识中错误的是() A.20种氨基酸共有64个密码子B.碱基缺失、插入可致框移突变C.AUG是起始密码D.一个氨基酸可有多达6个密码子19.下列不是蛋白质生物合成中的终止密码是( )。
分子生物学试卷(二)生分子生物学试卷(二)一、选择题,选择一个最佳答案(每小题1.5分,共30分)1.DNA双螺旋结构模型的描述中哪一条不正确:()A.腺嘌呤的克分子数等于胸腺嘧啶的克分子数B.同种生物体不同组织中的DNA碱基组成极为相似C.DNA双螺旋中碱基对位于外侧D.二股多核苷酸链通过A-T,C-T之间的氢键连接E.维持双螺旋稳定的主要因素是氢键和碱基堆集力。
2.有关DNA的变性哪条正确:()A.变性是分子中磷酸二酯键的断裂B.变性后紫外吸收增加C.变性后粘度增加D.热变性DNA速冷后可复性E.DNA分子开始变性的温度叫Tm3.DNA聚合酶III的描述中哪条不对:()A.需要四种三磷酸脱氧核苷酸作底物B.具有5′→3′外切酶活性C.具有3′→5′外切酶活性D.具有5′→3′聚合活性E.聚合反应需要引物4.有关反转录的正确叙述:()A.反转录反应不需要引物B.反转录后的产物是cDNAC.反转录的板可以是RNA,也可以是DNAD.合成链的方向是3′→5′E.反转录反应的底物是4种NTP。
5.有关蛋白质合成,下列哪条是错误的:()A.基本原料是20种氨基酸B.直接模板是mRNAC.合成的方向是从羧基端到氨基础D.是一个多因子参加的耗能过程E.是多聚核蛋白体循环6.在乳糖操纵子中,阻遏蛋白结合的是:()A.操纵基因B.调节基因C.启动基因D.结构基因E.终止基因7.氨基酸活化酶:()A.能识别一组同功tRNAB.催化磷酸二酯键的形成C.催化氨基酸结合到tRNAD.催化氨基酸的氨基与tRNA结合E.催化氨基酸的羧基与GTP反应8.稀有核苷酸含量最高的核酸是:()A.tRNAB.mRNAC.rRNAD.DNAE.hnRNA9.真核与原核细胞蛋白质合成的相同点是:()第 1 页共5 页A.翻译与转录偶联进行B.模板都是多顺反子C.转录后的产物都需要进行加工修饰D.甲酰蛋氨酸是第一个氨基酸E.都需要GTP10.与pCAGCT互补的DNA序列是:()A.pAGCTGB.pGTCGAC.pGUCGAD.pAGCUGE.pTCGAC11.色氨酸操纵子的调控需要:()A.增强子B.转录子C.衰减子D.顺反子E.调节子12.下列哪种氨基酸的密码子可作为起始密码:()A.甲硫氨酸B.S-腺苷蛋氨酸C.苯丙氨酸D.丙氨酸E.以上都不是,而是TAG13.真核细胞中mRNA的加工修饰不包括:()A.在mRNA3′末端另polyA尾B.mRNA的前体是核内hnRNAC.在mRNA5′端形成7甲基尿苷酸帽子结构D.除去非结构信息部分E.不同RNA片断之间的拼接14.真核生物基因组中没有:()A.内含子B.外显子C.转录因子D.插入序列E.高度重复序列15.DNA的半保留复制需要()A.核心酶和单链DNA结合蛋白B.模板DNA和四种NTPC.引物和RNA聚合酶D.DNA引物和连接酶E.冈崎片段和终止因子16.PCR实验的特异性主要取决于()A.DNA聚合酶的种类B.反应体系中模板DNA的量C.引物序列的结构和长度D.四种dNTP的浓度E.循环周期的次数17.RNA电泳转移后与探针杂交叫作:()A.SouthernblotB.NorthernblotC.WesternblotD.斑点杂交E.原位杂交18.对限制性核酸内切酶的作用,下列哪个不正确:()A.识别序列长度一般为4-6bpB.识别序列具有回文结构C.切割原核生物D分子D.只能识别和切割双链DNA分子E.只能识别和切割原核生物DNA分子19.在基因工程实验中,DNA重组体是指:()A.不同来源的的两段DNA单链的复性B.目的基因与载体的连接物C.不同来原的DNA分子的连接物D.原核DNA与真核DNA的连接物E.两个不同的结构基因形成的连接物20.对基因工程载体的描述,下列哪个不正确:()A.都可以转入宿主细胞B.都有限制性核酸内切酶的识别位点C.都可以连接进目的基因D.都是环状双链DNA分子E.都有筛选标志二、简答题(每题5分,共40分)1.衰减子2.DNA拓扑异构酶3.基因表达4.前导肽5.启动子6. DNA分子克隆技术7.G蛋白8.受体型酪氨酸激酶三、论述题(每题10分,共30分)1.操纵子中的诱导剂和辅阻遏对基因表达的调控有何不同?2.细胞内第二信使包括哪些物质?它们是怎样产生的,有何作用?3.PCR和细胞内DNA复制两者有哪些主要的相同点和不同点?参考答案一、选择题,选择一个最佳答案(每小题1.5分,共30分)1.D;2.B;3.A;4.A;5.A;6.C;7.C ;8.C ;9.B;10.E二、填空题(每题1分)1.质粒DNA具有三种不同的构型分别是:(SC构型)、(oc构型)、(L构型)。
分子生物学试题及答案一、选择题1. 核酸是所有生物体的遗传物质,以下哪项不是核酸的基本组成单位?A. 腺苷B. 胞嘧啶C. 脱氧核糖D. 磷酸基团2. 在DNA双螺旋结构中,两条互补链之间是通过什么方式连接的?A. 氢键B. 疏水作用C. 离子键D. 共价键3. 以下哪种酶能够在DNA复制过程中加入新的核苷酸?A. 解旋酶B. 聚合酶C. 连接酶D. 切割酶4. 转录过程中,RNA聚合酶催化合成的RNA链是:A. 从3'端到5'端B. 从5'端到3'端C. 双向合成D. 环状合成5. 在蛋白质合成过程中,哪种RNA负责携带氨基酸进入核糖体?A. rRNAB. mRNAC. tRNAD. snRNA6. 以下哪项不是真核生物细胞质中核糖体的组成成分?A. 核糖B. 蛋白质C. mRNAD. 转运RNA7. 逆转录是指:A. RNA转录成DNA的过程B. DNA复制的过程C. RNA翻译成蛋白质的过程D. DNA转录成RNA的过程8. 以下哪种技术常用于检测基因的表达?A. PCRB. DNA测序C. Northern BlotD. Western Blot9. 基因突变中,哪种类型的突变会导致氨基酸序列的移码?A. 点突变B. 插入突变C. 缺失突变D. 沉默突变10. 以下哪个不是蛋白质纯化的方法?A. 离子交换层析B. 凝胶渗透层析C. 亲和层析D. 核磁共振二、填空题1. 核酸根据五碳糖的不同可以分为______和______。
2. DNA的二级结构是______,其特点包括两条互补链的______和______。
3. 在蛋白质合成中,终止密码子包括______、______和______。
4. 逆转录酶的化学本质是______,它是由______病毒携带的。
5. 核糖体是蛋白质合成的场所,它由______和______两部分组成。
三、简答题1. 请简述DNA复制的三个主要步骤。
生物技术专业《分子生物学教程》参考试卷及答案一、名词解释(共10小题,每小题2分,共20分)1、反式作用因子:能从合成地点扩散到其他场所对其他基因的表达起调控作用的蛋白质因子(有时为RNA)。
2、转座子:在基因组中可以移动的一段DNA序列。
3、SOS反应:许多能造成DNA损伤或抑制DNA辅助的过程能引起一系列复杂的诱导效应,这种效应称为应急反应。
4、操纵子:是原核生物在分子水平上基因表达调控的单位,由调节基因、启动子、操纵基因和结构基因等序列组成。
5、CAP位点:在研究E.coli乳糖操纵子时发现,只有当cAMP-CAP复合物结合与启动子上游区域的CAP位点时,-10区序列解开,lac启动子才能形成开放起始复合物,否则不能起始转录。
6、重叠基因:不同的基因共用一段核苷酸序列,按照不同的可读框进行转录的现象。
7、兼性异染色质:指在一定的细胞类型或一定的发育阶段呈现凝集状态的异染色质。
8、终止子:使转录终止的一段DNA序列。
9、复制子:基因组内能够独立复制的单位。
