植物生理生化研究法实验班次安排(2013年春季)——

令狐采学《植物生理生化》实验指导（适用专业：农学类相关专业）黑龙江八一农垦大学植物科技学院生理生化教研室目录生物化学实验部分：实验一、氨基酸的纸层析 (1)实验二、蛋白质含量测定（设计性实验） (5)实验三、酶的基本性质 (7)实验四、维生素C含量的测定 (12)实验五、还原糖和总糖的测定 (14)实验六、淀粉酶活性的测定 (17)实验七、脂肪浸提——索氏脂肪浸提法 (20)实验八、一种简单实用的提取植物DNA的方法 (22)实验九、聚丙烯酰胺电泳法测定大麦、小麦种子纯度 (24)实验十、淀粉酶的诱导、提取和活性测定（综合性实验） (26)植物生理学实验部分:实验一、植物组织水势的测定（小液流法） (28)实验二、植物伤流量的测定 (30)实验三、根系活力的测定 (31)实验四、蒸腾强度的测定 (35)实验五、叶绿体色素的提取、分离、性质和定量测定（综合性实验） (37)实验六、光合强度的测定（改良半叶法） (39)实验七、呼吸强度的测定 (41)实验八、植物抗逆性的鉴定（电导仪法） (43)实验九、植物缺水程度的测定（脯氨酸法） (45)生物化学实验部分实验一氨基酸的纸层析一、目的：层析分析法已广泛用于氨基酸、核酸、激素、维生素、糖类的分离与分析。

其优点是能够分离与分析在组成、结构及性质上极为相似的物质；设备简单，操作容易，样品用量很少，结果也较明确。

本实验的目的在于要求学生掌握纸层析法的一般原理和操作技术。

二、原理：纸层析法是以滤纸作为支持物的分配层析法。

分配层析法是利用物质在两种不同混合溶剂中的分配系数不同，而达到分离的目的。

通常用α表示分配系数。

在一定条件下，一种物质在某溶剂系统中的分配系数是一个常数。

）溶质在流动相的浓度（）溶质在静止相的浓度（l s C C =α 层析溶剂是选用有机溶剂和水组成的。

由于滤纸纤维素对水有较强的亲和力（纸上有很多-OH 基与水以氢键相连），吸附很多水分子，一般达滤纸重的22%左右（其中约有6%的水与纤维素结合成复合物），因此使这一部分水扩散作用降低形成静止相；而有机溶剂与滤纸的亲和力很弱，可以在滤纸的毛细管中自由流动，便形成流动相。

《植物生理生化》实验教学大纲实验一钾离子对气孔开度的影响（3学时）一、实验目的通过本实验的观察验证气孔运动的无机离子吸收学说，通过与钠离子、蒸馏水做对照，观察钾离子对气孔开度的影响。

二、实验性质验证性实验三、实验内容钾离子对茶树叶片气孔开度的影响。

四、实验材料与仪器设备(一)材料：茶树叶片(二)仪器设备：显微镜，温箱，镊子，盖玻片，载玻片，培养皿(三)试剂：0.5% 硝酸钾溶液，0.5% 硝酸钠溶液，蒸馏水五、实验方法与步骤（1）每2人一组。

取三个培养皿编号，分别放入15ml的0.5% 硝酸钾溶液、0.5% 硝酸钠溶液和蒸馏水。

（2）撕茶叶表皮分别放入上述3个培养皿中。

（3）将3个培养皿放入25℃温箱中。

（4）取出培养皿置于人工光照条件下照光0.5h。

（5）分别取出叶表皮放在载玻片上，加盖玻片，在显微镜下观察气孔的开度。

六、作业1．完成实验报告。

编写人：茶学与生物系洪永聪实验二植物细胞渗透势的测定（3学时）一、实验目的渗透势与植物水分代谢、生长及抗性等有密切关系，因此，在植物的水分生理和抗性生理研究中经常需要测定渗透势。

