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黑曲霉XY一7固态发酵生产木聚糖酶主要营养因子的研究

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从而消除或降低消化道中的食糜黏度，提高动物 内源性消化酶的活性，促进营养物质消化吸收作 用等。因此，木聚糖酶的发酵成为饲料行业研究 的热点。
木聚糖酶主要是诱导酶，除了菌株本身的特 点外，基质中的诱导物与酶的合成有着密切的关 系，向培养基中加入诱导物可以解除阻遏作用或 产生诱导效应。诱导生产木聚糖酶是一个极其 复杂现象，对于某一种微生物具有诱导活性的物 质可能是另外一种微生物产木聚糖酶的抑制 剂【ｌ’２Ｊ。因此，对特定菌株进行产酶主要影响因 子研究有助于酶活力的提高，对于进一步实现工
将发酵好的培养物于４０℃烘干，并用高速粉 碎机磨成细粉。称取一定量的固体酶样，加入适 量的水，４０℃抽提３０ ｍｉｎ，用滤纸过滤，得到的浸 提液进行适当稀释进行酶活测定。酶活测定采用 ＤＮＳ法，一个单位的酶活定义为１ ｍｉｎ内水解木聚 糖底物产生相当于ｌ腭木糖的还原糖的酶量。 １．５数据处理
每组试验重复处理２次，结果取平均值。运 用ＳＡＳ软件对数据进行统计分析，并在Ｏ．０５水 平上进行显著性检验。
万方数据
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浙江农业学报第２０卷（２００ｓ）
表１ Ｎ＝２４的Ｐ－Ｂ试验设计与结果
Ｔａｂｌｅ １ ７Ｉｈｅ Ｐ－Ｂ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｒｅｓｕｌｔｓ
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收稿日期：２００７一１１—１２ 基金项目：浙江省重大科技攻关项目（２００７Ｒ１７ＡＳＯＧ０１） 作者简介：李艳丽（１９８０一），女，山东文登人，硕士。从事酶制剂研 究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｑｉｎｑｉｎｊｉａｙｕａｎｌｙｌ＠ｙａｈｏｏ．００ｎ１．∞．Ｔｅｌ：８６—５７１—８６４０４２５４ ＊通讯作者，许尧兴，Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｕｙｘ＠ｚａａｓ．ａｒｇ
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小麦、黑麦、稻谷、麸皮等饲料中含有较多的 木聚糖，这些木聚糖能结合大量的水，导致采食 动物的消化道中食糜体积增大、黏度增加，阻碍 营养物质尤其是脂肪和蛋白质的消化吸收，最终 导致营养物质的消化率下降。此外，食糜在小肠 中的滞留会引起微生物的异常繁殖，使动物生长 受阻，表观代谢能（ＡＭＥ）受到抑制。饲料中添加 木聚糖酶，可显著降低阿拉伯木聚糖分子大小，
万方数据
李艳丽等：黑曲霉ＸＹ－７固态发酵生产木聚糖酶主要营养因子的研究
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业化生产具有重要意义。本研究报道了黑曲霉 （Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）菌株）（Ｙ－７固态发酵生产木聚 糖酶的主要影响因子，以期对进一步提高木聚糖 酶的活力提供科学依据。
１材料与方法
１．１菌种与培养基 菌株Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ ｘＹ．７由本课题组筛选
ｂｅｓｔ ｎｉｔｒｏｇｅｎ ｓ叫Ⅱ优ｆｏｒ Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ ＸＹ－７ ｘｙｌａｎａｓｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ．ｗｈｉｌｅ ｙｅａｓｔ ｅｘｔｒａｃｔ ａｎｄ ｕｒｅａ ｓｅｒｖｅｄ ａｓ ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ｂｅｓｔ
ｎｉｔｒｏｇｅｎ￥ＯＩＩＩ＇Ｐ沱． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ａｓｐｅｒｇ／／ｌｕｓ ｎｉｇｅｒ ＸＹ－７；Ｐｌａｃｋｅｔｔ－Ｂｕｒｍａｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｄｅｓｉｇｎ；ｘｙｌａｍｓｅ
Ａｂ醴叫：Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓｗａｓ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｆｏｒ ｘｙｌａｎａｓｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆｖａｒｉｏｕｓ ｓｔｒａｉｎｓ．Ｐｌａｃｋｅｔｔ－Ｂｕｒｍａｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｄｅ。
ｓｉｇｎ ｗａｓ ａｐｐｌｉｅｄ ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ ｏｆ Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ ＸＹ－７ ｘｙｌａｎａｓｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ．Ａｍｏｎｇ ｓｔｕｄｉｅｄ ２０
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表２ Ｐ－Ｂ试验设计的因素及影响效果
Ｔａｂｌｅ ２ Ｔｈｅ ｆａｃｔｏｒ８妇ｌｕｄｅｄ ｉｎ ｔｈｅ Ｐ－Ｂ ａ甲口ｉｌｌ掰舡Ｉ ｄｅｓｉｇｎ
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浙江农业学报Ａｃｔａ Ａｇｒ／ｃｕ／ｔｕｒａｅ Ｚｈｅｊ／ａａｇｅｎｓ／ｓ ２０（４）：２７０～２７３，２００８
黑曲霉ＸＹ一７固态发酵生产木聚糖酶主要营养因子的研究
李艳丽１，李卫兵２，许少春１，柳 永１，许尧兴１’＊
（１浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所，浙江杭州３１００２１；２衢州出入境检验检疫局。浙江衢州３２∞０２）
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从易代谢糖类对Ａ．ｎｉｇｅｒ ＸＹ－７木聚糖酶生 产的影响来看，在所研究的８种糖中，仅有麦芽
糖对Ａ．ｎｉｇｅ，ＸＹ－７木聚糖酶生产有诱导作用， 但诱导效果不显著；木糖、蔗糖和棉子糖对Ａ． ｎｉｇｅｒ ＸＹ．７木聚糖酶生产有强烈的抑制作用；半 乳糖、甘露糖、乳糖对Ａ．ｎｉｇｅｒ ＸＹ－７木聚糖酶生 产抑制作用也较明显；而葡萄糖则对Ａ．ｎｉｇｅｒ ＸＹ－７木聚糖酶生产影响不大。从氮源添加对 Ａ．ｎｉｇｅｒ ＸＹ．７木聚糖酶生产的影响来看，添加的 ７种氮源中仅有牛肉膏对Ａ．ｎｉｇｅｒ ＸＹ．７木聚糖 酶生产影响效果不显著，亚硝酸钠诱导作用比较
ｓｔａｔｅ ｃｕｌｔｕｒｅｓ
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２结果与分析
２．１ Ｐ－Ｂ设计处理及响应值 对２０个因素进行Ｐ－Ｂ实验设计，共２４个处

