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血浆灭活对凝血因子的影响

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血浆灭活对凝血因子的影响

发表时间：2009-12-14T17:05:27.403Z 来源：《中外健康文摘》第26期供稿 作者： 张志宏 葛玉翠

[导读] 血浆经白细胞过滤后取新鲜血浆，经亚甲蓝光照处理后过滤比较其灭活前后血浆部分凝血因子活性及白蛋白、球蛋白的变化

张志宏 葛玉翠（河南省周口市中心血站成分科 河南周口 466000）

【中图分类号】R457.1+4 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085(2009)26-0083-01

【摘要】 目的 血浆经白细胞过滤后取新鲜血浆，经亚甲蓝光照处理后过滤比较其灭活前后血浆部分凝血因子活性及白蛋白、球蛋白的变

化。方法 新鲜血浆加入浓度2.25-1umol/L亚甲蓝，置于荧光照射仪中震荡后取出。用一期分凝固法、比浊法及比色法测定其活性。结论

血浆灭活后对凝血因子活性无显著影响，蛋白回收率＞80％。

【关键词】 血浆病毒灭活 亚甲蓝 凝血因子

血浆是血液成分中病毒危害性较高的一种制品，而目前我国临床上血浆输注量还很大，解决经输血而引起的传染病是较为紧迫的大事，除了加强筛选献血员的质量控制外，对临床用的血液制品进行病毒灭活是一种最为有效的方法。亚甲蓝光化学是一种单袋血浆病毒灭

活方法。德国红会于90年代初期开始研究此技术，1992年开始将亚甲蓝处理的血浆用于临床，效果良好。但是血浆灭活处理后血浆中蛋白

质功能、凝血因子活性是否满足临床需求，是最为直接的矛盾。

1 对象与方法

1.1 材料 血袋由山东威海高分子血细胞保养液一配方抗凝全血分离储存于PVC血袋中，制成200ml新鲜血浆，病毒灭活柜（山东中保康）ZBK-YBM-01,灭活转移袋（淄博中保康医疗器械有限公司）。

1.2 器械 ACL200自动血凝仪（cauer美国），pu740分光光度计（becman美国），BH-2荧光显微镜（olympus日本），凝血因子测定试剂均购自conlter公司。

1.3方法 （1）新鲜血浆由中心血站采集的血液，6小时内分离的。（2）随即抽取新鲜血浆200ml 15袋，穿刺入加有亚甲蓝的PVC袋内，置于荧光照射中。以强调为3.8万LX荧光照射并连续振满30分钟，取出后过滤，去除亚甲蓝。留取照射前后样品，测定血浆VIII因子活

性，血浆部分凝血活酶时间（KPTT），纤维蛋白原（Fg），以及血浆白蛋白和球蛋白的含量，血浆VIII因子活性测定采用一期法

(KPTT),Fg测定采用凝固法，血浆白蛋白测定采用比色法，血浆球蛋白测定采用比浊法。

2 结果

3 讨论

在新鲜冰冻血浆所含的诸多有效成分中不稳定的凝血因子对理化环境的变化相对较为敏感。 IX:C及纤维蛋白原的回收率作为衡量理化处理对血浆有效成分影响的指标。本实验实经亚甲蓝+荧光处理后的血浆蛋白原，VIII:C和IX:C等凝血因子回收率为＞80％，且荧光照射后

血浆蛋白质回收率优于其他光源，这主要是因为血浆经不同光源照射30分钟后，其血袋表面温度提高，影响蛋白质的功能。而其中经荧光

照射后其表面温度为40±2℃，其它光源为60±2℃。这说明亚甲蓝化学处理后血浆中纤维蛋白原及其它凝血因子会有少量损失，但并不影响

临床治疗效果。国外报导多用660nm红光作为亚甲蓝血浆的照射光源，笔者证实用荧光作为照射源，其病毒灭活的效果和对凝血因子的影

响与红光无显著差异。实验所用PVC储血袋是目前我国使用最普遍的输血容器，荧光则是常用的照明光源，故用荧光照射盛装于PVC储血

袋内的含亚甲蓝血浆的病毒灭活方法，其操作和取材更具有实用性。亚甲蓝作为一种治疗用药物已有相当长的历史，本研究所用亚甲蓝含

量甚微（1uMol/L）。以2L/50Kg体重输注计，输注量尚不足临床低剂量（266uMol/50Kg）的1%，应无化学毒性之虑，因此，亚甲蓝+荧

光照射有可能成为一种安全、有效、实用的单袋血浆病毒灭活的方法。

参 考 文 献

[1]Lambreoht B,Mohr H,etal Photoinactivation of viruses in human fresh plasman by phenothiazine dyes in eombination with visible lightVox Sang 1991,60:207﹣213. [2]Piet MPJ.et al.The use of tri(n-butyl)Phosphatedetergent mixture to inaclivate hepatitis viruses and human immunodeficiency viruses inplasma and plasma’sfractionation. Transfusion1990;30:591.\

