分配系数的测定教学提纲
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实验十一分配系数的测定一、实验目的掌握药物在互不相溶的两液相中的分配系数测定方法及应用二、实验原理在恒定温度下,将一种溶质(A)溶在两种不互溶的液体溶剂中;达到平衡时,此溶质在两种溶剂中的分配符合一定的规律性。
该定律(即分配定律)为:若溶质(A)在此两种溶剂中皆无缔合作用,A在1,2两种溶剂中浓度比(严格地说是活度比)将是一个常数,它,不随溶质加入量不同而变化,该常数称为分配系数K。
如下式:K=C1/C211-1式中C1和C2分别为A在溶剂1及2中的浓度。
若使K保持常数,除温度恒定外,尚需较小,可以用浓度代替活度;2.溶质在两种溶满足两个条件:1.溶液的浓度很稀,C1、C2都剂中分子形态相同,即不发生缔合、解离、络合等现象。
如果该溶质在溶液中发生化学变化,如缔合、解离、水解及络合反应等,则同种的分子或离子在两液相之间也仍遵守分配定律,但总平衡浓度比,则不一定是一个常数。
如果溶质在溶剂1和2中的分子形态不同,分配系数的形式也要做相应的改变。
例如溶质A在溶剂1中发生缔合现象,即A n=nA(溶剂1中)(溶剂2中)式中n是缔合度,表明缔合分子是由n个组成的。
则分配系数符合关系式:K=C2n/C1 11-2C1是A n分子在溶剂1中的浓度。
因此,可以计算出溶质在溶剂中的缔合情况。
上述例子也可看成A n分子在溶剂2中解离,故也可用以研究溶质的解离性质。
在许多情况下,特别是无机离子在有机相和水相中分布时,情况较为复杂。
其间不仅有络合效应,而且金属离子和有机溶剂还可能发生络合作用。
此外,溶质在两相中的分配还与有机溶剂的性质、溶质浓度,介质酸度、温度等因素有关。
分配系数是药物制剂中设计处方,开发新药以及临床应用时的重要参数之一。
如配置乳剂确定处方时应知药物、防腐剂等的分配系数才能决定正确用量,配置缓释制剂,软膏剂,栓剂以及贴片等,药物从基质释放到粘膜,皮肤或进入体内后的分配系数与其吸收等均有密切关系,知道有关的分配系数才能更正确地控制剂量。
【精品】实验七十七化学平衡常数及分配系数的测定实验目的:1. 测定化学平衡常数Kc 2. 测定分配系数Kd
实验原理:该实验利用固定体系的特点:在恒定的温度和压力下,浓度的发生可以被
描述为一个恒定的化学平衡常数Kc。
此外,如果物质之间由不同相中互相分配,则可以定义出分配系数Kd。
实验材料:1. 无水氯化钠溶液 2. 0.1M HCl溶液 3. 0.3M NaCl溶液
实验步骤:
(1)准备实验用液体:将50ml的无水氯化钠溶于50ml的蒸馏水后配制成0.1M的氯
化钠溶液,并分别配制出0.1M的HCl溶液、0.3M的NaCl溶液。
(2)进行反应:58ml的HCl溶液加入到50ml的NaCl溶液中,搅拌均匀,放置20分钟。
(3)测量溶液中的浓度:用分光光度计测量混合液中的浓度,记录。
(4)算出Kc:根据浓度得出Kc,即Kc=([HCl]^2-[NaCl]^2)/([NaCl]*[Cl-]^2) 。
(6)数据分析:计算得出的Kc和Kd的绝对值,并比较和理论值的差距,得出实验
结论。
实验结论:本次实验采用定容、定温及固定压力的场景,得出了搅拌前后溶液中浓度
的变化,从而算出Kc和Kd的绝对值,并与理论值比较,结果达到了理想的误差步骤,实
验完成了预期的任务。
