水质 水中挥发酚类测定 4-氨基安替比林分光光度法HJ503-2009

水中挥发酚类的测定——4-氨基安替比林分光光度法5、4—氨基安替比林直接光度法方法原理酚类化合物于pH10.00±0.2介质中，在铁氰化钾存在下，与4—氨基安替比林反应，生成橙红色的吲哚酚安替比林染料，其水溶液在510nm波长处有最大吸收。

研究指出：酚类化合物中，羟基对位的取代基可阻止反应进行；但卤素、羧基、磺酸基、羟基和甲氧基除外，这些基团多半是能被取代下的；邻位硝基阻止反应生成，而间位硝基是不完全地阻止反应：氨基安替比林与酚的偶合在对位较邻位多见，当对位被烷基、芳基、酯、硝基、苯酰基、亚硝基或醛基取代，而邻位未被取代时，不呈现颜色反应。

用光程为20mm的比色皿测定，酚的最低检出浓度为0.1mg/L。

6、试剂（1）苯酚标消贮备液：称取1.00g无色苯酚(C6H5OH)溶于水，移入l000ml 容量瓶中，稀释至标线，置于4℃冰箱内保存，至少稳定一个月。

（2）贮备液的标定（标定原理：溴酸钾-溴化钾，酸性，生成溴单质，和苯酚发生定量反应，过量的溴酸钾氧化碘化钾析出碘，用硫代硫酸钠滴定。

硫代硫酸钠用碘酸钾-碘化钾标定）（3）苯酚中间液：将苯酚贮备液用水稀释至10μg/ml的酚标淮个间液。

使用时当天配制。

（4）缓冲溶液（pH为10）：称取20g氯化铵溶于100ml氨水中，加塞，置于冰箱中保存。

（5）2%的4-氨基安替比林溶液：称取2g的4-氨基安替比林溶于水，稀释至100ml，置于冰箱中保存，可使用一周。

注：固体试剂易潮解、氧化，宜保存于干燥器中。

（6）8%的铁氰化钾溶液：称取8g铁氰化钾溶于水，稀释至100ml，置于冰箱中保存，可使用一周。

（7）硫酸铜（1g/L）（8）磷酸（9）5%硫酸亚铁：称取5g硫酸亚铁固体，溶入100ml水中。

7、分析步骤（1）校准曲线的绘制于8支50ml比色管中，分别加入0.00、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00、10.00、12.50ml、浓度为10μg/ml的苯酚标淮中间液，加水至50m1标线。

编号：作业指导书水质挥发酚的测定临江市环境保护监测站水质挥发酚的测定流动注射-4-氨基安替比林分光光度法1、适用范围本标准规定了测定地表水、地下水、饮用水、工业废水和生活污水中挥发酚的4-氨基安替比林分光光度法。

地表水、地下水和饮用水宜用萃取分光光度法测定，检出限为 0. 0003 mg/L，测定下限为 0.001 mg/L，测定上限为 0.04 mg/L。

工业废水和生活污水宜用直接分光光度法测定，检出限为 0.01 mg/L，测定下限为 0. 04 mg/L，测定上限为2.50 mg/L。

对于浓度高于标准测定上限的样品，可适当稀释后进行测定。

2、原理用蒸馏法使挥发性酚类化合物蒸馏出，并与干扰物质和固定剂分离。

由于酚类化合物的挥发速度是随馏出液体积而变化，因此，馏出液体积必须与试样体积相等。

被蒸馏出的酚类化合物，于pH10.0± 0.2介质中，在铁氰化钾存在下，与4-氨基安替比林反应生成橙红色的安替比林染料。

显色后，在30 min内，于510 nm波长测定吸光度。

3、试剂3.1、蒸馏试剂（30%磷酸）将150ml磷酸（H3PO4）（85%，优级纯）用水稀释至500ml，当天配制。

3.2、4-氨基安替比林显色剂将0.32g4-氨基安替比林溶于水中，稀释至500ml，当天配制。

3.3、铁氰化钾缓冲液铁氰化钾缓冲液（pH=10.3）：将2.0g铁氰化钾【K3Fe（CN）6】（优级纯），3.1g硼酸（H3BO3）（优级纯）和3.75g氯化钾（KCI）（分析纯）溶于水中，加入1M氢氧化钠（NaOH）溶液47ml，稀释至1000ml，调节溶液的pH值为10.3，每周配制。

