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欢迎下载 实验五：血液凝固及其影响因素
实验人：
同组人：
【实验目的】
1． 学习血液凝固的基本过程
2． 了解加速或延缓血液凝固的一些因素
【实验原理】
血液凝固是一个酶的有限水解激活过程，在此过程中有多种凝血因子参与。根据凝血过程起动时激活因子来源不同，可将血液凝固分为内源性激活途径和外源性激活途径。内源性激活途径是指参与血液凝固的所有凝血因子在血浆中，外源性激活途径是指受损的组织中的组织因子进入血管后，与血管内的凝血因子共同作用而启动的激活过程。
【实验材料和用具】
家兔
清洁小试管7个、小烧杯2个、竹签、秒表、试管架、哺乳动物手术器械一套、兔手术台、动脉夹、塑料动脉插管、线、棉花、水浴槽、冰盒
液状石蜡、肝素、草酸钾1~2mg、脑匀浆液0.1ml、生理盐水
【实验过程】
1、 动物麻醉及颈部手术 （此部由助教老师操作）
取一只动物，称重。按1g/kg体重的剂量将乌拉坦（氨基甲酸乙酯）由耳缘静脉缓慢注入，观察动物肌张力、呼吸与角膜反射的变化。动物麻醉后背位固定于兔手术台上。
剪去颈部手术野的毛，沿颈正中线在喉头上一指至锁骨上一指的地方作一5～7cm的皮肤切口。分离皮下组织及肌肉。
2、 颈总动脉插管（此部由助教老师操作）
在气管两侧辨别并分离颈总动脉，颈总动脉下方穿两条线备用。在左侧颈总动脉的近心端夹一动脉夹，在动脉夹远心端距动脉夹约3cm处结扎。用小剪刀在结扎线的近侧（结扎线与动脉夹之间）沿向心方向剪一小斜口（约占管径的一半），向心脏方向插入动脉插管，由备用的线结扎固定。取血时将动脉夹松开即可。
实验报告血液凝固及其影响因素－资料类
关键信息项：
1、 实验目的
2、 实验材料与设备
3、 实验方法与步骤
4、 血液凝固的影响因素
5、 实验结果与数据分析
6、 实验结论
7、 注意事项
11 实验目的
本实验旨在探究血液凝固的过程以及各种因素对血液凝固的影响，从而深入了解血液凝固的生理机制和相关的病理现象。
111 具体目标
1111 观察血液在不同条件下的凝固时间。
1112 分析温度、钙离子浓度、抗凝剂等因素对血液凝固的作用。
1113 培养学生的实验操作能力和科学思维方法。
12 实验材料与设备 121 实验动物
新鲜的家兔，体重 20 25 千克。
122 实验器材
采血针、注射器、试管、小烧杯、恒温水浴箱、秒表、离心机、显微镜等。
123 实验试剂
38% 柠檬酸钠溶液、0025mol/L 氯化钙溶液、生理盐水、肝素溶液等。
13 实验方法与步骤
131 家兔的麻醉与采血
用 20% 氨基甲酸乙酯按 5ml/kg 的剂量对家兔进行耳缘静脉注射麻醉。然后，在颈动脉处进行采血，将血液分别注入事先准备好的含有抗凝剂的试管和不含抗凝剂的试管中。
132 血液凝固时间的测定
1321 取三支清洁的试管，分别标记为 A、B、C。
1322 A 管中加入 2ml 血液，置于 37℃恒温水浴箱中，每隔 30 秒轻轻倾斜一次试管，观察血液是否凝固，直至血液凝固，记录凝固时间。
1323 B 管中加入 2ml 血液，置于室温（约 25℃）环境中，同样每隔 30 秒观察一次，记录凝固时间。 1324 C 管中先加入 01ml 肝素溶液，再加入 2ml 血液，混合均匀后置于 37℃恒温水浴箱中，观察血液是否凝固。
133 钙离子对血液凝固的影响
1331 取两支试管，分别标记为 D、E。
1332 D 管中加入 2ml 血液和 01ml 38% 柠檬酸钠溶液，充分混匀后离心 5 分钟，取上清液。
