大蒜绿变色素分离纯化的研究
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铁 、硒 、锗 等矿物元素 [] 1 。另外 ,大蒜 含有众多的生 - 2 物活性物质 ,可 以提 高机体的免疫 能力 ,有抗癌 、杀 菌 、防止动 脉粥样硬化 和血小板凝集 、防止血栓 的形
司) ,R 一2 A旋转蒸发器 ( E 5A 上海亚荣生化仪器厂 ), 层析柱 (6× 5mm、1 20 m),数显恒温水浴锅 1 40 6× 0r a ( 国华 电器有 限公司) ,T L 低速 台式大容量离心机 D一
共振波谱及红外光谱等进行研究 【 ,这就需要对提取 出 6 ] 来的绿色素溶液样 品进行分离纯化 ,达到一定的纯度要 求 。因此 ,本文采用7 种柱层析方法对大蒜绿色素样 品
操作要点 :
打破休 眠的大蒜 ( 泰安农贸市场购得 )。 12 主要试剂与仪器设备 .
实验所 需柠檬酸 ,甲醇 ,无水NaS :O ,石油醚 ,
项 目资助:本研究受 国家自然科学基金 (0 7 3 3 3 5 1 0 )资助。 作者简介:陈聪 (9 4 ) 女 , 在读研究生 , 18 - , 研究方 向: 功能性食品 。 通讯 作者 :乔旭光
摘
要:本文采用固相苹取 法, 附树 脂法和凝胶层析 法对大蒜绿 变的产物绿 色素进行 了分 离纯化的研 究, 吸 并
利 用高效液相 色谱法对其分 离纯化 的效果进行检 验 , 色素样 品达到较 高的纯度 。 绿 经过实验 筛选 , 先将 大蒜绿 色素 粗提 液通过 X D 型大孔树 脂吸 附,用含 02 C的 甲醇作 为洗脱液 ,收集绿 色素溶液再经过 Sp dxL 一 0 A -1 6 .%H l e ae H 2 凝 h 胶树 脂 ,用纯 甲醇作 为洗脱液 ,流速为 12 V h .B / ,即可以达到较好 的纯化效果 。 关键词 :大蒜 ;绿 色素 ;分离纯化 大蒜 ( lu S f u . A l m a v m L )为百合科 葱属植物 ,营 i i 养 丰富 ,含有蛋 白质 、糖类 、脂 肪维生素和 钙 、磷、 9 %乙醇 ,盐酸,甲酸均为 国产分析纯试剂 ,乙腈为国 5 产色谱纯试 剂。
还经常加工成蒜泥、蒜汁 、脱水蒜片、蒜粉等制 品,但 在加工过程 中常常出现绿变现象 ,严重地影响了产品的 外观质量 ,成为妨碍大蒜进一步加工的主要 问题 [ 。 7 】 大蒜绿色素物质 的结构至今 尚未明晰 ,为推测该物 质的分子式及结构 ,需利用液质联用 ( CMS L — )、核磁
高效液相色谱仪L 一0 v (t c1A p E 本岛津公司 ),二极 管 阵列 检 测器 ,组 织破 碎 机 ( 海海 菱 电器 有 限 公 上
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20 年第 7 08 期
中 国 食 物 与 营 养
F o n ti o nChn o da dNu rt ni ia i N o. , 2 0 7 0 8
大蒜绿 变色素分 离纯化的研 究
陈 聪 ,乔 旭 光
2 1 1) 7 08 ( 山东农业 大学食品科学与工程学院 ,泰安
( )溶剂浸提 :甲醇 ( 1 料液 比为 1 )在0 " :1 ~4 C
环境 下浸提蒜泥2 h 4。
( )石油醚萃取脱脂 :加入与绿色素提取液相 同 2
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陈聪 等 :大蒜 绿变 色素 分离 纯化 的研 究
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体积的石油醚 ,萃取 除去其中的脂肪及醚溶性化合物。 ( )添 ̄9 %乙醇去除蛋白:按 1 的比例向提取 3 U5 :1 液 中添 ̄9 %乙醇 ,溶液立刻出现 白色混浊 ,4 0 转 / U5 80 mi离 Ilmi,取上清液抽滤并旋转蒸发浓缩备用 。 n  ̄O n , 13 2 固相萃取法分离纯化大蒜绿色素物质 .. 分别选
AB. 型 大 孔树 脂 ( 津 南开 大学 化 工 厂 ) , 8 天 A ele AD 1聚苯 乙烯 型合成 吸附树脂 ( mbrtX 一6 i 美国罗 门 哈斯公 司) ,葡 聚糖 凝胶树 ̄S p a e H 2 ( E e h d xL 一0 G 公
司 )。
产国 ,其产量 占世界总产量的 1 4。除鲜食外 ,大 蒜 / 】 4【
成、抗糖尿病等多方面 的作用 [ 。我国是大蒜的主要生 3 ]
C R 4 柱 (ML A B , 6 ),Wa rO SS L s 柱 (c ), m s A I B J H  ̄ 6c
Wa r S pP kV c H2  ̄ (c )。 t s e —a a e N d 柱 3c
一
而有 效控制发绿现象 ,达到大蒜规模化生产具有重要意
义 【 。 t
甲醇浸提一过滤 ( 无水 N 2O 去水 )一石油醚萃取 除 a 4 S
脂 一3  ̄旋转蒸发浓缩一添加 9% 乙醇沉淀蛋 白一离心 5 C 5
1 材料与方法
1 1 实验原料 .
பைடு நூலகம்
一
抽滤一旋转蒸发脱除部分溶剂 一粗提浓缩液备用 【 6 ' 。
的纯化进行研究 ,为进一步探索大蒜绿色素的结构及其 理化性质奠定了基础 ,对研究大蒜制品绿变的机理 ,进
( 上海安亭科学 仪器厂 )。
1 3 实验 方法 .
13 1 大蒜绿 色素粗提液制备的工艺流程 大蒜去皮 , ..
破碎 一添加 2 %柠檬酸一8  ̄ 0 C水浴加热 3mn 0 i ̄蒜泥变绿
用 S p lo ENVI 1 ,ENVICARB;W ae sOAS S u ec 一 8 — tr I
物质 _ ,其保 留时间在 5 n 内。 6 J mi之
2 结果与分析
2 1 固相萃取法分离纯化大蒜绿色素物质 . 4 种商 品化小柱 中,S p l N I1s 柱和Wa r u ec E V 一8] o  ̄ ts e O SSH B A I L 属于C1填料反相柱 ,比较适合绿色素物质 8 的纯化 ,而E V — A B N I R 活性炭填料小柱对色素 吸附严 C 重 ,试验证明洗脱很困难 ,SpP k aN 2 e—a V c H 属于正相氨