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实验三细胞骨架的光学显微镜观察（5篇）第一篇：实验三细胞骨架的光学显微镜观察实验三细胞骨架的光学显微镜观察一、实验目的掌握植物细胞骨架的光镜标本制作方法。
细胞骨架是指细胞质中纵横交错的纤维网络结构，按组成成分和形态结构的不同可分为微管、微丝和中间纤维。
它们对细胞形态的维持、细胞的生长、运动、分裂、分化和物质运输等起重要作用。
光学显微镜下细胞骨架的形态学观察多用1% Triton X-100处理细胞，可使细胞膜溶解，而细胞骨架系统的蛋白质被保存，再用考马斯亮兰R250染色，使得胞质中细胞骨架得以清晰显现。
二、材料、试剂和仪器1．材料新鲜洋葱鳞茎、人口腔上皮细胞2．试剂1）M缓冲液（pH 7.2）各成分终浓度为：50mmol/L咪唑(MW:68.08)，50mmol/L KCl(MW:74.55)，0.5mmol/L MgCl2?6H2O(MW:203.30)，1mmol/L EGTA(MW:380.36)，0.1mmol/L EDTA-Na2(MW:372.24)，1mmol/L DTT(MW:154.3)2）6mmol/L PBS磷酸缓冲液（pH 6.5）:KH2PO4 : Na2HPO4?2H2O = 7:3(见附录3 查磷酸缓冲液的配置)3）0.7% NaCl生理盐水4）1% Triton X-100(聚乙二醇辛基苯基醚)溶于 M-缓冲液5）3% 戊二醛100mL: 25% 戊二醛取12mL ,PBS 88mL6）0.2% 考马斯亮蓝R250染液 200mL:考马斯亮蓝R250 0.2g，甲醇46.5mL，冰乙酸7mL，蒸馏水46.5 mL3．仪器光学显微镜，镊子，剪刀，试管，表面皿，滴管，载玻片，盖玻片,灭菌牙签，1.5mL离心管，1mL吸头，1mL取液器，酒精灯，染色缸细胞骨架动画三、实验程序四、结果与分析洋葱鳞茎外层与内层的表皮细胞比较（放大倍数10×20）五、思考题1．光镜下观察到的细胞骨架有何形态特征？2．对实验成功或失败的原因进行讨论。
实验6 植物细胞骨架观察〔目的要求〕了解动植物的细胞骨架的基本形态〔实验原理〕1%Triton X-100处理细胞，使95%以上的可溶性蛋白及全部脂质被抽提，而细胞骨架中的蛋白质却不被破坏，经固定和考马斯亮兰（非特异性蛋白质染料）染色后，胞质背景着色弱，有利微丝的显示，可在光镜下观察到由微丝组成的纤维束。
〔仪器材料〕1、器材：恒温水浴锅、光学显微镜、小培养皿、小镊子、载玻片、盖玻片、吸管、50ml烧杯、小烧杯、吸水纸、擦镜纸2、材料：洋葱鳞茎3、试剂：6mmol/L磷酸缓冲液（PBS）、1% Triton X-100，3%戊二醛、M缓冲液、0.2%考马斯亮蓝R250染液4、试剂配制：（1）PBS（pH=6.5）A液：NaH2PO4.2H2O 936mg/1000mlB液：Na2HPO4.12H2O 2148mg/1000ml工作液：A液68.5ml+B液31.5ml，NaHCO3调pH=6.5（2）M缓冲液（pH=7.2）咪唑3.4克、KCl 3.71g、MgCl2.6H2O 101.65mg、EGTA(乙二醇双醚四乙酸)380.35mg、EDTA（乙二胺四乙酸）29.22mg、巯基乙醇0.07ml、甘油292ml，加蒸馏水至1000l。
HCl调pH为7.2。
（3）1% Triton X-100：Triton X-100 1ml、M缓冲液99ml。
（4）3%戊二醛：25%戊二醛12ml、6mmol/LPBS 88ml（5）0.2%考马斯亮蓝R250染液：考马斯亮蓝R250 0.2g、甲醇46.5ml、冰醋酸7ml、蒸馏水46.5ml〔内容方法〕1、取材：洋葱内表皮，浸入装有PBS缓冲液的烧杯中，使其下沉处理3分钟2、抽提：吸去PBS，加2ml 1% Triton X-100入烧杯中，置37℃恒温处理30分钟3、冲洗：转移到载波片上,吸去Triton X-100，用M缓冲液轻轻洗2次，每次10分钟。
细胞骨架高中生物教案教学目标：1. 了解细胞骨架的组成和功能。
2. 掌握细胞骨架在细胞内的重要作用。
3. 能够描述细胞骨架在细胞运动和细胞形状维持中的作用。
教学重点：1. 细胞骨架的组成和结构。
2. 细胞骨架在细胞内的功能和作用。
教学难点：1. 理解微管、微丝和中间丝在细胞骨架中的作用。
2. 掌握细胞骨架在细胞运动和形状维持中的作用。
教学准备：1. PowerPoint课件2. 实验用显微镜3. 细胞骨架模型教学过程：一、导入（5分钟）通过展示细胞骨架的结构图，激发学生对细胞骨架的兴趣，并引入本节课的主题。
二、讲解细胞骨架的组成和结构（15分钟）1. 细胞骨架的组成：微管、微丝和中间丝。
