【CN109618852A】一种丛枝菌根真菌的扩繁方法及其应用【专利】

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一种丛枝菌根真菌菌剂及其制备方法和在离子型稀土尾矿地生态修复

专利名称：一种丛枝菌根真菌菌剂及其制备方法和在离子型稀土尾矿地生态修复中的应用
专利类型：发明专利
发明人：王慧娟,黄金,邓扬悟,肖信锦,黄紫彬,谢芳芳
申请号：CN202011478128.0
申请日：20201215
公开号：CN112662565A
公开日：
20210416
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提供了一种丛枝菌根真菌菌剂及其制备方法和在离子型稀土尾矿地生态修复中的应用，属于生态环境技术领域；所述丛枝菌根真菌菌剂，包括以下组分：栽培基料和采用所述栽培基料培养的C4植物的地下部分；所述栽培基料包括丛枝菌根真菌和C4植物扩繁基质。

本发明的丛枝菌根真菌菌剂中包括C4植物根系、菌丝、孢子和扩繁基质。

将本发明的丛枝菌根真菌菌剂接种到离子型稀土废弃尾矿土壤中，可显著提高紫花苜蓿和黑麦草等植株的存活率并促进其生长发育，同时可以提高土壤的有机质含量。

本发明提供的丛枝菌根真菌菌剂能够有效提高离子型稀土废弃矿山生态修复效果。

申请人：江西离子型稀土工程技术研究有限公司
地址：341000 江西省赣州市赣州经济技术开发区黄金大道36号
国籍：CN
代理机构：北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司
代理人：朱玲艳
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一种丛枝菌根真菌及其应用

一种丛枝菌根真菌及其应用
本发明涉及一种丛枝菌根真菌及其应用。

该真菌属于丛枝菌门，形态特征为菌丝体纤细，呈白色或淡黄色，生长迅速，能够形成丰富的丛枝菌根，与多种植物形成良好的共生关系。

经过鉴定，该真菌为一种新的丛枝菌根真菌，命名为“ARF-1”。

该真菌具有以下特点：①对多种植物均具有良好的共生能力，可与大豆、玉米、小麦等农作物形成丛枝菌根；②在不同环境条件下均能生长良好，对土壤的适应性强；③可促进植物生长，提高植物的产量和品质，减少化肥的使用量，降低农业生产成本；④能够生产多种生物活性物质，具有潜在的药用和农药开发价值。

本发明还提供了一种利用“ARF-1”丛枝菌根真菌改良农田土壤的方法，包括以下步骤：①选择“ARF-1”真菌株进行培养和繁殖；
②将“ARF-1”真菌株接种在种子或幼苗根系上，与植物形成丛枝菌根；③将接种后的植物移栽到农田土壤中生长，利用“ARF-1”真菌根系对土壤进行改良。

该方法可有效提高土壤的肥力和水分利用率，改善土壤结构，减轻土壤盐碱化和酸化等问题，从而提高农田产量和质量。

本发明还提供了一种利用“ARF-1”丛枝菌根真菌制备生物肥料和生物农药的方法。

该方法通过培养“ARF-1”真菌，收集其产生的丛枝菌根和生物活性物质，制备成生物肥料和生物农药，具有天然、绿色和环保的特点，对农业生产具有广泛的应用前景。

综上所述，本发明提供了一种具有广泛应用价值的丛枝菌根真
菌及其应用，可用于改良农田土壤、提高农田产量和质量、制备生物肥料和生物农药等领域。

一株丛枝菌根真菌及其应用[发明专利]

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201610206026.0(22)申请日 2016.04.05(83)生物保藏信息CGMCC No.12157 2016.03.02(71)申请人中国科学院生态环境研究中心地址 100085 北京市海淀区北京海淀区双清路18号(72)发明人陈保冬　郝志鹏　张莘　吴照祥　于萌　谢伟　(74)专利代理机构中科专利商标代理有限责任公司 11021代理人任岩(51)Int.Cl.C12N 1/14(2006.01)C09K 17/40(2006.01)C12R 1/645(2006.01)C09K 101/00(2006.01) (54)发明名称一株丛枝菌根真菌及其应用(57)摘要本发明公开了一株新的丛枝菌根真菌及其应用。

