上海交通大学微生物实验实验四培养基的使用特点和微生物接种方法
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微生物常用的接种方法微生物的接种是微生物学实验中的一个重要步骤,它是将微生物从一个培养基转移到另一个培养基的过程。
接种方法的选择对于微生物的培养和研究具有重要意义。
下面将介绍一些微生物常用的接种方法。
一、平板接种法。
平板接种法是将微生物接种在培养基的表面上,通过接种棒或铅笔头的方式在培养基表面画线或涂抹,形成菌落。
这种接种方法适用于培养革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,通常用于分离和计数微生物。
在进行平板接种时,需要注意接种的均匀性和细菌数量的控制,以避免产生过多或过少的菌落。
二、液体接种法。
液体接种法是将微生物接种在含有营养物质的液体培养基中,通过摇床或振荡器进行培养。
这种接种方法适用于培养需要大量微生物的情况,如大规模生产微生物菌种或进行微生物代谢产物的生产。
在进行液体接种时,需要注意培养液的搅拌速度和通气情况,以保证微生物的充分生长和代谢。
三、斜面接种法。
斜面接种法是将微生物接种在倾斜的培养基表面上,通过接种棒或铅笔头的方式在斜面上画线或涂抹,形成菌落。
这种接种方法适用于培养对氧需求较高的微生物,如厌氧菌和微需氧菌。
在进行斜面接种时,需要注意斜面的倾斜角度和接种的均匀性,以保证微生物的充分生长和代谢。
四、深层接种法。
深层接种法是将微生物接种在含有固体琼脂的试管或培养瓶中,通过接种棒或铅笔头的方式在琼脂表面插入或涂抹,形成菌落。
这种接种方法适用于培养对氧需求较低的微生物,如厌氧菌和微需氧菌。
在进行深层接种时,需要注意琼脂的固化温度和接种的深度,以保证微生物的充分生长和代谢。
五、滴播接种法。
滴播接种法是将微生物接种在含有营养物质的琼脂平板上,通过滴管或移液器滴播微生物悬液,形成菌落。
这种接种方法适用于培养对氧需求较高的微生物,如厌氧菌和微需氧菌。
在进行滴播接种时,需要注意滴播的均匀性和微生物悬液的浓度,以保证微生物的充分生长和代谢。
总结,微生物的接种方法多种多样,选择合适的接种方法对于微生物的培养和研究具有重要意义。
微生物接种操作方法
微生物接种操作方法一般包括以下步骤:
1.准备培养基:按照培养菌种的需求准备合适的培养基。
通常需要将培养基均匀地倒入培养皿中,待其凝固。
2.选择菌株:在无菌操作的情况下,选择一株菌株接种。
菌株需要在一个菌液培养基中培养,直到其成长到一定程度。
3.适当稀释:在接种前,应依据所需菌群数量,将培养基适当稀释一些(通常是1000倍),以防菌群增长过快的情况。
4.接种:接种时,取适量菌株,用烧杯、披露环或接种针等工具将微生物接种于培养基上。
5.培养:将培养皿放置在适宜的培养条件下,如适宜的温度、湿度和氧气等,等待菌群的生长。
6.观察:观察微生物的生长情况,并根据其形态特征、生长速度、代谢特征等进行鉴定。
7.保存:根据需要,将不同种类的微生物进行保存。
常见的方法包括低温保存、
冷冻保存或干燥保存等。
注意事项:
1.选择适宜的培养基,以保证微生物的生长和繁殖。
2.操作时应严格无菌,防止其它微生物污染。
3.在接种前,应对培养皿、烧杯等工具进行高温、紫外线或化学消毒处理。
4.尽量减少接种时对培养基的破坏和干扰,以保证生长情况的准确观察。
5.保存时应先进行初步鉴定,以免与其它菌群混淆。
保存时选用适宜的保存条件。
培养基的接种实验步骤培养基的接种实验步骤其实一点都不复杂,大家只要按照一定的流程来,基本上就能顺利完成。
