CL联合苦参碱抑制胃癌细胞共培养内皮细胞增殖与凋亡_郭俊

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苦参碱对胃癌细胞培养基上清液诱导的人脐静脉内皮细胞增殖及迁移的抑制作用

关蛋白等效应分子的活性，在肿瘤细胞恶性增殖方面起着重要的作用。近年研究表明，ＩＫＡｔＭＡＫＥＫ通Ｐ３／ｋ和Ｐ／Ｒ
ｔｍｕｅｓ［］ａＣｌＢｏ，０８１６９—６４ｕｏｒｃｌＪ．Ｎｔｅｉ２０，０：１２．ｌｌｌ
・
２８・３１
Ｍ０ＤＮＮＣＯＧＤｃ２０．ＥＲＯＯＬＹ．ｅ．０１Ｖ０Ｉ１．８．ＮＯｌ２
殖作用。
ｌｇｓｓｉａｔｃｃｎｅｘｓｍｅ— ｉｄｃｄａｏｔｓｓｏｕｋｔＴｉａｅｎｇｓｒａｃｒｅｏｏｉｎｕｅｐｐｏｉｆＪｒａ
ｆｉｔｔｌｔｓｅｉｃｅｌＪ．ｎＩｍｎｌＯ２１：３— ２．ｉｅｌｓｍｕａｐｃｌ［］Ｉｔｍｕｏ，０，７７２ｃｎｙｉｅｉｆＴｃｓ２４１
［］张靖，９张庆瑜．Ｐ３／ｋ和ＣＸ一２信号通路阻断在胃癌治ＩＫＡｔＯ
［］７
ｄａｎｓｃｂｏａｋｒＪ．Ｎｔｅｌｉｌ２０１：４０—１７．ｉｏｔｉｍｒｅｇｉｓ［］ａＣｌＢｏ，０８，０１７４６
ＭｅｈｍａｉＡＹａＹ，ｔａ．Ｐｒｄｃｉｎａｄ［］Ｌｍｐｒｋ６ａａｓｉＨＧ，ｔａ—Ｄａｎ，ｏＪｅ１ｏｕｔｏｎ
ＥＫ通路有关。由于ｅｏｏｓ活细胞主动产生并分泌的Ｒｘｓｍｅ是生物活性结构，能复杂多变，此深入探讨肿瘤来源的ｅ— 功因ｘｏｏｅ促进肿瘤细胞增殖的分子机制对阐明ｅｏｏｓ生ｓｍｓｘｓｍｅ的

苦参碱对上消化系肿瘤临床药理作用的研究进展

·综述与论坛·DOI ：10.13493/j.issn.1672-7878.2020.01-001苦参碱对上消化系肿瘤临床药理作用的研究进展张明发*，沈雅琴上海美优制药有限公司，上海201204【摘要】苦参碱能防治大鼠胃癌前病变以及乙基硝基亚硝基胍诱发大鼠原发性胃癌，也能防治人胃癌MKN-45细胞、SGC-7901细胞、BG823细胞、人胰腺癌BxPC-3细胞移植瘤在裸鼠或大鼠体内生长。

经体外实验发现，苦参碱能浓度相关地抑制人胃癌SGC-7901细胞、MGC803细胞、BGC823细胞、MKN-45细胞、NCI-N87细胞、AGS 细胞、人胰腺癌BxPC-3细胞、CFPAC-1细胞、人胆管癌QBC939细胞、人胆囊癌GSC-SD 细胞、人食管癌Eca109细胞、Escl 细胞的增殖并诱导其凋亡。