该丛枝菌根真菌的保藏编号为C G M C CNO.12157。

本发明的丛枝菌根真菌可促进宿主植物吸收磷等矿质元素，对宿主植物的抗逆性有显著的促进作用，如能够提高植物对干旱胁迫和重金属的耐受性，在制备生产土壤调理剂等领域中具有广泛的应用前景。

权利要求书1页说明书5页附图3页CN 105861316 A 2016.08.17C N 105861316A1.一株丛枝菌根真菌(Rhizophagus irregularis )AH01，其特征在于，其保藏编号为CGMCC NO.12157。

2.一种生物土壤调理剂，其特征在于，其包括如下组分：按重量份计，有机堆肥40-60份，草炭粉25-50份，磷矿粉15-30份，丛枝菌根真菌菌剂2-5份；其中，所述的丛枝菌根真菌菌剂由下述方法获得：在灭菌的扩繁基质上接种保藏编号为CGMCC NO.12157的丛枝菌根真菌，种植玉米和/或三叶草，使所述丛枝菌根真菌在扩繁基质和植物根系间充分繁殖，最终收获由扩繁基质干土、根外菌丝、根内菌丝和被侵染根段组成的丛枝菌根真菌菌剂，每克所述丛枝菌根真菌菌剂中含有50～80个丛枝菌根真菌孢子。

一种丛枝菌根真菌野外高效扩繁的方法[发明专利]

专利名称：一种丛枝菌根真菌野外高效扩繁的方法专利类型：发明专利
发明人：黄璐琦,陈美兰,杨光,陈敏,李鹏英,周修腾申请号：CN201510577555.7
申请日：20150911
公开号：CN106508419A
公开日：
20170322
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：丛枝菌根是土壤中的一类真菌与宿主植物根系建立的互惠共生体，研究表明AM菌根能参与植物许多生理生化代谢过程，对植物有多方面有益的作用。

目前的AM真菌扩繁生产主要采用土壤基质培养系统，需要灭菌处理和接种剂重量大，不便于运输的缺点，制约了丛枝菌根地推广应用。

因此，建立一种丛枝菌根野外高效扩繁方法具有重要的意义。

本发明涉及到“一种丛枝菌根真菌野外高效扩繁的方法”，该方法采用大扫灭对田间土壤消毒，并采用玉米和高粱作为宿主植物，正常管理下栽培3～6个月后取土壤样品进行检测，土壤中的孢子密度＞200个/10g，菌丝长度＞150m/10g。

申请人：中国中医科学院中药研究所
地址：100700 北京市东城区东直门内南小街16号
国籍：CN
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一种丛枝菌根真菌的培育方法[发明专利]

专利名称：一种丛枝菌根真菌的培育方法专利类型：发明专利
发明人：胡剑锋,胡娟红,俞冬冬,沈学锋,郑锋申请号：CN201811101342.7
申请日：20180920
公开号：CN109220521A
公开日：
20190118
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及微生物培育领域，为解决现有的用以大量快速地培育丛枝菌根真菌的方法成本高、培养基质制备成本同样较高，其效果也不尽人意等问题，本发明提供了一种丛枝菌根真菌的培育方法。

其包括：1)苗床准备：在大棚内的苗床铺设可透气渗水的塑料膜，然后填充丛枝菌根真菌培养基质；2)接种菌种：将菌种接种到苗床内部的丛枝菌根真菌培养基质中；3)作物种植：将已发芽后的宿主植物种植到苗床中，对其进行灌溉、施肥，使得丛枝菌根菌定植到宿主植物根部；4)收获交付：当宿主植物成熟后，停止灌溉，使得丛枝菌根真菌培养基质自然干燥，并将根系从丛枝菌根真菌培养基质中清理，再对丛枝菌根真菌培养基质进行干燥，包装交付市场。

申请人：浙江世佳科技有限公司
地址：313200 浙江省湖州市德清县武康镇曲园北路1233号
国籍：CN
代理机构：杭州杭诚专利事务所有限公司
代理人：尉伟敏
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一种丛枝菌根真菌的扩繁方法[发明专利]

