家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的共24页文档
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实验十二消化实验家兔离体小肠平滑肌生理特性[目的要求]1、学习离体肠段平滑肌的实验方法。
2、了解肠段平滑肌的生理特性。
[基本原理]哺乳动物消化管平滑肌与肌肉组织共有的特性,如兴奋性、传导性和收缩性等。
但消化管平滑肌又有其特点,即兴奋性较低,收缩缓慢,富有伸展性,具有紧张性、自动节律性,对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。
这些特性可维持消化管内一定压力,保持胃肠等一定的形态和位置,适合于消化管内容物的理化变化,在体内受中枢神经系统和体液因素的调节。
将离体组织器官置于摸拟体内环境的溶液中,可在一定时间内保持其功能。
本实验以台式液作灌流液,在体外观察及记录哺乳动物离体肠段的一般生理特性。
[动物与器材]兔、恒温平滑肌槽、支架、烧杯、20ml注射器、张力传感器、生物机能实验系统、温度计、台式液、肾上腺素(1:10000)、乙酰胆碱(1:10000)、阿托品针剂(1支)。
[方法与步骤]1、装好实验装置,平滑肌槽恒温调至37℃。
2、制备离体兔肠段用木槌猛击兔后头延髓部,致其昏迷后立即剖开腹腔,找到胃幽门与十二指肠交界处。
在十二指肠起始端扎一线,取出十二指肠、空肠、放入冷台式液内。
先用20ml注射器冲洗内容物,冲洗干净后剪成若干约1.5cm长的小肠段(每一实验小组一段)在其两端结扎,一端做一短线环固定在通气的浴皿内,另一端扎线与张力传感器相连。
将肠段完全浸浴在调好温度的平滑肌槽中,并调整好台式液充气量(小气泡接连不断)。
3、开启生物机能实验系统,接通与张力传感器相连的通道。
固定管并调节扎线与张力传感器,使肠段运动自如又能牵动传感器(注意:扎线不可贴壁或过紧过松)。
调节增益与扫描速度,使肠段的运动曲线清晰地显示在显示器上并记录肠段活动曲线。
4、实验观察(1)记录对照肠段运动曲线后,停止供气1分钟并记录曲线变化,同时观察肠段紧张度变化。
当出现明显变化后,立即恢复供气。
用新鲜37℃台式液冲洗,待恢复正常(注意作好标记)。
家兔离体小肠平滑肌生理特性,实验目的,1(通过观察各种因素对离体小肠平滑肌运动的影响,加深对平滑肌生理特性的了解。
2(学习动物离体组织器官灌流的实验方法。
,实验原理,消化管、血管、子宫、输尿管、输卵管等均由平滑肌组成。
平滑肌除具有肌肉的一般生理特性外,还具有自动节律性、较大的伸展性及对化学、温度和牵拉刺激敏感等生理特性。
在一定时间内,离体的小肠平滑肌在适宜的环境中仍可保持其生理功能。
本实验将小肠平滑肌置于模拟内环境中,观察当模拟内环境因素发生变化时,离体小肠平滑肌运动的变化。
该实验方法不仅在理论上可以证明平滑肌的生理特性,而且还可用来测定微量化学物质或药物的生物学特性,被称为生物学检定法。
,器械与材料,兔(大白鼠或鸭)、恒温平滑肌浴槽、计算机生物信号采集处理系统(或二道生理记录仪)、张力换能器、哺乳动物手术器械一套、注射器、纱布、棉线、丝线、万能支架、螺旋夹、双凹夹、温度计、细塑料管(或橡胶管)、长滴管。
缝针、培养皿、台氏液、肾上腺素(1?10000)、乙酰胆碱(1?100000)、0.5mg/ml 阿托品、0.01%磷酸组织胺、1mol/LNaOH、1mol/LHCI、1%BaCl2。
1,CaCl2、心得安、阿托品、自己准备可影响消化的药物。