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凝血因子

凝血因子

凝血因子是参与血液凝固过程的各种蛋白质组分。它的生理作用是，在血管出血时被激活，和血小板粘连在一起并且补塞血管上的漏口。这个过程被称为凝血。它们部分由肝生成。可以为香豆素所抑制。为统一命名，世界卫生组织按其被发现的先后次序用罗马数字编号， 有凝血因子Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ，Ⅶ，Ⅷ，Ⅸ，Ⅹ，Ⅺ，Ⅻ，Ⅻi等，因子XIII以后被发现的凝血因子，经过多年验证，认为对于凝血功能，无决定性的影响，不再列入凝血因子的编号。因子 VI 事实上是活化的第五因子，已经取消因子VI的命名。

主要凝血因子

因子 I， 纤维蛋白原

因子 II, 凝血素

因子 III, 凝血酶原酶

因子 IV, 钙(Ca2+) 因子

因子 V, 促凝血球蛋白原，易变因子

因子 VII, 转变加速因子前体，促凝血酶原激酶原，辅助促凝血酶原激酶

因子 VIII, 抗血友病球蛋白A (AHG A), 抗血友病因子A （AHFA),血小板辅助因子 I,

血友病因子 VIII 或 A,

因子 IX, 抗血友病球蛋白B (AHG B)，抗血友病因子B (AHF B)，血友病因子 IX 或 B

因子 X, STUART(-PROWER)-F, 自体凝血酶原C

因子 XI, ROSENTHAL因子，抗血友病球蛋白C

因子 XII, HAGEMAN因子， 表面因子

因子 XIII, 血纤维稳定因子

辅助凝血因子

FITZGERALD因子

FLETCHER因子 (激肽释放酶原)

von-Willebrand-因子

被取消资格的凝血因子

因子 VI, 促凝血球蛋白:其实是活化后的第五因子。

这些因子共同作用，会导致凝血。

如果一种或多种凝血因子缺失，会导致“血友病”: 血液病，血友病。

同义语 缩写符号 血浆浓度 在血清中 贮存稳定性 参与凝血途径

研究亚甲蓝光化学法病毒灭活对血浆有效成分的影响

研究亚甲蓝光化学法病毒灭活对血浆有效成分的影响

国际检验医学杂志２０１３年７月第３４卷第１３期Ｉｎｔ　Ｊ　ＬａｂＭｅｄ，Ｊｕｌｙ　２０１３，Ｖ０１．３４，Ｎｏ．１３　

・检验技术与方法・　

研究亚甲蓝光化学法病毒灭活对血浆有效成分的影响　

何锐洪　

（广东中山市中心血站，广东中山５２８４０３）　・　１７２１　・　

摘　要：目的　探讨亚甲蓝光化学法病毒灭活对血浆主要质量指标的影响及亚甲蓝残留情况。方法　分别于病毒灭活前和　

病毒灭活后无菌留取血浆标本，对凝血因子Ｖ、Ⅷ、Ⅸ、血浆纤维蛋白原（Ｆｇ）、血浆总蛋白（ＴＰ）的含量及病毒灭活血浆亚甲蓝残留　

量进行测定。结果　亚甲蓝光化学法病毒灭活对血浆蛋白浓度无明显影响，而凝血因子、纤维蛋白原含量均有一定程度的降低，　

但仍然符合国家标准，经过滤除去亚甲蓝，其亚甲蓝残留量小于０．３￣ｍｏｌ／Ｌ，符合质量标准。结论　亚甲蓝光化学法是一种安　

全、有效、实用的单袋血浆病毒灭活的方法。　

关键词：血浆病毒灭活；　亚甲蓝；血液凝固因子　

ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３—４１３０．２０１３．１３．０３９　文献标识码：Ａ　文章编号：１６７３－４１３０（２０１３）１３－１７２１－０２　