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201710058144.6(22)申请日 2017.01.23(71)申请人中国农业科学院蔬菜花卉研究所地址 100089 北京市海淀区中关村南大街12号(72)发明人贺超兴　李衍素　闫妍　于贤昌　(74)专利代理机构北京高沃律师事务所 11569代理人王加贵(51)Int.Cl.A01G 31/00(2006.01)A01G 7/06(2006.01)(54)发明名称一种丛枝菌根真菌的扩繁方法(57)摘要本发明涉及一种丛枝菌根真菌的扩繁方法，属于菌根真菌扩繁技术领域。

本发明提供的丛枝菌根真菌的扩繁方法，包括以下步骤：1)将丛枝菌根真菌接种于基质进行培养，所述基质包括沸石、浮石、蛭石和泥炭；2)在所述步骤1)的基质中先后播种玉米、万寿菊和三叶草；所述每种植物的播种密度独立地为(8～12)个/m 2；3)以玉米的播种时间为基准，植物生长4～6个月后，将地下部分的菌根进行干燥、粉碎，与培养该丛枝菌根真菌的基质混合。

本发明提供的扩繁方法菌根侵染率高，真菌产量高，扩繁效果好。

权利要求书1页说明书5页附图1页CN 106718770 A 2017.05.31C N 106718770A1.一种丛枝菌根真菌的扩繁方法，包括以下步骤：1)将丛枝菌根真菌接种于基质进行培养，所述基质包括沸石、浮石、蛭石和泥炭；2)在所述步骤1)的基质中先后播种玉米、万寿菊和三叶草；所述每种植物的播种密度独立地为(8～12)个/m 2；3)以玉米的播种时间为基准，植物生长4～6个月后，将地下部分的菌根进行干燥、粉碎，与培养该丛枝菌根真菌的基质混合。

2.根据权利要求1所述的扩繁方法，其特征在于，所述沸石、浮石、蛭石和泥炭的体积比为(10～15)：(2～4)：(2～4)：1。

3.根据权利要求2所述的扩繁方法，其特征在于，所述沸石、浮石、蛭石和泥炭的体积比为12:3:3:1。

一种丛枝菌根真菌的高效单孢扩繁方法[发明专利]

专利名称：一种丛枝菌根真菌的高效单孢扩繁方法专利类型：发明专利
发明人：孙学广,石静
申请号：CN201811337362.4
申请日：20181112
公开号：CN109197379A
公开日：
20190115
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种丛枝菌根真菌的高效单孢扩繁方法，包括：于培养皿内石英砂上均匀摆放微孔滤膜圆片，用移液枪转移AMF孢子至微孔滤膜表面，每片微孔滤膜转移1个外观饱满的新鲜收集的孢子，盖好皿盖，20‑28℃暗培养；取白三叶草种子，浓硫酸表面消毒后催芽；将萌发的孢子连同微孔滤膜圆片一起转移至折叠的浸湿滤纸内，同时转接一颗刚长出真叶的白三叶草幼苗；用1/2强度的霍格兰营养液浸润花盆中的河沙，将携带孢子和白三叶草的滤纸片垂直放入花盆的河沙中；白三叶草生长1个月后检查AMF侵染情况；将成功侵染的白三叶草移栽回花盆，继续培养4个月后收获。

本发明单孢扩繁成功率高，耗时短。

申请人：贵州大学
地址：550025 贵州省贵阳市花溪区贵州大学(北区)科技处
国籍：CN
代理机构：贵阳东圣专利商标事务有限公司
代理人：袁庆云
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一种增强丛枝菌根真菌使用效果的基质及其制备方法和应用[发明专利]

专利名称：一种增强丛枝菌根真菌使用效果的基质及其制备方法和应用
专利类型：发明专利
发明人：孙锦,吴亚胜,郭世荣,张杰,李扬丹,赵玥,庄晏榕,刘波,许星规
申请号：CN201610089290.0
申请日：20160217
公开号：CN105724207A
公开日：
20160706
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种增强丛枝菌根真菌使用效果的基质及其制备方法和应用。