,方法与步骤,1(恒温平滑肌槽的准备首先注水于水浴槽,浸漫度务必超过2支加热管。
然后在药液管及预液管加适量台氏液,二通开关是用于接通预液管和药液管之间的台氏液,使预液管预温的台氏液通向药液管。
恒温仪上的加温旋钮置于所需的温度约40?(此温度是水浴槽中加热管旁的水温,与药液管内的温度相差2,3?),为了药液管内的温度得到准确控制,须采用外加温度计调整。
最后打开供氧开关,即可产生空气气泡供氧,微调旋钮调节使气泡一个接一个不断涌出,不能过快以免液面振动而影响记录。
肌槽的右侧面有与预液管、药液管相通的出液管,用弹簧夹控制出液量。
2(水浴里的水恒温38?,营养管内充满台氏液。
实验四家兔离体小肠平滑肌生理特性及药物作用的观察实验目的:1. 了解兔小肠平滑肌的收缩特性;2. 观察不同剂量乙酰胆碱和异丙肾上腺素对小肠平滑肌的作用;3. 观察肉桂胺和地奥心明对小肠平滑肌的作用。
实验原理:1. 平滑肌收缩原理:平滑肌细胞中的钙离子可以进入肌浆高敏感度钙离子离子通道,钙离子进入细胞内后可激活肌球蛋白轻链激酶(MLCK),MLCK会通过磷酸化肌球蛋白轻链,使其与肌球蛋白重链结合,进而激活肌原纤维的收缩。
平滑肌的松弛则是通过激活肌球蛋白酶磷酸化酶(MLCP),使已经磷酸化的肌球蛋白轻链脱磷酸而实现的。
2. 乙酰胆碱和异丙肾上腺素作用机制:乙酰胆碱是一种促进胆碱能神经传递的神经递质,通过激活M3胆碱能受体激活平滑肌细胞内的MLCK,激活肌原纤维收缩而引起平滑肌收缩。
而异丙肾上腺素则是一种肾上腺素类神经递质,在平滑肌细胞内通过激活β2-肾上腺素能受体作用于肌浆高敏感度钙离子离子通道(L型钙通道),引起离子通道开放,钙离子进入细胞内,激活MLCK,MLCK活化肌原纤维,导致平滑肌收缩。
3. 肉桂胺和地奥心明作用机制:肉桂胺是一种抑制钙离子离子通道开放的钙离子通道阻滞剂,通过抑制平滑肌细胞内的钙离子进入细胞内而阻止平滑肌收缩。
而地奥心明则是一种肾上腺素能受体激动剂,与β2-肾上腺素能受体结合,促进L型钙通道开放,增加平滑肌细胞内的钙离子进入,从而导致平滑肌收缩。
实验步骤:1. 实验前准备:将兔子解剖,取出小肠,并将其中的粘膜和黏膜去除,切成宽约0.5cm,长约 3-4cm 的小块,用泡沫贴片固定于组织浴盆内。
组织浴盆中加入平衡液,使小块与平衡液分离,并置于37℃水浴2至3小时。
2. 实验操作:将小肠平滑肌组织块连接至力记录器,穿孔测压管插入,测压管注射平衡液,保持压力稳定后进行实验记录。
a. 观察小肠平滑肌的基础收缩情况,记录其基础张力;b. 每隔2分钟注射一次乙酰胆碱,初步测定其作用剂量,以其作用达到峰值的最小剂量为标准剂量,记录其作用前和作用峰值的收缩程度,记录对应的张力值;c. 注射不同剂量异丙肾上腺素,观察其作用,记录其作用时的收缩程度和张力;d. 注射肉桂胺,观察其作用,记录其作用时的收缩程度和张力;e. 注射地奥心明,观察其作用,记录其作用时的收缩程度和张力。
实验24 离体家兔肠肌运动一、实验目的观察某些因素对肠肌运动的影响消化道平滑肌兴奋性较低,收缩缓慢并有自律性。
消化管运动的基本形式是蠕动和紧张性收缩,小肠还有分节运动。
给予离体肠肌以接近于在体情况的适宜环境,消化道平滑肌仍可保持良好的生理特性。
二、实验材料和方法1. 材料家兔;麦氏浴槽,超级恒温器,张力换能器,生物信号采集处理系统;台氏溶液。
2. 方法2.1 实验系统连接和参数设置麦氏浴槽中加20ml的台氏液,调节超级恒温器的温度,使麦氏浴槽内温度恒定在38度。
通气管接95%O2+5%CO2混合气体通道。