10、Klemow片段:用蛋白水解酶将DNApolⅠ有限水解,可得到大小两个片段,大片段称为Klemow片段。
二、填空题(共5小题,每空1分,共25分)1、真核生物的mRNA加工过程中,5’在3’端加上如果被转录基因是不连续的,2、原核生物每次肽链延伸的循环需要3个延伸因子2分mRNA3能提供转录停止信号的DNA RNA聚合酶识别终止信号的蛋有些终止子的作用可而被特异因子阻止,使酶能越过终止子继续4、真核生物的DNA5、写出下列英文缩写代表的含义:三、单项选择题(共10小题,每小题1分,共10分)1、下面哪一种是细胞内生物大分子(A)A、核酸B、有机酸C、硫酸D、脂肪酸2、在蛋白质中,二级结构指的是(C)A、氨基酸线性顺序B、多肽链中所有原子的三维结构C、肽链的折叠和多肽间的相互作用D、组成多聚蛋白质的多肽链之间的相互作用3、当一条多肽链被核糖体合成是(C)A、它经常立刻折叠成功能结构B、它经常与分子伴侣相互作用在其指导下进行折叠C、通常与分子伴侣作用并在其指导下折叠或保持可以进行转位的构象D、通常与分子伴侣相互作用,而若蛋白质是酶则分子伴侣会成为功能结构的一部分4、氨酰tRNA的作用由(B)决定A、其氨基酸B、其反密码子C、其固定的碱基区D、氨酰tRNA合成酶的活性5遗传密码是以(D)形式存在的A、四联体B、二联体、C、五联体D、三联体6、真核复制子有下列哪些特性?(B)A、由于存在终止序列,所以比原核复制子短的多B、由于基因组较大,所以比原核复制要长得多C、常是双向复制,且能融合D、全部立刻激活,确保S期中整条染色体被复制7、σ因子和DNA之间相互作用的最佳描述是(C)A、游离的和与DNA结合的σ因子的数量是一样的,而且σ因子合成的越多,转录其实的机会就越大B、σ因子通常与DNA结合,且沿着DNA搜寻,直到在启动子碰到核心酶,它与DNA的结合不需依靠核心酶C、σ因子通常与DNA结合,且沿着DNA死讯,直到碰到启动子,在有核心酶存在的时候与之结合D、σ因子是DNA依赖的RNA聚合酶的固有成分,它识别启动子固有成分,且与全酶结合8、下列叙述不正确的是(A)A、共有20个不同的密码子代替遗传密码B、每个核苷酸三联体编码一个氨基酸C、不同的密码子可能编码同一个氨基酸D、密码子的第三位具有可变性9、起始因子IF-3的功能是(B)A、如果同40S亚基结合,将促进40S与60S亚基的结合B、如果同30S亚基结合,将促进30S与50S亚基的结合C、如果同30S亚基结合,促使30S亚基的16SrRNA与mRNA的SD序列相互作用D、直到起始tRNA进入30S亚基中与mRNA结合的P位点10、反密码子中哪个碱基对参与了密码子的简并性(摇摆)(A)A、第一个B、第二个C、第三个D、第一个和第二个四、判断题(每个1分)1、依赖DNA的DNA聚合酶是多亚基酶,它负责DNA的转录。
《分⼦⽣物学》试卷(基因表达的调控)《分⼦⽣物学》试卷(基因表达的调控)(课程代码)班级姓名学号⼀、名词解释(每⼩题﹡分,共﹡分)1.基因表达(gene expression)2.启动⼦(promoter)3.多顺反⼦(polycistron)4.操纵⼦(operon)5.单顺反⼦(monocistron)6.顺式作⽤元件(cis-acting element)7. 核⼼启动⼦(core promoter)8. 上游启动⼦元件(upstream promoter element, UPE)9. 增强⼦(enhancer)10. 沉默⼦(silencer)11. 反式作⽤因⼦(trans-acting factor)12. 转录因⼦(transcription factor, TF)13. 锌指结构(zinc finger structure)14. 同源结构域(homeodomain, HD)15. 碱性亮氨酸拉链(basic leucine zipper, bLZ)16. 转录活化结构域(transcription activation domain)17. 选择性剪接(alternative splicing)18. 核不均⼀性RNA(heterogeneous nuclear RNA, hnRNA)⼆、单项选择题(从下列各题所给备选答案中选出⼀个正确的答案,并将其序号填在题⼲后的括号内。
