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五倍子单宁提取纯化及生理活性的研究进展_江凯

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五倍子中有效成分提取方法研究进展

五倍子中有效成分提取方法研究进展

ａ ｉ ｒ ｉｃ ｓ ｅ ｎ ｈ ｄ ａ ｔｇ ｓ ａ ｄ ｄ ｓ ｄ ａ ｔｇ ｓ ｏ ｅ ｅ ｔａ ｔ ｎ ｒ ｏ ｃｄ ｗｅｅ ｄ ｓ ｕ ｓ ｄ ａ ｄ ｔ ｅ ａ ｖ ｎ ａ ｅ ｎ ｉａ ｖ ｎ ａ ｅ ｆｔ ｘｒ ｃ ｉ ｓ ｗｅ ｅ ｃ ｍｐ ｒ ｄ Ｆ ｎ ｌ ，ｔ ｅ ｅ ｔ ｃ ｉ ｎ ｐ ｏ ｐ ｃ ｆｔ ｅ ａ ｔ ｅ ｉ ｇ ｅ ｉｎ ｓ ｉ ｉ ｅ ｅ ｈ ｏ ａ ｅ ． ｉ ａ ｌ ｈ ｘ ｒ ｔ ｒ ｓ ｅ ｔｏ ｃｉ ｎ ｒ ｄ ｅ ｔ ｎ Ｃｈ ｎ ｓ ｙ ａ ｏ ｈ ｖ
ＬｉＨｏ ｒ ｎ， ｕ Ｄ ａ ｕ ｎｇ ａ Ｆ ｙｏ
（ ｔｒ ｌ ｎ ｈ ｍｉ ｌ ｎ ｉｅｒ ｇＣ ｌ ｇ ， ｉ ｕ ｎ ｉｅｓｙｏ ｃ ｎ ｅ ｎ ｎ ｉｅｒ ｇ Ｚｇ ｎ ４ ０ Ｍａｅｉ ｄＣ ｅ ｃ ｇｎ ｅｉ ｏｌ ｅ Ｓｃ ａ ｖ ｒｉ ｆ ｉ ｃ ｄＥ ｇｎ ｅｉ ， ｉｏ ｇ６ ３ ０ ， ａａ ａＥ ｎ ｅ ｈ Ｕｎ ｔ Ｓ ｅ ａ ｎ ０ Ｃ ｉａ ｈｎ ）
加压提取 时间短且提取率高 ，产品颜色 浅、纯度高 ， 工艺 流程短 ，用水少，
１５ 超 临界 ＧＯｚ 鞣质 ．
鞣 质是五倍子 的主要成分 ， 是一种多酚类化合物 ， 在食 品、 日化、医药 、染料 、冶金等方面有广泛应用 。
超 临界 Ｃ ： Ｏ 萃取法是用超临界流体代替传统 有机溶媒进 行萃取 分离 的新技术 。姜萍等 采 用超临界 Ｃ Ｏ 萃取单宁酸。 将五倍子原料装入萃取罐 ，通 Ｃ ｚ Ｏ ，在一 定的压力 、温度、时 间及夹带剂和 Ｃ 等条件下 ，连续萃取 ，分 离，过滤 ，得含 Ｏｚ 单 宁酸 的溶液 。 在最佳工艺条件萃取温度 ４ ４℃、 力 ２ ａ 压 ５ＭＰ 、 夹带剂为 乙酸乙酯，萃取 １０ｒｉ，得率 为 ５ ． ２ ｎ ａ ７８ ３％。 此法提取率高、产 品质量好、节省热 能、无毒无害 、操作 温度低 ，适用于易氧 化、热敏性强 的成分 的提取 ， 但是设备 比 较昂贵 。

五倍子单宁研究进展

五倍子单宁研究进展

五倍子单宁的主要研究进展摘要：五倍子是中国的传统中药,其主要有效成分及含量最多的组分——五倍子单宁(Chinese Gallotannins，CGTs)，近年来已成为天然产物领域的研究热点之一，本文综述CGTs 的主要研究进展。

关键词:五倍子单宁、提取、生理活性引言五倍子是中国的特有中药，具有敛肺降火、敛汗、止血等功效【1】。

我国是五倍子的主要生产国家，不仅产量大，而且品质高，占世界总产量95%左右【2】。

五倍子中的主要有效成分为鞣质，鞣质又称单宁，单宁又名鞣酸、单宁酸。

五倍子单宁在国际上称为中国单宁, 我国五倍子单宁属于水解类单宁【3】，是没食子单宁的代表，在五倍子中含量高达60%～80%，是由没食子酸、双棓酸与葡萄糖结合以苷或酯的形式形成的复杂混合物，此类单宁的糖或多元醇部分的羟基全部或部分地被酚酸所酯化,结构中具有酯键或酯式苷键。