梳毛机分配系数的测定一﹑导言:梳理机各滚筒单位面积上纤维层的平均重量称为负荷。
负荷量的大小,反映纤维层的厚薄,而滚筒上纤维层的厚薄,直接关系梳理机梳理效能。
梳理效能好,毛网质量就好;反之,则差。
在生产中要求各滚筒针面上合理分配纤维数量,即负荷量的大小应该适当。
所以一般用分配系数来反映梳理效果的好坏。
分配系数表示有关负荷之间的比例关系。
分配系数有两种,一种是工作辊分配系数,另一种是道夫分配系数。
分配系数与毛网质量之间有一定的内在联系,在一般情况下,提高分配系数有利于提高毛网质量。
因为提高分配系数意味着锡林单位面积交给工作辊或道夫的纤维量增加。
工作辊携带的纤维量越大,纤维接受梳理的机会越多;道夫分配系数越大,返回负荷越小,锡林针布越清晰,越有利于梳理。
但是返回负荷小,不利于纤维的均匀混合作用,同时纤维在机内停留时间短,也影响纤维的重复梳理。
因此,分配系数选择要适当。
二﹑实验目的与要求1﹑测定并计算各种负荷及分配系数。
2﹑进一步了解各种负荷的关系及各工艺参数对分配系数的影响。
3﹑结合生产实际用二系数的概念解释生产质量问题。
三﹑实验设备与用具1、梳毛机一台;2、转数表﹑秒表﹑皮尺﹑钢板尺﹑剪刀、天平﹑拈棍﹑塑料袋等。
四﹑实验内容﹑方法和步骤(一) 内容测定工作辊和道夫分配系数,其公式如下:1﹑预梳锡林工作轴和大锡林工作辊分配系数31111αβαββαβ++=+=K K 或 式中:β — 交工作辊负荷(剥毛负荷) (g/㎡)1α— 喂入负荷 (g/㎡)3α— 返回负荷(g/㎡)2﹑道夫分配系数 3212ααα+=K式中:α 2 — 出机负荷(g/㎡)分配系数的测定实质上就是以上各种负荷的测定,各种负荷测出后,即可根据以上公式计算出各类分配系数。
(二)各种负荷的测定方法1﹑测定大锡林喂入负荷α1和出机负荷α2 (在梳毛机开车正常后,α2=α1,故一般只测定出机负荷α2)(1)取开车2min 内道夫所出的毛网称重,以Q (g )表示。
分配系数的测定实验报告
实验名称:分配系数的测定实验
实验目的:
1、了解液体与液体之间的相互作用力。
2、学习利用分配系数来进行有机物的提取和分离。
3、掌握测定物质分配系数(K值)的方法。
实验原理:
分配系数K值(K=浓度在有机相中的浓度/浓度在水相中的浓度)
是描述物质在两种液体中分配均相的程度的指标,该指标可以用来描
述两种液体之间的相互作用力。
在实验时,将待提取的物质溶于水中,然后加入有机相,经反复摇动后,使物质在两相之间分配均相,经离
心分离后,得到两相之间的分配系数K值。
实验器材:
滴定管、计量瓶、量筒、试管、取样瓶、离心机
实验步骤:
1、取一定量的石油醚加入试管中,加入待提取物溶液(如苯环)。
2、摇匀,均相分配后放置一段时间离心分离。
3、取上层有机相并装入烘干皿进行烘干。
4、称量所得有机相质量,计算分配系数K值。
实验结果:
在实验中,成功分离了异丙基苯磺酸盐和苯乙二酮。
测定结果如下:
样品溶剂 K值
苯环石油醚 0.36
苯石油醚 2.38
分析和讨论:
实验结果与文献数据表明,不同物质的分配系数具有很大差异,这主要是由于它们分子之间相互作用力的差异所导致的。
对于大多数铁电物质而言,水相的生物活性更强,而有机相可以更好地溶解不极性物质,因此,利用分配系数提取和分离化合物的方法能够极大地增加实验的效率和准确性。
结论:
通过此次实验,我们学会了利用分配系数来进行有机物的提取和分离,并掌握了测定物质分配系数的方法,积累了实验经验,对学习后续实验和专业的学习有积极的指导意义。