1. 下列哪项是属于乳糖操纵⼦的转录调控序列( C )A. ZB. YC. OD. AA. 包括基本和特异性转录因⼦B. 通常含有DNA结合结构域C. 基因组上⼀段DNA序列D. 通常还有与其它蛋⽩结合的结构域E. 含有转录活化域3. 下列哪项不属于真核基因转录调控的顺式作⽤元件( D )A. 启动⼦B. 增强⼦C. TATA 盒D. ⼀种RNAE. 沉默⼦4. 有关基因表达描述错误的是( A )A. 其过程总是经历基因转录及翻译的过程B. 某些基因表达经历基因转录及翻译等过程C. 某些基因表达产物是蛋⽩质分⼦D. 某些基因表达产物不是蛋⽩质分⼦E. 某些基因表达产物是RNA分⼦5. 关于管家基因叙述错误的是( C )A.在⽣物个体的⼏乎所有细胞中持续表达B.在⽣物个体的⼏乎各⽣长阶段持续表达C.在⼀个物种的⼏乎所有个体中持续表达D.在⽣物个体的某⼀⽣长阶段持续表达E.在⽣物个体全⽣命过程的⼏乎所有细胞中表达6. ⼤多数基因表达调控的最基本环节是(C)A. 复制⽔平B. 转录⽔平C. 转录起始⽔平D. 转录后加⼯⽔平E. 翻译⽔平7.当培养基内⾊氨酸浓度较⼤时,⾊氨酸操纵⼦处于( B )A. 诱导表达B. 阻遏表达C. 基本表达8. 顺式作⽤元件是指( E )A. 基因的5侧翼序列B. 基因的3侧翼序列C. 基因的5、3侧翼序列D. 基因5、3侧翼序列以外的序列E. 具有转录调节功能的特异DNA序列10. ⼀个操纵⼦通常含有( B )A. ⼀个启动序列和⼀个编码基因B. ⼀个启动序列和数个编码基因C. 数个启动序列和⼀个编码基因D. 数个启动序列和数个编码基因E. 两个启动序列和数个编码基因11. 反式作⽤因⼦是指( D )A. 具有激活功能的调节蛋⽩B. 具有抑制功能的调节蛋⽩C. 对⾃⾝基因具有表达调控的蛋⽩D. 对另⼀基因具有表达调控的蛋⽩E. 对另⼀基因具有功能的调节蛋⽩12. 乳糖操纵⼦的直接诱导剂是( E )A. β-半乳糖苷酶B. 透酶C. 葡萄糖D. 乳糖E. 别乳糖13. 阻遏蛋⽩结合乳糖操纵⼦的( B )A、P序列B、O序列C、CAP结合位点D、I基因E、Z基因14. 乳糖操纵⼦的阻遏蛋⽩是由( D )A、2基因编码B、Y基因编码E、以上都不是15. 对⼤多数基因来说,CpG序列甲基化( A )A、抑制基因转录B、促进基因转录C、与基因转录⽆关D、对基因转录影响不⼤E、以上都不是16. ⼤肠杆菌转录启动⼦-10区的核苷酸序列称为( E )A. TATA盒B. CAAT盒C. 增强⼦D. 调节⼦E. Pribnow盒17. 别乳糖对乳糖操纵⼦的作⽤是( C )A. 作为阻遏物结合于操纵基因B. 作为辅阻遏物结合于阻遏蛋⽩C. 使阻遏蛋⽩变构⽽不能结合DNAD. 抑制阻遏基因的转录E. 使RNA聚合酶变构⽽活化18. 有关操纵⼦学说的正确论述是( B )A. 操纵⼦调控系统是真核⽣物基因调控的主要⽅式B. 操纵⼦调控系统是原核⽣物基因调控的主要⽅式C. 操纵⼦调控系统由结构基因、启动⼦和操纵基因组成D. 诱导物与操纵基因结合启动转录E. 诱导物与启动⼦结合⽽启动转录19. 属于反式作⽤因⼦的是( E )A. 启动⼦B. 增强⼦C. 终⽌⼦D. RNA聚合酶E. 转录因⼦20. 乳糖操纵⼦上Z、Y、A基因产物是( B )A. 脱氢酶、黄素酶、CoQB. β-半乳糖苷酶、渗透酶、硫代半乳糖苷⼄酰转移酶E. 乳糖酶、乳糖磷酸化酶、激酶21. RNA聚合酶结合于操纵⼦的( E )A. 结构基因起始区B. 阻遏物基因C. 诱导物D. 阻遏物E. 启动⼦22. 