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毛细管电泳_电喷雾质谱联用中缓冲液pH对质谱检测灵敏度的影响

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毛细管电泳出现问题分析

毛细管电泳出现问题分析

一、无样品峰出现A、检查电流是否稳定：①没有电流。

可能原因——毛细管堵塞或断裂。

解决方法——用水冲洗毛细管，并观察是否有水流出，若无水流出请拆下卡盒检查毛细管两端和窗口是否断裂；毛细管没有断裂的话可以用水反向高压冲洗以试图解决此问题。

缓冲溶液需要过滤，将样品过滤或者离心去除其中的颗粒。

②电流波动很大，直至几乎消失。

可能原因——缓冲溶液中有气泡产生或者区带中样品析出。

解决方法——将缓冲溶液超声脱气，如果还有此现象发生，则可能是样品区带有析出，可以通过降低样品浓度/延长ramptime来试图解决这一问题；对于在缓冲溶液中溶解度不高的样品则需要在缓冲溶液中加入添加剂以解决此问题。

③电流初始值较小，后逐渐增大。

可能原因——样品进样量过大。

解决方法——减少进样量，通常进样参数设置在0.5psi,5sec 左右。

④电流正常。

可能原因：a样品浓度过低：使用高浓度样品测试，如果无法解决则有可能是以下其他原因。

b检测波长设置不正确：请确认被分析物的特征吸收，检查方法中的检测波长设置。

c分离极性错误：对于蛋白样品，请注意蛋白在分离条件下其PI及所带电荷；对于核酸样品，通常条件下会带负电荷。

d样品在毛细管内壁吸附：对于蛋白及核酸样品应尽量采用涂层毛细管分离，或采用极端pH条件或动态涂层防止样品吸附。

e光学检测器或光纤损坏：进行标准样品的测试，如果没有对应的结果出现，则有可能存在硬件问题，请联系工程师。

B、检查毛细管窗口，是否有透明窗口：可能原因——忘记开毛细管窗口或窗口位置不正。

解决方法——重新开毛细管检测窗口，或将窗口调整到正确位置。

二、样品峰出现拖尾可能原因——样品在毛细管内壁吸附。

解决方法——对于蛋白及核酸样品应尽量采用涂层毛细管分离，或采用极端pH条件或动态涂层防止样品吸附。

三、样品峰形不对称A、检查毛细管入口：可能原因——毛细管入口切口不平齐。

解决方法——重新切割毛细管入口，注意毛细管切割方法，不可以用力过猛或反复刮擦。

高效毛细管电泳联用电喷雾-质谱法研究新型抗癌铂配合物的稳定性

高效毛细管电泳联用电喷雾-质谱法研究新型抗癌铂配合物的稳定性

高效毛细管电泳联用电喷雾-质谱法研究新型抗癌铂配合物的稳定性苏强;刘清飞;吴娟芳;王义明;毕开顺;刘伟平;罗国安【期刊名称】《分析化学》【年(卷),期】2007(35)12【摘要】研究了新型抗癌铂配合物3,5-二异丙基水杨酸-1,2-环己二胺合铂(Ⅱ)(SM54111)在溶液中的稳定性.采用高效毛细管电泳(HPCE)法,分离在pH 3.7～9.0的缓冲液中铂配合物与其降解产物,联用电喷雾质谱(ESI-MS/MS)检测,确证降解产物的结构.结果表明,SM54111溶液,在pH 5.0～9.0时基本稳定,pH《5.0时发生解离反应.证实该新型抗癌铂配合物SM54111在生理pH范围的溶液中稳定.在pH 4.5时,以SM54111色谱峰面积计算,得到降解反应速率常数K＝0.133 h-1,半衰期t1/2＝5.6 h.降解产物为母体化合物PtO键水解断裂的单齿水杨酸-Pt配合物,同时观察到Pt配合物的新裂解方式,可以经过亲柱攻击和重排反应同时脱去2个中性分子(C2H7N和H2),并证实其电离程度强烈依赖于电离原条件.该结果可为研究SM54111的药代动力学和药理学提供方法和参考.【总页数】5页(P1721-1725)【作者】苏强;刘清飞;吴娟芳;王义明;毕开顺;刘伟平;罗国安【作者单位】沈阳药科大学药学院,沈阳,110016;清华大学医学院,北京,100084;清华大学医学院,北京,100084;清华大学化学系,北京,100084;清华大学化学系,北京,100084;沈阳药科大学药学院,沈阳,110016;昆明贵金属研究所,昆明,650221;清华大学医学院,北京,100084【正文语种】中文【中图分类】O65【相关文献】1.高效液相色谱-电喷雾质谱(HPLC-ESI-MS/MS)测定新型抗癌铂配合物 [J], 苏强;刘清飞;梁琼麟;王义明;毕开顺;刘伟平;罗国安2.新型铂(Ⅱ)类配合物对结肠癌SW620细胞系的体外抗癌活性研究 [J], 李睿;殷红专;徐峰;苏琪3.新型铂类抗癌配合物斑蝥酸铂的水合动力学研究 [J], 刘洋;高文桂;谌喜珠4.铂配合物的抗癌作用及非铂抗癌物 [J], 高朝明5.新型抗癌配合物的研究Ⅳ［Pd（二齿胺）（NO＿3）＿2］配合物的合成、表征和抗癌活性的研究 [J], 毕琼斯;李俊忠;李万山;林辉祥因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