经体内外实验结果发现，苦参碱能增强化疗药抗人胃癌SGC-7901细胞作用。

综述苦参碱对消化系肿瘤临床药理作用的研究文献，并对其研究进展做了分析。

【关键词】苦参碱；胃癌；胰腺癌；胆管癌；胆囊癌；食管癌；研究进展【中图分类号】R 969.3【文献标志码】A【文章编号】1672-7878（2020）01-001-007Research Advances on Clinical Pharmacological Effects of MatrineAgainst Tumors of Upper Digestive SystemZHANG Ming-fa *，SHEN Ya-qinShanghai Meiyou Pharmaceutical Co.，Ltd.，Shanghai 201204，ChinaABSTRACTMatrine has the effects in prophylaxis and treatment of gastric precancerous lesion of rat,and rat prima-ry gastric carcinoma induced by N -ethyl-N -nitro-N -nitrosoguanidine,and growth of transplantation tumor of gastric car-cinoma MKN-45cells,SGC-7901cells,BG823cells,and pancreatic cancer BxPC-3cells in rat or nude mice.Matrine inhibits proliferation and induces apoptosis in association with dosage on gastric carcinoma SGC-7901cells,MGC803cells,BGC823cells,MKN-45cells,NCI-N87cells,AGS cells,pancreatic cancer BxPC-3cells,CFPAC-1cells,cancer of biliary duct QBC939cells,carcinoma of gallbladder GBC-SD cells,carcinoma of esophagus Eca109cells,and Escl cells in vitro .Matrine can promote the effects of chemotherapeutics against gastric carcinoma SGC-7901cells in vivo and in vitro .The literatures on clinical pharmacological effects of matrine on digestive system tumors have been re-viewed and their research progress has been also analyzed.KEY WORDS matrine;gastric carcinoma;pancreatic cancer;cancer of biliary duct;carcinoma of gallbladder;carcino-ma of esophagus;research advances[Anti Infect Pharm ,2020,17(01)001-007]苦参碱(matrine)具有广泛的生物活性(如抗菌、抗病毒、抗炎、免疫调节、抗肿瘤和保护心、肝、肺、肾、脑、血管的作用，也能对心脏有正性肌力、负性频率和抗心律失常的作用，还有升高白细胞，平喘，抗溃疡，抗纤维化以及镇静、催眠、镇痛等中枢神经药理作用。

苦参药理作用研究进展

苦参药理作用研究进展原雪，郭凯（中国药科大学生命科学与技术基地，江苏南京， 210038）E-mail:guokai3042@摘要：目前,已经从苦参中分离得到生物碱、黄酮、挥发油和脂肪酸等多种成分,具有心血管、神经系统以及肝脏、皮肤等方面广泛的药理活性。

本文阐述了近年来对其药理活性的研究进展，为进一步研究和开发利用苦参提供参考。

关键字：苦参，药理作用，不良反应苦参为豆科多年生落叶亚灌木植物苦参Sophora flavescens Ait.的干燥根。

英文名为Lighiyellow Sophora Root，又名苦甘草、苦参草、苦豆根、西豆根、苦平子、野槐根、山槐根、干人参、苦骨等，是我国的传统中药之一。

我国各地均产，春秋两季采收，切片，晒干生用。

苦参性苦、寒。

有清热燥湿，杀虫，利尿的功效。

用于热痢，便血，黄疸尿闭，赤白带下，阴肿阴痒，湿疹，湿疮，皮肤瘙痒，疥癣麻风；外治滴虫性阴道炎。

不宜与藜芦同用。

由于其重要的药用价值和广泛的药理作用,苦参越来越引起人们的关注。

苦参的主要成分是氧化苦参碱、苦参碱、槐果碱等生物碱成分，二氢黄酮及二氢黄酮醇类等黄酮类成分，这是苦参目前发现的主要有效成分，也是多年来国内外学者广泛研究深入探讨的对象。

此外苦参还含有多种挥发油和脂肪酸等。

本文就近年来国内外对苦参主要药理作用的研究成果作一概述[1]。

1. 苦参药理作用1.1保肝作用苦参碱有抗肝炎、抗肝损伤、改善肝脏微循环、促进肝细胞再生、抑制乙肝病毒复制和免疫抑制作用。

1.1.1抗肝炎有关研究证明，苦参素能抑制乙肝病毒，促进肝功能恢复。

苦参素在体外试验中，发现对含有 HBV 基因的 2.2.15 细胞株分泌 HBsAg 有显著的抑制作用。

在乙肝病毒全基因组转基因小鼠动物模型中，抗乙肝病毒功能的研究表明，苦参素在体内确有抗乙肝病毒作用，可降低乙肝病毒转基因小鼠肝脏内 HBsAg、HBeAg 的含量[2]。