实验六 化学平衡常数及分配系数的测定一、实验目的测定I 2在CCl 4和H 2O 中的分配系数k 以及反应I 2+KI=KI 3的平衡常数K C 。
二、实验原理在恒温、恒压下I 2和KI 在水溶液中建立如下平衡:I 2+KI=KI 3 (1)为了测定平衡常数,应在不扰动平衡状态的条件下,测定平衡组成。
当上述反应达到平衡时,若用Na 2S 2O 3标准溶液来滴定溶液中I 2的浓度,则随着I 2的消耗,平衡将向左移动,使KI 3继续分解,最终只能测得溶液中I 2和KI 3的总量。
为了测定I 2的单独浓度,可在上述溶液中加入CCl 4,然后充分摇匀。
由于KI 和KI 3均不溶于CCl 4,只有I 2既可溶于CCl 4也可溶于H 2O ,当温度和压力一定时,上述化学平衡及I 2在CCl 4层和H 2O 层中的分配平衡同时建立。
设a ——平衡时H 2O 层中的2I Ca ’——平衡时CCl 4层中2I Cb ——平衡时H 2O 层中32KI I C C +c ——KI 溶液初浓度实验测得分配系数k 及CCl 4层中I 2浓度a ’后,根据k=a ’/a 即可求得H 2O 层中I 2的单独浓度a 。
再从已知c 及测得的b ,即可计算(1)式的平衡常数。
][23)(a b c a a b C C C K KI I KI C ---== 三、仪器和试剂恒温槽一套;250ml 碘量瓶3个;50ml 移液管3支;10ml 移液管2支;250ml H 2O 层 (稀KI 层) CCl 4层 H 2O 层 (稀KI 层) CCl 4层II 、III 号样 I 号样三角锥瓶4个;碱式滴定管2支;10ml量筒1个,25ml量筒1个;5ml量杯2个;50ml小烧杯1个。
0.005M Na2S2O3标准溶液;0.1MKI标准溶液;0.04M I2的CCl4溶液;纯CCl4;1%淀粉溶液。
四、实验步骤1、按表列数据,将样品溶液配于碘量瓶中。
分配系数的测定
1 实验目的:通过实验掌握药物在互不相容的两液相中的分配系数测定方法
2 实验原理:温度,压力一定时,在两种彼此接触而又互不相溶的溶剂之间,溶
质可按一定比例分别溶解。
当分配达到平衡时,两种溶液平衡浓度的比值是一个常数。
分配系数:代表药物在油相和水相中的比例。
是药物制剂中设计处方,开发新药以及临床应用时的重要参数之一。
P= C油相 =油相中药物的质量浓度
C水相水相中药物的质量浓度
3 实验内容
(1)试液的配制
精密称取供试品样品12.5mg,置100ml容量瓶溶解定容。
计算精确百分含量。
(2)标准曲线的绘制
精密称取供试品标准品0.015g,置100ml容量瓶中溶解定容,再分取 1.0,
2.0,
3.0,
4.0,
5.0,ml配制成50ml溶液,),蒸馏水为空白,在218nm波长处测其吸收度,将吸收度对浓度回归得标准曲线回归方程。
4分配系数的测定
精密吸取25ml供试品试液,置分液漏斗中,再精密加入等体积25ml的正辛醇,时时振摇30min,静置10min,如此反复两次,静置分层后弃去下层。
精密吸取上层溶液2.5ml配成25ml溶液(稀释10倍)。
取10ml溶液+2ml硫酸铁铵,218nm处测A,代入方程计算浓度,乘以稀释倍数,即得萃取后的C水,计算P值。
5实验结果及数据处理
标准曲线室温
样品编号 1 2 3 4 5 空白浓度(mg/ml)0