中药中农残的毛细管电泳--质谱联用分析方法研究的开题报告

中药中农残的毛细管电泳--质谱联用分析方法研究的开题报告

中药中农残的毛细管电泳--质谱联用分析方法研究的开题报告题目：中药中农残的毛细管电泳--质谱联用分析方法研究一、研究背景和意义随着人们生活水平的提高，中药的使用越来越普及。

中药治疗疾病的主要成分是来自植物和动物的天然化学物质，但是中药也有可能受到污染，这是导致中药质量下降的原因之一。

其中农药残留是重要的一种污染物。

目前市场上售卖的中药产品中，一些存在农药残留超标现象。

因此，必要的质量检测是必不可少的。

毛细管电泳--质谱联用分析方法有着灵敏度高、分辨率高等优点，对于中药中农药残留的检测具有巨大潜力。

二、研究内容和方法本文旨在研究中药中农药残留的毛细管电泳--质谱联用分析方法，探究中药中农药残留检测的实用性。

具体研究内容和方法如下：1.收集不同来源的中药，采用超声提取法提取样品的农药残留物。

2.采用毛细管电泳分离农药残留物，并通过质谱进行检测。

3.优化毛细管电泳--质谱联用分析的条件，如开发适合于中药农药残留检测的样品预处理方法、选定合适的毛细管电泳分离条件、建立对应的质谱检测方法。

4.验证所建立方法的准确性、灵敏度和稳定性。

在此基础上，对不同来源的中药样品进行检测，并分析检测结果。

三、预期成果本研究旨在建立一种适用于中药中农药残留检测的毛细管电泳--质谱联用分析方法。

预计可以获得以下成果：1.建立中药中农药残留检测的毛细管电泳--质谱联用分析方法。

2.对常见中药中农药残留情况进行调研和汇总分析。

3.验证所建立方法的准确性、灵敏度和稳定性，并推广应用于实际检测中。

四、研究的难点1.中药成分繁多，复杂的化学矩阵可能会干扰到农药残留的检测。

2.毛细管电泳分离的选择和优化需要较多的时间和耐心。

3.不同来源的中药样品的农药残留含量和成分差异较大，运用该方法需要考虑其适用性和精度。

五、研究意义和推广价值1.本研究可以对中药中农药残留的检测提供一种新的方法。

2.为中药的质量检测提供了更为精确、灵敏的手段。

3.可以为保障公众食品安全提供一定的参考。

药物分析中的电喷雾液相色谱质谱联用技术研究

药物分析中的电喷雾液相色谱质谱联用技术研究

药物分析中的电喷雾液相色谱质谱联用技术研究近年来，随着科学技术的不断进步，药物研发和分析技术也得到了长足的发展。

而电喷雾液相色谱质谱联用技术作为一种强大的分析工具，被广泛应用于药物分析领域。

本文将对电喷雾液相色谱质谱联用技术在药物分析中的研究进行探讨。

1. 电喷雾液相色谱质谱联用技术的原理及优势电喷雾液相色谱质谱联用技术是将液相色谱和质谱两种分析技术有机地结合在一起，能够实现对药物样品的分离、检测和定性定量分析。

其原理是通过电喷雾离子源将待分析的药物样品溶解在溶剂中，形成微细雾化的药物分子，然后将药物分子引入质谱仪中进行离子化，并利用质谱仪进行药物分子的鉴定和定量分析。

电喷雾液相色谱质谱联用技术相比于传统的单一分析方法具有很多优势。

首先，它能够在高效液相色谱的基础上实现对复杂样品的分离和提纯，提高了样品的纯度和分离效果。

其次，电喷雾离子源能够将样品转化为气态离子，在高真空下进行传输，避免了样品在离子源中的分解和损失。

此外，质谱仪的高灵敏度和质量/荷电比的测量精确性，使得电喷雾液相色谱质谱联用技术在药物分析中能够实现对微量成分的检测和定量。

2. 电喷雾液相色谱质谱联用技术在药物研发中的应用随着新药的不断研发，对于药物的分析和质量控制要求也越来越高。

电喷雾液相色谱质谱联用技术在药物研发中发挥了重要的作用。

首先，电喷雾液相色谱质谱联用技术能够对复杂的药物成分进行分离和检测。

对于多成分药物来说，传统的分析方法无法实现对所有成分的同时检测和定性分析。

而电喷雾液相色谱质谱联用技术的高分辨率和高选择性，使得可以同时对多种成分进行有效的分离和定性分析。

其次，电喷雾液相色谱质谱联用技术能够检测药物中的微量有害成分。

在药物研发和质量控制中，对于与药效无关的杂质成分的检测是非常重要的。

而电喷雾液相色谱质谱联用技术的高灵敏度和高分辨率，使得可以对药物中的微量有害成分进行准确的定性和定量分析。

此外，电喷雾液相色谱质谱联用技术还能够用于药物代谢研究。

毛细管电泳电化学检测测定阿司匹林水解反应速率常数

毛细管电泳电化学检测测定阿司匹林水解反应速率常数

收稿日期:2002-12-05 通讯联系人:曹玉华第20卷第2期Vol .20　N o .2分析科学学报JOU RNA L OF ANA LY T ICA L SCIENCE 2004年4月A pr .　2004文章编号:1006-6144(2004)02-0187-03毛细管电泳电化学检测测定阿司匹林水解反应速率常数曹玉华,汪　云(江南大学化学与材料工程学院,江苏无锡214036)摘　要:本文利用毛细管电泳-电化学检测方法研究了阿司匹林水解产物水杨酸的浓度随反应时间变化的规律。

在pH 7.4的中性条件下,在不同温度下对阿司匹林水解反应速率进行了测定,并分别求得反应活化能E a 为786.8kJ /mol 。

关键词:毛细管电泳;电化学检测;阿司匹林;反应速率常数;水解中图分类号:O657.8;R917 文献标识码:A阿司匹林为最常用的解热镇痛抗炎药,解热、镇痛作用温和,抗炎和抗风湿作用较强,并有促进尿酸排泄作用。

但是,阿司匹林容易水解,其水解产物水杨酸对胃肠道有刺激作用,可出现恶心、呕吐等现象,严重时导致胃肠道出血[1]。

所以研究阿司匹林的水解反应速率及相关动力学常数有重要的意义。

阿司匹林水解反应为二级反应[2],如果保持溶液的pH 值恒定,可以认为阿司匹林水解反应是准一级反应。

目前已有一些研究阿司匹林水解反应的报道[3-5],但尚未见毛细管电泳法用于测定该药物的水解反应速率常数的研究。

目前,毛细管电泳-电化学检测(CE -ED )的应用主要用于定量分析领域,而将它运用于物理化学常数的测定还不多[6,7]。

将毛细管电泳引入到蔗糖、乳糖、麦芽糖水解的反应速率常数的测定中,取得了较为满意的结果[8,9]。

本文以碳圆盘电极为工作电极,用CE -ED 技术对阿司匹林水解反应速率常数及相关的反应活化能进行了测定,该法能直观地监测反应产物———水杨酸的电泳峰高随着水解反应的进程而发生的变化,方法直观、可靠,结果令人满意。

无鞘流毛细管电泳-电喷雾串联质谱用于面粉中荧光增白剂的高灵敏检测

无鞘流毛细管电泳-电喷雾串联质谱用于面粉中荧光增白剂的高灵敏检测

无鞘流毛细管电泳-电喷雾串联质谱用于面粉中荧光增白剂的高灵敏检测王安平;陈楚诗;杨巾栏;杨丽【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2024(42)6【摘要】食品中残留的过量荧光增白剂(FWAs)对人体健康存在潜在威胁,因此,开发准确、高灵敏的FWAs检测方法在食品安全监测方面具有重要意义。

本工作提出了利用无鞘流接口的毛细管电泳-电喷雾串联质谱(CE-ESI-MS/MS)的方法,以实现面粉样品中6种FWAs的高灵敏检测。

实验采用超声辅助液相萃取法进行样品前处理,以减小复杂样品中基质效应的干扰。

以氯仿-甲醇(3∶2,v/v)溶液作为萃取剂,在30℃下对样品中的FWAs进行萃取。

萃取完成后,经离心、氮气吹干后用氯仿-甲醇(1∶4,v/v)复溶后检测。

无鞘流CE-ESI-MS/MS方法采用正离子(ESI+)和多反应监测(MRM)模式,利用二级质谱对6种目标物同时进行定性定量分析,从而提高方法的检测通量和灵敏度。

结果显示,本方法具有较宽的线性范围、良好的线性关系和较低的方法检出限(0.04~0.67 ng/g),在实际样品中3个水平下的加标回收率良好(86.2%~103.7%),日间和日内重复性(RSD)分别不大于11.5%和10.2%。

上述研究表明,本方法适用于复杂基质中多种FWAs的准确、高灵敏检测,在面粉样品的质量评估和FWAs的污染监控方面具有潜在的应用价值。

【总页数】9页(P590-598)【作者】王安平;陈楚诗;杨巾栏;杨丽【作者单位】东北师范大学【正文语种】中文【中图分类】O658【相关文献】1.反向毛细管电泳-激光诱导荧光快速分析面粉中的荧光增白剂2.毛细管电泳-电喷雾质谱联用中缓冲液pH对质谱检测灵敏度的影响3.高灵敏液相色谱-串联质谱研究鞘糖脂类作为神经退行性疾病小鼠模型的生物标志物4.毛细管电泳-无鞘流电喷雾质谱用于药物分析5.毛细管电泳-串联非接触电导法检测纺织物中6种荧光增白剂因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

毛细管电泳-质谱联用技术及其在药物和生物分析中的应用

毛细管电泳-质谱联用技术及其在药物和生物分析中的应用周韦;刘易昆;陈子林【摘要】毛细管电泳-质谱(CE-MS)联用技术是在液相色谱-质谱联用技术基础上发展起来的一项新型分析技术,它结合了毛细管电泳具有的分离效率高、分离速度快、样品消耗量少以及质谱检测具有的高灵敏度和强结构解析能力等优点,现已成为倍受分析化学工作者关注的新型微量分析技术.目前,CE-MS联用技术是中药有效成分分析,体内药物分析以及生物样品,如氨基酸、多肽、蛋白质和多糖等分析的重要手段.本文对CE-MS联用技术中同轴鞘流及无鞘流纳流电喷雾等几种接口装置的研究进展,CE-MS技术在中药活性成分分析及多级质谱结构解析以及氨基酸、多肽及蛋白质等生物样品分析中的应用研究进行了综述,并对该技术的发展进行了展望.%Capillary electrophoresis-mass spectrometry (CE-MS), developed on the basis of liquid chromatography-mass spectrometry, is a new hyphenated technique that combines the advantages like high separation efficiency, short analytical time, low sample consumption in CE and the high sensitivity, powerful molecular structure elucidation in MS.It has been paid great attention by analytical scientists and become a powerful tool for analysis of active components in Chinese medicine, in vivo drugs and bio-samples like amino acids, peptides, proteins and polysaccharides.In this paper, a brief review was given on recent advance in CE-MS and its applications, including advance in sheath-flow and sheathless nano-spray interfaces and applications in analysis of pharmaceutical and biological samples.The first part of this review summarizes the development of stable and efficient interfaces to improve the feasibility of CE-MStechnique.Several interfaces like coaxial sheath-flow, electrokinetic sheath-flow, liquid injection and sheathless interface with etching emitter have been reviewed.The second part introduces the application of CE-MS in the past few years.The applications are categorized according to the types of analytes, including the analysis for active components in Chinese medicines, in vivo drugs, amino acids, peptides, proteins and carbohydrates.Coatings for capillary inner wall, online processing strategies, sample preparation methods and other experiment methods have been discussed in each category.In the last part of this review, a perspective of this technique has been discussed.【期刊名称】《质谱学报》【年(卷),期】2017(038)004【总页数】13页(P362-374)【关键词】毛细管电泳-质谱(CE-MS);电喷雾离子化接口装置;药物分析;生物分析;综述【作者】周韦;刘易昆;陈子林【作者单位】武汉大学药学院,湖北武汉 430071;武汉大学药学院,湖北武汉430071;武汉大学药学院,湖北武汉 430071【正文语种】中文【中图分类】O657.63毛细管电泳(CE)具有分离速度快、样品消耗量少、分离效率高等特点。

药物分析中的液相色谱电喷雾质谱联用技术研究

药物分析中的液相色谱电喷雾质谱联用技术研究液相色谱电喷雾质谱联用技术（LC-ESI-MS）是目前药物分析领域中广泛应用的一种分析方法，它结合了液相色谱（LC）和电喷雾质谱（ESI-MS）两种技术的优势，具有快速、灵敏、高效和具体的特点。

在这篇文章中，我们将详细探讨液相色谱电喷雾质谱联用技术在药物分析中的应用和研究进展。

第一部分：液相色谱技术概述液相色谱（LC）是一种常见的分离技术，主要用于复杂混合物中化合物的分离和纯化。

通过将样品溶解在有机溶剂或水溶液中，然后通过固定相材料将化合物分离出来。

在液相色谱中，常用的固定相包括反相和离子交换柱。

通过调节流动相的组成和pH值，可以实现化合物的选择性分离。

第二部分：电喷雾质谱技术概述电喷雾质谱（ESI-MS）是一种常见的质谱分析技术，它主要用于化合物的分析和结构鉴定。

在电喷雾质谱中，样品通过高压电场的作用下被喷雾成气溶胶，然后经过干燥和脱溶剂过程得到带电的气体离子。

这些气体离子在质谱中通过质量过滤和离子检测来实现对化合物的分析。

第三部分：LC-ESI-MS联用技术原理LC-ESI-MS联用技术将液相色谱和电喷雾质谱技术结合起来，可以实现对复杂样品的高效分析。

在LC-ESI-MS联用技术中，液相色谱将样品分离成多个组分，然后通过电喷雾接口将液相色谱柱出口的物质转化为气相离子。

这些气相离子经过质谱的分析可以得到物质的质量信息和分子结构。

第四部分：LC-ESI-MS在药物分析中的应用LC-ESI-MS联用技术在药物分析中具有广泛应用。

首先，它可以用于药物的定量分析。

通过建立药物标准品的质谱图谱和校准曲线，可以准确测定药物的浓度。

其次，它可以用于药物的代谢研究。

通过分析药物代谢物的质谱图谱，可以了解药物在体内的代谢途径和代谢产物。

此外，LC-ESI-MS联用技术还可以用于药物的结构鉴定和药物不良反应的研究。

第五部分：LC-ESI-MS联用技术的发展趋势随着科技的不断进步，LC-ESI-MS联用技术也在不断发展。

毛细管电泳


带电粒子在直流电场作用下于一定介质（溶剂）中所发生的定向运动称为电泳。单位电场下的电泳速度称为 淌度。在无限稀释溶液中（稀溶液数据外推）测得的淌度称为绝对淌度。
电场中带电离子运动除了受到电场力的作用外，还会受到溶剂阻力的作用。一定时间后，两种力的作用就会 达到平衡，此时离子作匀速运动，电泳进入稳态。实际溶液的活度不同，特别是酸碱度的不同，所以样品分子的 离解度不同，电荷也将发生变化，这时的淌度可称为有效电泳淌度。一般来说，离子所带电荷越多、离解度越大、 体积越小，电泳速度就越快。
基础理论
Zeta电势
双电层
淌度
双电层是指两相之间的分离表面由相对固定和游离的两部分离子组成的。
双电层是与表面异号的离子层，凡是浸没在液体中的界面都会产生双电层。在毛细管电泳中，无论是带电粒 子的表面还是毛细管管壁的表面都有双电层。
电介质溶液中，任何带电粒子都可被看成是一个双电层系统的一部分，离子自身的电荷被异号的带电离子中 和，这些异号离子中有一些被不可逆的吸附到离子上，而另一些则游离在附近，并扩散到电介质中进行离子交换。 “固定”离子有一个切平面，它和离得最近的离子之间的电势则被称之为离子的Zeta电势。
电渗、电渗流和表观淌度电渗是推动样品迁移的另一种重要动力。所谓电渗是指毛细管中的溶剂因轴向直流 电场作用而发生的定向流动。电渗是由定域电荷引起。定域电荷是指牢固结合在管壁上、在电场作用下不能迁移 的离子或带电基团。在定域电荷吸引溶液中的反号离子并与其构成的双电层，致使溶剂在电场作用（以及碰撞作 用）下整体定向移动而形成电渗流（毛细管中的电渗流为平头塞状）。
毛细管电泳仪度随pH的升高而升高，电渗流也随之升高。因此，pH为分离条件优化时不可忽视的因素。
在CE中，分离电压也是控制电渗的一个重要参数。高电压是实现CE快速、高效的前提，电压升高，样品的迁 移加大，分析时间缩短，但毛细管中焦耳热增大，基线稳定性降低，灵敏度降低；分离电压越低，分离效果越好， 分析时间延长，峰形变宽，导致分离效率降低。因此，相对较高的分离电压会提高分离度和缩短分析时间，但电 压过高又会使谱带变宽而降低分离效率。电解质浓度相同时，非水介质中的电流值和焦耳热均比水相介质中小得 多，因而在非水介质中允许使用更高的分离电压。

液相色谱-质谱联用(lcms)的原理及应用

width: 740px"><div align=center><font color=#ff0000 size=3><strong>&nbsp;液相色谱-质谱联用(lc/ms)的原理及应用</strong></div><div align=center>&nbsp;</div><div align=left><br><strong>液相色谱—质谱联用的原理及应用</strong> <br>简介<br>1977年，LC/MS开始投放市场</font></div><p><font color=#ff0000 size=3>1978年，LC/MS首次用于生物样品分析</font></p><p><font color=#ff0000 size=3>1989年，LC/MS/MS取得成功</font></p> <p><font color=#ff0000 size=3>1991年，API LC/MS用于药物开发</font></p><p><font color=#ff0000 size=3>1997年，LC/MS/MS用于药物动力学高通量筛选</font></p><p><font color=#ff0000 size=3>2002年美国质谱协会统计的药物色谱分析各种不同方法所占的比例。

1990年，HPLC高达85%，而2000年下降到15%，相反，LC/MS所占的份额从3%提高到大约80%。

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电喷雾接口中 , 从样品离子的产生到被分析检 测的过程可以分为 4 个步骤: ( 1) 样品溶液进入电喷 雾针头 , 加高压使样品溶液喷雾形成表面带有电荷 的液滴 ; ( 2) 随着缓冲溶液的挥发 , 液滴表面的电荷 密度增加, 当液滴表面的电荷密度增大到 Rayleig h 稳定极限 ( 即液滴表面的静电斥力大于液滴表面张 力) 时 , 液滴碎裂成更小的液滴 , 这个过程反复进行 , 直到形成非常小的液滴 ; ( 3) 在静电斥力作用下 , 样 品离子从非常小的、 电荷密度高的液滴中脱离出来 进入气相 ; ( 4) 样品离子进入质谱仪进行质量分析。 根据电喷雾原理, 样品离子的质谱响应信号强 度受到很多因素的影响。质谱在阳离子模式下检测 时, Kebarle 等人 [ 23, 24] 提出 了二元缓冲体系中 质谱 检测信号强度的计算公式 : IA = f p IB = fp KA[ A ] I spray K A [ A+ ] + K B [ B+ ] K A[ B ] I spray K A [ A+ ] + K B[ B+ ]
2
t t
( 1) ( 2)
混合液中两种组分的浓度分别为 : C 1∀ = [ HAc] = V 1 C1 + V 2 C3 V1 + V2 V1C 2 V1 + V 2 ( 7) ( 8)
其中 : A + , B + 为 二元缓 冲体系 中的 阳离 子; I A 是 A 在质谱上响应信号强度; I B 是 B 在质谱上的响 应信号; f 是电喷雾过程中液滴上的电荷转化成气 相离子的分数; p 描述的是气相离子进入质谱分析
+
C 2∀ = [ NH 4Ac] =
显然 , 混合液中两种组分的浓度不仅与电泳运 行缓冲溶液有关, 也与所使用的包层液有关。
第1期 1. 3
梁
振等 : 毛细管电泳 电喷雾质谱联用中缓冲液 pH 对质谱检测灵敏度的影响
+
色谱等高效分离系统在线联用成为可能[ 1~
11]
, 更进
一步拓宽了两者的应用领域。随着蛋白组学研究的 开展, CE M S 联用也将发挥越来越重要的作用。 Oliver 等 首次成 功地将毛细管 电泳与质谱 联用, 毛细管出口采用不锈钢组件, 从而建立了毛细 管电泳的电路循环和电喷 雾接口的电路 循环。此 后 , 他们进一步利用包层液接口代替不锈钢毛细管
( N ational Chromatogr ap hic R . & A . Center , Dalian I nstitute of Chemical Physics, T he Chinese A cademy of Sciences , DalianIn recent years, the hy phenation of capillary elect rophoresis ( CE) and electrospray ioniza t ion m ass spect rometry ( ESI MS) has been w idely applied to some research fields wit h high eff iciency and high accuracy . T he eff ect s of pH of the mixed solut ion consisting t he running buf fer and t he sheath f low on t he ESI M S signal intensity w ere invest igated ex periment ally and theoret ically w it h a mix ture of tw o model pept ides, hist idine proline leucine ( His Pro L eu) and alanine t rypt ophan ( Ala T rp) . T he running buffer and t he sheat h flow w ere found t o af fect t he signal intensity in a synerg ist ic fashion. T he ESI MS signal intensity of H is Pro L eu increased w it h t he H + concent rat ion of t he mix ed solut ion ranging f rom 0. 5 to 2. 3 mmol/ L , but decreased w it h the H concentration range of 2. 3 to 3. 