茶叶中有效成分的提取以及含量的测定

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一,器材与材料的预处理
1,材料:茶叶,乙醇,蒸馏水;电炉,圆底烧瓶(磨口),铁架台,酒精灯,漏斗,滤纸,滤布,烧杯,量筒,玻棒,旋转减压蒸馏器等。

配置:称取10g茶叶,用200ml的量筒量取80%乙醇200ml
预处理:将茶叶碾碎
二,方法
1,称取茶叶10克揉碎再加80%乙醇100ml在40℃水浴中提取1h。

2,过滤收集滤液,再向滤渣中加入80%乙醇100ml在40℃水浴中提取1h。

过滤
收集滤液,并去滤渣。

3,将2次的滤液混合,减压浓缩至40ml,将乙醇回收。


浓缩也中加等体积氯仿萃取,静置30分钟。

分离,有机
相为咖啡碱(减压蒸馏至15ml回收有机物,将15ml的咖
啡碱溶液于收集图1,收集方法:将残留液 (大约l0~15ml)
倾入蒸发皿中, 烧瓶用少量乙醇洗涤, 洗涤液也倒人蒸
发皿中, 蒸发至近干。

加入4g 生石灰粉, 搅拌均匀, 用
电热套加热(100~120V), 蒸发至干, 除去全部水分。

冷却后, 擦去沾在边上的粉末, 以免升华时污染产物。

将一张刺有许多小孔的圆形滤纸盖在蒸发皿上, 取一只大小合适的玻璃漏斗罩于其上, 漏斗颈部疏松地塞一团棉花。

用电热套小心加热蒸发皿, 慢慢升高温度, 使咖啡因升华。

咖啡因通过滤纸孔遇到漏斗内壁凝为固体, 附着于漏斗内壁和滤纸上。

当纸上出现白色针状晶体时, 暂停加热, 冷至100 ℃左右, 揭开漏斗和滤纸, 仔细用小刀把附着于滤纸及漏斗壁上的咖啡因刮入表面皿中。

将蒸发皿内的残渣加以搅拌, 重新放好滤纸和漏斗, 用较高的温度再加热升华一次。

此时 ,温度也不宜太高, 否则蒸发皿内大量冒烟, 产品既受污染又遭损失。

合并两次升华所收集的咖啡因。

待测定,用高效液相色谱法对咖啡因进行测定。

),水相主要为茶多酚。

4,向水相中加入等体积乙酸乙酯采取分离,水相为色素去掉,有机相减压蒸馏并干燥保存。

三,茶多酚含量的测定
材料:分光光度仪,蒸馏水,酒石酸亚铁溶液,pH7.5磷酸缓冲液
预处理:讲风光光度仪设定波长为540nm处预热
配置:1,酒石酸亚铁溶液:称取1g (准确至0.0001g) 硫酸亚铁(GB 664-77)和5g (准确至0.0001g)酒石酸钾钠(GB 1288-81),用水溶解并定容至1L。

2,pH7.5磷酸缓冲液:称取23.377g磷酸氢二钠(GB 1263-77),加水溶解后定容至1L;称取9.078g磷酸二氢钾(GB 1274-77),加水溶解后定容至1L。

取方法:上述的磷酸氢二钾溶液85ml和磷酸二氢钾溶液混合均匀。

取茶多酚0.1g加10水配置城溶液。

取茶多酚溶液1ml+水4ml+5ml酒石酸业铁溶液+缓冲液于25ml容量瓶中
用10mm比色杯,在波长540nm处,以试剂空白溶液作参比,测定吸光度(A)
Mg=A1.957/0.5。