吸光度A 0
求出标准曲线回归方程
计算分配系数P=C氯/C水。
实验七十七 化学平衡常数及分配系数的测定一、实验目的(1)了解分配定律的应用范围;(2)掌握从分配系数求平衡常数的方法; (3)通过平衡常数计算I 3- 的解离焓。
二、实验原理在一定温度下如果一个物质A 溶解在两种互不相溶的液体溶剂中达到平衡,且A 物质在这两种溶剂中都无缔合作用,则物质A 在这两种溶剂中的活度之比为常数,这就是分配定律。
若浓度较稀,则活度之比近似等于浓度比。
用数学式(1)表示:βαAA d c c K = (1) 式中:c A α为A 物质在溶剂α中的浓度;c A β为A 物质在溶剂β中的浓度;K d 为与温度有关的常数,称为分配系数。
式(1)只能用于理想溶液或稀溶液中,同时,溶质在两种溶剂中分子形态相同,即不发生缔合、离解、络合等现象。
在恒温下,碘(I 2)溶在含有碘离子(I -)的溶液中,大部分成为络离子(I 3-),并存在下列平衡:其平衡常数表达式为:232323II II I I II Ia c c c c K γγγαααθ------⨯==(2)式中:α,c ,γ分别为活度,浓度和活度系数。
由于在同一溶液中,离子强度相同(I -与I 3-电价相同)。
由德拜-休克尔公式:II Z i i +-=1509.0lg 2γ (3)计算可知,活度系数--=3I I γγ (4)在水溶液中,I 2浓度很小12≈I γ (5)一定温度下,故得:c I I I a K c c c c K =≈--23θ (6)为了测定平衡常数,应在不干扰动态平衡的条件下测定平衡组成。
在本实验中,当达到上述平衡时,若用硫代硫酸钠标准液来滴定溶液中的I 2浓度,则会随着I 2的消耗,平衡将向左端移动,使I 3-继续分解,因而最终只能测得溶液中I 2和I 3-的总量。
为了解决这个问题,可在上述溶液中加入四氯化碳(CCl 4),然后充分震荡 (I -和I 3-不溶于CCl 4),当温度一定时,上述化学平衡及I 2在四氯化碳层和水层的分配平衡同时建立,如图1所示。
分配系数的测定实验报告分配系数的测定实验报告引言:分配系数是描述物质在两个不同相中分布的能力的指标。
在化学领域中,分配系数常用于描述溶质在溶剂中的分布情况。
本实验旨在通过测定苯酚在水和正庚烷中的分配系数,探究溶质在不同相中的分配规律,并进一步了解物质的分散和分离过程。
实验过程:1. 实验前准备:a. 准备所需实验器材:量筒、滴定管、试管、移液管等。
b. 准备所需试剂:苯酚、水、正庚烷。
c. 清洗实验器材,保证实验的准确性和可靠性。
2. 实验步骤:a. 将10 mL水和10 mL正庚烷分别倒入两个干净的试管中。
b. 使用滴定管向每个试管中加入相同体积的苯酚溶液(初始浓度为0.1mol/L),并充分摇匀。
c. 静置一段时间后,观察两个试管中溶液的分层情况。
d. 使用移液管将上层溶液(正庚烷相)和下层溶液(水相)分别转移到两个干净的试管中。
e. 分别用量筒测量两个试管中上层溶液和下层溶液的体积,并记录。
实验结果:1. 实验数据:a. 水相中苯酚的体积:V1 mLb. 正庚烷相中苯酚的体积:V2 mL2. 计算分配系数:分配系数(P)= V2 / V1讨论:1. 实验结果分析:通过实验测得的分配系数,可以看出苯酚在正庚烷中的分配能力较强,即苯酚更倾向于分布在正庚烷相中。
这可以解释为苯酚与正庚烷之间的相互作用力较强,导致苯酚在正庚烷中的溶解度较高。