研究证明:五倍子单宁是由8个组分所组成的一种混合物。

所有组分的化学结构都是以1,2,3,4,5,6-五-O-棓酰-β-D-葡萄糖为“核心”,在2,3,4-位上有更多的没食子酰基以缩酚酸的形式相连接形成的。

五倍子单宁混合物是由5~12-O-没食子酰葡萄糖组成的。

最多的组分是7~ 9- 0-没食子酰葡萄糖。

每个葡萄糖基平均连有8.3个没食子酰基。

中国药典上称为单宁酸，是最早在化学结构上受到详细研究的单宁之一。

五倍子单宁易溶于水、乙醇、丙酮等极性溶剂；不溶于氯仿、乙醚等非极性溶剂。

因其具有多酚羟基的结构赋予了它一系列独特的化学特性和生理活性，如与蛋白质、多糖、生物碱、微生物、酶、金属离子反应，还有抗氧化性、抑菌性【4】、抗肿瘤等。

目前在食品加工、果蔬加工、贮藏、医药和水处理等方面的应用已取得重要突破，近年来它在化妆品生产中也崭露头角，如应用在延缓衰老、收敛、防晒、美白、抗皱、保湿等方面。

应用前景极其广阔【5】，现已成为世界各国的研究热点。

本文综述了五倍子单宁（CGTs）所涉及到的提取及主要生理活性等的研究进展。

211055800_五倍子单宁酸提取方法及对动物生长性能的影响

211055800_五倍子单宁酸提取方法及对动物生长性能的影响

572023.3加丝兰提取物组的粗蛋白质代谢率提高17%，粗蛋白消化率提高3.9%。

此外，丝兰提取物还可以改善猪的机体免疫能力，提高生长性能，提升猪肉品质，增强母猪繁殖性能，减少机体内硫化氢与氨气含量，具有显著的效果。

2.3　丝兰提取物对鸡生产性能与肠道健康的影响丝兰提取物中富含皂苷，生物效应的多样性，能够对宿主和疾病有机体的生理过程产生影响。

丝兰皂苷能够通过影响细胞膜的通透性与膜孔隙度，使较大的蛋白质分子能够顺利穿越肠道屏障，对家禽产生积极的影响。

丝兰提取物是肉鸡饲料中常见的饲料添加剂，具备改善肉鸡的生长性能、调节肠道菌群与抗氧化等功效。

将100毫克/公斤的丝兰提取物添加至AA肉仔鸡饲料中，促进隐窝与空肠绒毛的发育；当添加量提升至200毫克/公斤时，能够显著提升超氧化物歧化酶活性和血清总抗氧化能力；肉鸡饲料添加300毫克/公斤时，能够使血清丙二醛含量下降。

将60毫克/公斤的丝兰提取物添加至蛋鸡的饲料中，产蛋率明显提升23%，并能够明显降低蛋黄的胆固醇含量鸡蛋清中胆固醇与甘油三酯含量；添加量提升至120毫克/公斤时，使料蛋比显著下降，以上结果显示丝兰提取物可以明显提高鸡蛋品质。

2.4　丝兰提取物对反刍动物生产性能与肠道健康的影响研究显示，在荷斯坦泌乳奶牛饲料中添加丝兰提取物，牛乳中尿素氮含量与排泄物中氨氮含量均表现出下降趋势，牛乳中蛋白质含量逐渐提升；但是受风速、仪器与牛群移动等多种因素的影响，牛舍中氨气浓度变化不明显。

将100毫克/公斤的丝兰提取物添加至奶牛的饲料中，能够提升中性洗涤纤维的消化率，对酸性洗涤纤维与脂肪的消化率无明显变化；当添加200毫克/公斤时，对酸性洗涤纤维与脂肪的消化率产生积极影响，并能够提升乳蛋白和乳脂。

丝兰提取物对绵阳的瘤胃环境产生积极的影响，当添加量为300毫克/公斤时，能够提高中性洗涤纤维与干物质的消化能力，当添加量为6毫克/公斤时，使绵阳瘤胃内的酸碱度维持在6.2～6.8之间。

五倍子中单宁酸提取工艺的研究

五倍子中单宁酸提取工艺的研究

五倍子中单宁酸提取工艺的研究五倍子中单宁酸提取工艺的研究单宁酸（Tannic acid）又称鞣酸，分子式C76 H52O46。

常温下为淡黄色至浅棕色粉末，有特殊气味，味极涩。

单宁酸具有丰富的自然资源，主要富含于中国五倍子、土耳其槽子、塔拉果荚、石榴、漆树叶、黄栌、金缕梅树等植物中，其提取主要来自于天然植物或植物虫瘿五倍子中。

其中，五倍子是一种林副产品，又名文蛤，是倍蚜虫在漆树科植物盐肤木、青麸杨或红麸杨叶子上寄生所形成的早瘿。

五倍子适宜生长在温暖湿润的山区和丘陵，我国大部分地区均有分布，主产区集中在湖北、湖南、贵州、四川、陕西、云南等六省，这些省的五倍子产量约占全国的90％以上[1] 。