4、采样和样品保存在样品采集现场，用淀粉-碘化钾试纸检测样品中有无游离氯等氧化剂的存在。

若试纸变蓝，应及时加入过量硫酸亚铁去除。

样品采集量应大于500 mL，贮于硬质玻璃瓶中。

5、分析步骤5.1、样品处理：浑浊的样品需要事先离心或用0.45um滤膜过滤，不能直接分析。

水质水中挥发酚类测定4-氨基安替比林分光光度法HJ503-20091.目的通过4-氨基安替比林分光光度法测定水中挥发酚的浓度，分析方法检出限、回收率及精密度，判断本实验室的检测方法是否合格。

2.适用范围2.1.1本标准适用于地表水、饮用水、工业废水和生活污水中挥发酚的4-氨基安替比林分光光度法的测定。

1.2检测方法是4-氨基安替比林分光光度法。

1.3检测依据是GB/T5750.4-2006和HJ503-20093.职责3.1检测人员负责按操作规程操作，确保测量过程正常进行，消除各种可能影响试验结果的意外因素，掌握检出限、方法回收率与精密度的计算方法。

3.2复核人员负责检查原始记录、检出限、方法回收率及精密度的计算方法。

3.3技术负责人负责审核检测结果及检出限、方法回收率、精密度分析结果。

4.分析方法4.1．水样预处理4.1.1量取250mL水样置于蒸馏瓶中，加数粒小玻璃珠以防暴沸，再加二滴甲基橙指示液，用磷酸溶液调节至pH4(溶液呈橙红色)，加5.0mL硫酸铜溶液(如采样时已加过硫酸铜，则补加适量)。

如加入硫酸铜溶液后产生较多量的黑色硫化铜沉淀，则应摇匀后放置片刻，待沉淀后，再滴加硫酸铜溶液，至不再产生沉淀为止。

4.1.2连接冷凝器，加热蒸馏，至蒸馏出约225 mL时，停止加热，放冷。

向蒸馏瓶中加入25 mL水，继续蒸馏至馏出液为250 mL为止。

蒸馏过程中，如发现甲基橙的红色褪去，应在蒸馏结束后，再加1滴甲基橙指示液。

如发现蒸馏后残液不呈酸性，则应重新取样，增加磷酸加入量，进行蒸馏。

4.2．标准曲线的绘制：于一组8个分掖漏斗中，分别加入100mL水,依次加入0；0.50；1.00；2.00；3.00；5.00；7.00；10.00mL苯酚标准使用液，再分别加水至至250mL。

加2.0mL 缓冲溶液混匀，此时pH值为10.0±0.2，加1.5mL4-氨基安替比林溶液，混匀。

再加1.5mL铁氰化钾溶液，充分混匀，放置10min。

用 4－氨基安替比林（ 4－ AAP）萃取分光光度法测定水中挥发酚的几点体会前言：笔者常年从事水质挥发酚的测定分析工作，现就在工作中用4－氨基安替比林（4－AAP）萃取分光光度法测定水中挥发酚时所遇到的问题（如萃取振荡时溶液的渗漏及如何降低空白样的吸光度等）提出个人的意见和解决方法，以共大家学习和交流。

关键词：挥发酚；测定；问题；探讨目前水质挥发酚的测定主要用的方法是4－氨基安替比林（4－AAP）分光光度法（HJ503－2009），该方法中规定当水质中挥发酚的浓度大于0.5mg/L时用直接分光光度法，而小于0.5mg/L时用萃取分光光度法，本文着重探讨小于0.5mg/L时所用萃取分光光度法中所遇到的问题。

1、方法原理用蒸馏法使挥发性酚类化合物蒸馏出，并与干扰物质和固定剂分离。

由于酚类化合物的挥发速度是随馏出液体积而变化，所以馏出液体积必须与试样体积相等。

被蒸馏出的酚类化合物，于PH（10.0±0.2）介质中，在铁氰化钾存在的条件下，与4－APP反应生成橙红色的安替比林染料，用三氯甲烷萃取后，在460nm 波长下测定吸光度。

