基因工程复习题
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1、就克隆一个基因(DNA片段)来说，最简单的质粒载体也必需包括三个部分：_______________、_____________、______________。
另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子量。
答案：含有复制起点；选择标记：克隆位点
2、基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。
3、基因工程的基本程序包括、、、
、等方面。
答：DNA 制备、体外DNA 重组、遗传转化、转化细胞的筛选
4、RNA分子经凝胶电泳后按大小不同分开，然后被转移到一张硝酸纤维素膜(尼龙膜)
上，同一放射DNA探针杂交的技术称_______________________。
答：Northern印迹
5、在________________技术中，DNA限制性片段经凝胶电泳分离后，被转移到
硝酸纤维素膜(或尼龙膜)上，然后与放射性的DNA探针杂交。
Southern印迹
6、引物在基因工程中至少有4个方面的用途：、、
、。
答：合成探针；合成cDNA；用于PCR反应；进行序列分析
7、受体细胞的感受态是___________________________________。
接受外源DNA的生理状态
8、基因工程中有三种主要类型的载体 质粒DNA 、病毒DNA 、质粒和病毒DNA 杂合体。
9、 由于不同构型的DNA 它们在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率也不同。
答：插入EB 的量不同
10、就克隆一个基因(DNA片段)来说，最简单的质粒载体也必需包括三个部分：、、另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子量。
答：复制起点、选择标记、多克隆位点
11、在分离DNA时要使用金属离子螯合剂，如EDTA和柠檬酸钠等，其目的是。
答：螯合Mg2+离子，抑制核酸酶的活性
12．用乙醇沉淀DNA时，通常要在DNA溶液中加人单价的阳离子，如NaCl和NaAc，
其目的是。
答：中和DNA分子的负电荷，增加DNA分子间的凝聚力
13、目前，在重组体的筛选中，已经发展了许多构思巧妙、具有极高准确性的筛选方法。
大致可以分为：、、
、。
答：遗传学法、物理筛选法、核酸杂交法、表达产物分析法将含有一个mRNA的DNA拷
14、是自然界存在的植物基因工程的天然载体。
答：Ti 质粒
15、基因工程中把那些具有识别（双链DNA 分子）中的某种特定核苷酸序列 并由此切割DNA 双链结构的内切核酸酶统称为限制性内切核酸酶。
16、黏粒(cosmid)是质粒—噬菌体杂合载体 它的复制子来自 COS 位点序列来自最大的克隆片段达到 45 kb。
答：质粒，λ噬菌体
17、在分离DNA 时要戴手套操作原因是答：手上常有核酸酶
18、限制性内切酶通常保存在 50% 浓度的甘油溶液中。
19、cDNA 技术是进行真核生物基因克隆的一种通用方法因为它可以用 通过反转录合成一个双链的、的基因，因而有利于在原核细胞中进行功能表达。
答：mRNA 为模板，无内含子。
20、为了提高重组DNA 分子对E. coli 的转化效率通常可采取处理和 42℃处理2min 。
答：CaCl2
21、根据Northern 印迹的结果可以说明答：外源基因是否进行了转录。
22、核酸杂交探针可分为两大类答：DNA 探针和RNA 探针。
23、能够与特定DNA 序列结合的放射性DNA 片段称为。
答：探针
24、技术是基于互补的DNA 单链分子能够形成稳定双螺旋结构的天然特性而发展起来的。
答：核酸杂交。