苦参碱抗乙型肝炎病毒的机理目前尚不明确,有学者认为其可能与调节机体免疫功能,增强Th淋巴细胞功能,改善和纠正免疫紊乱状态,使免疫系统识别和清除病毒的能力增强。

氧化苦参碱诱导人胃癌细胞凋亡的实验研究

２１１第卷３０年１８第１１月期
・短篇论著・
氧化苦参碱诱导人胃癌细胞凋亡的实验研究
刘粉霞，玉芳，宁徐孙
１．省中医院病理科，南郑州河南河
４００；．５０２２河南中医学院，南郑州河
４００５０８
Байду номын сангаас
【要】目的：究氧化苦参碱诱导人胃癌ＭＧＣ８３细胞裸鼠移植瘤细胞凋亡的作用机制。方法：备人胃癌ＭＧＣ摘研一０制一８３细胞裸鼠移植瘤模型，其随机分为阴性对照组、０将阳性对照组及氧化苦参碱小、、剂量组，中大观察氧化苦参碱
对人胃癌裸鼠移植瘤的抑制作用。流式细胞仪检测移植瘤细胞Ｂｌ２Ｂｘ的表达。结果：化苦参碱能有效抑制裸ｃ、ａ一氧鼠移植瘤的生长，阴性对照组比较，大剂量组肿瘤抑制作用明显，均抑制率为４．％；与其平３０流式细胞仪检测显示２氧化苦参碱组裸鼠移植瘤细胞Ｂｌ２达降低，Ｂｘ达升高，中剂量氧化苦参碱诱导细胞凋亡最明显，ｃ表一而ａ表以移植
Ｔｅｍｉｅｗｅｅｇｏｐｄｒｎｏｙｉｔｖｒｕｓｈｅａｉｅｃｎｒｌｇｏｐｈｅｐｓｔｅｃｎｒｌｇｏｐｔｅｌｗ，ｍｉｄｈｃｒｒｕｅａｄｍｌｎｏｆｅｇｏｐ，ｔｅｎｇｔｏｔｒｕ，ｔｏｉｉｏｔｏｒｕ，ｏｉｖｏｖｈｄａｎｈｇｏａｅＯｘｍａｒｎｏｐ．Ｔｅｃａｇｓｏｅｔａｓｌｔｄｔｍｏｒｗｉｇｗｅｅｏｓｒｅ．ＦｊｈｄｓｇｙｔｉｅｇｕｓｈｈｒｎｅｆｔｎｐａｅｕｒｇｏｎｒｂｅｖｄＣＭｒｐｌｄｔｎｈｒｎｗｅｅａｐｉｏａ－ｅｎｌｚｈｘｒｓｉｎｌｖｌｏｌ２ａｄＢａｎｔａｓｌｔｄｇｓｒｃｃｒｉｏ．ｓｌｓｙｅｔｅｅｐｅｓｏｅｅｆＢｃ－ｘｉｎｐａｅａｔａｃｎｍａＲｅｕｔ：Ｏｘｍａｒｎｏｌｎｉｉｔｅｇｏｈｎｒｎｉｙｔｉｅｃｕｄｉｈｂｔｈｒｗｔ

苦参碱对人胃癌 SGC-7901细胞增殖的影响及其机制

苦参碱对人胃癌 SGC-7901细胞增殖的影响及其机制毛玲;汪顺才;陈超;梁靓;左念;祝寅;李伟萍【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2015(0)32【摘要】目的：探讨不同浓度苦参碱对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响及其机制。

方法将对数生长期的人胃癌SGC-7901细胞随机均分为观察组和对照组。

观察组分别加入1．0、2．0、3．0 mg／mL苦参碱（分别为低、中、高浓度），对照组不予处理。

采用MTT法检测两组细胞增殖抑制率，流式细胞术检测细胞凋亡率，RT-PCR法检测程序性细胞死亡因子4（PDCD4）mRNA相对表达量。

结果细胞增殖抑制率：对照组为8．19％±2．35％，观察组低、中、高浓度分别为18．02％±3．13％、30．20％±3．52％、53．32％±2．72％；观察组各浓度与对照组比较及观察组各浓度间比较，P均＜0．05。

细胞凋亡率：对照组为4．06％±1．59％，观察组低、中、高浓度分别为10．75％±2．36％、19．08％±4．39％、25．63％±1．96％；观察组各浓度与对照组比较及观察组各浓度间比较，P均＜0．05。

细胞PD-CD4 mRNA相对表达量：对照组为0．35±0．06，观察组低、中、高浓度分别为0．52±0．06、0．67±0．04、0．82±0．07；观察组各浓度与对照组比较及观察组各浓度间比较，P均＜0．05。

结论不同浓度苦参碱均可抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖、诱导其凋亡，并呈剂量依赖性；其作用机制可能与提高细胞内PDCD4 mRNA表达有关。