2、实验操作过程中所遇到的问题的探讨1)萃取时如何准确加入10ml三氯甲烷本次实验萃取时要求准确加入10ml三氯甲烷。

因三氯甲烷的加入量直接影响比色时的吸光度，故三氯甲烷的加入量必须准确加入，但三氯甲烷密度比一般试剂溶液的大，初学者在加入的过程中很难控制，稍不注意就加错，很多时候还没等加入，中途就漏了几滴。

笔者认为要准确加入10ml三氯甲烷，分析人员除了平时要练好基本功外，还要不但总结经验，比如加10ml三氯甲烷选择移液管时选10ml的移液管就比选5ml、20ml或者其他刻度的移液管好，另外应尽量缩短三氯甲烷试剂瓶与反应容器之间的距离，最好两个瓶口挨得很近，但不要互相接触，这样的话，能有效避免转移加入过程中发生滴漏。

2)振荡萃取时如何防止渗漏在显色分液漏斗中准确加入10ml三氯甲烷后，密塞，要求剧烈振摇2分钟，而就在用分液漏斗剧烈振摇的过程中，渗漏也是很难避免的，渗漏一旦发生，就将直接影响分析数据的准确性。

水中挥发酚类的测定—-4—氨基安替比林分光光度法5、4—氨基安替比林直接光度法方法原理酚类化合物于pH10.00±0。

2介质中，在铁氰化钾存在下，与4-氨基安替比林反应，生成橙红色的吲哚酚安替比林染料，其水溶液在510nm波长处有最大吸收.研究指出：酚类化合物中，羟基对位的取代基可阻止反应进行；但卤素、羧基、磺酸基、羟基和甲氧基除外，这些基团多半是能被取代下的；邻位硝基阻止反应生成，而间位硝基是不完全地阻止反应：氨基安替比林与酚的偶合在对位较邻位多见，当对位被烷基、芳基、酯、硝基、苯酰基、亚硝基或醛基取代，而邻位未被取代时,不呈现颜色反应.用光程为20mm的比色皿测定，酚的最低检出浓度为0。

1mg/L。

6、试剂(1)苯酚标消贮备液：称取1。

00g无色苯酚（C6H5OH）溶于水，移入l000ml 容量瓶中,稀释至标线，置于4℃冰箱内保存，至少稳定一个月。

（2）贮备液的标定（标定原理：溴酸钾—溴化钾，酸性，生成溴单质，和苯酚发生定量反应，过量的溴酸钾氧化碘化钾析出碘，用硫代硫酸钠滴定。

硫代硫酸钠用碘酸钾—碘化钾标定）(3)苯酚中间液:将苯酚贮备液用水稀释至10μg/ml的酚标淮个间液.使用时当天配制。

（4)缓冲溶液（pH为10）：称取20g氯化铵溶于100ml氨水中，加塞，置于冰箱中保存。

（5）2%的4-氨基安替比林溶液：称取2g的4-氨基安替比林溶于水，稀释至100ml，置于冰箱中保存，可使用一周。

注：固体试剂易潮解、氧化，宜保存于干燥器中.（6)8%的铁氰化钾溶液：称取8g铁氰化钾溶于水，稀释至100ml，置于冰箱中保存，可使用一周。

(7）硫酸铜（1g/L)（8）磷酸（9)5%硫酸亚铁：称取5g硫酸亚铁固体，溶入100ml水中。

7、分析步骤(1)校准曲线的绘制于8支50ml比色管中,分别加入0。

00、0。

50、1.00、3。

00、5。

00、7.00、10。

00、12。

50ml、浓度为10μg/ml的苯酚标淮中间液，加水至50m1标线。

4-氨基安替比林分光光度法测定水中的挥发酚王静平【期刊名称】《《化工管理》》【年(卷),期】2019(000)028【总页数】2页(P30-31)【关键词】挥发酚; 截距; 斜率; 分光光度法【作者】王静平【作者单位】山西省分析科学研究院山西太原 030006【正文语种】中文0 引言挥发酚是中国水质环境监测评价项目之一，通常指沸点230℃以下的酚类，属于一元酚。

