泛酸测定原始记录表
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受控编号:
执行日期2023年 月 日 第 1 页 共 1 页 样品编号 样品名称 检验项目 泛酸
检验依据 GB5009.210—2016食品中泛酸含量的测定 检出限
仪器名称 仪器型号 仪器编号
检测起止日期 环境条件 温度 湿度
分析步骤:称取试样_______按标准中5.1制备接种液,按标准中6.2进行试验提取。根据试样中泛酸含量用水对试样提取液进行适当稀释(F),使稀释后试样提取液中泛酸浓度约为 20 ng/mL.所用试管使用前洗刷干净,用水煮沸30min,沥干后放入盐酸浸泡液中浸泡2h,经170℃烘3h后使用。取4支试管,分别加入1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL试样提取液(Vx),补水至5.0mL,加入5.0mL泛酸测定用培养液,混匀。另取4支试管分别加入1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL酶空白液。取试管分别加入泛酸标准工作溶液0.00mL、0.50mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL、2.50mL、3.00mL、3.50mL、4.00mL、4.50mL、5.00mL于试管中,补水至5.0mL,相当于标准系列管中泛酸含量为0ng、10ng、20ng、30ng、40ng、50ng、60ng、70ng、80ng、90ng、100ng泛酸,再加入5.0mL泛酸测定用培养液,混匀。为保证标准曲线的线性关系,应制备2套~3套标准系列管,绘制标准曲线时,以每个标准点的均值计算。将所有测定管塞好棉塞,于121℃高压灭菌15min。待测定系列管冷却至室温后,在无菌操作条件下向每支测定管滴加接种液50L。塞好棉塞,置于37℃士1℃恒温培养箱中培养16h~20h,直至达到最大混浊度,即再培养2h后透光率(或吸光度值)无明显变化。另准备一支标准0管(含0g泛酸)不接种作为0对照管。
将培养好的标准系列管、试样和酶空白系列管用漩涡混匀器混匀。用厚度为1m比色杯,于550m处,以未接种的0对照管调节透光率为100%(或吸光度值为0),依次测定标准系列管、试样和酶空白系列管的透光率(或吸光度值)。如果0对照管有明显的细菌增长,或者与0对照管相比,标准0管透光率在90%以下(或吸光度值在0.2以上);或标准系列管透光率最大变化量<40%(或吸光度值变化量<0.4),
标准曲线的绘制
标准溶液名称:泛酸 标准工作液 标准曲线工作液:20ng/mL
试管号 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11
标准曲线工作液 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00
泛酸含量 0.00 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
吸光度两次平均值
回归方程标准曲线Y=
样品测定
提取液定容体积V mL;P=Px/Vx ;X=P×V×f×100/(m×1000000)
空白 吸取酶空白液体积V1 吸光度 从曲线查得泛酸含量m3(ng) 酶液中泛酸含量 / / 试样中泛酸
含量X mg/100g
A1
B1
C1
D1
序号 试样质量m(g) 稀释
倍数f 吸取试样液体积Vx 吸光度 曲线中得泛酸含量Px(ng) 泛酸浓度P(ng/ml) 泛酸浓度的平均值ng/ml
A2
B2
C2
D2
A3
B3
C3
D3
检验员: 复核人: 审核人: