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荧光染料基础知识大全纺织染整团队今天荧光显微镜技术的基本原理是借助荧光剂让细胞成分呈现高度具体的可视化效果,比如在目的蛋白后面连一个通用的荧光蛋白—GFP。
在组织样本中,目的基因无法进行克隆,则需要用免疫荧光染色等其他技术手段来观察目的蛋白。
为此,就需要利用抗体,这些抗体连接各种不同的荧光染料,直接或间接地与相应的靶结构相结合。
此外,借助荧光染料,荧光显微镜技术不只局限于蛋白质,它还可以对核酸、聚糖等其他结构进行染色,即便钙离子等非生物物质也可以检测出来。
1免疫荧光<IF>在荧光显微镜技术中,可以通过两种方式观察到你的目的蛋白：利用源荧光信号,即通过克隆手段,用遗传学方法将荧光蛋白与目的蛋白相连；或利用荧光标记的抗体特异性结合目的蛋白。
有些生物学问题采用第二种方法会更有用或更有必要。
比如,组织学样品无法使用荧光蛋白,因为通常来说,标本都是从无法保存荧光蛋白的生物体中获取。
此外,当有一个有功能的抗体可用时,免疫荧光法会比荧光蛋白技术快很多,因为后者必须先克隆目的基因再将DNA转染到适当的细胞中。
荧光蛋白的另一项劣势在于其本身属于蛋白质。
因此,细胞的这些荧光蛋白具有特定的蛋白质特性,其会导致附着的目的蛋白质发生功能紊乱或出现误释的情况。
然而,荧光蛋白技术仍然是观察活细胞的首选方法。
免疫荧光法利用了抗体可以和相应抗原特异性结合的这个特性,对此它还有两种不同的表现形式。
最简单的方式是使用可与目的蛋白相结合的荧光标记抗体。
这种方法被称为"直接免疫荧光法"。
在很多情况下,我们可以利用两种不同特性的抗体。
第一种抗体可以结合目的蛋白,但其本身并未进行荧光标记〔一抗。
第二种抗体本身就携带荧光染料〔二抗,并且可以特异性结合一抗。
这种方法被称为"间接免疫荧光法"。
这种方法存在诸多优势。
一方面,它会产生放大效应,因为不只一个二抗可以与一抗相结合。
另一方面,没有必要始终用荧光染料标记目的蛋白的每个抗体,但可以使用市售荧光标记的二抗。
荧光培训教案时间： 2月14日-2月23日地点：总化验室会议室培训人：杨海军王海涛培训对象：各班组质量调度、荧光配料工程师、荧光分析员、简易分析人员、散装及各生产线取样人员。
培训方式：统一进行理论学习及实际操作培训，学习结束统一考核。
目的和意义：为了进一步提高控制组人员的业务素质，统一操作手法，希望通过此次培训使大家更加热爱自己的岗位，自己的本职工作，为化验室及公司作出自己最大的贡献。
今天培训的内容主要是荧光分析的主要仪器设备的工作原理及常见故障的分析和解决办法，希望大家认真听，在岗的人员提高自己的认识，增强自己的水平，不是本岗位的进一步了解咱们化验室的工作和这些仪器设备的基本知识，增长自己的知识面。
一、荧光仪1、工作原理：何为X光荧光？有些物质吸收了比紫外线光波长度短很多的X射线后，发出波长比所吸收的X射线的波长稍长的射线（二次射线），这种X射线被称为X光荧光。
它是一种电磁波。
它的特性是它的高能量，这就是他能穿透固体材料的原因，这是其他射线所不能比拟的。
2、（操作）首先开机过程：（1）.将墙壁荧光仪电源空气开关送电；（2）.开启ups电源（on按键），同时开启水冷机；（3）.开启荧光仪低压及电脑并进入SuperQ Manager程序；（4）.进入Measure & Analyse，需要输入的用户及密码都是S；（5）.点击界面左上角左侧样杯状标志（测量样品）。
（6）.点界面左上角左侧“常规分析测量”。
（7）.点击“系统”里面的“谱仪状态”，选择左上角手动状态（manual）；（8）.开启荧光仪高压（钥匙）；（9） .在谱仪状态表里升高压，初始电压及电流为20kV 10mA,先升电压后升电流，每次升10千伏或10毫安，直到升到50kV 40mA；（10）.选择分析曲线，输入样品名后准备分析。