要求学生通过本实验熟悉植物细胞渗透势的测定方法。

二、实验性质验证性实验三、实验内容洋葱细胞渗透势的测定。

四、实验材料与仪器设备(一)材料：洋葱(二)仪器设备：显微镜，载玻片，盖玻片，温度计，尖头镊子，刀片，小培养皿，试剂瓶，烧杯，容量瓶，量筒，吸管等（三）药品试剂：蔗糖、0.03%中性红溶液五、实验方法与步骤（1）每2人一组。

取培养皿9套编号，将配制好的不同浓度的蔗糖溶液按顺序加入各培养皿。

（2）用镊子博取0.5平方厘米的洋葱表皮，吸去表面水分，放入0.03%中性红溶液中染色5min，吸去表面水分后浸入不同浓度的蔗糖溶液中，浸泡30min。

（3）取出切片放在载玻片上，并滴一滴同浓度的蔗糖溶液，盖上盖玻片，于显微镜下观察。

六、作业1．完成实验报告编写人：茶学与生物系洪永聪实验三叶绿体色素的提取分离及理化性质（4学时）一、实验目的学会叶绿体色素提取和分离的方法；了解叶绿体色素的荧光现象、皂化反应等理化性质。

植物生理生化综合实验报告面粉与米粉中可溶性糖含量的差异蒋名鹏（云南农业大学烟草学院 2021313546）植物体内的可溶性糖是光合作用的产物【1】。

可溶性糖以蔗糖为主，是植物糖类运输的主要形式。

糖是人体所需的六大营养成分之一【2】，在我们的生活中，我们主要是从植物中获取糖分。

而在我国南方人主要以大米为主食，北方人以面粉为主食。

本文对于研究植物碳水化合物代谢，评价营养状况，分析农产品品质等均有必要测定可溶性糖含量，同时可掌握蒽酮法测糖的基本技术【3】；更进一步可分析比较米粉与面粉中可溶性糖含量，试说明米粉与面粉哪个糖分更高，为二者营养价值比较作参考。

一、材料和方法供试材料为云南农业大学购买的粗米粉和粗面粉，经过一定的去杂处理。

糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛或羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖【4】的含量成正比，故可用于糖的定量测定。

可溶性糖的测定可分为三步：1.绘制标准曲线；2.提取可溶性糖---干样浸提；3.测定糖含量，选用620nm波长在分光光度计上比色，查标准曲线，求得相应的【5】糖含量。

二、结果和分析 1.米粉与面粉中可溶性糖含量通过表一可看出4次重复实验面粉的可溶性糖平均百分含量为4.23，米粉的可溶性糖平均百分含量为1.01,；显然，面粉的可溶性糖含量是米粉的四倍多。

表一重复次数蔗糖含量% 平均值 1 0.995 米粉 2 0.871 1.01 3 0.8834 1.661 3.91 面粉2 3.80 4.233 4.334 4.88通过下图一，可清晰看出在各次重复实验中，面粉中可溶性糖含量显著高于米粉中可溶性糖含量。

图一米粉与面粉蔗糖含量比较折线图米粉面粉4.883.83.914.331.660.871蔗糖含量%0.9950.883三、讨论蔗糖是糖类主要的一种，面粉和米粉这两种食物是人获得糖类的主要物质。

糖类是人体生命活动的基础，糖类代谢是生物体物质代谢中具有重要的作用。

《植物生理生化实验》教学大纲1．课程中文名称/英文名称：植物生理生化实验（Experiment of Plant Physiology and Biochemistry）2．课程代码：PRN2523．课程类别：☐公共课程 学科基础课程☐专业课☐实践教学环节4．课程要求： 必修课☐选修课5．课程属性： 独立设课☐课内实验6．课程总学时:32学时总学分：1学分实验学时：32学时实验学分：1学分7．适用专业：园艺学、设施农业科学与工程学、农学、草业科学、农业资源与环境学、植物保护8．先修课程：植物生理生化理论一、实验课程简介本课程是植物生理生化学的配套课程，是园艺学、设施农业科学与工程学、农学、草业科学、农业资源与环境学、植物保护学专业基础课。