1 单宁酸的结构与性质单宁酸属于典型的葡萄糖梏酰基化合物，溶于水、乙醇、丙酮，不溶于氯仿或乙醚[1]，其结构如图1所示，其多酚羟基的结构赋予了它一系列独特的化学特性和生理话性，如能与蛋白质、生物碱、多糖结合，使其物理化学行为发生变化；能与多种金属离子发生络合和静电作用；具有还原性和捕捉自由基的活性；具有两亲结构和诸多衍生化反应活性等[2]。

图1 单宁酸的化学结构式Fig.1 Chemical Structure of Tannic acid2 单宁酸的药用价值及其他应用[2]单宁酸具有独特的化学特性及特殊的生理和药理功能，因此在日用化学工业、医药工业、食品工业、皮革行业及其他方面获得了极为广泛的应用。

2.1 药用价值单宁酸的药理活性是其与生物体的蛋白质、酶、多糖、核酸等相互作用以及单宁酸的抗氧化和与金属离子络和等性质的综合体现。

1)传统药方中，含单宁酸为主的五掊子、儿茶鞣质为主的儿茶膏常因其收敛性作创伤、烧伤表面的止血剂，同时由于它们有一定的抑菌效果，可以保护伤部，防止伤口感染发炎等。

2)单宁酸还可用作生物碱和一些重金属离子中毒时的解毒剂，因为它可与之螯合成沉淀，减少机体的吸收，而单宁酸与细胞外或组织外的钙离子的络合。

浅析五倍子药理作用的研究进展论文

浅析五倍子药理作用的研究进展论文

浅析五倍子药理作用的研究进展论文浅析五倍子药理作用的研究进展论文五倍子( Galla chinensis)，别名文蛤、百虫仓、木附子等。

作为传统中药，其具有敛肺降火、涩肠止泻、固精缩尿、止汗、止血、解毒、敛疮等多种临床功效。

五倍子适宜生长在温暖湿润的山区和丘陵。

在我国主产区集中在贵州、四川、湖北、湖南、陕西、云南等六省，这些省的五倍子产量约占全国总产量的90%以上。

五倍子的化学成分包括鞣质( 又称单宁酸、鞣酸)、没食子酸、油酸、亚油酸、亚麻酸、月桂酸等，此外还含有铜、锌、铁、钙等微量元素。

其中以鞣质的含量最高，可达70%。

本文就五倍子药理作用的研究进展作一综述，为相关研究工作的开展提供参考。

1 止泻闵芳莉等研究五倍子的止泻作用。

方法通过煎煮法制备五倍子的水提液。

然后将大鼠随机分为正常组、五倍子组、阳性对照组(思密达)。

给组分别给药后，灌喂番泻叶，并记录各组食用番泻叶前后的排便量，同时对各组大鼠的结肠进行病理检查。

试验结果显示:灌喂番泻叶后，正常组在观察期间(6 小时)一直存在腹泻情况，且结肠粘膜明显充血、增厚;五倍子组在3 h 后腹泻停止，且结肠粘膜轻度充血，无增厚现象;思密达组在4 h 后腹泻停止，且结肠粘膜轻度充血，无增厚现象。

由此推断五倍子具有良好的止泻作用。

2 抗菌黄美玲等研究五倍子、大黄、虎杖三种中药对女性生殖道厌氧菌感染的体外抑菌活性。

方法是将大黄、虎杖、五倍子制成煎剂，测定中药提取物对临床分离的消化链球菌、小韦荣球菌、产黑色素类杆菌与消化球菌的最小抑菌浓度(MIC)。

试验结果显示:大黄、虎杖对4 种厌氧菌菌株均无体外抑菌作用，五倍子对这4 种厌氧菌的MIC 均为25 mg /mL，而3 种中药组合液的MIC 均为50 mg /mL。