诱导乳糖操纵⼦转录的物质是( D )A. 果糖B. 葡萄糖C. 阿拉伯糖D. 别乳糖E. AMP21. cAMP对转录的调控作⽤是通过( C )A. cAMP转变为CAPB. CAP转变为cAMPC. 形成cAMP-CAP复合物D. 葡萄糖分解活跃,使cAMP增加,促进乳糖利⽤来扩充能源E. cAMP是激素作⽤的第⼆信使,与转录⽆关22. 增强⼦是( D )A. 特异性⾼的转录调控因⼦B. 真核⽣物细胞内的组蛋⽩C. 原核⽣物的启动⼦在真核⽣物中的别称D. 增强启动⼦转录活性的DNA序列E. 在结构基因的5'-端的DNA序列23. 下列哪些不是操纵⼦的组成部分( A )A. 阻遏蛋⽩B. 启动⼦C. 操纵基因D. 结构基因E. Pribnow盒24. 转录前起始复合物是指( C )A. RNA聚合酶与TATAAT序列结合D. σ因⼦与RNA聚合酶结合E. 阻遏物变构后脱离操纵基因复合物25. 下述关于管家基因表达的描述最确切的是(B)A. 在⽣物个体的所有细胞中表达B. 在⽣物个体⽣命全过程⼏乎所有细胞中持续表达C. 在⽣物个体⽣命全过程部分细胞中持续表达D. 特定环境下,在⽣物个体⽣命全过程⼏乎所有细胞中持续表达E. 特定环境下,在⽣物个体⽣命全过程部分细胞中持续表达。
《分子生物学》期末试卷(A)一、术语解释(20分,每题2分)1、cDNA2、操纵子3、启动子4、内含子5、信号肽6、单顺反子mRNA7、顺式作用元件8、复制叉9、密码子的简并性10、转录因子二、选择题(20分)1.指导合成蛋白质的结构基因大多数为: ( ) A.单考贝顺序 B.回文顺序C.高度重复顺序D.中度重复顺序2. 下列有关Shine-Dalgarno顺序(SD-顺序)的叙述中错误的是: ( )A.在mRNA分子的起始密码子上游7-12个核苷酸处的顺序B.在mRNA分子通过SD序列与核糖体大亚基的16s rRNA结合C.SD序列与16s rRNA 3'端的一段富含嘧啶的序列互补D. SD序列是mRNA分子结合核糖体的序列3.原核生物中起始氨基酰-tRNA是: ( )A.fMet-tRNAB.Met-tRNAC.Arg-tRNAD.leu-tRNA4.下列有关TATA盒(Hognessbox)的叙述,哪个是错误的: ( )A. 保守序列为TATAATB.它能和RNA聚合酶紧密结合C. 它参与形成开放转录起始复合体D.它和提供了RNA聚合酶全酶识别的信号5. 一个mRNA的部分顺序和密码的编号是140 141 142 143 144 145 146CAG CUC UAU CGG UAG AAC UGA以此mRNA为模板,经翻译生成多肽链含有的氨基酸为: ( )A.141B.142C.143D.1446. DNA双螺旋结构模型的描述中哪一条不正确:( )A.腺嘌呤的克分子数等于胸腺嘧啶的克分子数B.同种生物体不同组织中的DNA碱基组成极为相似C.DNA双螺旋中碱基对位于外侧D. 维持双螺旋稳定的主要因素是氢键和碱基堆集力。
7. DNA聚合酶III的描述中哪条不对:( )A.需要四种三磷酸脱氧核苷酸作底物B.具有5′→3′外切酶活性C. 具有5′→3′聚合活性D. 是DNA复制中链延长反应中的主导DNA聚合酶8.与mRNA的GCU密码子对应的tRNA的反密码子是: ( )A.CGAB.IGCC.CIGD.CGI9.组蛋白在生理pH条件下的净电荷是:()A. 正 B . 负 C. 中性 D. 无法确定10.转录需要的原料是( )A. dNTPB. dNDPC. dNMPD. NTP11.DNA模板链为 5’-ATTCAG-3 ’ , 其转录产物是: ( )A. 5 ’ -GACTTA-3 ’B. 5 ’ -CTGAAT-3 ’C. 5 ’ -UAAGUC-3 ’D. 5 ’ -CUGAAU-3 ’12.DNA复制和转录过程有许多相同点,下列描述哪项是错误的? ( )A.