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黑曲霉液体发酵产木聚糖酶条件的研究_彭林才

黑曲霉液体发酵产木聚糖酶条件的研究_彭林才

在优化了碳源和氮源的基础上 , 进一步考察培 养环境对产木聚糖酶的影响 。其中 pH值是一个重 要的因素 。 对实验的观察和数据分析可知 (图 4), 培养 基 起 始 pH值 对 产 酶 的 影 响 很 大 , 黑 曲 霉 FSY01在初始 pH值为 4.2时产酶 较多 , 木聚糖酶 活力最高 。 随着初始 pH值的 上升或下降 , 木聚糖 酶活力明显降低 , 这可能是体系的 pH值改变影响 了部分营养物质的解离状态和霉菌细胞膜的生理功 能 , 进而影响了微生物的生长和酶的合成 [ 8] 。
PaperScience＆ Technology 2008 Vol.27 No.3
黑曲霉液体发酵产木聚糖酶条件的研究
彭林才 陈元彩 付时雨 詹怀宇 刘 浩
(华南理工大学制浆造纸工程国家重点实验室 , 广东 广州 510640)
摘 要 :用麦草 、蔗渣和麦麸等农业废弃物作为主要 原料生产木聚糖酶 , 并对黑曲霉 FSY01液体发酵产木 聚糖酶的 条件进行了优化 。 研究表明最适产酶条件 :以麦草 /麦麸 3:1(w/w)作碳源 , 用量 3% ;尿素 /硝酸铵 1:1(w/w)作氮 源 , C/N比 5:1;调节初始 pH值 4.2;培养温度 30 ℃;培养时间 72 h, 在 此条件下 黑曲霉液体 发酵产 木聚糖 酶最高 活力达到 119.6 IU/mL。 添加少量可溶性低聚木糖可以提高产酶 活力 , 加入 Tween80则抑制木聚糖酶的产生 。 关键词 :黑曲霉 ;木聚糖酶 ;农业废弃物 ;液体发酵 中图分类号 :TS71+1 文献标识码 :A 文章编号 :1671 -4571(2008)03-0018-04
酶 。 C/N值偏高 , 则会限制 菌体的繁殖 , 从而影响 到酶的产生 ;C/N值偏低 , 则会使微生 物生长过于
黑曲霉产木聚糖酶的固态发酵条件优化

