0405 细胞系和细胞株的建立

细胞系与细胞株
人的乳腺癌细胞
细胞株（Cell Strain）：通过选择法或克隆形成法从
系中获得具有特殊性质或标志物的培养物。

细胞株图示
细胞系指可连续传代的细胞。

原代培养物在首次传代时就成为细胞系，能连续培养下去的细胞系成为连续细胞系，不能连续培养下去的细胞系成为有限细胞系。

通过一定的选择和纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称为细胞株。

可以连续多次传代的细胞株称为连续细胞株，传代次数有限的细胞株称为有限细胞株。

所以，细胞系泛指可传代的细胞，细胞株是具有特殊性质的细胞系。

适合于工业化生产的细胞株必须满足一下条件：
1、分散性好，适合大规模悬浮培养。

2、均已型号，细胞大小，生理状态一致。

3、生长速度快，培养周期短，不易染菌。

4、目标产物产量高，容易分离提取。

5、细胞遗传稳定。

细胞株筛选
（一）一般步骤
愈伤组织诱导与培养单细胞分离细胞无性系的分离细胞株筛选性能评价细胞株获得
（二）定向富集驯化
激素滋养型细胞株的筛选驯化耐受高剂量有毒物质的细胞株驯化（三）人工诱变筛选
悬浮培养系统愈伤组织系统原生质体系统
细胞株的保存
（一）继代培养保存法
（二）低温保存法
（三）冰冻保存
（四）。

细胞系谱系的建立与应用细胞系谱系，也叫“细胞系譜”，是指从一个原始细胞分裂而来的一系列细胞株。

这些细胞株具有相同的基因型和表型，可以被用来研究细胞生物学、癌症疾病、药物毒性及毒理学等领域。

建立细胞系谱系的过程需要经过多个步骤。

首先，需要从组织样本或器官切片中分离出单个细胞。

这些单个细胞可以通过多种技术进行培养，如原代细胞培养和细胞株化等。

培养好的细胞株需要被检测，以确保它们是纯的、同质性强的。

这些细胞株还需要被保存和命名，以方便日后的使用。

细胞系谱系的应用范围极为广泛。

首先，在基础生物学研究中，细胞系谱系可以被用来探索细胞的分化、增殖、分子信号通路和细胞生物学模型等。

比如，使用特定的细胞株可以研究癌症细胞如何分化，以及癌细胞增殖时调控细胞周期的分子机制。

此外，也可以使用细胞系谱系进行细胞药物毒理学研究，预测潜在的药物毒性并减少药物临床上的不良反应。

另外，在医学研究中，细胞系谱系也具有重要的应用价值。

比如，一些癌症治疗方法可以利用细胞毒性化学剂杀死癌细胞。

但是，化学剂毒性的程度是难以预测的。

利用特定的细胞株，可以在实验室中根据化学剂的各种浓度测试癌细胞敏感性，并预测患者对药物的反应。

这样，可以优化治疗方案，达到更好的治疗效果。

除了生物学和医学研究，细胞系谱系还可以应用于毒理学领域。

在化学试剂和产品的研发过程中，我们需要对它们进行毒性测试，以保证生产的安全。

使用细胞系谱系可以模拟细胞与药物的相互作用，提前预测潜在的毒性反应。

总之，细胞系谱系的建立与应用具有非常大的实际意义，不仅可以在基础生物学和医学研究中发挥作用，也可以对人们的健康和安全提供保障。

什么是细胞株什么是细胞系两者有什么区别什么是细胞株什么是细胞系两者有什么区别细胞株与细胞系是细胞生物学中两个重要的概念，它们在细胞培养、遗传学研究以及药物开发等领域扮演着关键角色。

尽管两者在名称上相似，但它们各自具有独特的定义、形成方式及特性。

细胞株的定义与特性细胞株（Cell Strain）是指通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志物的培养细胞。

这些特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在，包括特定的生化特性、温度敏感突变株、染色体组型、特殊的染色体标志以及特定的同工酶谱等。