转录以DNA一条链为模板,而以DNA两条链为模板进行复制B. 在这两个过程中合成均为5`-3`方向C. 复制的产物通常情况下大于转录的产物D. 两过程均需RNA引物13.下面那一项不属于原核生物mRNA的特征()A:半衰期短 B:存在多顺反子的形式C:5’端有帽子结构 D:3’端没有或只有较短的多聚A.结构14.真核细胞中的mRNA帽子结构是()A. 7-甲基鸟嘌呤核苷三磷酸B. 7-甲基尿嘧啶核苷三磷酸C. 7-甲基腺嘌呤核苷三磷酸D. 7-甲基胞嘧啶核苷三磷酸15.下面哪一项是对三元转录复合物的正确描述()A.σ因子、核心酶和双链DNA在启动子形成的复合物B.全酶、模板DNA和新生RNA形成的复合物C.三个全酶在转录起始点形成的复合物D.σ因子、核心酶和促旋酶形成的复合物16.下列哪组氨基酸只有一个密码子?()A.苏氨酸、甘氨酸B.脯氨酸、精氨酸C.丝氨酸、亮氨酸D.色氨酸、甲硫氨酸E.天冬氨酸和天冬酰胺17.tRNA分子上结合氨基酸的序列是()A.CAA-3′B.CCA-3′C.AAC-3′D.ACA-3′E.AAC-3′18.下列关于遗传密码的知识中错误的是()A.20种氨基酸共有64个密码子B.碱基缺失、插入可致框移突变C.AUG是起始密码D.一个氨基酸可有多达6个密码子19.下列不是蛋白质生物合成中的终止密码是( )。
分子生物学课程考试试卷(A)考试时间:;考试对象:;考试方式:闭卷;总分:100分注意:所有答案写在答题纸上!一、名词解释(共10小题,每小题2分,共20分)1.基因:产生蛋白质或RNA等具有特定功能产物所必须的全部DNA序列。
2.引物:为DNApol提供游离羟基作为复制起点的物质,一般是RNA。
3.弱化子:是指原核生物操纵子中能显著减弱甚至终止转录作用的一段核苷酸序列,该区域能形成不同的二级结构,利用原核微生物转录与翻译的偶联机制对转录进行调节。
4.辅阻遏物:能够结合或者激活转录阻遏蛋白,从而阻碍基因的转录和抑制蛋白质合成的小分子物质。
5.安慰诱导物:能诱导酶的合成,但又不被分解的分子,称为安慰诱导物(gratuitous inducer)。
6.开放阅读框架(ORF):是结构基因的正常核苷酸序列,从起始密码子到终止密码子的阅读框可编码完整的多肽链,其间不存在使翻译中断的终止密码子。
7.终止子:常指转录终止子,是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列。
转录成RNA可形成茎-环结构序列。
在大肠杆菌中有依赖于ρ或不依赖于ρ的两类终止子。
8.校正tRNA:反密码子突变的tRNA,能校正阅读框架中密码子的点突变。
9.RNA剪接:除去初级转录产物中的内含子,并将外显子连接起来,形成成熟的RNA分子的过程。
10. S-D序列:原核生物mRNA中位于起始密码AUG上游7-12个核苷酸处的一个富含嘧啶的短片段叫做S-D序列。
这段序列正好与30S小亚基中的16S rRNA3’端一部分序列互补,一致序列是AGGAGG。
二、单项选择题(选出最合适的答案,共20小题,每题1分,共20分)1~5 BBBCB 6~10DDDAA 11~15DDDCC 16~20CDBBC三、判断题(错的在括号里打×,否则打√,共10小题,每题1分,共10分)1~5 ××√××;6~10 ××√√×四、简答题(共12小题,选做9小题,每题4分,共36分)1、简述真核生物染色体DNA的序列类型及其特点。
分子生物学试卷
姓名:__________ 考试时间:_______ ___
一、填空题,根据题意,将正确答案补充完整(本大题满分20分,每小题2分)
1. 反式作用因子可划分为( )、组织特异性转录因子和
( )三类。
2. 分子克隆中常用的工具酶有( )、( )、
( )、( )。
3. 常用的核酸探针包括( )、( )和( )。