抗 凝----应用化学或物理学的方法，抑制或除去血液中的某些凝血因子以阻止血液凝固的方法。
抗凝剂----能阻止血液凝固的化学试剂。
一、枸橼酸钠
【原理】 枸橼酸钠（柠檬酸钠）是枸橼酸钠的三钠盐。它能与血液中的钙离子形成可溶性的螯合物，使Ca2+失去凝血作用，从而阻止血液凝固。
【应用范围】 血沉、凝血象、血小板功能检查及血液保养液。
【用量】凝血象: 109mmol/L水溶液,与血液之比为1:9； 血沉: 106mmol/L水溶液,与血液之比为1:4。
二、乙二胺四乙酸盐
【原理】乙二胺四乙酸（EDTA）盐可与血液中的钙离子结合形成配位化合物，从而阻止血凝。
【应用范围】一般血液学检查和血液粘度测定。不适于凝血象及血小板功能检查。
【用量】其有效抗凝浓度为1～2mg/ml血液。 血细胞分析仪用EDTA-K2作抗凝剂，用量为EDTA-K2•2H2O 1.5～2.2mg/ml血液。
三、肝素
【原理】通过与抗凝血酶Ⅲ结合，增强抗凝血酶的作用，灭活丝氨酸蛋白酶，从而可阻止凝血酶的形成和阻止血小板聚集，阻止血液凝固。
【应用范围】血细胞比容测定、血液粘度测定和多种生化分析。
用量 通常用肝素的钠盐或钾盐粉剂配成1g/L肝素水溶液。取0.5ml置小瓶中，37～50℃烘干后，能抗凝5ml血液。
四、草酸盐
草酸盐也是常用的抗凝剂，优点是溶解度大，作用原理是溶解后解离的草酸根与标本中的Ca2+形成草酸钙沉淀，使Ca2+失去凝血功能，凝血过程被阻断。
【实验报告】血液凝固及其影响因素
一、实验目的
本次实验旨在探究血液凝固的过程以及了解影响血液凝固的各种因素，从而加深对血液生理特性的理解。
二、实验原理
血液凝固是一个复杂的生理过程，它是由凝血因子按一定顺序相继激活而生成的凝血酶最终使纤维蛋白原转变为纤维蛋白的过程。血液凝固可分为内源性凝血途径和外源性凝血途径。内源性凝血途径是指参与凝血的因子全部来自血液，外源性凝血途径是指始动凝血的组织因子来自组织。
影响血液凝固的因素众多，包括血液接触面的光滑程度、温度、钙离子浓度等。光滑的接触面不利于凝血因子的激活和血小板的黏附聚集，从而延缓血液凝固；温度降低时，酶的活性下降，凝血过程减慢；钙离子在凝血过程中起着重要的作用，缺乏钙离子会导致凝血障碍。
三、实验材料与方法
（一）实验材料
家兔、注射器、酒精棉球、草酸钾溶液、生理盐水、肺组织浸液、石蜡油、冰块、氯化钙溶液等。
（二）实验方法 1、 用注射器在家兔耳缘静脉抽取一定量的血液，分别注入两支清洁的小试管中。
2、 一支试管静置，作为对照管；另一支试管用竹签搅拌，观察血液是否凝固以及凝固所需的时间。
3、 在两支新的小试管中分别加入等量的草酸钾溶液和生理盐水，再用注射器抽取家兔血液注入两管，摇匀后静置，观察两管血液的凝固情况。
4、 取三支小试管，分别加入等量的血液，一支置于 37℃水浴中，一支置于室温下，一支置于冰水中，观察血液凝固的时间。
5、 在两支小试管中分别滴入一滴肺组织浸液和石蜡油，然后加入等量的血液，观察血液凝固的时间。
6、 在一支加入血液的试管中加入适量的氯化钙溶液，观察血液凝固的情况。
四、实验结果
（一）搅拌对血液凝固的影响
对照管中的血液很快凝固，而搅拌管中的血液不凝固或凝固时间明显延长。
（二）草酸钾溶液对血液凝固的影响
加入草酸钾溶液的试管血液不凝固，而加入生理盐水的试管血液正常凝固。 （三）温度对血液凝固的影响
37℃水浴中的血液凝固时间最短，室温下的血液凝固时间次之，冰水中的血液凝固时间最长。