要说这个培养基,简单来说,就是一个供微生物生长的“豪华套餐”,微生物通过它能得到生长所需的营养,就像我们吃饭一样,养分都能吸收得很棒。
不过,在实验中,这个“豪华套餐”可不是随便谁都能吃的。
它可得经过精心的准备,接种过程得小心谨慎,稍不注意,可能就会给微生物“添乱”了。
怎么做呢?你跟着我一起来看,保证你马上能搞懂。
咱们得准备好一切。
培养基得先做好,装进培养皿或者试管里。
如果是固体培养基,那就像是煮粥时加点“凝胶”让它定型;如果是液体培养基,那就像是给小家伙们准备了一碗“汤”。
这些培养基得一锅一锅地做,讲究卫生,啥细菌、杂质都得“打发”掉,不能有一点马虎。
培养基放进去后,记得得搞清楚,管子、皿子要消毒,毕竟你要是碰上不速之客,谁都不开心,不是?然后,咱们接种这步就开始了。
别以为随便一捻就行,这里面可有学问呢。
接种环就是关键中的关键!这环,就像是我们拿筷子夹菜一样,得稳准狠。
你得把接种环放到火焰上烧一下,烧到红红的,像个小火把一样的。
这样做是为了杀死接种环上可能有的细菌,确保万无一失。
接种环冷却了,就可以开始操作了。
切记,一定要让接种环待在空气中冷却,不然小心烧到自己,热乎乎的环可是有点危险的。
咱们把要接种的微生物弄好。
一般来说,你可能从琼脂平板上取,或者从液体培养基里取,甚至有时候可能从环境样本中取。
你把接种环轻轻地接触微生物,记得,不要太猛,慢慢地接触就行,别让细菌散落得四处乱跑。
拿好了微生物后,别着急,还是得保持冷静,先放在目标培养基上,稳稳当当地转动接种环,或者画个小圈圈,让微生物均匀分布在培养基表面。
别小看这个过程,控制力度、转动的角度,都是技术活儿。
然后,接下来的步骤也是至关重要的,咱们要给这些微生物提供一个“五星级的环境”,让它们在培养基里开心长大。
这个时候,最好是把接种好的培养基放进温箱里。
通过本次微生物接种实训,旨在掌握微生物接种的基本原理和操作方法,提高对微生物实验技术的实际操作能力,培养严谨的科学态度和良好的实验习惯。
二、实训时间2023年X月X日三、实训地点实验室微生物实验室四、实训器材与试剂1. 器材:无菌操作台、接种环、接种针、酒精灯、试管、培养皿、镊子、剪刀、试管架、培养箱等。
2. 试剂:牛肉膏蛋白胨培养基、生理盐水、无菌水、酒精、碘酒等。
五、实训内容1. 无菌操作台的准备- 在无菌操作台表面铺上无菌纸,确保操作台面无菌。
- 检查酒精灯火焰是否稳定,确保操作安全。
2. 微生物接种操作- 将待接种的微生物样品进行初步处理,如研磨、稀释等。
- 将接种环在酒精灯火焰上灼烧至红热,待冷却后进行接种。
- 采用平板划线法或稀释涂布平板法进行接种。
- 将接种后的平板倒置放置在培养箱中,根据微生物的生长特性设置合适的培养温度和时间。
3. 观察与记录- 观察微生物的生长情况,包括菌落形态、颜色、大小等。
- 记录菌落生长的详细情况,包括生长时间、生长速度等。
1. 准备工作- 检查无菌操作台、酒精灯、接种环等器材是否准备齐全。
- 检查培养基、试剂是否在有效期内。
2. 无菌操作- 按照无菌操作规程进行操作,避免微生物污染。
3. 接种操作- 使用接种环取适量微生物样品。
- 将接种环在酒精灯火焰上灼烧至红热,待冷却后进行接种。
- 采用平板划线法或稀释涂布平板法进行接种。
4. 培养与观察- 将接种后的平板倒置放置在培养箱中,根据微生物的生长特性设置合适的培养温度和时间。
- 定期观察菌落生长情况,并做好记录。
七、实训结果与分析1. 菌落生长情况- 观察到接种的微生物样品在平板上成功生长,形成了明显的菌落。
- 菌落形态、颜色、大小等特征与理论预期相符。