4. 限制性核酸内切酶的作用特点是识别位点的DNA序列呈二重旋转对称,即具有( )、切割DNA均产生含( )和3'-羟基的末端、错位切割产生具有5'-或3'-突出的粘性末端;而沿对称轴切割双链DNA产生平头末端,也称( )、少数不同的限制酶可识别和切割相同的( )。
5. 顺式作用元件按功能可划分为( )、( )、( )和( )。
6. 影响PCR的因素有( )、( )、耐热DNA聚合酶活性和用量、( )、( )、PH、温度、( )。
7. 原核细胞中各种RNA是催化一种酶催化( )种RNA生成的,而真核细胞基因的转录分别由( )种RNA聚合酶催化,其中rRNA基因由( )转录,hnRNA基因由
( )转录,各类小分子量RNA则是( )的产物。
8. 体外重组常用方法有( )、平齐末端连接法、( )、( )和适配子连接法。
9. DNA切除修复需要的酶有( )、 ( )、( )。
10. PCR技术的基本过程是( )、( )、( )。
二、判断题,以下各题只有对错两个选项(本大题满分10分,每小题1分)
1. Km值是酶的特性常数之一,与酶的浓度、pH、离子强度等条件或因素无关。
( )
2. 有两个核酸制剂A和B,A的A250/A280=2.0,B的A250/A280=1.5,因此可判定制剂A的纯度比制剂B的要高。
( )
3. 卫星DNA是一类高度重复序列,通常由串联重复序列组成。
( )
4. 目前已知的G蛋白都是由α和βγ亚基组成的。
( )
5. 生物膜中脂质的流动性受胆固醇含量的影响。
( )
6. 可逆性膜锚定与蛋白激酶参与的信号转到有关,而与G蛋白(如Ras)参与的信号转导无关。
( )
7. 端粒的序列在同一细胞各条染色体上都是相同的。
( )
8. 能被某种振奋分子识别,并与其特异和共价结合的原子,原子团和分子,称为配基。
( )
9. 人是最高等生物,其基因组的碱基对数目(2.9*10#9)是动物界中最大的。
( )
10. Na+,K+-ATP酶在水解一分子ATP时使2个K+由细胞外进入细胞内,同时使2个Na+由细胞内达到细胞外。
( )
三、单选题,以下各题有多个选项,其中只有一个选项是正确的,请选择正确答案(本大题满分10分,每小题1分)
1. 大肠杆菌DNA连接酶只能连接:( )
A. 粘性末端
B. 平头末端
C. 3'-磷酸
D. 5'-羟基
2. 下述化合物中不属于胆固醇衍生物的是:( )
A. 雌性激素
B. 前列腺素
C. 黄体酮
D. 胆酸
3. 在DNA重组过程中,RecA蛋白能促进交换的DNA是:( )
A. 同源单链DNA与双链DNA
B. 同源单链与双链子DNA
C. 同源双链DNA
D. 同源单链DNA
4. 人类某些神经系统疾病主要与下列那种核苷酸序列的不正常扩增有关:( )
A. 具有回文结构的六核苷酸序列
B. SINE序列
C. CpG序列
D. 三核苷酸序列
5. 鞘磷脂分子的代谢不产生:( )
A. 磷脂酰肌醇
B. 鞘胺醇
C. 乙酰胆碱。
D. 神经酰胺
6. 遗传学的三大定律是:( )
A. 重排定律.突变定律.减数分裂定律
B. 隐性定律.自由组合定律.独立分配定律
C. 连锁定律.分离定律.独立分配定律
D. 质量性状定律.数量性状定律.混合性状定律
7. 反密码子为IGC,可识别密码子:( )
A. GCG
B. GCA
C. ACG
8. B型右旋DNA的螺旋距比Z型左旋DNA:( )
A. 小
B. 相同
C. 大
9. M13噬菌体是:( )
A. 单链DNA噬菌体
B. RNA噬菌体
C. 双链DNA噬菌体
D. 都不是
10. 细胞色素C的Pi:( )
A. 6-7
B. <6
C. >8
D. 7-8
四、名词解释(本大题满分20分,每小题5分)
1. 基因表达:
2. 增强子:
3. 锌指:
4. 基因工程:
五、简答题(本大题满分20分,每小题10分)
1. 何谓载体?分子克隆中常用的载体有哪些?理想的载体应具备哪些条件?
