微生物实验室建设PPT演示幻灯片共58页

功能
微生物实验室在医学、生物科学、环境科学等领域发挥着重要作用，如病原微 生物的检测与鉴定、抗生素的筛选与研发、环境微生物的监测与治理等。
微生物实验室的重要性
保障公共卫生安全
通过对病原微生物的检测和鉴定， 及时发现和控制传染病的爆发和 传播，保障公众的健康和安全。
推动生物科学发展
微生物实验室是进行微生物学基础 和应用研究的重要场所，为新药物、 新疫苗的研发提供技术支持和保障。
仪器设备与配置
基本仪器
包括显微镜、培养箱、高 压蒸汽灭菌器等常用微生 物实验仪器。
专用仪器
根据实验需求配置如PCR 仪、全自动生化分析仪等 专用仪器。
仪器维护与校准
建立仪器维护和校准制度， 确保仪器的正常运行和准 确性。
实验技术与方法
基本实验技术
掌握微生物培养、分离、鉴定等基本实验技术。
分子生物学技术
阐述了微生物实验室质量控制的必要性，介绍了实验室内部质量控制和外部质量评估的方法和标准， 强调了持续改进的重要性。
学员心得体会分享
知识收获
通过本次课程，学员们对微生物 实验室的基本能力和要求有了更 深入的了解，掌握了微生物检测 与鉴定的基本技术和方法。
技能提升
通过实践操作和案例分析，学员 们的实验技能和解决问题的能力 得到了提升，对微生物实验室工 作有了更全面的认识。
微生物鉴定
通过观察微生物的形态特征、生理生化特性以及血清学反应等， 对微生物进行种类鉴定。
药物敏感性试验及结果解读
药物敏感性试验意义
药物敏感性试验方法
结果解读
了解微生物对抗菌药物的敏感性，指 导临床合理用药。
常用的方法包括纸片扩散法、稀释法等。 通过测定抑菌圈直径或最低抑菌浓度 （MIC）等指标，判断微生物对药物的 敏感性。

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微生物实验室的分区
一般分为下列区域: 接样室、样品保存室、培养基配制室、洁净室、生化室 、培养室、仪器室和洗刷消毒室，此外还有办公室。
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实验室核心工作间的照度不低于350 lx,其他区域照度不低于 200 lx，宜采取吸顶式防水洁净照明灯。
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天平
最大量程：100g、120g等 可读性精度：0.1mg
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精密电子稀释仪
样品量：0.5-1000g（依靠系数调整） 稀释系数：2-1000 液流速度：950ml/min 重量误差精度：<1%
能够准确释放稀释液的重量。
借助经过消毒的均质袋，可对样本进行 准确的稀释，最大程度地减少手工接触 操作，避免样品污染。
实验室的温度宜控制18℃~26℃范围内。
实验室的相对湿度宜控制30%~70%范围内。
在安全柜开启情况下，核心工作间的噪声应不大于68 dB(A)。
------GB 19489-2008 实验室 生物安全通用要求
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病原微生物分类
国家根据病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度， 将病原微生物分为四类： 第一类 指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我 国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。（天花病毒）
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10
•10
洁净室分级
洁净度级别 100级
尘粒最大允
≥0.5μm尘粒数
浮游菌/立方米
3,500

§(1)特殊营养物质---- ? 生长因子 § 如：培养乳酸杆菌需要在培养基中添加维生
素 § (2)pH值 § 如:培养霉菌需酸性、培养细菌需中性或微碱
性 § (3)氧气的含量 § 如:培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件
•练习
练习1（多项选择）
§ 1、下列细菌中，能利用含碳无机物作碳源的是 A
§ A 光合细菌 B 根瘤菌
•②有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨 基酸等 ⑶.作用：•主要用于合成蛋白质、核酸及含N的代谢 产物。
•3.生长因子
•⑴.概念：•微生物生长不可缺少的微量有机物。 •⑵.作用：酶和核酸的组成成分。
•⑶.常见的生长因子：
•维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。
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微生物的实验室培养
2.培养基内所需的其他条件
§ C 微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见 的单个细菌
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微生物的实验室培养
▪ 3.分类
§ (1)按物理状态分 液体培养基 固体培养基 ——加入凝固剂（如琼 脂）
•固体培养基：菌落，菌苔
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微生物的实验室培养
•液体培养基：
•表面生长
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•均匀混浊生长
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微生物的实验室培养
•几 种 菌 落 及 其 形 态
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微生物的实验室培养
•菌 落
•细菌的菌落特 征因种而异
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微生物的实验室培养
细菌的营养类型
§ 根据细菌所利用的能源和碳源的不同， 将细菌分为两大营养类型。
§ 自养菌（autotroph）
§ 异养菌（heterotroph）
分离固氮菌： 分离自养型微生物：