酚类主要来自炼油、煤气洗涤、炼焦、造纸、合成氨、木柴防腐、和化工废水等。

常存在于地下水及生活污水中，人体摄入一定量会出现急性中毒症状；长期饮用被酚污染的水，可引起头痛、出疹、瘙痒、贫血及各种神经系统症状。

因其对人及水生生物有极高的毒性而备受关注。

挥发酚的现行检测方法有4-氨基安替比林分光光度法、溴化容量法、流动注射分析法、气相色谱法等。

而经典通用的方法是4-氨基安替比林分光光度法，该方法具有较高的灵敏度、精密度与准确度。

目前对该方法的研究也很多，多集中在方法的验证、方法的改进以及前处理影响因素探讨或不确定度研究等。

在HJ 503—2009《水质挥发酚的测定4-氨基安替比林分光光度法》中对分光光度法测定挥发酚时所绘制的校准曲线的截距(a)和斜率(b)均未给出参考值或参考范围。

校准曲线的准确与否直接决定最终检测数据是否准确可信。

笔者收集近几年用4-氨基安替比林法测定水中挥发酚制作校准曲线一系列原始数据进行统计分析，给出该方法校准曲线截距(a)斜率(b)参考范围，为应用该方法检测提供参考。

1 试验部分1.1 仪器仪器：721分光光度计，具460nm波长。

30mm比色皿。

一般实验室常用仪器。

1.2 试剂所用试剂均为符合国家标准的分析纯化学试剂；实验用水为新制备的去离子水。

标准溶液由单位统一购置的有证标准物质。

无酚水：按HJ 503—2009《水质挥发酚的测定4-氨基安替比林分光光度法》制备。

酚标准贮备液为挥发酚标准溶液: 编号GBW(E)080376，100mg/L。

挥发酚测定实验中空白值影响因素的探讨摘要：4-氨基安替比林萃取光度法是国标规定的水体中挥发酚的测定方法，此方法灵敏度高，精密度好，但实验空白值对测定结果影响较大，且在实际分析中经常会出现空白值偏高的现象，为了保证挥发酚测定的精密度和准确性，本文对影响挥发酚实验空白值的几种因素进行了探讨。

关键词：挥发酚；4-氨基安替比林；实验空白1. 实验空白值的影响因素分析1.1实验用水的影响根据标准[1]要求，在进行挥发酚实验前一定要先制备无酚水，无酚水的制备有两种方法，一是在每升去离子水中加入0.2g经200℃活化的活性炭粉末，充分振摇后，放置过夜，用双层中速滤纸进行过滤。

二是加氢氧化钠使水呈强碱性，并加入高锰酸钾至溶液呈紫红色，移入全玻璃蒸馏器中加热蒸馏，集取馏出液备用。

两种方法均可制备无酚水，但时间漫长，过程繁琐。

为探索简单的无酚水的制备方法，本站比较了一级水、烧沸后冷却至室温的一级水以及蒸馏后的一级水对空白值的影响。

实验结果显示烧沸后冷却至室温的一级水以及蒸馏后的一级水空白值无显著差异，吸光度均在0.04以下，满足标准要求，而未经任何处理的一级水所得的空白值吸光度均值为0.129，不满足标准要求。

分析其原因为过滤一级水的滤膜含有芳香烃类物质，该物质也会与4-氨基安替比林显色，增加空白值的吸光度。

张青春[2]的研究表明用无酚水测定挥发酚空白值比蒸馏水的低，用无酚水能提高实验结果的精密度。

1.2不同纯度4-氨基安替比林对实验结果的影响显色剂的灵敏度及空白值影响显色反应的准确度。

4-氨基安替比林是挥发酚测定实验中的显色剂，但在存放过程中易潮解结块、氧化变质，生成安替比林红，色泽变深，影响测定结果。

因此需要对溶液进行提纯。

常见的安替比林提纯的方法分为两类，一是液体提纯法，即通过萃取、吸附、过滤等方式对配制好的溶液进行提纯；二是晶体洗脱法，直接对4-氨基安替比林晶体进行洗脱处理。

液体提纯法主要包括氯仿萃取、硅酸镁性吸附剂吸附、活性炭脱色等，其中以三氯甲烷萃取法使用最为广泛。

水质挥发酚的测定4-氨基安替吡啉分光光度法HJ503—2009方法验证报告辉哥聊质量管理我们的实验室日记 2022-07-28 09:00 发表于广东一、目的对实验室选用的HJ 503—2009水质挥发酚的测定4-氨基安替吡啉分光光度法方法进行确认，以证实实验室能够正确运用这些方法，并能证实该方法适用于预期的用途，在误差的允许范围之内，可在本实验室内运行。