同螺丝夹调节气体管道的气体流量,调节至浴槽中气泡一个个逸出为止,张力换能器与生物信号采集处理系统相连。
仪器参数:RM6420系统参数:点击实验菜单中的“肠肌记录”,仪器参数:通道时间常数为直流,滤波频率10Hz,灵敏度3g,采样频率200Hz,扫描速度1ms/div。
2.2 离体家兔十二指肠标本制备取家兔一只,用木追击其头部至昏,立即剖开腹腔,找到十二指肠大乳头处,然后取10cm左右一段置于氧饱和的台氏液中,用注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净,后将其剪成小段(约1~1.5cm),换以新鲜台氏液备用(注意操作时勿牵拉肠段以免影响收缩功能)。
去小肠肠管于盛有台氏液的培养皿中,在其两端对角壁处,分别用缝针穿线并打结。
注意保持肠道通畅,勿使其封闭。
2.3 标本固定肠管一端连线于浴槽固定钩上,然后放入38摄氏度的麦氏浴槽中。
再将肠管的另一段系结在张力换能器的悬臂梁上,调节张力至2~3g。
2.4.1 在浴槽中滴加入Ach,观察其反应,反应稳定后换液冲洗。
2.4.2 在浴槽中滴加肾上腺素溶液后,观察其反应,反应稳定后换液冲洗。
2.4.3 在浴槽中滴加HCl,观察并记录其收缩幅度,反应稳定后换液冲洗。
2.4.4 在浴槽中滴加NaOH,记录其收缩幅度,待曲线恢复至基线或基本稳定后换液冲洗。
2.4.5 将浴槽中台氏液的温度降低到25摄氏度,观察其反应,反应稳定后换液冲洗。
离体小肠平滑肌运动一、实验目的:1、学习制备离体肠肌运动的实验方法2、观察离体小肠平滑肌运动形式;3、观察、观察各种各种各种因素对离体肠肌运动的影响因素对离体肠肌运动的影响并分析其机制离体小肠平滑肌运动二、实验材料及方法:(一)实验材料:1、对象:家兔2、仪器与设备:哺乳动物手术器械一套、、仪器与设备:哺乳动物手术器械一套、RM6240RM6240RM6240生物生物信号采集处理系统信号采集处理系统 、HSS-1B HSS-1B型数字式超级恒温浴槽、型数字式超级恒温浴槽、麦氏浴皿、张力麦氏浴皿、张力换能器、带微调铁支架、木锤、弯盘。
换能器、带微调铁支架、木锤、弯盘。
3、药品及试剂:台氏液(Tyrode sol.)、 1:1000010000乙乙酰胆碱、酰胆碱、11:1000010000肾上腺素、肾上腺素、肾上腺素、1%1%1%氯化钙、氯化钙、氯化钙、1mol/L 1mol/L 1mol/L盐酸、盐酸、1mol/LNaOH、离体小肠平滑肌运动(二)实验方法:1、离体组织灌流装置的准备①将超级恒温器的出、入水口与麦氏浴槽的出、入水口相连,形成循环灌流状态。
②打开超级恒温器的电源开关;将显示、设定开关拨向“设定”侧,转动旋钮将水温设定在37℃,再将显示、设定开关拨向显示侧,显示当前加热的水温度。
③在麦氏浴槽的中心管加在麦氏浴槽的中心管加Tyrode Tyrode Tyrode sol sol sol(台氏液)(台氏液)于某一水平,并做记号(以后每次换液均保持这一水平)。
离体小肠平滑肌运动④调节调节LL 型固定钩末端的进气量旋钮,使气泡细小而均匀。
⑤灌流装置加热,使恒温槽的温度保持在37℃。
⑥将盛有备用将盛有备用Tyrode Tyrode Tyrode sol sol sol的烧杯的烧杯的烧杯..放在超级恒温器内水浴箱恒温。
离体小肠平滑肌运动2、记录装置准备①打开打开RM6240RM6240RM6240外置设备的电源和电脑电源外置设备的电源和电脑电源②鼠标左键双击鼠标左键双击RM6240RM6240RM6240快捷键。