细胞株的形成通常涉及单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。

这些细胞株的特殊性质使得它们在科学研究中具有独特的价值，例如，某些细胞株已被商用，广泛用于各种细胞实验中。

细胞株的传代次数一般可培养到40-50代，但在这个过程中，细胞株的特殊性质或标志必须保持稳定。

这意味着，尽管细胞在传代过程中可能会经历一些变化，但它们的核心特性必须得以保留。

细胞株在生物医学研究中具有重要应用。

例如，温度敏感突变株可以用于研究基因功能，因为在不同温度下，这些细胞可能表现出不同的生物学特性。

此外，细胞株在药物筛选中也扮演着重要角色，因为它们的稳定性和可重复性使得实验结果更具可靠性。

细胞系的定义与特性细胞系（cell line）则是指原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的细胞群体，也指可长期连续传代的培养细胞。

简单来说，细胞系是通过将原始细胞进行一系列培养和传代培养过程，使其能够持续增殖并具有某些特定的性质或表达某些特定的基因。

细胞系的传代次数通常较高，能够长期保持增殖能力。

随着传代次数的增加，细胞系内的细胞可能会发生基因突变或表型变化，导致细胞系具有一定的变异和异质性。

这种变异可能源于传代过程中的遗传不稳定性或环境因素的影响。

细胞系在生物技术和医学研究中具有广泛应用。

例如，HeLa细胞系是最著名的无限细胞系之一，广泛用于癌症研究、病毒学研究以及药物开发。

肿瘤细胞系的建立原理肿瘤细胞系的建立是为了研究肿瘤生物学和治疗方法的开发，通过从患者的原发肿瘤或转移瘤中分离和培养细胞，形成可持续增殖的细胞系。

肿瘤细胞系的建立在肿瘤研究中扮演着重要的角色，它们可以用来研究肿瘤的生长机制、细胞信号转导通路、基因表达调控以及药物敏感性等。

肿瘤细胞系的建立主要分为以下几个步骤：1. 原发肿瘤样本的获取：原发肿瘤是指肿瘤起源的部位，通过手术、活检等方式获得肿瘤组织样本。

获取的样本要在临床医生的指导下进行，并尽量保持组织的完整性和洁净度。

2. 细胞分离和培养：将原发肿瘤组织进行体外分离，将组织切碎或通过酶消化等方法将肿瘤细胞从正常细胞中分离出来。

然后将分离的细胞转移到培养皿中，加入适当的培养基和生长因子，提供细胞生长所需的养分和环境条件。

3. 细胞增殖和扩增：在培养皿中，肿瘤细胞开始进行增殖。

通过适当的细胞密度、培养基成分的调整，可以促进肿瘤细胞的增殖和扩增。

为了获得可持续生长的肿瘤细胞系，需要反复传代和定期培养。

4. 细胞株的鉴定：通过形态学观察和免疫组化染色等方式，对细胞株进行鉴定，确认细胞的来源和纯度。

同时，用多种方法对细胞进行病毒感染和生物学特性的测试，以确保肿瘤细胞的稳定性和代表性。

5. 细胞的冻存和保存：为了长期保存肿瘤细胞系，通常将肿瘤细胞进行冻存。

冻存可以减缓细胞的生长活动，使其长期保存，并在需要时重新启动。

肿瘤细胞系的建立原理主要是通过分离和培养患者原发肿瘤组织中的肿瘤细胞，使其在体外条件下继续增殖，从而形成可持续生长的细胞株。

在细胞培养的过程中，肿瘤细胞可能会发生一定的改变，例如基因变异、表达水平的改变等，因此需要经常进行鉴定和验证。

肿瘤细胞系的建立对于肿瘤研究和治疗具有重要的意义。

一方面，肿瘤细胞系可以用来研究肿瘤生长的分子机制，通过研究其增殖、迁移、侵袭和转移等特性，可以揭示肿瘤的形成和发展机制。

另一方面，肿瘤细胞系也可以用来评估药物的敏感性和抗药性，帮助选择和优化治疗方案。

、概念、概念1、细胞系（Cell Line）：原代培养舞经首次传代成功即成细胞系，由原先存在于原代培养物中的细胞世系（Lineage of Cells）所组成。

2、细胞株（Cell Strain）：通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物称为细胞株。

细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。

如果不能继续传代或传代数有限，称为有限细胞株（finitecell strain）；如果可以连续传代，称为连续细胞株（continuous cell strain）。

