植物组织培养脱毒技术共16页

植物组织培养脱毒技术综述作者：李美娜来源：《农家科技下旬刊》2015年第06期摘要：植物病毒分布广、危害大，对农业和花卉产业的发展产生了巨大的冲击。

国内外的系统研究和生产实践证明，培育和栽培无病毒种苗是防治作物病毒病的根本措施。

本文通过查阅国内外研究文献和资料，综合阐述了热处理脱毒法、组织培养脱毒法、微体嫁接离体培养脱毒法等方法以及几种常用的病毒检测方法。

关键词：植物组织培养；脱毒技术；检测技术植物病毒分布广、危害大，对农业和花卉产业的发展产生了巨大的冲击。

近年来，随着我国从国外引种花卉的种植面积的扩大以及不规范的繁殖技术，病毒病开始流行，严重影响了中国花卉产业的发展。

目前国内外多用组织培养脱毒方法来阻止病毒病的继续传播以便提高植物的产量和质量。

世界上不少国家十分重视这项工作，把脱除病毒纳入常规良种繁殖的一个重要程序，建立了大规模的无病毒苗生产基地，为生产提供无病毒良种种苗，已经在生产上发挥了重要作用，取得了显著的经济效益。

无病毒良种种苗的优点有：（1）产量提高。

通过脱毒可大大提高作物的产量，如草莓脱毒可提高产量20%—30%、马铃薯脱毒可提高产量40%以上、地瓜脱毒可提高产量30%—50%、苹果脱毒可提高产量15%—45%。

（2）品质提高。

脱毒后的植物所结果实品质提高，如地瓜脱毒可提高出干率0.1%—1.5%；苹果着色好，糖度高；观赏植物生长健壮、花大、花艳，优质花增加，商品价值提高。

（3）抗病性增强。

脱毒后，植物本身抗性提高。

对病虫的抗性增强，如地瓜脱毒后可增强抗茎线虫病；另外，脱毒时，还会同时脱除有些细菌、真菌、线虫等。

一、脱毒技术当前脱除植物病毒的方法有热处理脱毒法、组织培养脱毒法、微体嫁接离体培养脱毒法3类。

其中组织培养脱毒法又包括微茎尖培养脱毒、愈伤组织培养脱毒法、珠心组织培养脱毒法3种方法。

1.茎尖培养脱毒。

（1）茎尖培养脱毒原理。

在染病毒植株体内，病毒分布并不均匀，在生长点病毒含量最低。

第九章植物组织培养脱毒一、植物病毒的危害和培养无病毒植物的意义1、植物病毒的危害病毒给植物生产带来的损失是很大的，如草莓病毒的危害，使草莓产量严重降低，品质大大退化。

葡萄扇叶病毒使葡萄减产10%-18%。

花卉病毒的危害一般会影响花卉的观赏价值，其表现是花少而小，产生畸形、变色等。

而且病毒危害与细菌、真菌不同，不能通过化学药剂进行防治。

2、病毒的特性及其浸染病毒是指在活体细胞内寄生增殖的不具细胞结构的生命体。

病毒在植物体内的主要传播途径有：☐介体传播。

如蚜虫、叶蝉、螨类等。

☐机械传播（汁液摩擦传播）。

☐无性繁殖材料和嫁接传播。

☐种子和花粉传播。

3、无病毒苗培育的意义无病毒良种种苗的优点产量提高品质提高抗病性增强如草莓可增产20%—50%，植株结果多，单果重增加，上等果比例提高。

菊花切花品种的脱毒株，表现出株高增加，切花数增多，花朵较大等特点。

“无病毒”概念通常所说的无病毒应为“特定无病毒或特定无病原菌”.无病毒苗是一个相对概念,并不是绝对不带有任何病毒,只是不带有对当地生产危害最大的几种病毒而已.二、脱除植物病毒的原理及方法•热处理脱毒法•微体嫁接离体培养脱毒法•微茎尖培养脱毒法•珠心组织培养脱毒法组织培养脱毒法•愈伤组织培养脱毒法1、热处理脱毒植物细胞分裂和病毒繁殖之间存在着相互竞争。

在快速分裂的细胞中是正常核蛋白合成占优势，而在细胞伸长期间是病毒核蛋白的合成占优势，因此加速分生组织细胞的分裂，是能获得无病毒植株的。

热处理可以钝化病毒的活性，使其增殖减缓或停止，失去传染能力。

但并不能杀死病毒。

热处理方法愈伤组织热处理 热空气处理热处理脱毒的局限性并非所有病毒都对热处理敏感延长热处理时间，病毒钝化效果好，同时也可能钝化植物中的抗性因子而降低处理效果。

热处理后只有一小部分植株能够存活。

2 微体嫁接离体培养脱毒法也称“试管嫁接”，是把极小（小于0.2mm）的茎尖作为接穗接到实生砧木上（无菌种子培养获无菌苗，种子实生苗不带毒），然后将嫁接后的砧木接种到新的培养基上培养。

第七章植物组织的脱毒培养一、植物病毒的危害病毒:一类结构简单生物，由核酸和蛋白质分子组成。

病毒结构简单，没有完整的酶系统来独立地进行物质代谢和能量代谢，只能依靠寄主生物的酶系统实现生理代谢过程，因此，具有寄生性。

病毒侵入寄主后，在寄主细胞中进行自我复制而迅速增殖，并扩展到植物全株发病。

病毒病不同于真菌和细菌病害，不能用杀菌剂和抗菌素进行防治，与细胞共生，一旦染病，只能采用拨除病株的措施。

病毒危害：1）导致植物产量和品质的大幅度降低。

2）通过无性繁殖或者种子传给下一代。

通过植物组织培养方法，可脱除植物病毒，恢复种性，使品种复壮，提高产量品质。

二、植物组织中病毒的分布病毒在植物组织中分布不均匀：在顶端分生组织中含毒少，在老组织中病毒增加。

（茎尖培养脱毒的理论依据）植物茎尖分生组织无病毒原理（原因）：(1) 能量竞争：病毒核酸和植物细胞分裂时DNA合成均需要消耗大量的能量，而分生组织细胞本身很活跃，其DNA 合成是自我提供能量自我复制，而病毒核酸的合成要靠植物提供能量来自我复制，因而就得不到足够的能量，从而就抑制了病毒核酸的复制。

(2) 传导抑制：病毒在植物体内的传播主要是通过维管束实现的，但在茎尖分生组织中，维管组织还不健全或不存在，从而抑制了病毒向分生组织的传导。

(3) 激素抑制：在分生组织中，生长素和细胞分裂素水平均很高，因而阻滞了病毒的侵入或者抑制病毒的合成。

(4) 酶缺乏：1969年，Stace-Smith提出，可能病毒的合成需要的酶系统在分生组织中缺乏或还没建立，因而病毒无法在分生组织中复制。

(5)抑制因子：1976年，Martin-Tanguy等提出了抑制因子假说，认为在分生组织中存在有某种抑制因子，如“酶钝化系统” 。

三、脱除植物病毒的方法(一)茎尖培养脱毒1、根据培养目的和取材大小可将茎尖培养分为:1）普通茎尖（Shoot tip）培养较大茎尖（几毫米至几十毫米的茎尖）培养技术。

技术简单，操作方便，茎尖易成活，成苗所需时间短，能加速繁殖速度。