09 mmol/ L . It is concluded t hat t he ESI MS sig nal int ensit y of t hese peptides increases at first and t hen decreases subsequent ly w ith the increase of t he concent rat ion of H + of the mixed solu t ion, and t herefore, there ex ist an opt im al pH value of t he mixed solut ion to max im ize t he MS re sponse. Key words: capillary elect rophoresis; elect rospray ionization interface; mass spectrometry; pH value; signal int ensit y 毛细管电泳 ( CE) 具有柱效高、 样品用量小等特 点, 特别适宜于对生物样品( 肽、 蛋白质等) 进行分离 分析 , 现已广泛应用于医药、 环境、 卫生等领域。质 谱( MS) 方法能够提供可靠的检测信息及高的检测 灵敏度, 能够提供分析样品的结构信息 , 具有对分析 样品进行快速定性的能力。电喷雾 ( ESI) 接口的出 现, 使质谱与高效液相色谱、 毛细管电泳、 毛细管电
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的分数 ; K A 和 K B 分别代表 A+ 和 B+ 的灵敏度系 数 ; I spray 是电喷 雾接 口的电 流; [ A + ] 和 [ B+ ] 表示 A 和 B 的浓度。 对于一种浓度连续变化的溶液而言, I spray 与溶 液的电导率成正比关系 [ 23, 25] : I spray ! 其中 :
+ + +
K S [ S ] + K H[ H ] + K NH4 [ NH + 4]
其中: K S 为样品离子的灵敏度系数。 1. 2 电喷雾接口中运行缓冲溶液与包层液形成的 混合溶液中各种组分的浓度变化 假设 CE 缓冲溶液中的 HAc 和 NH 4Ac 浓度分 别为 C 1 和 C 2 , 包层液中的 HAc 的浓度为 C 3 。样 品的电泳速率为 v 0 , 包层液速率为 v 1 , 毛细管内半 径为 r 。 在 t 时间内进入电喷雾接口的缓冲液体积 V 1 和包层液的体积 V 2 分别为 : V1 = v 0 r V2 = v 1
2003 年 1 月 January 2003
色
谱
Chinese Journal of Chromatography
Vol. 21 No. 1 9~ 12
毛细管电泳 电喷雾质谱联用中缓冲液 pH 对质谱检测灵敏度的影响
梁 振, 段继诚, 张维冰, 张玉奎
( 中国科学院大连化学物理研究所 国家色谱研究分析中心 , 辽宁 大连 116011) 摘要 : 毛细管电泳 电喷雾质谱联用以其高效及高 准确性被广泛应用于 很多领域。联 用过程中 , 质谱 信号强度受 多 种因素的影响 , 缓冲溶液 pH 是其中之一。以两种小肽 ( 组氨酸 脯氨酸 亮 氨酸( His Pro L eu) 和丙氨酸 色氨酸 ( A la T rp) ) 为例从理论上探讨了分离的缓冲溶液和包 层液形成的混合液中 H + 浓度对质谱信号的影响。结果 表明 , 缓 冲 液和包层液对质谱信号的影响不是独立的 , 而是 两者的相互耦合。 关键词 : 毛细管电泳 ; 电喷雾接口 ; 质谱 ; pH 值 ; 检测 灵敏度 中图分类号 : O658 文献标识码 : A 文章编号 : 1000 8713( 2003) 01 0009 04
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第 21 卷
出口, 利用连续流动的包层液来建立整个分析检测 系统的电路循环 [ 13] , 奠定了 CE ESI MS 联用 的基 础。为了提高 CE ESI MS 在线联用的稳定性 , 一些 研究 者也 研 制了 不 同 的同 轴 混 合液 接 口 。 CE ESI M S 在线联用技术受到很多因素的影响, 其 中包括电喷雾接口、 毛细管电泳运行缓冲液组成、 包 层液 的组成 等。选 择合适 的分 析条 件对 CE ESI M S 系统的分离检测结果具有重要意义。 以 CE MS 为手段的蛋白组学研究 , 通常需要将 蛋白酶解成不同长度的肽段 , 经 MS 定性后确定是 否为新的蛋白质结构 , 因此 , M S 结果的稳定性与可 靠性, M S 的灵 敏度 和精确 度是非 常重要 的因素。 毛细管电泳的运行缓冲溶液及其组成对毛细管电泳 分离系统及 质谱检测 系统影响 的研究已有 报 道[ 18, 19] 。Karg er 等人[ 16] 在理论上系统地研究了包 层液组成对毛细管电泳分离系统的影响。包层液的 组成 对 质 谱 检 测 系 统 灵 敏 度 的 影 响 也 有 报 道 。本文将毛细管电泳缓冲溶液与包层液综 合加以考虑 , 探讨了两者 形成的混合液中 H + 浓度 对质谱检测灵敏度的影响, 也从理论上说明了缓冲 液和包层液对质谱检测灵敏度影响的本质。