黑曲霉产木聚糖酶的固态发酵条件优化

万方数据万方数据万方数据黑曲霉产木聚糖酶的固态发酵条件优化作者：周晨妍， 张金华， 马雪婷， 周锋， 周克楠， 丰慧根作者单位：周晨妍,马雪婷,周锋,周克楠,丰慧根(新乡医学院生命科学技术系,河南省医学遗传学与分子靶向药物高校重点实验室培育基地,河南新乡,453003)， 张金华(新乡医学院护理学院,河南新乡,453003)刊名：安徽农业科学英文刊名：ANHUI AGRICULTURAL SCIENCE年，卷(期)：2010,38(21)被引用次数：5次参考文献(6条)1.余元莉;李秀婷;宋焕禄微生物木聚糖酶的研究进展[期刊论文]-中国酿造 2009(02)2.LI X T;JIANG A Q;LI L T Characterization of a cellulase-free,neutral xylanase from Thermomyces lanuginosus CBS 288.54 and its biobleaching effect on wheat straw pulp[外文期刊] 2005(12)3.ZIATE-SHIRKOLAEE Y;TALEBIZADEH A;SOLTANALI S Comparative study on application of nuginosus SSBPxylanase and commercial xylanaseon biobleaching of non wood pulp 20084.符丹丹;谢慧;邬敏辰宇佐美曲霉产木聚糖酶的固态发酵条件研究[期刊论文]-食品与发酵工业 2005(04)5.BAILEY M J;BIELY P;POUTANEN K Interlaboratory testing of methods for assay of xylanase activity 19926.吴克;蔡敬民;刘斌木霉菌株T6木聚糖酶固态发酵条件和酶学性质研究[期刊论文]-菌物系统 2001(02)本文读者也读过(6条)1.闫振丽.程杰渊.杨付伟.汤清源.张海涛.YAN Zhenli.CHENG Jieyuan.YANG Fuwei.TANG Qingyuan.ZHANG Haitao 黑曲霉固态生产木聚糖酶发酵条件的优化[期刊论文]-中国酿造2009(4)2.刘明启.关荣发.陈文伟黑曲霉固体发酵产木聚糖酶的响应面优化设计及其酶学性质的研究[期刊论文]-农业生物技术学报2010,18(1)3.苏玉春.陈光.白晶.韩微微.SU Yu-chun.CHEN Guang.BAI Jing.HAN Wei-wei木聚糖酶的产生条件优化[期刊论文]-吉林农业大学学报2008,30(6)4.刘成.孙中涛.周梅.杜金华.Liu Cheng.Sun Zhongtao.Zhou Mei.Du Jinhua黑曲霉固态发酵苹果渣产木聚糖酶的工艺优化研究[期刊论文]-农业工程学报2008,24(4)5.郑春翠黑曲霉产木聚糖酶生产工艺条件和酶学特性的研究[学位论文]20076.高洁.李军训.肖军.杜金华黑曲霉ASP-12固态发酵木聚糖酶培养条件研究[期刊论文]-饲料工业2006,27(6)引证文献(5条)1.李祝.葛永怡.陈青.周礼红.刘吴娟黑曲霉发酵液抗真菌活性及稳定性研究[期刊论文]-食品研究与开发 2011(7)2.胡玉琪.丁长河固态发酵生产木聚糖酶的研究进展[期刊论文]-中国酿造 2012(9)3.李淑丽.王娇.尹清强.常娟.左瑞雨.郑秋红.王平.王潇.刘俊熙矿物元素和葡萄糖对木聚糖酶活力影响的研究[期刊论文]-江西农业学报 2012(1)4.孙孝梅.黄建忠木聚糖酶微生物发酵生产的研究进展[期刊论文]-台湾农业探索 2012(6)5.方微.单玉萍.李峰.单安山木聚糖酶的作用机理及其在饲料中的应用[期刊论文]-中国饲料 2011(21)本文链接：/Periodical_ahnykx201021007.aspx。

黑曲霉固体发酵产木聚糖酶的研究

黑曲霉固体发酵产木聚糖酶的研究

黑曲霉固体发酵产木聚糖酶的研究作者：王娟王菲高娜刘东波来源：《农业与技术》2012年第08期摘要：本文对一株黑曲霉固体发酵产木聚糖酶的条件进行初步优化，优化因子分别为：Mandel盐、氮源、含水量、培养温度、培养时间、初始pH值，接种量。

利用单因素实验，以木聚糖酶的酶活力为评价指标，测得该菌株产木聚糖酶的最佳培养条件。

在此最佳培养条件下培养，酶活力比优化前提升倍。

关键词：玉米芯；黑曲霉；木聚糖酶；固体发酵；条件优化中图分类号：TQ925文献标识码：A中国年产约3000万吨的玉米芯，然而作为富含纤维素、半纤维素的农业废弃物，除了少量用于生产木糖醇、糠醛等外，绝大部分在田间放火焚烧，既浪费资源又污染环境。

木聚糖是植物半纤维素的最主要成份，其水解产物可应用于饲料、造纸及工业原料生产等多个领域。

因此，寻找高产木聚糖酶系的菌株并深入研究提高菌体产酶活性的方法势在必行。

本文以微生物教研室保存的一株黑曲霉为出发菌株，以玉米芯为主要原料，进行该菌株固体发酵产木聚糖酶的条件优化研究，旨在提高玉米芯的利用率的同时为黑曲霉产木聚糖酶的大规模工业化生产和应用提供参考。

1材料和方法材料菌株黑曲霉菌株（Aspergillus niger），东北师范大学生科院微生物教研室保存；固态基础发酵培养基：麸皮1g，玉米芯9g，含水量15ml，pH值自然。

木聚糖酶酶活定义及酶活力测定方法木聚糖酶酶活力国际单位定义为：标准反应条件下，每分钟生成1umol木糖所需要的酶量（以木聚糖为底物）为1个酶活单位。

酶活检测采用DNS还原糖测定法。

固体发酵粗酶液的制备在培养后的固体发酵物中加入100ml自来水，震荡摇匀，尼龙纱布过滤后，取至离心管中，12000r/min、4℃离心20min除去孢子，10倍稀释后测定酶活。

2结果与分析盐对发酵产酶的影响对照组采用固态基础发酵培养基，实验组在对照组基础上添加Mandel盐溶液（A盐：溶液=10%，B盐：溶液），28℃培养72h，测定并比较酶活力。

黑曲霉发酵产酶研究进展

黑曲霉发酵产酶研究进展

黑曲霉发酵产酶研究进展张熙;韩双艳【摘要】黑曲霉(Aspergillus niger)是曲霉属真菌中的常见种,它生长旺盛、发酵周期短、不产生毒素,是美国FDA认证安全菌种(GRAS)之一,也是重要的酶制剂生产菌种.综述了黑曲霉产纤维素酶、木聚糖酶、蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的研究进展,并展望了其广阔的应用前景.【期刊名称】《化学与生物工程》【年(卷),期】2016(033)001【总页数】4页(P13-16)【关键词】黑曲霉;酶;发酵产酶【作者】张熙;韩双艳【作者单位】华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州510006;华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州510006【正文语种】中文【中图分类】Q939.97黑曲霉(Aspergillus niger)，属半知菌亚门、丝孢纲、丝孢目、丛梗孢科，是丝状真菌的一个常见种，广泛分布于粮食、植物产品和土壤中。

人类运用黑曲霉的历史悠久，早在中国古代，人们就利用黑曲霉制作酱料、酱油、米酒等。

由于黑曲霉生长旺盛、发酵周期短、不产生毒素，被美国FDA认证为安全菌种(GRAS)。

黑曲霉具有很强的外源基因表达能力及高效的蛋白表达、分泌和修饰能力，同时重组子具有很高的遗传稳定性。

随着越来越多的外源蛋白在黑曲霉成功表达，且被证明具有较高的产量和活性，黑曲霉成为了一个重要的酶表达体系，也逐渐成为重要的工业酶制剂生产菌种[1]。

据报道，黑曲霉可生产纤维素酶、木聚糖酶、淀粉酶、蛋白酶、糖化酶、果胶酶、脂肪酶、葡萄糖氧化酶等多种酶。

作者综述了黑曲霉产纤维素酶、木聚糖酶、蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的研究进展，并展望了其广阔的应用前景。

纤维素是地球上分布最广泛的一类碳水化合物，也是最丰富的可再生资源，但因其结构复杂、降解难度大，还未实现有效的转化利用。

纤维素酶由葡聚糖内切酶(EG)、葡聚糖外切酶(CBH)、β-葡萄糖苷酶(β-BG)构成[2]，主要用于水解纤维素的β-1,4葡萄糖苷键，使纤维素分解成短链糖。