2. 影响分配系数的因素:分配系数的大小受多种因素的影响,如溶质和溶剂之间的相互作用力、温度、压力等。
在本实验中,我们只考虑了苯酚在水和正庚烷中的分配系数,而未考虑其他因素的影响。
进一步的研究可以探究这些因素对分配系数的影响,并提供更全面的分析。
结论:通过本实验测定了苯酚在水和正庚烷中的分配系数,并分析了分配系数的影响因素。
实验结果表明苯酚在正庚烷中的分配能力较强,这一结果对于进一步研究物质的分散和分离过程具有重要意义。
分配系数的测定实验为我们提供了一种简单而有效的方法,可以用于研究不同物质在不同相中的分布行为,从而深入理解物质的性质和相互作用。
实验三化学平衡常数及分配系数的测定实验目的:1. 通过测定酸碱指示剂在酸碱介质中颜色的变化,掌握平衡常数计算的方法。
2. 通过测定二苯醇在水和正丁醇中的分配系数,掌握物质在不同相中的分布规律。
实验原理:1. 化学平衡常数Kc在化学平衡条件下,反应物和生成物的浓度之比不再发生变化,称为化学平衡。
在一定温度下,平衡时反应物和生成物的浓度之比称为反应的平衡常数Kc。
其公式为:Kc=[C]c[D]d/[A]a[B]b2. 分配系数Kd物质在两相中分别的浓度之比称为分配系数Kd。
用水和正丁醇分别浸泡二苯醇,二苯醇在两相中的浓度之比即为分配系数Kd。
其公式为:Kd=C2-o/C2-w实验操作及步骤:1. 每个小组取三个试管,分别装入0.10mol/L的醋酸钠溶液、0.10mol/L的苯甲酸钠溶液和水。
2. 用蓝色酸碱指示剂滴定醋酸钠溶液和苯甲酸钠溶液,记录每滴指示剂后溶液颜色的变化。
重新取一组,用红色酸碱指示剂滴定醋酸钠溶液和苯甲酸钠溶液,记录每滴指示剂后溶液颜色的变化。
3. 再取两个试管,分别装入1mL二苯醇和1mL水,1mL二苯醇和1mL正丁醇,振荡均匀,并静置10min。
4. 用分光光度计测定试管中的吸光度,计算出二苯醇在水相和正丁醇相中的吸光度比值。
5. 根据测量值,计算出在二苯醇、水、正丁醇体系中二苯醇的分配系数Kd。
结果与分析:1. 酸碱指示剂颜色变化观察表指示剂醋酸钠水苯甲酸钠蓝色无明显变化蓝色碱性-中性红色无明显变化红色酸性-中性2. 二苯醇在水和正丁醇中的分配系数的计算取二苯醇、水、正丁醇中二苯醇的吸光度值分别为A、B、C,则二苯醇在水和正丁醇中的分配系数Kd=C/A。
化学平衡常数及分配系数的测定.化学平衡常数及分配系数的测定1. 简述测定反应KI+I2=KI3的平衡常数的基本原理。
答:在恒温下,碘(I2)溶在含有碘离子(I-答:在恒温下,碘(I2)溶在含有碘离子(I:其平衡常数表达式为:(2)式中:α,c,γ分别为活度,浓度和活度系数。
由于在同一溶液中,离子强度相同(I- (2)式中:α,c,γ分别为活度,浓度和活度系数。
由于在同一溶液中,离子强度相同(I:(3)计算可知,活度系数(4)在水溶液中,I2浓度很小(5)一定温度下,故得:(6)为了测定平衡常数,应在不干扰动态平衡的条件下测定平衡组成。
在本实验中,当达到上述平衡时,若用硫代硫酸钠标准液来滴定溶液中的I2浓度,则会随着I2的消耗,平衡将向左端移动,使I3- (6)为了测定平衡常数,应在不干扰动态平衡的条件下测定平衡组成。
在本实验中,当达到上述平衡时,若用硫代硫酸钠标准液来滴定溶液中的I2浓度,则会随着I2的消耗,平衡将向左端移动,使I3:(9)因此,将平衡后各物质的浓度代入式(7)就可求出此温度下的平衡常数Kc。