由此推断五倍子对临床分离的厌氧菌菌株有较强的抑菌活性。

3 抗炎岳小红等研究百倍子水提取物对牙龈卟啉菌内毒素(PgLPS)介导的人单核细胞分泌白介素-6( IL-6) 水平的影响。

五倍子有效成分提取分离、药理作用及临床应用研究进展

五倍子有效成分提取分离、药理作用及临床应用研究进展
７ ６ ２
・
陕西 中医 ２ ０ １ ５ 年第 ３ ６ 卷 第 ６期
文献 综述 ・
五 倍 子 有效 成 分提 取 分 离 、 药 理 作 用及 临床 应 用研 究 进展
郭 姝彤 审校 刘永仙 艾彩 莲 李 宝 莉△ 延 安 大学 医学 院（ 延安 ７ １ ６ ０ ０ ０ ）
摘 要 五倍 子 为漆树 科植 物 ， 具有 敛肺 、 止 血等作 用 ， 作 为传统 中药 ， 在 临床 用 于解毒 、 治 疗 烧 烫伤 、
鞣 质 和 没食 子 酸 ， 其 中鞣 质 的 提 取 可 以采 用 浸 渍 法 、 渗 漉法 、 煎
树科植物 ， 性 寒、 味涩 ， 其气特异 、 微 臭 。具 有 敛 肺 降 火 、 涩 肠 止
泻、 敛汗止血 、 收湿 敛疮 等作用 。在临床 上多 用 于治疗肺 虚肺 热痰嗽 、 久泻 久痢 、 盗汗 、 消渴 、 便 血痔血 、 外 伤 出 血 等 。五 倍 子 的化学成分十分复杂 ， 主 要 有 效 成 分 为鞣 质和 没 食 子 酸 。
久咳、 咳血等 多种 病症 。主 产 于我 国四 川 、 贵 州等地 ， 其 有效 成 分十 分复 杂 ， 主要 为鞣 质 和没
食 子酸 。本 文就 五倍 子的化 学成分 、 提取 分离、 药理 作 用 及 临床 应 用 等 几 个方 面 展 开综 述 ，
阐述 了五倍 子近 年 来的研 究现 状 ， 但 其 物质 基础和 作 用机 理方 面还 有待 更深入 的研 究 ， 以 利 于 新 药 的 开 发 和 为 临床 应 用 研 究 提 供 可 靠 的 依 据 。
主题 词 五倍 子 提取 分 离 药 理 作 用 临床 应 用
【 中图分 类号】 Ｒ２ ８ ２ 【 文章标 识码 】Ａ ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ Ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ０ — ７ ３ ６ ９ ． ２ ０ １ ５ ． ０ ６ ． ０ ５ ９

中药五倍子及其活性成分的研究进展

基层医学论坛 2018 年 7 月第 22 卷第 19 期
综述
凋亡 [14]。梁爽等认为，GA 抑制肿瘤的机制与其能产生活性氧 ROS、 诱 导 肿 瘤 细 胞 凋 亡 、 抑 制 血 管 细 胞 间 黏 附 分 子 -1 （VCAM-1） 和细 胞 间黏 附 分子 -1 表 达 、 抑 制 金 属 蛋 白 酶 （MMPs）表达有关。而且证明，GA 诱导细胞的凋亡敏感性不随 耐药性的增加而改变，可用于有较强耐药性的肿瘤的治疗。此 外，GA 能降低 MMP-2/9 和 mRNA 表达水平以及细胞外基质降 解而抑制肿瘤细胞侵袭和迁移[15]。此外，张庭秀等人也认为，GA 抗肿瘤的机制与对肿瘤细胞选择性的毒性作用以及诱导肿瘤 凋亡、抑制其生长、增加 ROS 产生、抑制肿瘤部位血管生成等 作用相关[16]。目前，对五倍子酸抗肿瘤的机制虽有一定了解，但 具体机制仍不清楚，且此类研究尚处于动物实验阶段，因此还 需要更深入的探索。
2728
胞间的作用关系及五倍子在体内的生化和代谢过程还不清楚， 此方面有待于进一步研究。
2 五倍子化学成分及其药理作用 2.1 鞣质 鞣质（tannins），又称单宁酸或鞣酸，是一类含有 多个羟基的多酚类化合物，约占五倍子的 70%，是五倍子的主 要成分。有研究表明，五倍子鞣质具有多种生物活性和药理作 用。于占洋等认为，鞣质可以清除自由基、调节抗氧化物酶活 性；同时，鞣质可以络合产生自由基的金属离子、抑制脂质过氧 化物生成，因而具有抗氧化作用[7]。刘畅等认为，鞣质能凝固微 生物的蛋白质，对细菌、真菌、酵母菌等多种病原体有明显的抑 制作用，且具有抗耐药菌作用。同时指出，五倍子鞣质可提高 γ- 射线损伤小鼠 30 d 存活率，延长平均存活时间，具有辐射 防护效应[8]。另外，刘畅等还发现鞣质具有提高免疫、抗炎、抗病 毒、降糖、降脂、治疗溃疡和体外杀精的作用[8]。朱玥等指出，鞣 质因含有大量酚基而有较强的还原作用，而且能与脂键以氢键 的形式结合，也可以抑制自由基与脂质结合，而起抗脂质过氧 化作用。鞣质还可以通过提高机体对对肿瘤细胞的免疫力和抑 制肿瘤细胞突变而起到抗肿瘤作用。此外，还发现鞣质可以通 过络合体液中的 Ca2+、抑制血管紧张素的作用用于降压治疗。 同时，从五倍子中提取的鞣质对龋齿均有较强的抑制作用[9]。李 忠军等人认为，薯莨中的鞣质成分具有抗氧化、清除自由基、抗 辐射的生物活性，临床被用于抑菌、止血、降压、驱虫、抗变态反 应以及治疗溃疡、延缓衰老等用途。此外，薯莨鞣质还可作为天 然杀菌剂用于食品、化妆品的抗菌杀菌，并且可以用于纺织印 染和美白、保湿、祛痘的化妆品生产领域[10]。周本宏等发现，鞣 花鞣质有抗炎、抗癌、抗氧化、调节肠道菌群的作用，同时指出 鞣花中的鞣质对糖尿病、神经性病变和心血管系统疾病都有较 好的治疗效果[11]。近年来，由于对鞣质的深入研究使得之前曾 被视之为杂质而废弃的鞣质类成分得到较好的利用。但是，对 于鞣质代谢和动力学的认识还很欠缺，未来鞣质的作用及机理 还有待于更进一步的研究探索。 2.2 五倍子酸 2.2.1 五倍子酸简介 五倍子酸（Gallic acid，GA）又称没 食子酸或棓酸，约占 2%~4%，是五倍子的主要有效成分[12]。GA 广泛存在于自然界的水果、茶叶和五倍子植物中，但一般通过 水解五倍子鞣质的方法获得五倍子酸。GA 现已被广泛应用于医 药、农业育种、食品加工等领域，尤其是作为药物的用途广泛。 2.2.2 五倍子酸抗肿瘤作用 赵 洪 昌等 认 为，GA 能 使 SMMC-7721 细胞皱缩、变圆变小、细胞核固缩，促进肝癌细胞 SMMC-7721 凋亡[13]。王丽萍等人发现，GA 能上调人纤维肉瘤 HT1080 细胞 Bax、下调 Bcl-2 表达，而抑制细胞增殖，促进细胞