2. 细胞骨架的结构：微管由蛋白质管组成，微丝由蛋白质丝组成，中间丝则是一种介于微管和微丝之间的结构。
三、探讨细胞骨架在细胞内的功能（20分钟）1. 细胞骨架在细胞形状维持中的作用：通过支撑细胞膜，维持细胞形状的稳定性。
2. 细胞骨架在细胞运动中的作用：微管参与细胞器的运输，微丝促进细胞的运动。
四、观察细胞骨架实验（20分钟）利用显微镜观察细胞骨架的结构和运动方式，让学生亲自感受细胞骨架在细胞内的作用。
五、总结与评价（10分钟）让学生总结本节课所学内容，强化对细胞骨架的理解。
并进行课堂表现评价，激励学生的学习兴趣。
六、作业布置（5分钟）布置练习题，让学生对所学知识进行巩固。
扩展阅读：1. 了解细胞骨架在细胞分裂过程中的作用。
2. 探究细胞骨架在疾病发生中的作用。
教师招聘高中生物《细胞骨架》教案《细胞骨架》教案一、教学目标1.描述细胞骨架的概念、细胞骨架的结构及其特点、功能。
2.通过观察和分析细胞骨架图片，提高概括能力和归纳能力。
3.认同结构和功能相统一的生物学观点。
二、教学重难点重点：细胞骨架的结构及其特点、功能。
难点：细胞骨架的结构及其特点。
三、教学过程(一)温故知新，导入新课1.人之所以有着一定的形态是为什么呢?(有骨骼、肌肉等支撑着身体)2.那么一个细胞又是通过什么来维持着一定的形态的呢?从而引出细胞的骨架，那么究竟什么是细胞骨架，它又有什么功能呢?这节课我们一起来学习细胞骨架。
(二)新课展开1.细胞骨架的概念让学生类比人体骨骼尝试归纳细胞骨架的概念，出示细胞骨架的图片，师生共同概括细胞骨架的概念(广义的细胞骨架包括细胞质骨架、核骨架、膜骨架及细胞外基质。
细胞骨架指真核细胞中与保持细胞形态结构和细胞运动有关的蛋白质纤维网架体系(包括微管、微丝、中间丝)。
)出示考马斯亮蓝R250染色后的细胞骨架图片，提出问题：从图片中能看到什么呢?(细胞骨架被染成深蓝色，呈放射状从细胞核向周围延伸。
)2.细胞骨架的类型及功能①播放电镜下微管的亚显微结构模式图，引导学生仔细观察，并在自主阅读教材的基础上思考如下问题：微管的形态结构是怎样的?外径、内经分别是多少?主要构成成分有哪些?(微管是一种中空的管状蛋白质纤维结构，其外径平均为25nm左右，内经约为15nm，一般仅长几微米。
)②播放纤毛、鞭毛、神经突起、中心粒、纺锤体图片，引导学生思考：这些图片是什么呢?他们都有什么共同点呢?(纤毛、鞭毛、神经突起、中心粒、纺锤体，共同点是微管是纤毛、鞭毛、神经突起、中心粒、纺锤体的主要构成成分。
)③微管的功能是什么?接着设疑：遇到高压或秋水仙素等物理、化学因素作用时有什么变化?(其功能是保持细胞形状(如细胞质微管)、引起细胞运动(如纤毛、鞭毛)和协助细胞内的物质运输(神经突起)、维持细胞内细胞器的定位和分布(中心体等)等。
大学课程《细胞生物学》实验教案植物细胞骨架的光学显微镜观察一、实验目的掌握细胞染色的基本过程及非切片法制片技术，了解细胞骨架的结构，学会制作永久封片。
二、实验原理当用适当浓度的TritonX—100处理细胞时，因其非离子型表面活性剂的特性，可以除去可溶性蛋白质和脂类，而微丝束属不可溶性蛋白，就不会被TritonX—100破坏而保留在细胞中。
当用考马斯亮蓝R250染色时，在光学显微镜下通常能观察到以核为中心的纤维状骨架，在质膜下还能见到丝状骨架，骨架上常附着一些与膜运动、整合有关的蛋白质。
考马斯亮蓝R250并不是特异地显示微丝，但由于有些细胞骨架纤维如微管等在该实验条件下不够稳定，又因有些类型的纤维太细而在光学显微镜下无法分辨，因此看到的是由微丝组成的纤维束，直径约在40nm左右。
三、实验材料新鲜洋葱鳞状叶。
四、实验器材普通光学显微镜，50ml烧杯，滴管，试剂瓶，载玻片，盖玻片，镊子，染色板，吸水纸，擦镜纸。
五、实验药品1．M—缓冲液：所含各成分终浓度为50mmol／L眯唑，50mmol／LKCL，0.5mmol／LMgCl2，lmmol／LEGTA(乙二醇双(α—氨基乙基》醚四乙酸)，0.1mmol／L EDTA，lmmol／L巯基乙醇或二硫苏糖醇<DTT)。
lmol／L HCl调pH到6.82 0.01mol/L磷酸缓冲液(pH 6.8)用0.2mol/L磷酸氢二钠一磷酸二氢钠缓冲液稀释配制其中磷酸盐缓冲液配法：0.2mol/LNa2HPO449ml0.2mol/LNaH2PO45lml3. 1％TrltonX—100，用M—缓冲液配制。
4．0.2％考马斯亮蓝R250。
配制用的溶剂为：甲醇：冰醋酸:水(46.5：7：46.5)。
·5. 3％戊二醛溶液，用9.01mol/L磷酸盐缓冲液(pH6.8)配制6. 50％，70％，95％乙醇。
7. 叔丁醇8. 正丁醇9. 二甲苯。
10.中性树胶。