是以无机化学、分析化学、有机化学、植物学等课程为基础，它与植物生理生化理论课同时开设。

该课程主要介绍植物生理生化的实验研究技术以及常用植物生理生化指标的分析方法及原理，为专业课的学习与科学研究工作提供技术支持与手段。

它不仅是验证、巩固和加深课堂所学的基础理论知识，更重要的是培养学生实验操作能力，综合分析问题和解决问题的能力，培养学生自主设计实验的基本能力，养成严肃认真、实事求是的科学态度和严谨的工作作风，使学生在科学方法上得到初步训练。

二、实验教学目标与基本要求通过本课程的学习，要求学生掌握植物生理生化的一些基本实验技术与原理，熟悉植物生理生化常规仪器的使用方法，掌握植物生理学实验注意事项，如取材方法、环境控制、数据处理，图表表示，结果讨论等基本规定和要求。

掌握包括糖、蛋白质、核酸、脂肪、酶等生命物质的分离、分析和测定技术；光合、呼吸、水分等代谢生理；生长、发育及环境生理等的动态测定和分析等内容。

能独立设计并完成一般性实验内容，操作规范，并熟练运用所学过的植物生理及其它有关课程的知识独立完成实验报告，以培养学生严谨的科学态度和科研素质。

三、本实验课程的基本理论与实验技术知识本实验课是基于《植物生理生化》理论课学习而开设的，基本理论依据为：生物大分子蛋白质、核酸、糖、脂及维生素、酶等的理化特性及其生物学活性；植物或离体组织的生长特性和规律等。

《植物生理学实验》课程大纲一、课程概述课程名称（中文）：植物生理学实验（英文）：Plant Physiology Experiments课程编号：18241054课程学分：0.8课程总学时：24课程性质：专业基础课前修课程：植物学、生物化学、植物生理学二、课程内容简介植物生理学是农林院校各相关专业的重要学科基础课，是学习相关后续课程的必要前提，也是进行农业科学研究和指导农业生产的重要手段和依据。

本实验课程紧密结合理论课学习内容，加深学生对理论知识的理解。

掌握植物生理学的实验技术、基本原理以及研究过程对了解植物生理学的基本理论是非常重要的。

本大纲体现了植物生理学最实用的技术方法。

实验内容上和农业生产实践相结合，加强学生服务三农的能力。

实验手段和方法上，注重传统、经典技术理论与现代新兴技术的结合，提高学生对新技术、新知识的理解和应用能力。

三、实验目标与要求植物生理学实验的基本目标旨在培养各专业、各层次学生有关植物生理学方面的基本研究方法和技能，包括基本操作技能的训练、独立工作能力的培养、实事求是的科学工作态度和严谨的工作作风的建立。

开设植物生理学实验课程，不仅可以使学生加深对植物生理学基本原理、基础知识的理解，而且对培养学生分析问题、解决问题的能力和严谨的科学态度以及提高科研能力等都具有十分重要的作用。

要求学生实验前必须预习实验指导和有关理论，明确实验目的、原理、预期结果，操作关键步骤及注意事项；实验时要严肃认真专心操作，注意观察实验过程中出现的现象和结果；及时将实验结果如实记录下来；实验结束后，根据实验结果进行科学分析，完成实验报告。

四、学时分配植物生理学实验课学时分配实验项目名称学时实验类别备注植物组织水势的测定3学时验证性叶绿体色素的提取及定量测定3学时验证性植物的溶液培养及缺素症状观察3学时验证性植物呼吸强度的测定3学时设计性红外CO2分析仪法测定植物呼吸速率3学时设计性选修植物生长物质生理效应的测定3学时验证性植物种子生活力的快速测定3学时验证性1果实、蔬菜中有机酸含量测定3学时设计性植物抗逆性的鉴定3学时设计性改良半叶法测定植物的光合速率6学时综合性选修植物生理综合演示实验3学时综合、设计性演示合计36学时注：本实验课程总计0.8学分，合24学时，安排8次实验，其中验证性实验占62.5%，综合性、设计性实验占37.5%。