五倍子单宁酸提取方法及对动物生长性能的影响

772023.12五倍子单宁酸提取方法及对动物生长性能的影响黄　博（辽宁省农业发展服务中心，辽宁 沈阳 110161）五倍子是我国传统的中药材，是青麸杨、红麸杨或盐肤木等漆树科叶片上的虫瘿，主要是由于瘿棉蚜科的蚜虫寄生形成的，富含单宁、淀粉、脂肪、树脂和蜡质等。

我国五倍子产量占世界的90%以上，其中单宁成分可达70%左右，单宁的天然活性成分为单宁酸，单宁酸具有抗氧化、抗菌、抗炎和止泻的功效，五倍子单宁酸作为动物饲料的添加剂具有促进动物生长，提高动物免疫力，降低腹泻率的作用。

1　五倍子单宁酸的生理功能 1.1　抗氧化能力五倍子单宁酸的主要是没食子酸酰基葡萄糖的混合物，不同产地和不同提取方法的五倍子单宁酸的没食子酰基含量、比例和葡萄糖连接位置、数量有所不同，会影响五倍子单宁酸的活性，没食子酰基数量越多，五倍子单宁酸的抗氧化能力越强。

活性氧是动物机体内所有具有较强的氧化性且性质活泼的含氧物质总称，动物正常生理代谢会产生和消耗活性氧，在正常条件下，活性氧的消耗和生成维持着动态平衡，可以维持机体细胞的正常功能，但机体内活性氧生成多或消耗少，积聚在体内会损伤细胞，甚至导致细胞凋亡或坏死。

动物机体需要消耗大量的具有抗氧化能力的维生素或微量元素才可清除多余的自由基，导致机体缺乏维生素和微量元素，降低机体的抵抗力，易发生各种疾病。

单宁酸具有提高内源性抗氧化酶活性的作用，可有效清除机体内多余的自由基。

1.2　抗菌作用单宁酸含有多酚，具有较强的生物活性，可以抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎球菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌和炭疽杆菌等有害细菌。

单宁酸还可以维持动物机体肠道菌群平衡，促进有益菌生长，抑制有害菌，提升机体的免疫力，抑制致病菌的侵袭。

1.3　止血、止泻单宁酸具有收敛、减缓肠道蠕动的作用，使食糜可以更久地停留在肠道内，肠道可以吸收到更多的养分和水分。

单宁酸还可以促进血小板聚集，加速皮肤黏膜的溃疡凝固，从而达到止血的目的。

超声波辅助提取五倍子中单宁的工艺优化

超声波辅助提取五倍子中单宁的工艺优化李倩云;张双灵;周国燕【摘要】五倍子单宁具有抗氧化、抗突变、抗肿瘤等多种生物活性功能.为了研究五倍子中单宁的超声波辅助提取工艺,以盐酸体积分数、乙醇体积分数、超声温度、料液比作为考察因素,在单因素试验基础上采用L9(34)正交试验设计,对单宁的提取工艺进行优化.结果表明,在盐酸体积分数为1.0％、乙醇体积分数为50％、超声温度为40℃、料液比为1∶30(m∶V)的条件下,提取效果最佳.该工艺条件下,单宁的提取率为10.97％.【期刊名称】《食品与机械》【年(卷),期】2015(031)001【总页数】4页(P171-174)【关键词】超声波;五倍子;提取;单宁【作者】李倩云;张双灵;周国燕【作者单位】上海理工大学,上海200093;青岛农业大学,山东青岛 266109;上海理工大学,上海200093【正文语种】中文五倍子主要分布于中国的四川、湖南、湖北等地，是一种重要的经济中药材，可缓解肺热引发的咳嗽、常泄不止、痢疾不愈等［1］。