一种增强丛枝菌根真菌使用效果的基质，以腐熟牛粪和木薯渣混合物、蛭石和珍珠岩按照4～5:1～2:1的体积比复配的有机基质中添加0.05～1％(v/v)的丛枝菌根真菌孢子悬浮液以及海藻糖；以添加丛枝菌根真菌孢子悬浮液的有机基质的体积为基准，海藻糖的添加量为300～400g/m。

本发明专利通过大量实验发现通过在含有丛枝菌根真菌的基质中添加特定浓度范围的海藻糖，能够增强丛枝菌根真菌的活性，从而提高丛枝菌根真菌的使用效果，促进宿主植物与菌根形成共生体，从而提高AMF的使用效果，促进蔬菜的生长。

申请人：南京农业大学
地址：211225 江苏省南京市溧水区白马镇国家农业科技园南京农业大学基地
国籍：CN
代理机构：南京天华专利代理有限责任公司
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一种丛枝菌根真菌菌剂及其制备方法与应用[发明专利]

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201810148371.2(22)申请日 2018.02.13(71)申请人河南科技大学地址 471000 河南省洛阳市涧西区西苑路48号(72)发明人石兆勇　张家成　徐寿霞　尹可敬　李珂　徐晓峰　(74)专利代理机构洛阳公信知识产权事务所(普通合伙) 41120代理人许菲菲(51)Int.Cl.A01G 18/10(2018.01)A01G 18/20(2018.01)A01G 31/00(2018.01)A01G 24/10(2018.01)A01G 24/27(2018.01)A01G 22/20(2018.01)B09C 1/10(2006.01)(54)发明名称一种丛枝菌根真菌菌剂及其制备方法与应用(57)摘要本发明涉及微生物制剂及植物栽培技术领域，具体涉及一种丛枝菌根真菌菌剂及其制备方法与应用。

本发明采集钼矿区植物的根际土壤，采用湿筛法分离丛枝菌根真菌的成熟孢子，然后接种到玉米幼苗的根系上，接种后的玉米幼苗在培养基质上生长3～4个月，将培养基质和玉米根系分离，玉米根系剪碎，然后与培养基质混合，得到丛枝菌根真菌原种菌剂；将原种菌剂接种至扩繁基质中播种玉米种子，对玉米培养6～10周，将扩繁基质和玉米根系分离，玉米根系剪碎，然后与扩繁基质混合，得到丛枝菌根真菌菌剂，该菌剂可促进玉米在钼污染土壤中生长。

权利要求书1页说明书6页附图1页CN 108419605 A 2018.08.21C N 108419605A1.一种丛枝菌根真菌菌剂的制备方法，其特征在于包含如下步骤：(1)采集钼矿区植物的根际土壤，采用湿筛法分离根际土壤中的丛枝菌根真菌的成熟孢子，得到丛枝菌根真菌孢子；将丛枝菌根真菌孢子接种到玉米幼苗的根系上，接种后的玉米幼苗在培养基质上生长3～4个月，然后去除玉米地上部分，将培养基质和玉米根系分离，玉米根系剪碎，然后与培养基质再次混合，得到丛枝菌根真菌原种菌剂；(2)将步骤(1)制得的丛枝菌根真菌原种菌剂接种至扩繁基质中，混匀，得到含有丛枝菌根真菌原种菌剂的扩繁基质；然后将含有丛枝菌根真菌原种菌剂的扩繁基质铺覆至厚度为10～20cm，浇水至田间持水量的50～70％，播种玉米种子，播种后表面覆盖厚度为1～2cm 的含有丛枝菌根真菌原种菌剂的扩繁基质；对玉米培养6～10周，其中，每天在光照8000～12000lux、温度28～35℃的条件下培养13～14h，在黑暗18～25℃的条件下培养10～11h；玉米生长过程中，浇灌含有1/2磷营养元素的Hoagland营养液并根据干湿状况进行浇水，控制基质含水量为田间持水量的30～70％；(3)玉米生长6～10周后，去除玉米地上部分，将扩繁基质与玉米根系分离，玉米根系剪碎，然后与扩繁基质再次混合，得到丛枝菌根真菌菌剂。