对于人类肿瘤细胞，在体外培养半年以上，生长稳定，并连续传代的即可称为连续性株或系。

二、建立细胞系（或株）的要求什么样的体外培养群可被认可为己鉴定的细胞，视具体情况而定，无统一规定。

对于用作原代培养的细胞只要供体均一，取材部位及组织种类等条件稳定即可，如用做长期培养，特别是反复传代的细胞，常需做如下说明：1、组织来源：细胞供体所属物种，来自人体或者动物；个体性别、年龄；取材的器官或组织。

如系肿瘤组织，应说明临床和病理诊断，以及病历号等。

2、细胞生物学检测：了解细胞一般和特殊的生物学性状，如细胞一般形态，特异结构，细胞生长曲线和分裂指数，倍增时间，接种率等。

如为肿瘤细胞，为说明来源于原肿瘤组织并保持恶性，须做软琼脂培养，异体接种致瘤和对正常组织侵润力等实验。

3、培养条件和方法；应说明细胞系（或株）适应的生存环境，即指明使用的培养基、血清种类、用量以及适宜PH值。

三、若干细胞建株的要点及基本过程（一）肿瘤细胞培养技术要点1、取材：材料主要来源于外科手术或活检瘤组织，取材时避免用坏死组织，要挑选瘤细胞集中和活力较好的部位，瘤性转移淋巴结或胸腹水是较好的培养材料。

取材后尽快培养，因故不能立即培养者，可冻存。

其培养方法及冻存方法同前述正常组织。

2、成纤维细胞排除：在肿瘤组织中常混杂有一些成纤维细胞，培养时能与瘤细胞同时生长，并常压过癌细胞，导致癌细胞生长受阻以至消失，应仔细排除。

细胞株和细胞系摘要“细胞株”和“细胞系”是动物细胞工程中常用的两个名词，但由于概念不清，使用混乱，为中学生物教学带来不必要的困惑。

本文拟就这两个名词的历史渊源和现实应用进行讨论。

关键词细胞株细胞系1 名词的由来细胞株（cell strain）最初为W.Earle（1940）所采用，他把自己建立的小鼠结缔组织L系称为“株”，1951年，George Gey把其建立的人体宫颈癌细胞Hela 系称为“株”。

1954年，White另外使用了“系”来称呼A Carrel培养的鸡胚心脏的细胞群，细胞系（cell line）由此产生，之后这两个名词长期混用。

即使在1979年国际组织培养协会专业术语委员会颁布“专业名词建议”和1984年在宁波召开的全国动物组织和细胞培养会议通过“动物细胞、组织和器官培养技术中的一些术语的译名和解释”之后，到目前为止国内对这两个名词的使用仍是混乱的，不仅在商品名中混用，在专业文献中亦十分严重。

2 名词使用的现实情况2．1 中学教材定义在人教版高中生物（选修）全一册第70页中，细胞株被定义为经原代培养的组织细胞，培养到第10代左右，度过第一次死亡危机后的细胞群，这种细胞的遗传物质没有发生改变；细胞系则被定义为可以度过第二次死亡危机，传代培养到40~50代的细胞，这部分细胞的遗传物质发生了部分改变并且细胞带有癌变的特点，这种细胞在适宜条件下无限传代。

2．2 文献定义由新鲜组织制成的细胞培养物称原代细胞，这种细胞经首次传代成功后的细胞称做细胞系，可泛指一般可能传代的细胞，由原先存在于原代培养物中的细胞世系（lineages of cells）所组成，这种细胞世系含有多种细胞类型。