单宁具有纯天然、效率高、安全无毒性、保护健康等优点，其利用价值很高，发展前景极其广阔。

目前，测定五倍子中单宁的方法主要有紫外分光光度法、药典法（皮粉法）、HPLC法（高效液相色谱法）等［2］。

药典法是各国同行认可的单宁酸测定方法，虽然其提取的试验结果较为稳定，但是所用的时间很长，过程复杂，不适合微量和低含量测定［3］。

高效液相色谱法法操作简单迅速，具有较高的灵敏度，但需要较高的分析技能和高纯度的标准品，检测成本高［4］。

在众多单宁含量的测定方法中，紫外分光光度法的应用最为广泛，具有简单、迅速等优点［5］，因此本试验采用此法进行测定。

超声波辅助提取方法具有操作简单快速、提取率高、花费少、安全等优势［6］，已广泛用在提取多种自然物质的研究中，如：超声波辅助提取锁阳多糖的工艺研究［7］，超声辅助法提取桑葚叶中的多糖［8］，超声波辅助提取酵母源类金属硫蛋白工艺的优化［9］，超声波辅助提取山豆根中的黄酮和多糖工艺优化［10］，超声复合酶法提取大蒜多糖的工艺优化［11］。

正交设计优选五倍子提取工艺研究

正交设计优选五倍子提取工艺研究郑玲英;刘芳菊;王跃生;曾文雪【摘要】目的:优化五倍子的有效成分提取方法.方法:以五倍子中鞣质水解成没食子酸的转移率以及干浸膏得率为评价指标,用高效液相色谱法测定含量,采用L9(34)正交试验,对煎煮次数、煎煮时间、加水倍量等因素进行考察,以确定最佳提取工艺.结果:用10倍量的水,提取2次,每次2小时的方法可以提高五倍子中没食子酸的提取率.结论:优选得到的五倍子提取工艺提取率较高且稳定可行.【期刊名称】《江西中医药》【年(卷),期】2013(000)005【总页数】2页(P58-59)【关键词】五倍子;没食子酸;正交设计;HPLC【作者】郑玲英;刘芳菊;王跃生;曾文雪【作者单位】南昌立健药业有限公司南昌330032;石家庄四药有限公司石家庄050021;中药固体制剂制造技术国家工程研究中心南昌330006;江西中医学院南昌330006【正文语种】中文【中图分类】R283.6五倍子为漆树科植物盐肤木Rhus chinensis Mill.等叶上的虫瘿，主要由五倍子蚜Melaphis chinensis(Bell)Baker寄生而形成。

五倍子具有敛肺降火，涩肠止泻，敛汗，止血，收湿敛疮等功效［1］。

五倍子中含有大量鞣质，鞣质具有收敛作用，是治疗久泻久痢、痈肿疮毒的有效成分之一，易溶于水。

故采用传统水煎煮法提取芪仙冲剂中有效成分。

本实验以鞣质水解后的没食子酸为指标，采用L9(34)正交试验，对煎煮次数、煎煮时间、加水倍量等因素进行考察，以转移率、干浸膏得率为提取工艺的评价指标，优化其提取工艺，为其后续研究奠定基础。

1 仪器与试药AL104/01电子天平(梅特勒－托利多仪器(上海)公司);RE－5210旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂);RT－02L粉碎机(台湾荣联铁工厂);Agilent 1100系列高效液相色谱仪;KQ－250超声波清洗器(昆山市超声波仪器有限公司)。

五倍子为漆树科植物盐肤木Rhus chinensis Mill、青麸杨 Rhus potaninii Maxin.叶上的虫瘿，由五倍子蚜寄生而形成，为肚倍，购自江西江中饮片厂，药材鉴定均符合《中国药典》2005版一部的规定。