关机顺序（与开机顺序相反）：在谱仪状态里降电压及电流，先降电流后降电压，降到20kV 10mA后关闭高压钥匙，关闭低压。
荧光颜料是以热固性树脂为基础的颜料,具有较高的着色力、较强的抗褪色性、极细的粒径、及较强的抗溶剂性能, 荧光颜料属功能性发光颜料，这类颜料当外来光(含紫外线)照射时，能吸收一定形态的能量，不转化成热能，而是激发光子，以低可见光形式吸收的能量释放出来，从而产生不同色相的荧光现象。
所以在白天看来,它比其它种类的颜料要鲜艳得多.但是荧光并不是夜光,夜光粉是吸收光线(阳光或灯光都可以)之后,在黑暗的地方将其放出来.荧光颜料并不能在暗处发光.当然也有客户将两者混合使用,这样的话白天鲜艳,晚上醒目,效果很不德国诺贝尔化学颜料国际集团有限公司网址：www。
Shdaorui。
com。
cn 上海代表处：上海道瑞颜料有限公司电话：技术支持：张工反光颜料反光粉产品特性：反光材料制品采用高折射率玻璃珠后半表面镀铝作为后向反射器，具有极强的逆向回归反射性能，能将85％的光线直接反射回光源处，回归反射所造成的反光亮度，可使驾驶人员和带光源的夜间作业人员在夜间或视野不佳的情况不清楚地看见行人和障碍目标，确保双方安全中国永辉(金属粉)集团生产的反光粉具有流动性好、色度纯、透明度高。
反光粉应用范围：反光粉是生产反光布，反光贴膜，反光涂料、反光标牌、广告宣传材料、服饰材料、标准赛场跑道、鞋帽、书包、水陆空救生用品等新型光功能复合材料的核心原材料，它具有回归反光的特性并由此产生较强的回归反射效应，无需外加电源，可广泛用于道路、港口、矿山，消防等领域，作为安全标志，大大地提高了使用者的安全可靠性。
永辉(金属粉)集团的反光粉性能:颜色: 白色灰色折射率:粒径: 250目、300目、400目、450目、500目荧光粉产品的详细介绍:永辉集团生产的FA系列荧光颜料,具有非常强的耐溶剂性能和非常亮丽的荧光色彩,易分散,能适用于各种极性的溶剂体系中,尤其特别适用于含环已酮及其它强极性溶剂的油漆,PVC,PET丝印刷油墨,PVC,PET溶胶中.耐溶剂性:具有非常强的耐溶剂性能够适用于包括:环已酮,无水乙醇及芳烃和醋酯类几乎所有的各种极性的常规有机溶剂中.超细粒径3um以下的细微颗粒,丝网印刷时不会出现堵网眼现象,有利于提高生产效率.永辉集团荧光粉颜色:橙红,绿色,大红,橙色,柠檬黄,橙黄,帝皇黄,桃红,粉红,玫瑰红,宝石红,紫色,白色,蓝色等颜色.永辉集团荧光粉广泛用于:涂料,油墨,塑胶,硅胶,印刷,皮革,工艺品,圣诞礼品,喷涂,玩具,印染,广告牌,安全标志,交通护栏,地下停车场,舞厅装璜,建筑装饰,鱼具等需要鲜艳明亮色彩的领域中,具有不可替代的代用.中国永辉(金属粉)集团生产的耐高温220℃的荧光粉在高温下具有优良的色安定性,耐色迁移性及耐溶剂性极佳.物理性质:热固性荧光颜料平均粒径:比重:分解点: 300℃吸油性: 56应用范围:涂布或成型、PP等之射出或碾压成型3.高品质之油漆或粉体涂装使用荧光油墨应注意以下几点:★由于荧光油墨的耐光性差，不适合在室外长期使用，因而室外使用的网版印刷品不宜选用荧光油墨。
1.把各种能量转换为光能的过程主要有两种: 其一是热辐射，其二是发光。
2. 按照激发能的不同可以把发光分类为光致发光（紫外波段发光或真空紫外波段发光激发）、阴极射线发光（电子束流激发）、电离辐射发光（Ｘ射线、γ射线及高能离子激发）、电致发光（直流或交流电场激发）、化学发光（由化学反应能激发）、生物发光（由生物能激发）、摩擦发光（由机械应力激发）等。
3. 发光材料是由作为材料主体的化合物（基质）和选定掺入的少量以至微量的杂质离子（激活剂）所组成，有时还掺入另一种杂质离子作为敏化剂。
4. 荧光，又作“萤光”，是指一种光致发光的冷发光现象。
当某种常温物质经某种波长的入射光（通常是紫外线或X射线）照射，吸收光能后进入激发态，并且立即退激发并发出比入射光的的波长长的出射光（通常波长在可见光波段）；而且一旦停止入射光，发光现象也随之立即消失。
具有这种性质的出射光就被称之为荧光。
在日常生活中，人们通常广义地把各种微弱的光亮都称为荧光，而不去仔细追究和区分其发光原理。
5. 荧光淬灭（fluorescence quenching）又称荧光熄灭或萃灭：是指导致特定物质的荧光强度和寿命减少的所有现象。
6.荧光熄灭剂:引起荧光熄灭的物质称为荧光熄灭剂。
如，卤素离子、重金属离子、氧分子以及硝基化合物、重氮化合物、羧基和羰基化合物均为常见的荧光熄灭剂。
7.荧光淬灭的原因很多，机理也很复杂，主要包括：①因荧光物质的分子和熄灭剂分子碰撞而损失能量；②荧光物质的分子与熄灭剂分子作用生成了本身不发光的的配位化合物；③溶解氧的存在，使得荧光物质氧化，或是由于氧分子的顺磁性，促进了体系间跨越，使得激发单重态的荧光分子生在荧光物质分子与猝灭剂分子之间8.静态猝灭：当基态荧光分子与猝灭剂之间通过弱的结合生成复合物，且该复合物使荧光猝灭的现象称为静态猝灭。
动态猝灭：如果激发态荧光分子与猝灭剂碰撞使其荧光猝灭则称为动态猝灭。
动态猝灭：温度增高，猝灭增强；静态猝灭：温度增高，猝灭降低。
荧光染料简介荧光染料会发出荧光，所谓荧光是指物质分子吸收紫外光后发出的可见光荧光以及吸收波长较短的可见光后发出的波长较长的可见光荧光。
荧光发生机理每个分子具有一系列严格的分立能级，室温下物质分子大部分处于"基态" ，当这些物质在光的照射下吸收光能后，进入新的状态，称为"激发态"。
处于"激发态"的分子是不稳定的，它可以通过以10-9-10-7 秒的极短时间内发射光量子回到基态。
这一过程称为荧光发射，也就是发光。
激发光谱和发射光谱任何发荧光的物质分子都具有两个特征光谱-- 激发光谱和荧光发射光谱。
在测定时，用以激发荧光的吸收光谱，一般称为荧光物质的激发光谱，它是指相对于不同激发波长的辐射所引起物质发射某一波长荧光的光谱。
荧光发射光谱简称为发射光谱，是指某一波长激发光引起物质发射不同波长荧光的光谱。
荧光效率和荧光强度分子能产生荧光必须具备两个重要的条件，一是物质的分子必须具有吸收一定频率光能的基团-- 生色团，二是必须具有能产生一定光量子的荧光团。
而物质发射荧光的能力用荧光效率表示。
荧光效率为荧光团发射荧光的光量子数与生色团吸收的光量子数的比值称。
荧光效率往往小于1。
如罗丹明B 的乙醇溶液的荧光效率为0.97 ；荧光素的水溶液的荧光强度为0.65 ，荧光效率与物质结构有关，还与所处的环境紧密相关。
而对于某种荧光物质在特定的环境下它的荧光效率是固定的。
在一定范围内，激发光越强，荧光也越强。
即荧光强度（发射荧光的光量子数）等于吸收光强度乘以荧光效率。
提高荧光强度的根本方法选择适当强度的光源作为荧光物质的激发光源，和选择适合于被检荧光物质选择性吸收的光谱滤光片作为激发滤光片，是提高荧光强度的根本方法。
许多染料的最大吸收峰并不是紫外光，而是在400nm-500nm 的蓝绿光，所以紫外光不是这些染料的最佳激发光源，可见光才是这些染料的最佳光源。
常用荧光色素波长名称最大吸收波长( nm ) 最大发射波长 ( nm ) 适用性吖啶橙( Acridine orange ) 405585中好吖啶黄( Acridine yellow )455620中碘化丙啶( Propidium iodide )488620中溴化乙啶( Ethidium bromide )488610好光神霉素( Mithramycin )457570好派若宁Y( Pyronin Y )488580540-660中罗丹明123( Rhodamine 123 )560差赫斯特33258 (Hoechst 