多肽合成工艺与应用

第２４卷第６期　２００７年６月　应用化学　

ＣＨＩＮＥＳＥ　ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＡＰＰＬＩＥＤ　ＣＨＥＭＩＳＴＲＹ　Ｖｏ１．２４　Ｎｏ．６　Ｊｕｎｅ　２Ｏｏ７　

天冬酰胺丙酮叉在多肽合成中的应用　

施志浩　魏运洋　周莉萍　顾云凯　

（南京理工大学化工学院南京２１００９４）　

摘要三一天冬酰胺（Ａｓｈ）与丙酮在ＫＯＨ的甲醇溶液中反应得到具有丙酮叉结构的环化天冬酰胺［ｃＡｓｎ　（ａｃｅｔｏｎｅ）］。该化合物在缩合剂１　乙基＿３．（３ｔ＿二甲氨基丙基）碳化二亚胺盐酸盐（ＥＤＣＩ）和１一羟基苯并三氮唑　（ＨＯＢｔ）存在下，与芴甲氧羰基（Ｆｍｏｃ）保护的酪氨酸（Ｆｍｏｃ－Ｔｙｒ（Ｂｚ１）一ＯＨ）、苯丙氨酸（Ｆｍｏｃ—Ｐｈｅ—ＯＨ）和丙氨　酸（Ｆｍｏｃ—Ａｌａ．ＯＨ）在二氯甲烷和Ｎ，Ⅳ－二甲基甲酰胺溶液中反应得到新的二肽Ｆｍｏｃ—Ｔｙｒ（Ｂｚ１）一ｃＡｓｎ（ａｃｅｔｏｎｅ）一　ＯＨ、Ｆｍ０Ｃ—Ｐｈｅ—ｃＡｓｎ（ａｃｅｔｏｎｅ）一ＯＨ和Ｆｍｏｃ—Ａｌａ—ｃＡｓｎ（ａｃｅｔｏｎｅ）一ＯＨ，收率分别为３５％、３Ｏ％和３Ｏ％。其中Ｆｍｏｃ—　Ｔｖｒ（Ｂｚ１）一ｃＡｓｎ（ａｃｅｔ０ｎｅ）一ＯＨ与苯丙氨酸二肽酰胺（Ｈ—Ｐｈｅ—Ｐｈｅ—ＮＨ　）在相同的缩合条件下反应生成四肽Ｆｍｏｃ—　Ｔｙｒ（Ｂｚ１）一ｃＡｓｎ（ａｃｅｔｏｎｅ）一Ｐｈｅ—Ｐｈｅ—ＮＨ，，收率为７０％。乙酸中Ｐｄ—ｃ催化加氢可同时脱去酪氨酸残基上的芴甲　氧羰基和苄基（Ｂｚ１）保护基，首次得到内吗啡肽一２（ｅｎｄｏｍｏｒｐｈｉｎ－２，Ｈ—Ｔｙｒ—Ｐｒｏ　Ｐｈｅ—Ｐｈｅ—ＮＨ２）的环化天冬酰胺　类似物Ｈ—Ｔｙｒ－ｃＡｓｎ（ａｃｅｔｏｎｅ）．Ｐｈｅ—Ｐｈｅ—ＮＨ：，收率为６０％。应用核磁共振、红外、质谱和高分辨质谱测试技术对　目标产物和中间体的结构进行了表征。小鼠醋酸扭体法对类似物的镇痛活性进行了初步的研究。结果表明，　当剂量为２．４×１０　ｇ／Ｋｇ时，镇痛抑制率为４５％。　关键词天冬酰胺丙酮叉，内吗啡肽，四肽，类似物　中图分类号：０６２９．７　文献标识码：Ａ　文章编号：１０００－Ｏ５１８（２００７）０６－０７０７－０５　

兰州大学科技成果——多肽药物合成工艺

多肽药物研发具有广阔的研究空间和市场应用前景。2015年全球多肽药物市场为175亿美元，据预测，2015-2025年年增长率为10.3%，到2025年全球多肽药物市场将增至469亿美元。随着多肽药物价格的平民化、蛋白相互作用新靶点以及替代传统注射给药的新型给药技术迅猛发展，多肽药物的临床应用范围将进一步得以拓展。

然而，多肽药物工业化生产中存在合成步骤繁琐、成本高等一系列技术问题，导致药品价格昂贵，大大增加了医疗负担，严重影响了这些多肽新药投放市场的速度。而我国多肽药物产业与欧美相比还存在较大差距，建立多肽药物产业化制备体系显得尤为重要。特别是，发展高效、低成本的多肽药物规模化制备技术，突破纯化和质控的关键问题，能加速我国多肽药物的质量达到国际化标准。