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Chinese Gallotannins （CGTs）； extraction； purification； physiological activity
0 引言
五倍子 （Galla chinensis） 为倍蚜科昆虫角倍蚜 或 蛋 倍 蚜 在 其 寄 主 漆 树 科 植 物 盐 肤 木 （Rhus chinensis） 、 青 麸 杨 （P.potaninii） 或 红 麸 杨 （R. punjabensis） 等树上形成的干燥虫瘿。 五倍子产于亚 洲东部和北美洲的美国、 加拿大等国家。 我国是五 倍子主产国， 产量约占世界总产量的 95%， 其中四 川、 贵州、 湖南、 湖北、 陕西和云南 6 省的产量占 全国总产量的 80%左右[1]。
2 五倍子单宁的生理活性
单宁特殊的化学结构和化学特性赋予了单宁特 有的生理活性， 近年来五倍子单宁已成为国内外的 研究热点。
随着工业化程度的不断提高， 各种有机合成物 质的不断增多， 环境致突变物对人类健康造成了严 重威胁， 随着人们对致癌机制认识的不断加深， 人 们意识到化学防癌能有效的抑制突变和癌变， 因此 寻找具有抗突变作用的天然产物成为研究热点。
（Department of Biology and Food， Zhejiang Pharmaceutical College， NingBo， Zhejiang 315100， China） Galla chinens is a traditional Chinese herb. Chinese gallotannins （CGTs） are the main bioactive and the most compounds， which have a research area including extraction， purification， antioxidant， antimutagenicity， bacteriostat， component analysis， and structuralidentification. This paper reviews the methods of extraction and purification， physiological activity of CGTs.
1 五倍子单宁的提取 纯化
单宁属于强极性的有机化合物， 通常使用水— 低级醇、 水—丙酮等较强的溶剂进行提取， 工业上 常选用水作为提取溶剂。 丙酮水溶液是常见的单宁 提取溶剂， 其特点是对单宁的溶解能力强， 能够破 坏植物体内鞣质 - 蛋白质的连接键， 使得单宁大量 浸出， 而且丙酮也易于从浸提液中回收得到单宁的 水溶液。 Chavan U D 等人[6]探讨了不同溶剂对单宁提 取率的影响， 发现 70%酸性丙酮的提取率最高。 甲
五倍子单宁提取后， 浸提液中含有单宁和其他 类型的化合物， 需要进行进一步提纯， 单宁在分离 过程中极易发生氧化、 降解、 聚合等反应， 因而单 宁的分离纯化比较费时， 且有一定的难度。 五倍子 单宁的主要分离纯化方法如下[11]：
（1） 有机溶剂法。 通常将单宁的水溶液先用乙 醚或者氯仿等溶剂萃取， 除去弱极性成分， 然后再 用乙酸乙酯、 正丁醇来萃取得到单宁成品[12-13]。 帅益 武等人[14]比较了溶剂萃取和 Ca2+ 离子沉淀对五倍子单 宁纯化效果， 研究表明有机溶剂法萃取的鞣质纯度 达 到 89.15% ， 而 离 子 沉 淀 法 得 到 的 鞣 质 纯 度 为 46.89%。 沉淀分离法虽然减少了有机溶剂的使用量， 大生产安全性好， 但是， 一方面过滤过程中单宁的 损失较多， 另一方面离子沉时 pH 值波动较大， 很容 易造成单宁被氧化从而影响产品的得率和纯度。 张 强等人[15]用溶剂法提纯工业单宁酸， 通过对萃取温 度、 搅拌时间和粒度等条件探索， 并采用乙酸乙酯、 丙酮、 乙醇的复合有机溶剂以配比的方式萃取单宁 酸粗提液， 使得工业单宁酸的纯度达到 90%以上。
（3） 薄层层析法。 薄层层析常用于混合物的分 离、 提纯及含量的测定[18]。 它是将吸附剂均匀地铺在 玻璃上， 形成薄层， 把分离的样品点在薄层上， 然 后用适宜的溶剂展开， 使混合物得以分开的方法。 该方法用量少、 展开快、 分离能力强， 可用于单宁 的制备型分离。
纤维素薄层层析常用的展开剂有乙酸水溶液和 正丁醇—乙酸—水 （4∶1∶5， 上层）。 在国外， 前 者可用于二聚缩合单宁和可水解单宁的纯化分。 硅胶薄层层析多用苯—甲酸乙酯—甲酸体系作为展 开剂， 不同的比例对应不同聚合体单宁的分离。 李 春远等人[19]研究了五倍子的化学成分， 利用硅胶柱色 谱及薄层色谱对五倍子分离纯化， 得到十种化合物， 分别为棕榈酸、 月桂酸、 2- 羟基 -6- 十五烷基苯甲 酸、 棕榈酸 -1,3- 二甘油酯、 白果酚、 4- 羟基 -3甲氧基 - 苯甲酸、 β- 谷甾醇、 肉豆蔻酸、 没食子酸 和正二十五烷。 刘萍等人[20]分别用硅胶薄层层析和聚 酰胺薄膜层析对五倍子进行鉴别， 由于五倍子单宁 的极性较大， 五倍子的硅胶薄层色谱产生拖尾式的 长条； 而用聚酰胺薄膜层析得到的效果图色泽鲜艳、 斑点整齐规则， 易于观察。
（2） 柱层析法分离。 柱层析是目前分离纯化单 宁的最主要方法， 常用羟丙基葡聚糖凝胶 （Sephadex LH-20） 柱层析法和大孔吸附树脂层析法。