33258 )338505好荧光素( Fluorescein )495525好荧光黄( Lucifer yellow )428544中伊红( Eosin ) 525546四甲基罗丹明( Tetramethyl rhodamine) 555580中SYBR Green I好498522SYBR Gold好495540SYPRO Orange好475580SYPRO Red中545635NBD好467538GelStar好495530好黄色荧光蛋白EYFP515530好绿色荧光蛋白EGFP490510蓝色荧光蛋白EBFP380440差常用抗体标记荧光染料的特性及其应用1、FITC （异硫氰酸荧光素）绿色：激发波长488nm 最大发射波长525nm1 ）其标记的抗体适用于所有配备488nm氩离子激光器的流式细胞仪；2）在流式细胞仪的FL1通道检测；3）可用于荧光显微镜技术4）荧光强度易受PH值影响，PH值降低时其荧光强度减弱。
国内日光型荧光颜料产品现状及发展方向前言日光型荧光颜料已有七十余年历史，以其鲜艳明亮的色彩及便捷而广泛的应用被市场所接纳。
虽然日光型荧光颜料在国内已存续三、四十年，并有数家生产商，其生产与应用在国内市场发展迅速，也已有化工应用方面学者对其原理、应用、制备、改进等方面做了研究并发布了相关成果，然而目前关于该产品似乎并没有正式、全面的介绍，在各种颜料的分类当中鲜见对其专门的说明，遑论对其在国内市场情况的系统分析与概括，甚至名称多种多样，亦有人将日光型荧光颜料与其他荧光颜料（无机荧光颜料等）混淆，或冠之以“荧光粉”等模棱两可的称谓。
本文旨在对日光型荧光颜料的历史、原理、应用以及国内的市场现状及发展方向做简略的介绍与分析，以期让更多的人了解该产品。
一、日光型荧光颜料的定义、历史及应用领域1. 荧光现象荧光现象【Fluorescence】是一个光致冷发光【Luminescence】过程。
在这个过程中，某种常温物质经某种波长的入射光（紫外光或可见光）波段内的短波长光能量被吸收之后，进入激发态，立即又从激发态回到常态并以较长波长的出射光形式被释放出来，后者通常落在可见光范围内；而一旦停止入射光后，发光现象也随之立即消失，具有这种性质的出射光就被称之为荧光。
在日常生活中，人们通常广义地把各种微弱的光亮都称为荧光，而不去仔细追究和区分其发光原理。
人眼能够看到的部分波长的光称为可见光，波长以nm（纳米）表示，范围很小（380‐780nm），如图一所示：图一 光谱示意图能够产生荧光效果的颜料分为无机荧光颜料（比如日光灯、CRT显像管及防伪荧光油墨上用的荧光颜料）和有机荧光颜料，包括日光型荧光颜料、荧光增白剂及极少数其他类型。
而另一个典型的光致发光【Luminescence】过程是夜光（或磷光）【Phosphorescence】。
通俗的说，夜光与荧光比较相似，同样是吸收入射光的某些波长的光然后通常以可见光形式释放出来，但夜光与上述荧光的最大区别在于：荧光是入射光停止后则发光现象随即消失，而夜光是入射光停止之后才开始发光现象。
分析荧光油墨的发光原理荧光油墨是发光材料，是能够发射光的物质。
该物质在阳光的照射下吸收太阳光辐射的能量储存起来，然后以热的形式表现出来，或者发生光化学反应，或者能量以可见光的形式散发出来。
吸收的辐射能比散发的能量波长短。
人们把吸收不同颜色的光，然后散发出来的现象称为荧光。
把吸收光以后在黑暗环境中发光的现象称为磷光。
二者的不同是磷光吸收自然光或人工光，在光移走之后的黑暗环境中发光，而荧光在吸收光之后必须在光存在下才可以发光。
荧光油墨在“夜光”或者紫光存在的情况下也可以发光。
但是在黑暗无光的情况下不发光。
荧光油墨不但能够表现出它本身的颜色，而且具有吸收光和改变光强度的能力，使得它表现出的颜色具有更强的光强度，但色相(或颜色)不变。