稀释涂布平板法
涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结 合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想， 第2步应如何进行无菌操作？
应从操作的各个细节保证“无菌”。例如， 酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触 任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。
微生物的恒温培养
微生物的恒温培养
微生物的恒温培养
3类。
（5）不论何种培养基，在各种成分都溶化后
分装前，要进行的是
。 调整pH
（6）右表中各成分重量确定的原则
是 依微生物的生长需要确定 。 （7）若右表培养基用于菌种鉴定，应该
增加的成分
琼脂（或凝固。剂）
一、课题目标：
了解有关微生物及培养基的基础知识，进 行无菌技术的操作，进行微生物的培养。
二、课题重点和难点：
如图是酵母菌电子显微 镜下的形态结构
青霉
生殖 孢子生殖
直立菌丝 营养菌丝
腐生生活
（二）培养基
培养基（培养液）是由人工方法配制
而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养
液。
1.培养基的类型
（1）按物理状态分：固体培养基和液体培养基、
半固体培养基。 （2）按功能分：选择培养基和鉴别培养基。
（3）按成分分：天然培养基和合成培养基。
芽孢又小又轻，可以随风飘散。
平板划线的操作方法
C是正确的，因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌；
且体内一般不含有叶绿素.
寄生菌 大部分病原菌
消毒与灭菌的概念及两者的区别
（2）若不慎将过量NaCl加入培养基中。
有的碳源同时是能源，如葡萄糖；
掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。

显 微 镜
（三）常用物品及仪器
玻璃器皿
培养基
革 兰 氏 染 色 液
高 压 灭 菌 锅
培养箱
冰箱
无菌室
实验室内布置
实验室布置
微生物检验室常用器皿
名称
规 格
试 管
18×180mm，15×150mm，10×100mm，小倒管
培养皿
常用的培养皿直径为900mm，高为15mm
各种容量
试剂瓶
各种容量(白色和棕色)
滴 瓶
一般用125mL(白色和棕色)
载玻片
2.5cm×7.5cm，厚0.01～0.13cm
盖玻片
1.8cm×1.8cm，厚0.17cm
干燥器
不同直径的普通干燥器
其他
另外，需具备电源的连续性供应，如配发电机组或不间断电源（UPS）。
充足供水：
实验室用水和消防用水
洗手池的配置
微生物用水应符合《GB/T 6628-2008 分析实验室用水规格和实验方法》中一级水的要求。
有实验室用水制备系统或装置。
通风系统：
三级和四级生物安全实验室不得采用回风系统。应安装独立的送排风系统以控制实验室气流方向和压力梯度。
（3）无菌室的灭菌消毒 熏蒸：甲醛、乳酸、硫磺 喷雾：5％石炭酸喷雾 紫外线照射：30～60min。
（4）无菌室工作规程 无菌室灭菌； 洗手、准备、浸洗 清点物品、喷雾 手酒精消毒 工作：注意安全。 工作结束：收拾台面、喷雾、紫外线灭菌。
5、恒温培养室 内室面积：3.2 * 4.4＝14m2 外室面积：3.2 * 1.8＝6m2 高：2.5m左右为宜 内外室都应在室中央安装紫外线灯，以供灭菌用。
五、食品微生物检验室的布局与各功能室（区）介绍

洗涤、高压、制水室 实验准备室 试剂配制室
实验材料储备室 培养观察室
淋浴、更衣室 药物、紧急冲淋装置
温度控制室
菌种保管室
现代生物实验室设计理念
1、充分利用周围环境，尊重和保护环境； 2、实验室的标准和模块化设计； 3、生物技术发展趋势； 4、促进最佳的科学研究能力； 5、合理使用空间（核心区和非核心区）； 6、室外内外环境的人性化处理； 7、实验室的安全和保安； 8、现代化生物实验www.c室cg-s建筑相关规范与标准。