Sephadex LH-20 柱层析法主要用于不同聚合度 单宁的分离， 分离效果不受凝胶过滤的影响。 Fang Tian 等人[16]将五倍子的乙酸乙酯提取物溶于乙醇后上 Sephadex LH-20 柱进行分离， 以乙醇—水—丙酮为
在临床上均有较好的疗效[3]。 五倍子的化学成分主要包括单宁、 没食子酸、
五倍子油、 树脂、 蛋白质、 脂肪物质、 淀粉、 蜡质、 矿物质等， 它们的组成随种类、 产地、 成熟程度不 同而有较大差异[4]。 五倍子单宁是五倍子的主要功能 成分和含量最多的成分， 五倍子单宁含量可达 70% 以上， 其中角倍类含单宁 56%~68%； 肚倍类含 70% ~80%[5]。 本文综述了近年来五倍子单宁的主要研究进 展。
五倍子中含量最多的组分。 CGTs 的研究涉及到提取纯化、 抗氧化、 抗突变、 抑菌、 组成成分分析、 结构鉴定等。 综
述了 CGTs 的提取纯化方法及生理活性的研究进展。
关键词： 五倍子单宁； 提取； 纯化； 生理活性
中图分类号： S
文献标志码： A
doi： 10.3969/jissn.1671-9646（X）.2013.05.001
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梯度洗脱， 得到 10 个组分。 其中经无水乙醇洗脱得 到 组 分 F1； 乙 醇 水 （225 ∶225） 洗 脱 得 到 组 分 F2-F6； 经 乙 醇 水 （3 ∶2） / 丙 酮 洗 脱 得 到 组 分 F3-F7。 进一步的 HPLC-ESI-MS 分析得到： F2-F8 依次为 1 GGs， 没食子酸、 2GGs， 二棓酸、 3GGs， 4GGs， 5GGs； F9 为 6-7GGs， 二棓酸乙酯组成的混 合 物 ； F10 为 8-10GGs， 除 2GGs 和 4GGs 外 ， 1-7GGs 均有异构体存在。
收稿日期： 2012-12-10 作者简介： 江 凯 （1985— ）， 男， 人， 硕士， 助教， 研究方向： 食品营养与卫生。
2013 年第 3 期
醇 - 水也是良好的溶剂且可以避免单宁被氧化。 单 宁在提取时应避免使用铁、 铜、 铝等金属容器， 同 时温度控制在 50 ℃以下。
五倍子单宁提取方法包括水浸提、 超声波辅助 提取、 微波提取、 加压提取和超临界萃取等。 孔琪 等人[7]用水作为提取溶剂， 在提取温度 50 ℃， 料液 比 1∶18， 提取时间 1.5 h 条件下， 五倍子鞣质得率 为 43.52%。 柳世萍[8]在五倍子提取单宁酸的工艺研究 中发现， 采用恒温水提， 每次提取 1 h， 提取 6 次以 上， 单宁酸提取率达到 50%左右。 姜萍等人[9]采用超 临界 CO2 萃取五倍子单宁， 在一定的压力、 温度、 时间及 CO2 和夹带剂乙酸乙酯条件下， 连续萃取分 离， 得到最佳工艺条件为： 压力 25 MPa， 萃取温度 44 ℃， 时间 120 min。 在该条件下五倍子单宁得率 为 57.83%， 该方法操作简单， 无毒无害， 适用于热 敏性差的活性物质提取， 但设备要求较高。 姜宁等 人[10]采用 3 因素 4 水平试验设计进行微波辅助提取五 倍子中单宁酸的研究， 结果表明， 在料液比 1∶30， 微波功率中高火， 提取时间 4 min 条件下， 单宁酸得 率达到 61.49%以上。 微波提取省时且效率高， 优于 传统的水提法。
文章编号： 1671-9646 （2013） 05b-0001-04
2013 年第 3 期
No.5 May.
五倍子单宁提取纯化及生理活性的研究进展
江凯
（浙江医药高等专科学校 生物与食品系， 浙江 宁波 315100）
摘要： 五倍子是中国的一种传统中药， 五倍子单宁 （Chinese Gallotannins， CGTs） 是五倍子的主要功能成分， 并且是
网络出版时间：2013-04-25 09:33 网络出版地址：/kcms/detail/14.1310.S.20130425.0933.001.html
农产品加工（学刊）
第 5 期 （总第 317 期） 2013 年 5 月
农产品加工 （学刊） Academic Periodical of Farm Products Processing
陈晓光[21]系统研究了五倍子有效成分的癌化学预
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农产品加工（学刊）
2013 年第 3 期
防作用， 同过建立多个癌化学模型， 验证五倍子有 效成分的抗突变， 抗肿瘤作用。 五倍子对环磷酰胺 引起的小鼠骨髓嗜多染红细胞微核形成有明显抑制 作用， 10 μg/mL 五倍子提取物能明显抑制苯并芘 （B(a)P） 对中国仓鼠肺细胞 V79 的恶性转化， 且量效 关系明显； 在体内能抑制苯并芘诱发 A/J 小鼠肺腺瘤 的形成； 对 B(a)P 引起的 ZBs 细胞增殖 Ki-67 表达亦 呈明显的抑制作用。 实验表明五倍子有效成分能保 护 DNA 染色体免受损伤， 抗突变作用机制在于通过 影响细胞的癌基因， 维持细胞正常增值和代谢平衡。 谢道刚等人[22]发现五倍子的水溶性提取物在 v79 细胞 染色体畸变实验中显示出抑制黄曲霉毒素 B1 的致突 变作用， 当质量浓度在 75， 150， 300 和 600 μg/mL 内， 五倍子提取物对黄曲霉毒素 B1 诱发细胞突变和 细胞染色体畸变和中具有明显的抑制作用， 随着提 取物浓度增加， 细胞突变和染色体畸变数目明显减 少， 显示出一定的量效关系。