2. 结果分析- 通过本次实训,成功掌握了微生物接种的基本原理和操作方法。
- 提高了无菌操作技能,培养了严谨的科学态度和良好的实验习惯。
八、实训体会通过本次实训,我深刻认识到微生物接种操作的重要性。
实验微生物接种技术讲解实验微生物接种技术讲解微生物包括:细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生生物、显微藻类等在内的一大类生物群体,它个体微小,与人类关系密切。
以下是小编为大家整理的实验微生物接种技术讲解,仅供参考,希望能够帮助大家。
实验微生物接种技术讲解1一、目的:学习微生物工作的基本接种方法,建立纯培养技术中的“无菌”概念,掌握无菌操作技术。
二、原理:所谓接种就是将一定量的纯种微生物在无菌操作条件下转移到另一已灭菌,并适宜于该菌生长繁殖所需的培养基上的过程。
本实验要求严格进行无菌操作,一般是在无菌操作台或在实验室内火焰旁进行。
根据不同的实验目的和培养方式,可以采用不同的接种工具和接种方法。
三、实验材料:斜面培养基、液体培养基、平板培养基、记号笔、酒精灯、接种针、消毒酒精、涂布棒等。
四、操作步骤(一)无菌操作菌种分离或移接工作应在无菌环境中进行,接种室、接种箱或超净工作台是常用的接种环境。
用前先清洁好卫生,再进行消毒处理。
可用紫外线灯和甲醛熏蒸的双重作用,或用3%来苏尔及其他表面消毒进行喷雾。
操作者的手应先用肥皂洗净,再用酒精棉球消毒;整个操作过程都要靠近酒精灯火焰;接种工具在用前和用后必须在灯焰上灭菌;棉塞不得乱放,操作中只能夹在手上;不能有跑、跳等力度大的动作,以免引起空气大振动而增加染菌机会。
(二)接种方法(1)斜面接种:从已长好微生物的菌种管移接到另一斜面管的方法。
此法用于好气性微生物的接种。
左手持菌种管和斜面管,使斜面向上,并尽量放平。
用右手先将棉塞拧转松动,再拿接种环,用右手的小指、无名指和手掌拨下棉塞并夹紧,同时将管口在火焰上燃烧一圈,接种环灼烧灭菌后插入管内,冷却、挑菌,立即转入斜面管底部,沿斜面划曲线或直线。
图1.斜面接种示意图(2)液体接种:由斜面菌接种到液体培养基(如试管或三角瓶等)中的方法。
操作与上法基本一致,只是在将接种环送入液体培养基中时使环在液体与管壁接触的地方轻轻磨擦,使菌体分散,然后塞上棉塞,再轻轻摇动均匀,即可培养。
课程名称:微生物学检验技术授课专业:医学检验学时:2学时实验四培养基的分装与细菌的接种一、实验目的1.掌握液体、半固体、固体培养基的分装;2.掌握细菌在液体、半固体、固体培养基上的接种。
二、实验物品接种环,接种针,酒精灯,试管架,无菌试管,无菌平板,菌种等三、实验内容㈠培养基的分装所有物品均应在使用前严格进行灭菌,在使用过程中不得与未经灭菌的物品接触.⒈固体培养基的分装:将灭菌的培养基熔化后冷却约至50℃,以无菌操作倾注于灭菌平板内,自然愈合,水平旋转,待冷凝固后翻转。
注意:倾注平板时切勿将皿盖完全开启,以免细菌落入。
新制的平板水分较多,不利于细菌的分离,可将平板倒扣37℃30分钟使其表面干燥。
2.液体、半固体培养基的分装:先开试管塞(小塞)再开三角烧瓶塞子(大塞),瓶口(管口)通过火焰2-3次,分装量为试管容量的1/3。
半固体培养基要趁热直放。
注意:无菌试管和烧瓶,于开塞后及盖塞之前,口部应通过火焰3次,以杀死可能附着管口或瓶口的细菌。
开塞后的管口及瓶口应尽量靠近火焰,试管及烧瓶应尽量平放,切忌口部向上和长时间暴露于空气中。
㈡细菌的接种与分离方法基本程序:灭菌接种环/针→待冷→沾取细菌→进行接种→灭菌接种环/针⒈接种环和接种针是接种细菌的必备工具,由镍锘合金或白金丝制成,接种环直径约2-4mm,一个合格的接种环是正圆形,连接端没有空隙,接种针长约50-80mm。
两端连接有一绝缘体的金属棒。
接种针与接种环在使用前要在酒精灯的火焰上灭菌后使用接种环——固体培养基和液体培养基的接种接种针——半固体培养基的接种⒉接种与分离技术根据标本的来源,培养目的及所用培养近的种类,采用不同的接种方法⑴平板划线法对于混有多种细菌的临床标本或其他培养物,经过划线接种到固体培养基表面,划线起到分散作用,一般经18-24小时培养后可得到单个菌落,供细菌计数和纯培养用(挑选单个菌落,转移至另一培养基中,生长出来的细菌均为纯种,称为纯培养),分离纯培养是从临床标本中检查鉴定细菌非常重要的第一步,只有先从含有多种杂菌的标本中分离出目的菌纯培养,才能进一步对目的菌予以鉴定和研究①(曲线划线法)此法多用于含细菌量不多的标本或咽拭,棉拭等标本的细菌分离培养方法:先将标本或培养物涂于平板1/5处,然后用接种环自标本涂擦处开始,向左右两侧划开并逐渐向下移动,连续划成若干条平行线。
微生物的接种以及菌落和抗生素抑菌现象的观察(实验)——沪科版生物拓展型课程教案实验目的1.掌握微生物的接种方法;2.观察不同微生物的菌落形态特征;3.了解抗生素抑菌现象。
实验材料1.培养基(营养琼脂、培养平板、葡萄糖琼脂、牛肉膏汁琼脂等);2.动物模型;3.火柴棒或抽线器;4.吸管;5.无菌培养皿。
实验步骤实验一:微生物接种1.消毒液将动物模型表面消毒;2.用火柴头或抽线器取出一小块细菌样本并放入营养琼脂平板中;3.用吸管将菌液均匀地涂抹在琼脂平板上;4.拧紧涂抹盖裔,倒置培养皿,放入恒温培养箱;5.培养48小时后,观察菌落。
实验二:菌落观察1.看到形成的菌落后,用气锅钳取出一小块菌落;2.将其移到葡萄糖琼脂平板或牛肉膏汁琼脂平板上;3.在实验后,观察菌落的形态特征。
实验三:抗生素抑菌现象观察1.换取2个营养琼脂平板;2.将其中一个平板中的菌液均匀涂抹在另一个平板上;3.在其中一个培养皿上加入抗生素;4.将两个培养皿放入恒温培养箱中实验后,观察不同培养皿中菌落的变化。
实验记录实验一:微生物接种 |取样地点|微生物名称|菌落形态| |:—:|:—:|:—:| |嗓子|金黄色葡萄球菌|圆形、凸起、呈金黄色| |手指|大肠杆菌|圆形、平坦、边缘整齐| |鼻子|鼻炎链球菌|圆形、平坦、灰白色|实验二:菌落观察|菌落名称|菌落特征| |:—:|:—:| |金黄色葡萄球菌|成群分布,大小相同、呈圆形、表面光洁、发黄| |大肠杆菌|大小不一、形态不规则| |鼻炎链球菌|成对或链状出现,呈灰白色|实验三:抗生素抑菌现象观察 |培养皿|菌落形态| |:—:|:—:| |无抗生素平板|菌落较为茂密| |加抗生素平板|只有少量生长|实验分析实验结果表明,菌落形成和抗生素的抑菌作用涉及诸多因素,其中最为关键的是微生物自身特征和营养环境。
在微生物接种实验中,从不同部位采集的微生物形态差异明显。
金黄色葡萄球菌菌落颜色呈现金黄色、大肠杆菌菌落呈现大小不一、形态不规则,而鼻炎链球菌则在平板上成对或链装呈现灰白色。
微生物细菌接种培养实验报告一、实验介绍微生物是指细菌、真菌、病毒、原生动物和藻类等微小生物的总称,它们在生命的整个过程中都扮演着重要的角色。
本次实验主要介绍了微生物细菌接种培养的方法和技巧,旨在帮助学生熟悉微生物实验的基本操作。
二、实验原理细菌接种培养实验是通过将细菌接种到含有营养成分的培养基中进行培养,使细菌在适宜的环境中进行繁殖。
细菌在培养基中繁殖所需要的主要营养成分有碳源、氮源、磷源和微量元素等。
根据不同的细菌,培养基的成分也不同,需要根据实验的需要加入不同的营养成分。