植物生理生化实验原理和技术.第2版
植物生理生化实验原理和技术是一门综合性学科，其主要是研究植物生理、生化过程及其依赖于环境胁迫的知识。

其实验方法覆盖多个学科，包括植物的形态结构、生命发育及其与环境的关系;物质的合成和代谢;细胞器的结构及其对应的功能;生殖学;分子生物学等。

本课程以实验为主，旨在培养学生熟悉一般植物生理生化实验原理及技术，以及综合运用实验结果进行植物生理生化过程的理解能力。

实验原理和技术是植物生理和生化学研究的驱动力，这门课程将涵盖植物生理生化实验所需的各种基本原理和技术，比如观察技术、细胞及组织技术、测定理论和操作技术、分析检测技术以及分子生物学技术等。

本课程围绕植物的生命特性介绍植物生理生化实验的原理和方法，重点关注植物物质合成及代谢过程中实验技术的应用，包括：植物形态学实验技术、抑制和调控植物生长的实验技术、理化分析实验技术、分子标记实验技术、放射有关实验技术等。

实验还将着重讲述植物光合作用和调节生物学、植物内源性激素活性以及植物耐受环境异常状况的实验技术。

另外，本课程还将专门介绍一些新技术，如植物分子标记技术和植物全基因组学研究技术等。

本课程旨在培养学生掌握植物生理生化实验的原理和技术，包括植物的形态学、生殖学、理化分析和分子生物学等。

此外，学生还需要了解植物物质合成、代谢物动态和植物对环境的反应等问题。

同时，要求学生掌握有关最新技术，学习实验室中使用的设备及其原理，熟悉实验室的安全规定，学会进行实验体验和准确分析数据，以及运用实验结果进行问题分析和判断。

李合生. 植物生理生化实验原理和技术李合生（1921～2012），中国植物生理生化学家，被誉为我国植物生理学的奠基人之一。

他的研究成果及其对中国植物生理学发展的贡献不仅在学术界享有盛誉，而且对农业生产的实际应用产生了重大影响。

李合生对植物生理生化实验的原理和技术进行了大量的研究和实践，为植物生理学研究方法的创新和发展作出了重要贡献。

以下是关于李合生. 植物生理生化实验原理和技术的一些介绍。

一、植物生理生化实验原理1. 实验的目的和问题：在进行植物生理生化实验时，首先需要明确实验的目的和解决的问题。

研究植物光合作用的效率提高的方法，研究植物对环境胁迫的响应机制等。

2. 实验的设计和控制：植物生理生化实验需要精确的实验设计和严格的实验控制，以确保实验结果的可靠性和准确性。

实验因素的选取和处理、实验材料的选择和处理、实验条件的控制等。

3. 实验的方案和方法：根据实验的目的和问题，确定合适的实验方案和方法。

测定植物光合作用的速率可以选择光合速率仪、测定植物叶片的光谱特性可以使用光谱仪等。

二、植物生理生化实验技术1. 光合作用的测定：光合作用是植物生命活动的基础，测定植物的光合作用对于研究植物生理生化过程至关重要。

李合生在光合作用的测定方面进行了大量的研究，并开发了一系列的测定技术和仪器。

2. 植物代谢产物的测定：植物代谢产物的测定可以揭示植物的生物化学过程和物质代谢机制。

李合生研究了植物合成蛋白质的方法和代谢产物，提出了一系列的测定技术和方法。

3. 植物生长调控的实验技术：植物生长调控是植物生理生化过程的核心之一，实验技术的发展为植物生长调控的研究提供了有力的支持。

李合生在植物生长调控的实验技术方面做出了重要的贡献。

三、植物生理生化实验的应用李合生的植物生理生化实验原理和技术的应用不仅限于学术研究领域，还广泛应用于农业生产、食品工业等实际生产领域。

1. 农业生产：通过植物生理生化实验原理和技术，可以揭示植物在不同环境条件下的生长规律和适应机制，为农业生产中的种植技术、育种方法等提供科学依据。

植物生理学实验课程教学大纲课程名称：植物生理学实验(Experimentation of plant physiology)课程编号：1313015225课程类别：专业课总学时数：38 实验时数：38学分：1开课单位：生命科学学院生物综合教研室适用专业：生物科学适用对象：本科（四年）一、课程的性质、类型、目的和任务植物生理学实验是高等院校生物科学专业开设的一门必修的专业课程，该实验是植物生理学发展的基础和重要环节，是植物生理学理论通向农业生产实践的桥梁。