若用胰蛋白酶等将原代细胞消解分散后，再培养一代，称次代培养。

如果不能继续传代或传代有限，可称为“有限细胞系（finite cell line）”或“已建立的细胞系（established line）”。

能够连续传代的细胞叫做“连续细胞系或无限细胞系（infinite cell line）”。

利用培育技术进行动物细胞株的建立与保存当我们在生物学研究中时，建立稳定的动物细胞株是非常重要的一步。

通过培育技术，我们可以将动物细胞成功地永久保存下来，为以后的研究提供便利。

本文将探讨如何利用培育技术建立和保存动物细胞株。

动物细胞株的建立通常通过体外培养的方式进行。

首先，我们需要获得需要建立细胞株的原始细胞，通常是从动物体内获得。

这些细胞可以来自正常组织或肿瘤组织。

然后，我们需要将这些细胞在含有适当营养物质的培养基中进行培养。

细胞培养的基本条件是一个合适的培养基和适宜的生长环境。

培养基通常包括有机营养物、无机盐、维生素和生长因子等。

此外，还需要提供适当的温度、湿度和气体环境。

这使得培养细胞能够在体外条件下存活和增殖。

为了获得特定类型的细胞株，我们需要对细胞进行筛选和分离。

一种常用的方法是单细胞克隆化。

在这个过程中，我们将细胞稀释到一种适当的浓度，使得每个细胞在培养皿中保持一定的距离。

然后，我们观察细胞的增殖情况，找到生长最好的单个细胞，并将其分离到新的培养皿中。

这个过程需要耐心和细心，但是能够确保我们获得纯种的细胞株。

建立好细胞株后，我们需要采取一些措施来确保其稳定性和长期保存。

首先，我们可以将细胞株分成小批量进行保存。

这样一来，即使一个批次的细胞株遭受了不良条件或者感染，其他批次的细胞依然能够保存下来。

此外，在保存过程中，添加一些防腐剂和保护剂也是有必要的。

例如，加入20%甘油可以防止细胞冻结时发生冰晶形成的损伤。

除了传统的保存方式外，我们还可以利用技术手段进行细胞株的保存。

一种方法是冷冻保存，即将细胞冷冻在极低的温度下。

这使得细胞活性暂停，直到需要时再重新培养。

另一种方法是液氮冷冻，将细胞保存在液氮中，使其完全冷冻。

这种方法可以长期保存细胞株，并且能够保持良好的细胞质完整性。

利用培育技术进行动物细胞株的建立和保存对于生物学研究具有重要意义。

通过正确的培育方法，我们可以成功地建立稳定的细胞株，并且将其长期保存下来。

细胞库成立概略一、对细胞库细胞基质总的要求( 一 ) 细胞系／株历史资料1．细胞系／株根源资料应拥有细胞系／株根源的有关资料，如细胞系／株制备机构的名称，细胞系／株根源的种属、年纪、性别和健康状况的资料。

这些资料最好从细胞根源实验室获取，也可引用正式发布文件。

人源细胞系／株须拥有细胞系／株的组织或器官根源、种族及地区根源、年纪、性别及生理状况的有关资料。

动物根源的细胞系／株须拥有动物种属、种系、饲养条件、组织或器官根源、地区根源、年纪、性别、病原体检测结果及供体的一般生理状况的有关资料。

2．细胞系／株培育历史的资料应拥有细胞分别方法、细胞体外培育过程及成立细胞系／株过程的有关资料，包含所使用的物理、化学或生物学手段，能否有外源增添序列，以及细胞生长特点、生长液成分、选择细胞所进行的任何遗传操作或选择方法等。

同时还应拥有细胞鉴识、检定、内源及外源因子检测结果的有关资料。

应供给细胞培育液的详尽成分。

如使用人或动物源成分，如血清、胰蛋白酶、水解蛋白或其余生物学活性的物质，应拥有这些成分的根源、制备方法、质量控制、检测结果和质量保证的有关资料。

( 二 ) 细胞库的成立细胞库的成立可为生物制品的生产供给已标定好的、细胞质量同样的及能连续稳固传代的细胞种子。

1．原资料的选择成立细胞库的各样种类细胞的供体均应切合细胞库细胞的检定中有关规定。

神经系统来源的细胞不得用于生物制品生产。

培育细胞用牛血清应根源于无牛脑海绵体脑病流行地区的健康牛群，其质量标准应符合规定 ( 附录 XIII D)。

不得使用人血清作为细胞培育液。

如需使用人血白蛋白，则须使用有同意文号的合格制品。

消化细胞用胰蛋白酶应进行检测，证明其无细菌、真菌、支原体或病毒污染。

特别应检测胰蛋白酶根源的动物可能携带的病毒，如渺小病毒等。

用于生物制品生产的培育物中不得使用青霉素或β- 内酰胺 ( β-Lactam) 类抗生素。

2．细胞培育操作的要求细胞培育生产人员应按期检查身体。