二、技术指标本方法（4-氨基安替吡啉三氯甲烷萃取分光光度法）适用于地表水、地下水和饮用水中挥发酚的测定。

本方法（4-氨基安替吡啉三氯甲烷萃取分光光度法）检出限为0.0003mg/l，测定下限为0.001mg/l，测定上限为0.04mg/l。

被蒸馏出的酚类化合物，于PH =10.0±0.2介质中，在氧化剂铁氰化钾存在下，与4-安替吡啉形成橙红色的安替吡啉染料，用三氯甲烷萃取后比色定量。

本方法（4-氨基安替吡啉直接分光光度法）适用于测定工业废水和生活污水中挥发酚的测定。

本方法（4-氨基安替吡啉直接分光光度法）检出限为0.01mg/l，测定下限为0.04mg/l，测定上限为2.50mg/l。

在PH =10.0±0.2和有氧化剂铁氰化钾存在的溶液中，酚与4-安替吡啉形成红色的安替吡啉染料，直接比色定量。

三、检测设施与环境条件实验室环境条件要求：四、检测过程受控文件vis-722N型可见分光光度计作业指导书vis-722N型可见分光光度计期间核查作业指导书HJ 503—2009水质挥发酚的测定4-氨基安替吡啉分光光度法分析原始记录表HJ 503—2009，水质挥发酚的测定4-氨基安替吡啉分光光度法样品前处理原始记录表标准储备溶液配制记录表地表水采样原始记录表污水现场原始记录表五、主要测量设备、配套设备、标准物质六、检测人员七、质量控制措施八、项目验证1、标准曲线1.1 4-氨基安替吡啉三氯甲烷萃取分光光度法在460nm波长下，用3cm比色皿进行比色，以空白校正后的吸光度为纵坐标，以其对应的挥发酚含量（μg）为横坐标，绘制标准曲线。

目次前言 (iv)1 适用范围 (1)2 规范性引用文件 (1)3 术语和定义 (1)方法1 萃取分光光度法4 方法原理 (1)5 干扰及消除 (1)6 试剂和材料 (2)7 仪器和设备 (3)8 样品 (3)9 分析步骤 (3)10 结果计算 (4)11 精密度和准确度 (4)12 质量保证和质量控制 (5)方法2 直接分光光度法13 方法原理 (5)14 干扰及消除 (5)15 试剂和材料 (5)16 仪器和设备 (5)17 样品 (5)18 分析步骤 (5)19 结果计算 (6)20 精密度和准确度 (6)21 质量保证和质量控制 (6)附录A（规范性附录）酚贮备液的标定 (7)附录B（资料性附录） 4-氨基安替比林的提纯 (8)水质挥发酚的测定4-氨基安替比林分光光度法警告：乙醚为低沸点、易燃和具麻醉作用的有机溶剂，使用时周围应无明火，并在通风橱内操作，室温较高时，样品和乙醚宜先置冰水浴中降温后，再尽快进行萃取操作；三氯甲烷为具麻醉作用和刺激性的有机溶剂，吸入蒸气有害，操作时应佩戴防毒面具并在通风处使用。

1 适用范围本标准规定了测定地表水、地下水、饮用水、工业废水和生活污水中挥发酚的4-氨基安替比林分光光度法。

地表水、地下水和饮用水宜用萃取分光光度法测定，检出限为0.000 3 mg/L，测定下限为0.001 mg/L，测定上限为0.04 mg/L。

工业废水和生活污水宜用直接分光光度法测定，检出限为0.01 mg/L，测定下限为0.04 mg/L，测定上限为2.50 mg/L。

对于质量浓度高于标准测定上限的样品，可适当稀释后进行测定。

2 规范性引用文件本标准内容引用了下列文件中的条款。

凡是不注日期的引用文件，其有效版本适用于本标准。

GB 7489—87 水质溶解氧的测定碘量法HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。

挥发酚 volatile phenolic compounds随水蒸气蒸馏出并能和4-氨基安替比林反应生成有色化合物的挥发性酚类化合物，结果以苯酚计。