一种应用丛枝菌根真菌的闽楠育苗方法[发明专利]

专利名称：一种应用丛枝菌根真菌的闽楠育苗方法
专利类型：发明专利
发明人：姜英,李娟,梁瑞龙,蒋燚,何应会,林建勇,韦铄星,戴菱申请号：CN201811095745.5
申请日：20180919
公开号：CN109168879A
公开日：
20190111
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种应用丛枝菌根真菌的闽楠育苗方法，包括菌剂扩繁、种子处理、沙床催芽、育苗基质制备、真菌接种和苗期管理，选择合适的种子进行消毒处理后催芽，在闽楠芽苗移苗至育苗基质时进行丛枝菌根真菌接种，通过苗期管理获得优质的闽楠容器苗。

本方法为闽楠芽苗接种丛枝菌根真菌形成外生菌根，帮助闽楠植株吸收养分及水分，增强苗木的抗性，从而提高苗木质量，而且简单方便，成本低，具有较好的经济效益、社会效益和生态效益。

申请人：广西壮族自治区林业科学研究院
地址：530002 广西壮族自治区南宁市西乡塘区邕武路23号
国籍：CN
代理机构：南宁深之意专利代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：卢颖
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(10)申请公布号 CN 109618852 A (43)申请公布日 2019.04.16
权利要求书1页说明书7页附图1页
CN 109618852 A
CN 109618852 A
权利要求方法，其特征是包括以下步骤：将沙土和丛枝菌根真菌混合，得到混合沙土，然后将三叶草种子播种在该混合沙土上，播种后第3个月开始每10天使用植物源烟水进行浇灌，第五个月开始停止浇灌，直至三叶草地上部分枯萎。
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CN 109618852 A
说明书
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一种丛枝菌根真菌的扩繁方法及其应用
技术领域 [0001] 本发明涉及一种丛枝菌根真菌的扩繁方法，还涉及一种提高西洋参幼苗成活率的方法，属于丛枝菌根真菌扩繁及应用技术领域。
背景技术 [0002] 丛枝菌根真菌(Arbuscular mycorrhiza fungi , AMF)是一种专性活体营养型真菌，能与大部分高等植物的根系形成共生关系。植物与AMF共生形成的丛枝菌根（AM），具有不同于单纯植物根系的结构和功能，对植物生长、矿质代谢、水分吸收、抗性及改善产量和品质具有重要作用，尤其是在提高苗期移栽成活率和抗性方面具有重要意义。目前已有较多的将丛枝菌根真菌用于植物栽培的相关报道，例如烟草、中药材等。 [0003] 专利201310085299 .0公开了一种丛枝菌根真菌在烟草大面积栽培中的应用方法，该方法将初始丛枝菌根真菌菌剂单独接种扩繁，然后采用漂浮育苗的方法对烟草进行丛枝菌根真菌菌剂混合接种获得菌根化烟苗，并将菌根化的烟苗直接应用于大田生产。专利 201110366781 .2公开了一种提高栽培中药材抗病性的生物防治方法，该方法采用丛枝菌根真菌 (AMF) 作为生防菌，通过在中药材栽培之前进行菌根化苗处理来提高栽培中药材的抗病性。上述方法中，丛枝菌根真菌的接种方法是将AMF与植物种子或者种苗根系接触，进行接种，这种接种方法容易导致AMF与土壤中的土著菌形成竞争关系，降低AMF的侵染率，如果 AMF的接种率较低，AMF所占的比例越来越低，菌根共生体的有益作用也随之越来越少，直接影响AMF促进生长效应的发挥。 [0004] 西洋参源于五加科植物西洋参Panax quinquefolium L .的干燥根，属常用名贵药材，其性凉，味甘、微苦，具有补气养阴，清火除烦之功效。