【总页数】3页(P23-24,25)【作者】毛玲;汪顺才;陈超;梁靓;左念;祝寅;李伟萍【作者单位】句容市人民医院，江苏句容212400;句容市人民医院，江苏句容212400;句容市人民医院，江苏句容212400;句容市人民医院，江苏句容212400;句容市人民医院，江苏句容212400;句容市人民医院，江苏句容212400;句容市人民医院，江苏句容212400【正文语种】中文【中图分类】R329.26【相关文献】1.氧化苦参碱对人胃癌SGC-7901细胞增殖及血管内皮生长因子表达的影响 [J], 刘益均;郑军;肖文波;周军2.NS-398联合奥曲肽对人胃癌 SGC-7901细胞增殖、凋亡的影响及机制 [J], 朱威;饶雷平;赵登秋;王丛3.苦参碱联合卡铂对人胃癌SGC-7901细胞增殖及凋亡的影响 [J], 汪顺才;毛玲;梁靓;左念;祝寅4.ADAM17对人胃癌细胞SGC-7901细胞增殖与侵袭的影响及作用机制 [J], 赵平; 王健; 李荣军; 付丽5.苦参碱衍生物的合成及其对人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制的影响 [J], 冯婷婷;严佳佳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

苦参碱调控肝癌细胞HepG2自噬作用机制研究

苦参碱调控肝癌细胞HepG2自噬作用机制研究郭浩;周淑妮;冉瑞智【摘要】目的探讨苦参碱调控肝癌细胞HepG2自噬的作用机制.方法体外培养肝癌细胞HepG2,用苦参碱染毒48 h后收获细胞,分为苦参碱高、中、低剂量组和对照组(苦参碱质量浓度分别为2.0,1.0,0.5,0 g/L),以单丹磺酞戊二胺(MDC)染色观察肝癌细胞HepG2自噬现象;以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和自噬相关蛋白LC3B mRNA的表达水平;Western Blot法检测Akt,p-Akt,mTOR,LC3B蛋白水平.结果与对照组比较,苦参碱高、中、低剂量组肝癌细胞HepG2荧光强度明显增强,mTOR mRNA和蛋白及p-Akt蛋白表达水平明显降低,LC3B mRNA和蛋白表达水平明显升高,Akt mRNA和蛋白表达水平无明显变化(P>0.05).结论苦参碱可促进肝癌细胞HepG2的自噬作用,其机制与抑制PI3K/Akt/mTOR通路有关.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2019(028)006【总页数】4页(P14-17)【关键词】苦参碱;PI3K/Akt/mTOR通路;肝癌细胞HepG2;自噬作用;作用机制【作者】郭浩;周淑妮;冉瑞智【作者单位】湖北省恩施土家族苗族自治州中心医院,湖北恩施 445000;湖北省恩施土家族苗族自治州中心医院,湖北恩施 445000;湖北省恩施土家族苗族自治州中心医院,湖北恩施 445000【正文语种】中文【中图分类】R932;R285.5;R273全球每年有超过60万患者死于肝癌，其中50%发生在中国[1-2]。