2. 在KI+I2=KI3反应平衡常数测定实验中,所用的碘量瓶和锥形瓶哪些需要干燥?哪些不需要干燥?为什么?答:配置2号液的碘量瓶需要干燥,配置1号液的碘量瓶和锥形瓶不需要干燥。
因为2号液是用来测定平衡浓度的,平衡时I-配置2号液的碘量瓶需要干燥,配置1号液的碘量瓶和锥形瓶不需要干燥。
因为2号液是用来测定平衡浓度的,平衡时I:配置1号液是用来测I2在H2O及CCl4层中的分配系数Kd,配置2号液是用来测定反应KI+I2=KI3达平衡时各物质的平衡浓度的。
4. 在KI+I2=KI3反应平衡常数测定实验中,滴定CCl4层样品时,为什么要先加KI水溶液?答:硫代硫酸钠标准液与溶液中I2的反应是在水层中进行,滴定CCl4层样品的I2时,先加KI水溶液是为了加快CCl4层中的I2借助于反应KI+I2=KI3提取到水层中,有利于Na2S2O3滴定的顺利进行。
实验三 化学平衡常数及分配系数的测定一. 实验目的测定化学反应KI+I 2=KI 3的平衡常数及I 2在四氯化碳和水中的分配系数。
二. 实验原理在一定温度、压力下,碘和碘化钾在水溶液中建立如下化学平衡:KI + I 2 = KI 3 (1)为测定化学平衡常数,应在不破坏平衡状态的条件下,测定平衡组成。
本实验在上述平衡建立时,若用Na 2S 2O 3标准溶液滴定溶液中I 2的浓度,则因随着I 2的消耗,平衡向左移动,使KI 3继续分解,因而最终只能测得溶液中I 2和I 3的总量。
为了解决这个问题,可在上述溶液中加入四氯化碳,然后充分摇混(KI和KI 3不溶于CCl 4),当温度和压力一定时,上述化学平衡及I 2在四氯化碳层和水层的分配平衡同时建立,测得四氯化碳层中I 2的浓度,即可根据分配系数求得水层中I 2的浓度。
当两个平衡同时建立时,设水层中KI 3和I 2的总浓度为b(可通过用Na 2S 2O 3标准溶液滴定测得)KI 的初始浓度为c,(由配置溶液可算出),四氯化碳层I 2的浓度为a′(用Na 2S 2O 3标准溶液标定测得)I 2在水层和四氯化碳层分配系数为K,通过实验测得K值及四氯化碳层中I 2的浓度a′后,可求出水层中I 2浓度a,K= a′/ a ,a = a′/K 。
这样平衡中水层中I 2的浓度为a ,KI 3的浓度为(b-a) ,KI的初始浓度减去KI 3的浓度(b-a)即c-(b-a),(因为形成一个KI 3,就消耗一个KI),所以反应式(1)的平衡常数:K C =]][[][23KI I KI =()[]a b c a ab −−− (2)化学平衡和分配平衡同时建立如图所示。
三. 仪器和药品仪器:恒温装置一套;碘素瓶(250ml)三个;碱式滴定管(50ml)3支;移液管(250ml)2支;洗耳球3个;移液管(胖肚式10ml)2支;移液管一个;移液管(5 ml)4支;铁架台1个;锥形瓶(250ml)6支;量筒(10ml)2个;量筒(100 ml)2个。
060668童海港《分配系数的测定》物理化学实验报告院系化学化工学院班级化学061班学号06066118姓名童海港实验名称分配系数的测定日期2022-4-2同组者姓名王海燕室温14.04℃气压101.7kP成绩一、目的和要求1、测定苯甲酸在苯和水体系中的分配系数;2、了解物质在两相间的分配情况和分子的形态。
二、基本原理在恒定的温度下,将一种溶质(A)溶在两种互不相溶的液体溶剂中,达到平衡时,此溶质在这两种溶剂中的分配有一定的现律性。
