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实验与实习卫生职业教育Vol.382020No.12两代抗-HCV酶联免疫吸附试验试剂性能评估陈莎，高洁*(陕西友谊医学检验实验室，陕西西安710065)摘要：目的比较间接法和双抗原夹心法丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)酶联免疫吸附试验试剂的性能。
方法收集2018年6月一12月在本检验所采用间接和双抗原夹心ELISA法诊断试剂进行平行抗-HCV检测的血浆样本1875份，初次检测结果为反应性时，使用原试剂进行双孔复查。
采用Chiron RIBA确证试剂对两种试剂中任意一种检测为阳性或可疑的标本进行检测，把RIBA试验结果为阳性的标本再用两代ELISA试剂检测，对得到的S/CO进行比较。
结果双抗原夹心法ELISA诊断试剂的阳性检出率为1.71%,假阳性率为3.13%，准确度为93.75%;而间接法ELISA诊断试剂的阳性检出率为3.36%，假阳性率为96.88%,准确度为47.62%,两者比较，差异有统计学意义("<0.05)。
经质控血清检测比较发现,双抗原夹心法ELISA诊断试剂灵敏度也远高于间接法。
结论双抗原夹心法酶联免疫吸附试剂的诊断性能优于间接法酶联免疫吸附试剂，更适用于早期筛查丙型肝炎病毒抗体，得使用关键词：丙型肝炎病毒抗体；间接酶联免疫吸附试剂；双抗原夹心酶联免疫吸附试剂中图分类号:G424.31文献标识码:B文章编号：1671-1246(2020)12-0110-02目前,检测抗-HCV(丙型肝炎病毒抗体)的主要方法是酶联免疫吸附试验(ELISA月,试剂主要为间接酶联免疫法第三代诊断试剂和双抗原夹心法第四代诊断试剂。
间接酶联免疫法第三代诊断试剂检测结果存在一定的假阳性企而且检测抗-HCV 的窗口期较长;双抗原夹心法诊断试剂可有效弥补间接酶联免疫法第三代诊断试剂存在的部分缺陷回。
基于此,本实验室通过检测1875份血浆标本，对第三代、第四代抗-HCV酶联免疫吸附试验试剂的性能进行评估。
ELISA检测抗HCV影响因素分析摘要】目的探讨ELISA检测抗HCV影响因素。
方法回顾性总结我院300例输血前、血透患者ELISA检测抗HCV的资料进行总结分析。
结果 298例为阴性，一例输血前感染过HCV病毒，另一例类凤湿因子（RF）的干扰造成假阳性反应。
结论ELISA检测抗HCV是血站、医院的常规检测项目，虽然该方法操作简单，灵敏度高，但在实际操作中，ELISA检测抗HCV结果假阴性、假阳性问题还是比较常见，该临床诊断给治疗带来很大困难，影响ELISA检测抗HCV因素众多［1］。
现就比较常见的影响因素加以分析总结。
【关键词】 ELISA 抗HCV 影响因素1试剂影响因素目前ELISA检测抗HCV试剂盒均采用HCV基因工程或合成多肽抗原核心区，NS3，NS4,NS5等包被固相，由于不同厂家HCV抗原组合不同，来源和用量方面也有差异，就造成临床上使用不同厂家的ELISA检测抗HCV试剂盒检测结果有很大差异，经常是这家试剂检测阳性，另一家试剂检测阴性，尤其是较弱阳性标本，这不但是这部分HCV感染的临床诊断不明确，而且在筛检献血员时，极易发生漏检，造成输血后HCV感染。
2内源性物质的影响由于患者体内特有内源性物质的存在，与固相HCV抗原非特异性结合而造成假阳性结果。
2.1类风湿因子（RE）的干扰类风湿因子可大量存在于类风湿性关节炎及某些自身免疫性疾病患者血液中，RF有与变性的IgG非特异性结合的性质，在ELISA检测抗HCV过程中，标本中的RF就与固相上的IgG及酶标记IgG结合，出现假阳性反应。
2.2 高免疫球蛋白血干扰血清中高浓度的非特异性免疫球蛋白可与酶标记IgG结合，非特异性的吸附在固相表面，造成假阳性。
2.3 超氧化物歧化酶（SOD）的干扰用于包被固相的重组HCV抗原片段C-100如为酵母菌产生的SOD融合蛋白，那么标本中SOD会造成HCV片段的假阳性。
3 试验过程中影响因素分析3.1 温育的影响温育是ELISA测定抗HCV影响结果的关键因素，温育时间不够，弱阳性标本检测不出，温育温度不够，弱阳性标本也难以检出。
丙型肝炎病毒抗体检测结果分析目的：分析HCV抗体检测结果并探讨解决问题的对策。
方法：结合全国血站系统室间质评，对我站2009年ELISA方法检测HCV抗体的结果进行分析。
结果：我站2009年共采集血液24 569 U（200 ml为1 U），ELISA方法检测HCV 抗体报废360 U，其中阳性报废162 U，可疑报废198 U，可疑报废占HCV总报废比为55.00%。
2005年血站系统第3次室间质评0574号标本回报结果准确率为35.51%。
结论：血站HCV检测还存在假阳性和假阴性的问题，提高试剂质量和改进检测方法可以更有效地减少血液浪费，保证血液安全。
[Abstract] Objective: To analyze the results of HCV-Ab test and discuss the countermeasure of problem-solving. Methods: The results of HCV-Ab detected by ELISA in 2009 linking with the external quality assessment of nationwide blood bank were analyzed. Results: 24 569 U(200 ml=1 U) blood were collected in 2009 and 360 U blood were abandoned altogether owing to HCV-Ab by ELISA, among reported 162 U as positive, reported 178 U as suspect. The rate as suspect was 55.00%. The accurac y rate of 0574’s result was 35.51% in the third time external quality assessment of blood bank in 2005. Conclusion: The HCV-Ab test exists false positive and false negative in blood bank. Testers should reduce waste and insure safety of blood by improving the reagent quality and the test method.[Key words] HCV-Ab; ELISA; Detection; Analysis丙型肝炎病毒（HCV）感染严重危害人类的健康，我国人群的流行率约为3％，其慢性化率高达85％[1]。