普通油墨或染料通过反射光来显示颜色，而且每种油墨颜色的波长和输出能量也不同。
例如红光反射红色，吸收其他颜色。
而荧光红色不但具有部分反射的红色，而且把其他颜色(绿色、蓝色和紫色)转换成红色波长作为红色散发出来，因此该色好像是从物体内部辐射出来一样。
正是这种发光的属性使该油墨被称为荧光油墨。
印刷者使用荧光油墨进行印刷可以获得4倍于普通油墨的亮度和可见性。
荧光油墨在昏暗的光线下，比如黄昏和黎明时分，显得非常明亮。
普通油墨颜色和荧光油墨颜色的反射特征是不同的，其测量单位是埃。
荧光油墨把短波长光转换成长波长光而叠加产生荧光，通过转换和叠加，形成一种具有特殊的亮度和可见性的荧光颜色。
通常情况下，日光型荧光颜色标明直接在日光下寿命为30天。
但现在该颜色在室内的寿命已经大大提高了。
该色在室内可延长到无限期。
它可用于表现鲜艳和跳跃的颜色。
目前，荧光油墨具有底色精细、干燥快、和易用于较薄墨层等优点，在使用时要注意使用说明。
荧光油墨的颜料是以荧光颜料为基础，在实验控制下与塑料树酯进行精心的化学复合、搅拌和混合而成。
日光型荧光颜色是染料悬浮于无色、透明、不可溶的树酯中所形成的颜色。
树酯是以粉状物质为基础，加入到特定的连接料中精心混合和搅拌而成。
碱性红染料在日光型荧光颜料中的荧光效果研究摘要：日光型荧光颜料的着色基本是碱性染料，用于红相的主要是碱性红和碱性紫，其添加比例决定了日光型荧光颜料的荧光效果好坏。
本文通过在注塑类日光型荧光颜料中添加碱性红和碱性紫，研究了不同比例对荧光效果的影响，并提供了最优的比例方案。
关键词：日光型荧光颜料；碱性红；碱性紫；荧光效果Study on fluorescence effect of basic red dye in sunlight fluorescent pigmentSheng Hairui1.2（1.School of Chemistry and Chemical Engineering, Hefei University of Technology，Hefei Anhui 230009；2. Huangshan Jiajia fluorescent material Co., Ltd，Huangshan Anhui 245200）Abstract:The coloring of solar fluorescent pigments is basically alkaline dyes, and the main dyes used in the red phase are basic red and basic violet. The addition ratio determines the fluorescenceeffect of solar fluorescent pigments. In this paper, the effects of different proportions on the fluorescence effect were studied by adding basic red and basic violet to the injection molding fluorescent pigment, and the optimal proportion scheme was provided.Key Words:Daylight fluorescent pigment；Basic Red; Basic Violet；Fluorescence effect0引言日光型荧光颜料是有机荧光颜料，具有特殊的性能，既在日光的照射下吸收紫外或可见光波段内的短波长电磁波光能，不以热量的形式散发，而以长波长电磁波的形式将所吸收的能量发射出去，落在低频可见光范围内，这种发射光与正常的反射光色彩相结合，形成异常鲜艳的荧光色彩，十分引人注目[1-2]。