成分输血在临床上的应用日益广泛，血浆用量大，尽管血　

液检测的水平在不断提高，但因检验方法与试剂灵敏度局限、　

窗口期、病毒检测种类局限、新病毒的出现等原因，经血传播病　

毒的危险性依然存在。病毒灭活可以降低经血传播疾病的风　

险，因此寻找有效的病毒灭活方法，是保证血浆安全应用的重　

要措施。亚甲蓝光化学是一种单袋血浆病毒灭活方法，该法灭　

活血浆中病毒的效果已被证实，我国部分地区血站已广泛推广　

应用。本血站自２０１２年７月起，采用该法对血浆进行病毒灭　

活，为分析亚甲蓝光化学法对血浆主要质量指标的影响，以及　

亚甲蓝残留量的情况，我们检测了血浆病毒灭活前后血浆主　

要质量指标的变化及亚甲蓝残留量，现报道如下。　．　

１材料与方法　

１．１一般资料２０１２年７月至２０１２年１Ｏ月，每月分批次随　

病毒灭活FFP提取冷沉淀凝血因子中主要成分含量分析

病毒灭活FFP提取冷沉淀凝血因子中主要成分含量分析

病毒灭活FFP提取冷沉淀凝血因子中主要成分含量分析

目的：探讨病毒灭活新鲜冰冻血浆（FFP）提取的冷沉淀凝血因子中主要成分含量的改变。方法：采集45袋400 ml全血，然后用CR-7型大容量低温血液成分离心机（3800 r/min，10 min）分离出血浆（200ml/袋），每袋再平均分为100 ml两袋，分别作为对照组液体血浆和试验组液体血浆。对照组（FFP组）立即置于低温血浆速冻机中速冻保存备用；实验组（病毒灭活FFP组）用亚甲蓝/光化学法进行病毒灭活后，再速冻保存备用。将两组FFP分别提取两组冷沉淀凝血因子速冻保存备用，而后分批用START-4全自动血液凝固检测仪，快速测定凝血因子Ⅷ（FⅧ）和纤维蛋白原（Fg）的含量。结果：经两组对比可见，用亚甲蓝/光化学法进行病毒灭活后FFP制备的冷沉淀凝血因子中，凝血因子Ⅷ（FⅧ）和纤维蛋白原（Fg）含量都有一定幅度的减少，但仍然符合国家标准。结论：以病毒灭活FFP提取冷沉淀凝血因子，对FⅧ和Fg的含量无显著影响，因此病毒灭活FFP提取冷沉淀凝血因子是可行的。

标签： 病毒灭活； 冷沉淀； 成分分析

冷沉淀凝血因子是FFP在4 ℃条件下水浴中解冻，收集到的不溶冷沉淀物，其主要成分为凝血因子Ⅷ（FⅧ）、纤维蛋白原（Fg）等，是局部止血药纤维蛋白胶的主要成分。广泛应用于FⅧ和Fg等凝血因子缺乏的疾病，如因FⅧ缺乏或活性下降的甲型血友病、VWF缺乏或分子结构异常的血管性血友病、凝血因子I（Fg）缺乏症等。对于以上患者，输注的冷沉淀凝血因子中凝血因子Ⅷ、纤维蛋白原的活性对治疗效果产生重要影响[1]。在亚甲蓝/光化学法病毒灭活血浆广泛应用于临床以来，它的效果与安全已被验证。所以用亚甲蓝/光化学法病毒灭活FFP为原料提取冷沉淀凝血因子，对进一步减少因输血传播疾病的发生率有积极作用。为发现病毒灭活FFP提取的冷沉淀凝血因子中主要成分含量的改变，笔者分别对实验组FFP和对照组FFP提取的冷沉淀凝血因子中凝血因子Ⅷ（FⅧ）、纤维蛋白原（Fg）进行了含量分析比较，现将结果报道如下。

大量输血患者输血前后凝血四项指标的变化及及时输注血浆对凝血四项指标的影响

大量输血患者输血前后凝血四项指标的变化及及时输注血浆对凝血四项指标的影响

大量输血患者输血前后凝血四项指标的变化及及时输注血浆对凝血四项指标的影响

摘要 目的 观察大量输血患者输血前后凝血四项指标的变化， 并分析及时输注血浆对其凝血四项指标的影响。方法 88例大量输血患者， 根据输血方法不同分为研究组与对照组， 每组44例。对照组单纯输注悬浮红细胞， 研究组联合输注悬浮红细胞和手工分冰冻血浆， 观察并比较两组凝血四項指标变化情况。结果 输血前， 两组患者凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原（FIB）、活化部分凝血活酶时间（APTT）及凝血酶原时间（PT）比较差异无统计学意义（P>0.05）。输血后1 d， 两组患者PT、APTT、TT和FIB与本组输血前比较差异具有统计学意义（P＜0.05）；输血后1 d， 研究组APTT（44.68±4.95）s、PT（15.48±2.26）s、

FIB（4.11±0.53）g/L、TT（18.22±3.29）s与对照组的（51.29±5.37）s、（19.76±3.15）s、（3.08±0.42）g/L、（24.76±

4.97）s比较， 差异具有统计学意义（P＜0.05）。输血后3、5 d， 两组患者PT、APTT、TT和FIB比较差异无统计学意义（P>0.05）；输血后5 d， 两组患者PT、APTT、TT和FIB与本组输血前比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论 大量输血会对患者的凝血功能造成一定影响， 应严密观察患者凝血功能变化， 并及时输注适量血浆， 改善患者凝血功能， 提高输血效果， 该方法可推广。

关键词 大量输血；悬浮红细胞；凝血四项；血浆输注；影响

大量输血是挽救大出血患者的重要方式， 一次性输血量达到患者自身血容量的1.0～1.5倍以上或输血速度>1.5 ml/（kg·min），

即为大量输血[1]。随着近年来大手术、大出血患者的增加， 使得患者大量输血的几率也明显升高， 大量输血虽然可以起到挽救患者生命的效果， 但同时也会引发抗凝血功能障碍、酸碱平衡失调、低钙血症以及微血栓等一系列并发症，