洁净实验室结构单元设计要求
不
窗
锈
钢 边 台
视窗
二更
一更
传 递 窗
走廊
边台
培养观察室

水池
落
地
仪
器

洁净实验室技术参数（1）
1、噪声：≤50dB 2、温/温度：
温度
冬季 夏季
16~20 18~28
℃
℃
湿度 冬季 夏季 30~50 60~70

更2 （+）
洁净室 （++）
3~4
排
级差
风 机
回风
洁净实验室气流流型设计
1、气流流型应满足空气洁净度等级的要求。 空气洁净度等级要求为1~4级时，应采用垂直 单向流。
2、送风、回风和排风系统的启闭应联锁。 正压洁净室联锁程序为先启动送风机，再
启动回风机和排风机；关闭时联程序应相反。 1~4级单向流平均风速0.3~0.5 m/s,向外气流 速度为0.1 m/s。
洁净实验室技术参数（2）
3、新风量：要满足洁净室最小新风量、满 足洁净室正压要求的最小新风量、满足 每个人所需最小新风量之和。 保证供给 洁净室内每人每小时的新鲜空气量不小 于40m3。

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排
级差
风 机
回风
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为深入学习习近平新时代中国特色社 会主义 思想和 党的十 九大精 神,贯彻 全国教 育大会 精神,充 分发挥 中小学 图书室 育人功 能
洁净实验室气流流型设计
1、气流流型应满足空气洁净度等级的要求。 空气洁净度等级要求为1~4级时，应采用垂 直单向流。 2、送风、回风和排风系统的启闭应联锁。 正压洁净室联锁程序为先启动送风机，再启 动回风机和排风机；关闭时联程序应相反。 1~4级单向流平均风速0.3~0.5 m/s,向外气流 速度为0.1 m/s。
实验室建筑与装修的指导思想
1、人文环境和实验环境并重：必须满 足人的生理、心理、健康学及美学的需要；安 全；要有现代化实验室人文文化有关健康学、 美学等设计理念。
2、标准与统一规划相结合：达到安静、 整洁、明亮、庄重和迷人效果。
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为深入学习习近平新时代中国特色社 会主义 思想和 党的十 九大精 神,贯彻 全国教 育大会 精神,充 分发挥 中小学 图书室 育人功 能
现代生物实验室设计理念
1、充分利用周围环境，尊重和保护环境； 2、实验室的标准和模块化设计； 3、生物技术发展趋势； 4、促进最佳的科学研究能力； 5、合理使用空间（核心区和非核心区）； 6、室外内外环境的人性化处理； 7、实验室的安全和保安； 8、现代化生物实验室建筑相关规范与标准。4
为深入学习习近平新时代中国特色社 会主义 思想和 党的十 九大精 神,贯彻 全国教 育大会 精神,充 分发挥 中小学 图书室 育人功 能
实验室功能区域模块化设计
非实验室区域
实验室区域
办 公 室
信 息 室
档 案 资 料 室
样 品 室
卫 生 与 清 洁 室

1.接种： Nacl 5g
⑵营养全面、浓度适宜、比例恰当选择合适的方法。
⑴平板划线法： 培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。
1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方
微生物生存的环境和营养物质
⑵稀释涂布平板法： 及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。
（2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 牛肉膏、蛋白胨易吸潮，要快、加盖
（3） 实验操作者的双手 答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又
可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 121℃、15～30min
二.无菌技术：防止外来杂菌的污染 1.消毒与灭菌：
平板划线法
平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连 续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的 表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁 殖而来的肉眼可见的子细胞群体。
1、为什么在操作的第一步以及每次划线之前都 要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧 接种环吗？为什么？
操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存 在的微生物污染培养物
6.倒平板：
约50℃
倒平板
灼烧灭菌，
防止瓶口的微生物污染培养基
防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染
1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时， 才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温 度？
答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，
感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可 以进行倒平板了。
2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？
3．平板划线法和稀释涂布平板法的比较
牛肉膏、称量纸 、少量水加热溶解