本课题组针对现有多肽药物合成方法的缺点，发展了相变化多肽合成法，使用多肽的收敛式合成路线研发出针对II型糖尿病的索马鲁肽和利拉鲁肽；针对骨质疏松的Abaloparatide、特立帕肽和鲑鱼降钙素；针对前列腺癌的曲普瑞林、地加瑞克和PSMA-617；针对特发性便秘的利那洛肽和普卡那肽；还有比伐卢定、阿托西班、特利加压素、去氨加压素等多肽药物的全新制备工艺。

新工艺申请专利12项，授权9项。通过改进中长肽的合成方法，进而改善生产中的工艺和路线，达到提高合成产率和减少副产物的目的，最终大大降低多肽药物生产成本。

2015届

分类号：O622.5

单位代码：10452

毕业论文

多肽的固相合成及固相反应在多肽合成中的应用

姓 名 薛立英

学 号 ************

年 级 2011级

专 业 制药工程

系 （院） 药学院

指导教师 李振 李冀伟

2015年4月10日

摘 要

为研究多肽的固相合成工艺，并为工业化合成目标多肽提供理论依据。本实验采用Fmoc固相合成法，以2-Cl-Trt树脂作为固相载体，以FMOC-L-LYS(Boc)-OH、FMOC-L-ALA-OH和FMOC-L-PRO-OH为原料合成目标产物五肽，将反应时间和反应温度作为控制反应的条件。实验得出最适合的合成条件为，0℃投入反应，在室温下分别搅拌5 h，过夜；目标产物五肽的最终纯度可达100.0%。该合成方法操作简便、产率高，可用于工业化合成多肽。

关键词：2-Cl-Trt树脂；固相载体；FMOC-L-LYS(Boc)-OH；FMOC-L-ALA-OH；有机合成；FMOC-L-PRO-OH

ABSTRACT

To study the artwork of solid phase synthesis of polypeptide,and to provide the theoretical

basis for industrialization synthesis of objective ing Fmoc solid phase

synthesis method,with 2-Cl-Trt resin as solid phase carrier,and with

二硝基甲苯的生产工艺和合成应用

二硝基甲苯(DNT)是一种主要基础化学品，广泛应用在医药、涂料、染料、橡胶和其他多种有机化工产品的合成制造过程中。常用来生产二氨基甲苯、聚氨脂、甲苯二异氰酸酯( TDI)等化工产品，也可直接用作军事工业中的火炸药和发射药和用来生产三硝基甲苯(TNT )。二硝基甲苯的年产量在百万吨以下，并以每年4-8%的增长率迅速增长!”。

二硝基甲苯生成途径有两种，一种是用硝基甲苯作原料在硫酸和硝酸的混合酸中与硝酸一段硝化反应获得二硝基甲苯，另一种方法是用甲苯为原料经过两段硝化反应生成二硝基甲苯。工业生产中常用到的是两段硝化法，生产过程中通常会产生多种二硝基甲苯异构体。因为化工生产中通常要用2,4-二硝基甲苯和2,6一二硝基甲苯两种异构体，所以工业生产中在硝化生产后都需要经过分离过程获得目标二硝基甲苯。二硝基甲苯的典型生产工艺过程

当今二硝基甲苯的主要生产工艺是两段硝化法，具体工艺是以甲苯为原材料，在硝硫混酸中反应，由甲苯分两步硝化成二硝基甲苯。第一步反应是:由甲苯硝化生成一硝基甲苯;第二步是:由一硝基甲苯硝化生成二硝基甲苯。这种工艺生产的产物主要是2,4-DNT和2,6-DNT，产品中2,4-DNT与2,6-DNT的质量比大概是80比20，俗称叫(80/20 )DNT。其余四种结构的异构体(2,3-DNT; 2,5-DNT;3,4-DNT; 3,5-DNT)均为需要排除杂质和副产物。

1.1两段硝化法生产二硝基甲苯

这种工艺的主要工艺流程为:原料、硝化、预洗、精制、干燥、成品、输送。

1.1.1原料

原料工序主要是准备好生产二硝基甲苯所需的原料:甲苯、浓硝酸、稀硝酸、硫酸等原料，保证生产过程中所需要的各种原料及时准确输送到位。

1.1.2硝化

硝化工序主要是经过两段硝化反应将甲苯硝化成二硝基甲苯。 一阶段硝化过程是在热水浴环境中按比例配制硫酸和硝酸的混合酸，再缓慢将甲苯加入混合酸液中，加热一段时间后就会反应生成一硝基甲苯，再经过冷凝分离出黄色油状的一硝基甲苯用作二段硝化的原料。