目前，肝癌的有效治疗方法是手术切除和肝移植，再辅助放射治疗、化学治疗（简称放化疗），但患者5年生存率仅为5%[3]。

加之大部分肝癌患者合并肝硬化，限制了化疗药物的使用[4]，有必要寻找同时具有抗肿瘤和抗纤维化活性的药物。

人参皂甙Rg3对胃癌诱导血管内皮细胞增殖的抑制作用

人参皂甙Rg3对胃癌诱导血管内皮细胞增殖的抑制作用王杰军;王兵;郭静;许青;高勇;朱长力【期刊名称】《临床肿瘤学杂志》【年(卷),期】1999(004)002【摘要】新生血管形成是肿瘤生长和转移的重要步骤,而血管内皮细胞(VEC)的增殖是新生血管形成的基础.本研究拟探讨红参特有成分——人参皂甙Rg3(申报中药国家一类新药,已完成二期临床试验)对胃癌细胞诱导VEC增殖的抑制作用.血管内皮细胞采用原代培养的小牛主动脉内皮细胞,小牛主动脉经1%胶原酶消化下来的小牛主动脉内皮细胞,用抗Ⅷ因子抗体免疫组化鉴定后用于实验.VEC以10~4/孔的密度接种于96孔板,24h后加入Rg3(大连天富科技开发公司天然药物研究所提供),浓度分别为0.0313,0.0625,0.125,0.25及0.5mM,作用24h后,MTT法检查细胞增殖情况.观察经Rg3作用后的胃癌细胞条件培养液对VEC增殖的影响及Rg3对胃癌细胞条件培养液诱导的血管形成的影响.试验结果发现,Rg3对VEC增殖没有直接的影响;对胃癌NKM-45细胞增殖没有影响,经Rg3作用后的胃癌细胞条件培养液不影响对VEC的促增殖作用,但Rg3能抑制胃癌细胞条件培养液诱导的VEC增殖.作用机制尚未阐明,推测可能通过下调增殖期VEC相关生长因子受体的表达,使VEC对肿瘤细胞分泌的生长因子的敏感性降低,从而影响VEC的增殖.综上所述,人参皂甙Rg3对胃癌细胞无细胞毒,但对肿瘤细胞条件培养液诱导VEC增殖具有抑制作用,值得在抗血管形成方面进行更深入的研究.【总页数】1页(P68)【作者】王杰军;王兵;郭静;许青;高勇;朱长力【作者单位】第二军医大学长征医院肿瘤科，上海200003【正文语种】中文【中图分类】R735.2【相关文献】1.原人参二醇对胃癌诱导血管内皮细胞增殖的抑制作用 [J], 张国成;李颖新;王继萍;侯文丽;董国霞;冷吉燕;何娜2.灯盏花素对缺氧和中高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞增殖及VEGF表达的抑制作用 [J], 高蓉;朱邦豪3.TNP-470对肺癌细胞诱导的血管内皮细胞增殖的抑制作用 [J], 吴晓娟;杨向红4.人参皂苷Rg3对胃癌诱导血管内皮细胞增殖的抑制作用 [J], 王兵;王杰军;徐钧;许青;高勇;郭静5.TNP-470与IL-2对肺癌细胞诱导的血管内皮细胞增殖的抑制作用 [J], 吴晓娟;杨向红;孙立民;孟斌;王志富因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

苦参碱的功效与作用

苦参碱的功效与作用苦参碱（Matrine）是一种天然的植物碱，是从苦参（Sophora flavescens）中提取得到的主要成分。

苦参是豆科黄芪属植物，主要分布在中国江苏、浙江、湖南、湖北、安徽等地。

苦参碱具有多种药理活性，包括抗炎、抗氧化、抗菌、抗癌等作用。

本文将详细介绍苦参碱的各种功效与作用，以及其在临床上的应用。

（一）抗炎作用苦参碱是一种天然的抗炎剂，可以抑制炎症反应的发生和发展。

炎症是机体对抗感染、损伤或刺激的一种保护性反应。

然而，过激的炎症反应可能会导致组织损伤和疾病的发生。

苦参碱可以通过多种途径发挥其抗炎作用，包括抑制炎症介质的生成和释放、抑制炎症信号通路的活化等。

实验证明，苦参碱可以抑制炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的产生，并减少炎症细胞的浸润。

此外，苦参碱还可以抑制炎症相关的信号通路，如NF-κB和MAPK等。

（二）抗氧化作用苦参碱具有明显的抗氧化活性，可以清除自由基和其他氧化物，减轻氧化应激造成的细胞损伤。

氧化应激是指由于自由基或其他氧化物的过度产生，导致氧化和损伤生物分子的一种状态。

氧化应激与许多疾病的发生和发展密切相关，如心血管疾病、神经系统疾病和肿瘤等。

苦参碱可以通过多种途径发挥其抗氧化作用，包括清除自由基、增强抗氧化酶的活性等。

实验证明，苦参碱可以降低氧化应激指标，如脂质过氧化物、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽等，从而保护细胞免受氧化应激的伤害。

（三）抗菌作用苦参碱对多种细菌、病毒和真菌具有抑制作用，包括金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、流感病毒和白色念珠菌等。