7701例抗－ＨＣＶ检测结果分析摘要目的：通过分析满洲里市医院检验科与中心血库抗-HCV检测情况，探讨满洲里地区抗-HCV阳性分布情况。
方法：对4637例医院检验科患者和3064例无偿献血者血清标本用间接ELISA法检测抗-HCV。
结果：医院检验科患者抗-HCV检测阳性率为2.0%，中心血库无偿献血者抗-HCV检测阳性率为0.29%。
结论：满洲里市医院检验科患者组抗-HCV阳性率远远高于无偿献血者组，满洲里地区抗-HCV阳性检出率符合我国一般人群HCV感染阳性检出率。
关键词丙型肝炎抗-HCV 无偿献血者检验科患者资料与方法标本来源：2003年1月～2005年12月满洲里市医院检验科检测抗-HCV标本4637例，患者年龄15天～78岁。
2004年1月～2005年12月满洲里市医院中心血库采集的3064例无偿献血者血清标本，年龄为18～55周岁。
检测试剂及方法：检验科所用试剂为上海科华生物技术有限公司生产，间接ELISA法，检测结果S/CO值≥3.8即报阳性。
中心血库所用初检试剂为北京万泰公司生产，复检试剂为北京华大吉比爱公司生产，均为间接ELISA法，若两种试剂检测结果符合且S/CO值均≥1，即报阳性，若初复检结果不符时，取小辫血样用结果阳性的试剂做双孔检测，若双孔均阴性报阴性，若有1孔以上阳性则报阳性。
统计学处理：采用X2检验。
结果医院中心血库无偿献血者抗-HCV检测情况：2年共采集3064例标本，9例抗-HCV阳性，平均阳性率为0.29%。
9例阳性中，仅1例有过输血史。
医院检验科患者抗-HCV检测情况：3年共检测4637例标本，抗-HCV阳性例数为94例，平均阳性率为2.0%，其中32例为复检标本。
49例阳性标本为门诊病例，占阳性病例数的52.1%；10例阳性标本来源于传染科病例，占阳性例数的10.5%；11例阳性标本来源妇科病例，占阳性数的11.7%；12例阳性标本来源于外科病例，占阳性例数的12.9%；12例阳性标本来源于内科病例，占阳性例数的12.9%，儿科尚未发现阳性病例。
ELISA法检测抗HCV影响因素分析发表时间：2009-10-10T08:32:05.373Z 来源：《中外健康文摘》第24期供稿作者：郭超群毛江燕李运琴来祝檩[导读] 探讨ELISA法检测抗HCV的影响因素及相应对策(河南省焦作市中心血站河南焦作 454000）【中图分类号】R446 【文献标识码】B 【文章编号】1672-5085(2009)24-0111-02 【摘要】目的探讨ELISA法检测抗HCV的影响因素及相应对策。
方法利用ELISA法，分别对无偿献血者血液标本进行抗HCV初检、复检两次检测；两次检测结果不符时，取相应标本，分别使用两家试剂进行双孔复试。
结果 11293份血液标本检测过程中，共有85份初复检结果不符，经双孔复试79份为阴性，6份为阳性。
结论加强对血液标本、仪器设备、检测试剂的质量管理，建立标准操作规程以规范实验操作，可显著提高检测结果的准确性。
【关键词】 ELISA 花板酶联免疫吸附试验(ELISA)具有灵敏度高、特异性好、操作简便、技术可靠、试剂稳定等优点[1]，广泛应用于采供血机构对无偿献血者抗HCV的检测。
按照有关规定，献血者抗HCV的检测必须使用两个不同厂家的ELISA试剂[2]。
但在实际工作中，会出现两家试剂结果不符的现象，即一种试剂结果超过或接近临界值（cut off），而另一种试剂阴性或仅呈很弱的反应，这种现象影响检验结果的正确判读，为此，笔者对ELISA法检测抗HCV的影响因素进行了分析，现报告如下。
1 材料与方法1.1 研究对象 2008年1月至2008年6月本站无偿献血者血液标本11293份。
1.2 试剂初检抗HCV试剂盒由北京现代高达生物药业有限公司提供，复检抗HCV试剂盒由北京万泰生物技术有限公司提供，以上试剂均经中国药品生物制品检定所批检合格，在有效期内使用。
1.3 质控血清 2NCU/ml抗HCV室内质控血清，卫生部临床检验中心提供，在有效期内使用。
elisa实验报告结果分析Title: Analysis of ELISA Experiment Report ResultsIntroductionEnzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) is a widely used laboratory technique for detecting and quantifying proteins, such as antibodies, antigens, and hormones. The experiment report presents the results of an ELISA experiment, which aimed to measure the concentration of a specific protein in a sample. In this article, we will analyze and interpret the findings of the ELISA experiment report.ResultsThe ELISA experiment report indicates that the absorbance values for the standards and samples were measured at a wavelength of 450 nm. The standard curve, which plots the absorbance values of the standards against their known concentrations, shows a linear relationship. This suggests that the assay is reliable and can accurately quantify the protein of interest in the samples.The absorbance values of the samples were then compared to the standard curve to determine their concentrations. The