人参皂苷是其主要药效成分，具有较强的抗癌、降压及提高免疫力等活性。“凡不受人参之温补者，皆可以西洋参代之”，“补而不燥”等药理特性使得西洋参使用范围广泛，在药品、食品、保健品及化妆品等领域的经济价值日渐凸显。20世纪80年代西洋参在我国引种成功，目前我国已成为西洋参主产地和销售大国。山东省是我国西洋参主产区，种植面积达全国70%以上，年产鲜参10000余吨，西洋参种植成为区域经济发展的重要支柱。但西洋参主要以种子或种苗（1年生苗）为主要繁殖方式，苗期西洋参幼苗病害严重、抗性差等导致大面积缺苗，每年因缺苗导致的直接经济损失达30%以上。为预防缺苗，参农大量使用化学农药，这些问题导致西洋参产量与品质大幅度下降，农残重金属超标，严重威胁其临床用药安全。采取有效措施构建优质西洋参种苗繁育体系，是提高西洋参药材产量和品质的重要环节。
( 19 )中华人民共和国国家知识产权局
( 12 )发明专利申请
(21)申请号 201910019360 .9
(22)申请日 2019 .01 .09
(71)申请人济南大学地址 250022 山东省济南市市中区南辛庄西路336号
(72)发明人周洁冉志芳杨小彤张华方磊
(74)专利代理机构济南泉城专利商标事务所 37218
代理人贾波
(51)Int .Cl . A01G 22/25(2018 .01) A01G 7/06(2006 .01) C12N 1/14(2006 .01) C12R 1/645(2006 .01)
( 54 )发明名称一种丛枝菌根真菌的扩繁方法及其应用
( 57 )摘要本发明公开了一种丛枝菌根真菌的扩繁方
法及其应用，扩繁方法是：将沙土和丛枝菌根真菌混合，得到混合沙土，然后将三叶草种子播种在该混合沙土上，播种后第3个月开始每10天使用植物源烟水进行浇灌，第五个月开始停止浇灌，直至三叶草地上部分枯萎。然后用扩繁得到的高浓度丛植菌根真菌菌剂对西洋参种子进行处理，同时用植物源烟水对幼苗进行处理，植物源烟水中含有诱导丛植菌根真菌接种的信号物质，同时扩繁得到的菌剂中含有高浓度的丛植菌根真菌，这大大提高了丛植菌根真菌在西洋参中的浸染率，提高了菌根共生体的比例，有利于提高西洋参幼苗的抗病能力和成活率，减少化学农药的使用量，提高西洋参产量和品质。
2 .根据权利要求1所述的扩繁方法，其特征是：沙土和丛枝菌根真菌按照8-12:1的体积比混合。
3 .根据权利要求1所述的扩繁方法，其特征是：播种后2个月内，每5天浇水一次。 4 .根据权利要求1-3中任一项所述的扩繁方法，其特征是：所述丛枝菌根真菌为根内球囊霉(Glomus intraradices , G .I)。 5 .根据权利要求1-3中任一项所述的扩繁方法，其特征是：所述植物源烟水的配置方法是：先将6-7kg的植物源焖烧50-60min所产生的烟通入500ml冷水中，得到的水溶液按照1: 500-5000的体积比用水稀释，即为植物源烟水；所述植物源为质量比4-6:1-3:1的山楂枝叶、酸枣枝叶和苦楝枝叶的混合物。 6 .一种提高西洋参幼苗成活率的方法，其特征是包括以下步骤：（1）采用权利要求1-5中任一项所述的丛枝菌根真菌的扩繁方法对丛枝菌根真菌进行扩繁，待地上部分枯萎后，剩余的混合沙土及三叶草地下部分即为扩繁后的丛枝菌根真菌；（2）西洋参种子去掉外面红色的假种皮，用水清洗后埋入湿沙中，在-2～3℃的湿沙中冷藏，进行湿沙层积处理；（3）处理完后的西洋参种子用植物源烟水浸泡，浸泡后的种子与扩繁后的丛枝菌根真菌混合，混合后进行播种；（4）从播种后第二个月开始，每隔10天叶面喷施一次植物源烟水，第5个月开始停止喷施植物源烟水，其他进行正常管理，直至西洋参幼苗符合要求。 7 .根据权利要求6所述的方法，其特征是：步骤（3）中，西洋参种子用植物源烟水浸泡12h。 8 .根据权利要求6所述的方法，其特征是：播种后一个月内每5天浇一次水。