这种抗菌作用可以通过多种方式发挥，如通过抑制微生物的生长和增殖、破坏微生物的细胞膜等。

实验证明，苦参碱可以抑制多种细菌的生长，并且其抗菌活性与抗生素相当，甚至超过某些抗生素。

此外，苦参碱还可以增强机体的免疫功能，提高机体对抗感染的能力。

（四）抗癌作用苦参碱具有广谱的抗肿瘤活性，可以抑制多种肿瘤细胞的生长和增殖。

实验证明，苦参碱可以抑制肺癌、肝癌、胃癌、乳腺癌等多种肿瘤细胞的增殖，并诱导肿瘤细胞的凋亡。

苦参碱联合卡铂对人胃癌SGC-7901细胞增殖及凋亡的影响

十一Ｅ药辱牛学２０１５年１２月第５卷第２３期
基础医学・
苦参碱联合卡铂对人胃癌ＳＧＣ一７９０１细胞增殖及凋亡的影响
汪顺才毛玲梁靓左念祝寅
江苏省句容市人民医院血液肿瘤科，江苏句容２１２４００［摘要】目的探讨苦参碱联合卡铂对人胃癌ＳＧＣ一７９０１细胞抑制增殖及诱导凋亡的机制。方法将体外培
Hale Waihona Puke Ｅｆｆｅｃｔｓ０ｆｍａｔｒｉｎｅａｎｄｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ０ｆｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｈｕｍａｎｇａｓｔｒｉｃｃａｒｃｉｎｏｍａＳＧＣ一７９０１ｃｅｌｌｓ
养人ＳＧＣ一７９０１细胞分为对照组、苦参碱组（１．０ｍｇ／ｍＬ、２．Ｏｍｇ／ｍＬ、３．０ｍｇ／ｍＬ）、卡铂组（０Ｏ１ｍｇ／ｍＬ）及苦参碱
．
联合卡铂组。ＭＴＴ检测各组细胞增殖抑制率，ＦＣＭ检测各组细胞凋亡率，ＲＴ — ＰＣＲ检测各组细胞的ＣＸＣＲ４ｍＲＮＡ表达。结果相同浓度苦参碱联合卡铂组增殖抑制率及凋亡率明显高于单药苦参碱组（Ｐ＜００５）及
ａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｈｕｍａｎｇａｓｔｒｉｃｃａｒｃｉｎｏｍａＳＧＣ－７９０１ｉｎｖｉｔｒｏ。ａｎｄｉｔｓｐｏｔｅｎｔｉａｌｍｅｃｈａｎｉｓｍ．ＭｅｔｈｏｄｓＳＧＣ一７９０１ｃｅｌｌｓ