如果溶质(A)在此两种溶剂中皆无缔合作用,A在l、2两种溶剂中浓度比(严格地说是活度比)将是一个常数,即K=C2/C1(1)此式所表达的规律称为分配定律。
式中,C1为A在溶剂1中的浓度,C2为A在溶剂2中的浓度,K为分配系数。
若使K保持常数,除温度恒定外,尚需满足两个条件:(1)溶液的浓度很稀,C1、C2都较小时可以用浓度代替活度;(2)溶质在两种溶剂中分子形态相同,即不发生缔合、解离、络合等现象。
如果溶质在溶剂1和2中的分子形态不同,分配系数的形式也要作相应的改变。
例如溶质A在溶剂1发生缔合现象,即An→nA(溶剂1中)(溶剂2中)式中,n是缔合度,表明缔合分子是由n个A组成的。
则分配系数符合关系式:K(2),c1c2n式中,C1是缔合分子An在溶剂1中的浓度。
因此,可以计算出溶质在溶剂中的缔合情况。
上述例子也可看成An分子在溶剂2中解离,故也可用以研究溶质的解离性质。
在许多情况下,特别是无机离子在有机相和水相中分布时,情况较为复杂:其间不仅有缔合效应,而且金属离子和有机溶剂还可能发生络合作用。
此外,溶质在两相中的分配还与有机溶剂的性质、溶质浓度、介质酸度、温度等因素有关。
三、仪器、试剂分液漏斗(125mL)2支移液管(25mL)1支移液管(5mL)1支移液管(2mL)1支锥形瓶磨口锥形瓶(50mL)苯甲酸苯NaOH(0.05mol/L)酚酞四、实验步骤上面是苯层,下面是水层。
两水相系统中蛋白质分配系数的测定一、实验目的和要求了解蛋白质在两水相系统中分配系数的测定方法二、实验原理1、两水相的形成高聚物与无机盐在水中会形成两个相,如PEG与硫酸盐或碱性磷酸盐,这是由于盐析作用。
两种亲水性高聚物在水中会形成两个相,这是由于聚合物的不相容性。
但是只有达到一定的浓度时,才能形成两相;两水相形成的定量关系可用相图来表示;相图是研究双水相萃取的基础。
2、两水相系统的优点(1)生物大分子活性物质(蛋白)不易受到破坏;(2)两相中水分占很大比例;(3)两水相的相间张力小,相分离过程温和。
(4)两水相之间的传质过程和平衡过程快速,可以实现快速分离;(5)易于放大3、在两水相系统中,生物物质与成相组分之间通过疏水键、氢键和离子键等相互作用而不同程度地分配在两相中。
(1)分配系数:当萃取达到平衡时,蛋白质在上、下两相中的浓度之比称为分配系数,分配系数K = C上/ C下;(2)相比:上下相体积比称为相比R = V上/ V下三、实验器材与试剂1. 器材天平,台式离心机,10 mL刻度离心管,移液管,容量瓶,试管等。
2. 试剂糖化酶,聚乙二醇400,硫酸铵和考马斯亮蓝等。
四、操作方法1、蛋白质在两相中的分配在10 mL刻度离心管中,用电子天平称取硫酸铵固体1.30 g,聚乙二醇400液体2.00 g,用吸管加入已稀释的糖化酶液2.00 mL,然后加水,直到总量为8.00g,用橡皮塞塞紧试管口,用力振摇数分钟,使硫酸铵完全溶解,并使两相充分混合,以便酶在两相中的分配达到平衡,然后,用台式离心机离心3 min,转速调节至3000 r/min,分别读出上、下相的体积,求相比R,并用考马斯亮蓝比色法测定两相中的蛋白质浓度,求出分配系数。
2、考马斯亮蓝比色法测定蛋白质含量制作标准曲线。
样品测定方法如下:上相液:吸取上相液0.5 mL,用水稀释定容到50 mL,取1 mL稀释液于试管中,按标准曲线相同的方法加入考马斯亮蓝溶液并比色测定。