results show that the concentration of the protein in the samples varies, with some samples having higher concentrations than others. This variability could be due to factors such as sample preparation, handling, or the presence of interfering substances.The experiment report also includes the calculation of the coefficient of variation (CV) for the samples, which is a measure of the precision of the assay. The CVvalues for the samples are within an acceptable range, indicating that the assay has good precision and reproducibility.DiscussionThe results of the ELISA experiment report provide valuable insights into the concentration of the protein in the samples. The standard curve demonstrates the linearity and reliability of the assay, while the variability in the sample concentrations highlights the importance of careful sample preparation and handling.The CV values indicate that the assay has good precision, which is essential for obtaining accurate and reliable results. However, it is important to note that the ELISA experiment report does not provide information on the specificity of the assay. Further validation experiments, such as cross-reactivity studies, may be necessary to confirm the specificity of the assay for the protein of interest. ConclusionIn conclusion, the analysis of the ELISA experiment report results demonstrates the utility of the assay for quantifying the concentration of a specific protein in samples. The linear standard curve, variability in sample concentrations, and acceptable CV values provide valuable information for researchers and clinicians using ELISA for protein analysis. Further studies to validate the specificity and accuracy of the assay may be warranted to ensure the reliability of the results. Overall, the ELISA experiment report results contribute to our understanding of protein quantification and its potential applications in various fields, such asbiomedical research and diagnostics.。
三种抗- HCV ELISA检测试剂的评价摘要：目的：评价三种常用厂家抗- HCV酶联免疫吸附试验（ELISA）检测试剂灵敏度和特异性结果分析，为本实验室ELISA试剂选择提供依据。
方法：将24例HCV确证阳性标本、48例HCV阴性标本及177例抗- HCV单试剂反应性标本，用三家试剂检测，计算各试剂对阳性标本和阴性标本的灵敏度、特异性，确定不同浓度阳性标本抗- HCV检测最高稀释滴度，并对检测弱阳性标本时的非特异性进行评价。
结果：三种长家的试剂对阳性标本的检测灵敏度均为100%，万泰、丽珠试剂特异性为100%，新创试剂特异性为97.9%。
对倍比稀释中等强度的阳性血清进行检测，万泰、丽珠试剂在1：512能检出，新创试剂在1：128时检出；177例核酸阴性，酶免单试剂阳性标本，新创试剂假阳性率最高，达85.71%，万泰试剂假阳性率最低，为3.95% ，丽珠试剂假阳性率为7.91%。
结论：经综合评估，本实验室对抗- HCV的ELISA检测应选用特异性和灵敏度都较好的万泰、丽珠试剂，而不应选用假阳性率较高的试剂。
关键词：抗- HCV ELISA试剂评价丙型肝炎病毒（HCV）是引起丙型肝炎疾病的一种经血传播的病毒，其重要的传播途径之一是输血传播〔１〕。
为保障临床血液的安全，避免输血传播丙型肝炎，２０１5版《血站技术操作规程》〔2〕要求使用２种不同的酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂检测HCV抗体（抗-HCV），同时建议进行核酸HCV-RNA的检测。
吴中华等[3-4]对不同厂家EILSA试剂进行了比较发现他们的检测结果还是有较大的差异性。
为了选择更适合本实验血液检测的试剂提供科学依据，我们对三家酶免试剂盒进行进行实验评价。
1 材料与方法1.1材料（1）经过RIBA确认过的24例阳性和48例阴性无偿献血者血液标本。
（2）2015年5月到2017年7月177例无偿献血者核酸阴性酶免HCV单试剂反应性的血液样本。