苦参碱对肝癌细胞增殖抑制作用研究

苦参碱对肝癌细胞增殖抑制作用研究
徐邦牢;李坚
【期刊名称】《临床医学工程》
【年(卷),期】2010(017)012
【摘要】目的在体外观察苦参碱对BEL-7402肝癌细胞增殖的影响.方法用含不同浓度(0～3.2 mmol/L)苦参碱的培养液在体外培养BEL-7402细胞24 h,通过MTT试验测定其时BEL-7402细胞增殖的影响作用.结果在上述使用浓度范围内,苦参碱对BEL-7402细胞增殖的抑制率为0～36.7%.结论苦参碱在体外可抑制BEL-7402细胞的增殖,且呈剂量依赖性.
【总页数】2页(P3-4)
【作者】徐邦牢;李坚
【作者单位】广州市第一人民医院检验科,广东,广州,510180;广州市第一人民医院体检中心,广东,广州,510180
【正文语种】中文
【中图分类】R735.7
【相关文献】
1.苦参碱对人鼻咽癌CNE2细胞增殖的抑制作用研究 [J], 张力;李海英;吴式琇n;吴建波;韩义香
2.苦参碱对人膀胱癌BIU-87细胞增殖的抑制作用及其机制研究Δ [J], 姚莉;武兴斌;秦龙
3.苦参碱对人鼻咽癌CNE2细胞增殖的抑制作用研究 [J], 张力;李海英;吴式琇;吴
建波;韩义香
4.组织蛋白酶B介导人参多糖联合顺铂对肝癌细胞增殖抑制作用的研究 [J], 郭林娜;姚立杰;王璐璐;李国锋;姜杨;金海峰;何军
5.氧化苦参碱抑制肝癌细胞诱导血管内皮细胞增殖作用的研究 [J], 王兵;王国俊;蔡雄;张大昕;姚阳
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carcino ma SG C-7901cells and pulmo na ry car cino ma A 549cells w ere ex po sed to FR and/o r CL in vitr o .T he inhibito ry effects w ere ev aluat ed by M T T a ssay.Cell apoptosis was detected by flow cyt ometr y.T he ex pr essions o f K i-67,Bax and Bcl-2in mRN A a nd pr otein level w er e quantified by RT -PCR and W estern blot.Results T he g r ow th inhibitio n o f SG C-7901and A 549w as do se -dependent after exposur e to t he FR or CL alo ne .T he inhibito ry r ates of FR at IC 30,CL at IC 30and F R plus CL at 1/2I C 30w ere (33.89±0.22)%,(30.86±1.17)%and(44.25±0.50)%fo r SG C-7901;and(30.91±1.72)%,(29.07±1.41)%and (43.62±2.15)%fo r A 549,r espectively .T he cells apopto tic rates increased in or der o f co nt ro l ,FR ,CL and F R plus CL gr oup (P <0.05).Compar ed w it h t he FR or CL ,the ex pr essions o f Ki-67and Bcl-2m RN A /pro tein in F R plus CL gr o up w ere decreased but the expr essio n o f Bax mR N A /pr ot ein w as incr eased,both for SG C-7901and A 549cells.Conclusion Both F R and CL have inhibitor y and a po pt osis -inducing effects o n the human g astric carcino ma SGC -7901and pulmonar ycarcino ma A 549cell line ,and the co mbinatio n of F R and CL show s a sy nerg istic effect .Key words :RO SA R OX BU R GHII /ther use ;cell pr olifer ation ;apo pto sis ;sto mach neoplasms /dr ug e ther ;lungneo plasms /dr ug e ther ;plant ex tr act s /phar macol ;F A GO PY RU M CY M O SU M /thera use ;antineo plastic co mbined chemo therapy pr oto cols收稿日期:2009-04-27作者简介:郭　俊(1975-),男,湖北十堰人,东南大学临床医学主治医师,硕士,从事肿瘤内科临床及基础治疗研究.*通讯作者　E-mail:lisuy i@csco.o CL 联合苦参碱抑制胃癌细胞共培养内皮细胞增殖与凋亡郭　俊,李苏宜*,崔玖洁,赵　婷,张　华(东南大学附属中大医院临床肿瘤中心,江苏南京210009)摘要:目的　探讨刺梨提取物CL 联合苦参碱(matr ine)抑制人胃癌细胞SGC-7901培养上清诱导的人脐静脉内皮细胞ECV -304的增殖和凋亡及其机制。

方法　人胃癌细胞SGC -7901培养上清诱导培养人脐静脉内皮细胞ECV -304,多个质量浓度苦参碱、CL 单药干预,或多个质量浓度苦参碱联合CL 干预,M T T 法检测内皮细胞增殖抑制率,中效原理法判断联合用药的相互作用;采用RT -PCR 和蛋白印迹法分析K i-67、Bax 、Bcl-2mRN A /蛋白表达变化。

结果　10mg /L 、20mg /L 、40mg /L 、80mg /L 、160mg /L 质量浓度的CL 干预48小时,其抑制率分别为(15.1±2.1)%、(23.1±2.3)%、(34.1±3.3)%、(46.9±3.8)%、(68.8±2.9)%;15mg /L 、30mg /L 、60mg /L 、120mg /L 、240mg /L 质量浓度的苦参碱干预48小时,ECV -304抑制率分别为(20.8±1.3)%、(25.1±2.2)%、(40.9±1.1)%、(62.9±2.2)%、(77.2±1.9)%;CL +苦参碱联合干预48小时,其抑制率分别为(33.8±2.1)%、(46.8±2.4)%、(84.2±2.0)%、(88.1±2.2)%、(94.8±0.9)%,以上均呈剂量依赖(P <0.05)。

IC 50浓度(75mg /L )CL 、IC 50浓度(75mg /L )苦参碱、1/2IC 50(CL +苦参碱)分别干预ECV -304细胞,抑制率分别为(40.7±1.3)%、(46.2±1.2)%、(51.4±0.7)%,联合用药抑制率增高(P <0.05);中效原理得出一定浓度范围两药联合为协同效应;与单独用药组比较,联合用药组K i-67、Bcl-2mR N A /蛋白表达显著降低,而Bax mRN A /蛋白表达显著增高。

结论　刺梨提取物CL 、苦参碱均可抑制人脐静脉内皮细胞ECV -304的增殖,两药联合应用存在协同作用。

关键词:刺梨/治疗应用;细胞增殖;细胞凋亡;内皮,血管;胃肿瘤/药物疗法;苦参碱/治疗应用;苦参碱/投药和剂量;药物协同作用;抗肿瘤联合化疗方案中图分类号:R 735.2 文献标志码:A 文章编号:1001-1692(2009)06-0547-06 近年来,抗肿瘤血管生成已成为肿瘤治疗的重要靶标,具有良好的特异性[1]。