三、实验步骤1.准备培养基根据实验需要选择合适的培养基,加入适量的蒸馏水和其他营养成分,将培养基均匀地倒入培养皿中。
2.接种细菌取一支已经生长好的细菌,用吸管沾取适量的细菌液,滴到培养基表面。
如果需要进行斜面培养,可以用细菌接种环将细菌接种到斜面上。
3.标记培养皿在培养皿的盖子上标记好实验的日期、细菌种类等重要信息,避免混淆。
4.封闭培养皿用透明胶带将培养皿的盖子封闭,避免细菌在外界环境的干扰下生长。
5.培养将培养皿置于恒温箱中,根据需要调节恒温箱的温度和湿度。
一般情况下,细菌的培养需要3-5天的时间。
四、实验注意事项1.实验过程中要做到操作规范、注意卫生,避免细菌的污染。
2.在接种细菌前,要先消毒接种器具,避免外界环境中的细菌污染。
3.在标记培养皿时,要将重要信息标注清楚,避免混淆。
4.在恒温箱中放置培养皿时,要将不同种类的培养皿分开放置,避免细菌之间的交叉感染。
5.实验结束后,要做好实验器具和培养皿的消毒和清洗工作,避免细菌的残留和传播。
五、实验结果与分析通过培养皿的观察和细菌的生长情况,可以初步判断细菌的种类和数量。
如果细菌长成了光滑、湿润的菌落,可以说明细菌在培养基中得到了良好的生长和繁殖。
如果发现有异常生长或变异的情况,需要进行进一步的实验和分析。
六、实验总结微生物细菌接种培养实验是学生进行微生物实验的基础操作,通过本次实验,学生可以熟悉微生物实验的基本步骤和操作技巧,同时也可以了解到微生物在适宜的环境中进行繁殖的基本原理。
微生物实验中的接种、分离和培养操作步骤微生物实验中的接种、分离和培养操作步骤一、目的要求1、掌握各种分离、接种方法。
2、掌握无菌操作基本环节。
二、实验说明微生物在自然界中呈混杂状态存在,要获得所需菌种,必需从中把它们分离出来。
在保存菌种时不慎受到到污染也需予以分纯。
微生物分离和纯化的方法很多,但基本原理却是相似的,即将待分离的样品进行一定的稀释,并使微生物的细胞(或孢子)尽量以分散状态存在,然后使其长成一个个纯种单菌落。
然而上述工作又离不开接种,即将一种微生物移到另一灭过菌的培养基上的过程。
三、实验材料1、恒温培养箱。
2、接种环、玻璃棒、吸管、酒精灯。
3、培养基(上次实验配制的)。
4、大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、酵母菌。
四、方法步骤(一)接种的操作1、斜面接种(接金黄葡萄球菌)(1)操作前,先用75%酒精擦手,待酒精挥发后点燃酒精灯。
(2)将菌种管和斜面握在左手大姆指和其它四指之间,使斜面和有菌种的一面向上,并处于水平位置。
(3)先将菌种和斜面的棉塞旋转一下,以便接种时便于拔出。
(4)左手拿接种环(如握钢笔一样),以火焰上先将环端烧红灭菌,然后将有可能伸入试管其余部位也过火灭菌。
(5)用右手的无名指、小指和手掌将菌种管和待接斜面试管的棉花塞或试管帽同时拔出,然后让试管口缓缓过火灭菌(切勿烧过烫)。
(6)将灼烧过的接种环伸入菌种管内,接种环在试管内壁或未长菌苔的培养基上接触一下,让其充分冷却,然后轻轻刮取少许菌苔,再从菌种管内抽出接种环。
(7)迅速将沾有菌种的接种环伸入另一支待接斜面试管。
从斜面底部向上作“Z”形来回密集划线。
有时也可用接种针仅在培养基的中央拉一条线来作斜面接种,以便观察菌种的生长特点。
(7)迅速将沾有菌种的接种环伸入另一支待接斜面试管。
从斜面底部向上作“Z”形来回密集划线。
有时也可用接种针仅在培养基的中央拉一条线来作斜面接种,以便观察菌种的生长特点。
(8)接种完毕后抽出接种环灼烧管口,塞上棉塞。