2. 何谓PCR?试述PCR基本技术原理和影响因素。
六、论述题(本大题满分20分)
0. 试述PCR基本技术过程中引物设计的原则。
《分子生物学试卷》答案
一、填空题
1.(通用转录因子),(诱发性反式作用因子)
2.(限制性核酸内切酶),(dna聚合酶),(dna连接
酶),(dna修饰酶) 3.(寡核苷酸探针),(双链探针),(单链探针) 4.(迥文结构),(5'-磷酸),(钝
性末端),(位点) 5.(启动子),(增强子),(终止子),(沉默子\衰减子) 6.(引物),(模板),(dntp
质量和浓度),(mg离子浓度),(循环次数) 7.(3),(3),(rna聚合酶i),(rna聚合酶ii),(rna的转录
加工) 8.(粘性末端连接法),(人工接头连接法),(同聚物加尾法) 9.(核酸内切酶),(dna聚合酶
i),(dna连接酶) 10.(高温变性),(低温退火),(中温延伸)
二、判断题
1.×
2.√
3.√
4.×
5.√
6.√
7.√
8.×
9.× 10.×
三、单选题
1.A
2.B
3.A
4.D
5.A
6.C
7.B
8.A
9.A 10.C
四、名词解释
1.基因表达是指原核生物和真核生物基因组中特定的结构基因所携带的遗传信息,经过转录、翻译等一系列过程,合成具有特定的生物学功能的各种蛋白质。
表现出特定的生物学效应的全过程。
2.指位于启动子上游或下游并通过启动子增强邻近基因转录效率的DNA顺序,增强子本身不具备启动子活性。
3.指含有一段保守氨基酸顺序的蛋白质与该蛋白的辅基锌螫合而形成的环状结构,分为锌指、锌扭(twist)和锌簇(cluster)结构。
4.有目的的通过分子克隆技术,人为的操作改造基因,改变生物遗传性状的系列过程。
五、简答题
1.载体:指能够将外源性DNA片段引入宿主细胞并能在宿主细胞中进行自我复制或最终使外源性DNA 表达的自主DNA。
常用的载体有:质粒、噬菌体、粘粒、病毒、人工染色体
理想载体条件:1、在宿主细胞中有自我复制能力2、拷贝数多3、应具有筛选标志4、有RE切割位点5、分子量不宜过大6、最好配备有调控元件7、载体DNA与宿主DNA容易分开 2.PCR是一种体外扩增特异片段的技术,其原理类似DNA的体内扩增。
它包括:高温变性(90-97°C)低温退火(45-55°C)中温延伸(72度左右)。
变性:待扩增的DNA模板加热变形成单链;退火:降低温度,是单链靶序列与寡核苷酸引物退火;延伸:在适当条件下,利用DNA聚合酶使引物延伸,产生新的双链。
这三个基本步骤重复循环,导致特异的靶序列的指数扩增。
影响PCR反应五要素:引物TaqDNA聚合酶Dntp模板和二价Mg离子。
六、论述题
0. A引物的长度;一般15-30BP,常用20MER
B引物扩增跨度:以500BP为宜,特定重要条件下可扩增长至10KP的片段
C引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌吟或嘧啶核苷酸的成串排列
D避免引物内部出现二级结构:避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异性的扩增条物
E引物3'端的碱基必须与模板严格配对,特别是最末及倒数第二个碱基,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败
F偿还物中有或能加上合适的酶切位点
G被扩增的靶序列最好有适[宜的酶切点,这对酶切分析或分子克隆很有好处
H引物量:每条引物的浓度0.1---1UMOL/L,以最低引物量产生所需的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体有机会
I引物的特异性:引物与非特异扩增序列的同源性应小于70%或少于连续8个的互补碱基。