刺梨为蔷薇科属植物,研究发现具有抗突变、抗自由基等作用[2]。

苦参碱属于四环的喹嗪啶类,近年发现其联合化疗可提高疗效[3]。

本课题组研究发现刺梨提取物CL 体外具有抗肿瘤作用,且可抑制内皮细胞ECV -304增殖。

本研究采用体外实验的方法,探讨在CL 联合苦参碱抑制人胃癌细胞株环境下血管内皮细胞增殖及其机制。

1　材料与方法1.1　试剂与材料CL(贵州同济堂药业惠赠);苦参碱(江苏恒瑞医药股份有限公司惠赠);RPMI1640培养基(美国Gibco公司产品);胎牛血清(天津灏洋公司);四氮甲唑蓝(MT T)及二甲基亚砜(DM SO)(美国Sigm a 公司);Annex in V-FIT C细胞凋亡检测试剂盒(南京凯基生物技术有限公司);逆转录试剂盒及PCR 试剂盒(宝生物工程大连有限公司T aKaRa试剂盒);鼠抗人Bax、Bcl-2、Ki-67单克隆抗体(美国Santa Cruz公司);丙烯酰胺(上海生物工程公司)。

酶标仪(M odel550美国Bio-Rad公司);PCR扩增仪(5331德国Eppendo rf公司)稳压稳流转移电泳仪(EPS604南京科宝仪器研究所)。

人胃癌细胞SGC-7901购自上海中国科学院生物化学与细胞生物学研究所。

用含20%胎牛血清(天津市生化制品厂)的DM EM(Sig ma)培养液培养人脐静脉内皮细胞(hum an um bilical v ein endothelial cell,H UVEC)ECV-304。

1.2　实验方法1.2.1　肿瘤细胞培养液刺激内皮细胞生长实验　取人胃癌细胞株SGC-7901于DMEM培养液中常规培养(含10%胎牛血清和双抗)。

吸取SGC-7901上清液,用DM EM培养液配成含7.25%、12.5%、25%、50%4个质量浓度的肿瘤上清培养液。

当EVC304细胞长成单层后,经胰酶消化制成单细胞悬液,接种于96孔培养板,100L L/孔,贴壁12小时,吸去培养液,加入上述4个质量浓度的肿瘤上清培养液100L L/孔,对照组加等量含10%血清的DM EM,继续培养48小时后,加MT T,在酶标仪上测570nm处的OD值。

本实验在同一条件下重复3次,取3次实验OD值的均数进行统计分析。

确定肿瘤细胞培养液促进内皮细胞增殖的最佳剂量。

1.2.2　分组干预及细胞增殖抑制率检测　对数生长ECV-304细胞胰酶消化,制成5×104个细胞/m L 的悬液,设空白对照组(3孔),肿瘤细胞对照组(3孔)及药物试验组(每种药物浓度3孔,重复3次),接种于96孔培养板内,37℃,5%CO2培养箱中培养24小时。

两单药5种浓度分别加在孔板内,CL的质量浓度依次为10mg/L、20m g/L、40mg/L、80m g/L、160m g/L,苦参碱的质量浓度依次为15m g/L、30m g/L、60m g/L、120mg/L、240mg/L;两药1∶1比例联合;空白对照组以RPM I1640培养液补足。

培养48小时,自动酶标读数仪比色波长570nm测出光密度OD值并计算药物对ECV-304细胞的增殖抑制率。

细胞增殖抑制率=(1-实验组OD值均数/对照组OD值均数)×100%。

此后实验设细胞对照组、CL单用组、苦参碱单用组和CL和苦参碱联合用药组4组,选取CL与苦参碱单独应用时增殖抑制率(fa)为0.5时所对应的CL与苦参碱浓度作为单用组药物处理浓度,联合组CL与苦参碱处理浓度为单用组药物各自剂量的1/2。

利用MT T法测定不同干预因素处理48小时后的细胞增殖抑制率。

1.2.3　RT-PCR检测Bax、Bcl-2、Ki-67mRNA的表达　按以上实验分组处理细胞24小时后,按T RIZOL试剂盒说明一步法提取总RNA,紫外分光光度法测定RNA纯度和浓度。