实验课的主要任务是培养学生动手能力、观察能力、分析问题和解决问题的能力，促进创造性思维，同时培养学生科研意识及实事求是的科学态度和严谨的科学作风，为后续课程学习以及将来科研工作奠定坚实的基础。

二、本课程与其它课程的联系与分工本课程开设之前要求学生必须先修数学、物理学、无机化学、有机化学、分析化学、生物化学及植物学实验等相关课程，具有这些课的基础，方可开设此门专业必修课。

三、课程内容及教学基本要求实验一植物细胞渗透势的测定植物细胞渗透势的测定原理[3]；测定方法[2]；撕表皮[3]；制片[3]。

实验二 TTC法测定植物根系活力植物根系活力测定的原理[2]；测定方法[3]；分光光度计的使用[3]。

实验三叶绿体色素的提取、分离和性质叶绿体色素的提取、分离和性质原理[2]；测定方法[2]；提取要点[3]；层析要点[3]；性质观察[1]。

实验四叶绿素的定量测定叶绿素定量的测定的原理[2]；基本技术方法[3]；含量计算[2]。

实验五植物呼吸速率的测定呼吸速率的测定原理[2]；基本技术方法[3]；滴定技术[3]；呼吸作用的意义[1]。

实验六生长素类物质对根、芽生长的影响生长素类物质对萌发种子根、芽生长的影响实验原理[2]；实验方法[2]；测量[3]；分析[3]；生长素及其类似物质的生理效应[2]。

实验七种子生活力的快速测定种子生活力快速测定的原理[3]；测定方法[2]；种子死活判定[3]。

植物生理生化实验课程教学大纲一、课程基本概况课程名称（英文）： Exp erime nt s of Plant p hysi ology and Biochemistry先行课：《物理学》、《化学》、《分析化学》、《植物生理生化》等。

、课程性质、目的和任务本课程是植物生理学的配套课程，是农科类各专业必修的专业基础课，属于以植物为对象各专业的工具课程之一。

其先行课为物理学、化学、分析化学、植物学、生理生化。

该课程主要介绍植 物生理生化的实验研究技术以及常用植物生理生化指标的分析方法及原理，为专业课的学习与科学 研究工作提供技术支持与手段。

通过本课程的学习，要求学生掌握植物生理生化的一些基本实验技术与原理，熟悉植物生理生化常规仪器的使用方法，能独立设计并完成一般性实验内容，操作规范，能够完成以植物为材料的 基本的科学研究工作。

从而达到更好地利用植物、人为地影响和改造植物，使之更大限度的为人类 服务的目的。

三、主要内容、重点及难点实验一应用纸层析分离鉴定氨基酸（一） 目的要求：学习纸层析分离技术，掌握纸层析分离鉴定氨基酸的原理和方法。

（二） 重点：纸层析分离鉴定氨基酸的原理、操作方法、结果分析。

（三） 难点 点样适量、分析确定层析结果。

实验二氨基酸含量的测定一一茚三酮比色法（一） 目的要求：掌握茚三酮比色法测定氨基酸含量的原理和方法；学习分光光度计的使用；学 习标准曲线的制作。

（二） 重点：实验原理和操作方法（三） 难点：样品提取、标准曲线制作和使用。

实验三可溶性糖含量的测定一一蒽酮法（一） 目的要求：掌握蒽酮法测定可溶性糖含量的原理和方法，了解可溶性糖含量这一生理指标 的意义。

练习分光光度计的使用和标准曲线的制作。

（二） 重点： （三） 难点：（一） 方法：（二） 目的要求：掌握测定蛋白质含量的原理和方法，了解蛋白含量测定的意义及使用方面。

练 习分光光度计的使用和标准曲线的制作。

（三） 重点：了解实验原理，正确运用方法。