天然药物化学鉴别反应总结

醌类化合物不同颜色反应鉴别特点及意义
香豆素显色反应的鉴别
特点
和意
义
新的酚羟基，然后再用Gibbs 或Emerson 反应加以鉴别，如为阳性反应表示C-6位无取代。

木脂素没有特征性的理化检识方法，常用的检识方法主要是针对木脂素结构中的功能基如酚羟基、亚甲二氧基及内酯结构等而进行的检识。

1．三氯化铁反应——检查酚羟基
2．Labat 反应（没食子酸、浓硫酸）——检查亚甲二氧基（阳性呈蓝绿色）
3．Ecgrine 反应（变色酸、浓硫酸）——检查亚甲二氧基（阳性呈蓝紫色）
3-OH、后黄色减褪，若有3-OH，则加枸橼酸后黄色不变，因此可用于区分黄酮和黄酮醇。

用的存在。

二酚羟基或兼有3-羟基、4-酮基或5-羟基、4-酮基结构。

而碱式醋酸铅的沉淀能力要大得多，一般酚类化合物均可与
②黄酮醇类在碱液中先呈黄色，通入空气后变为棕色。

③分子结构中有邻二酚羟基或3，4’-二羟基取代时，在碱液中不稳定，易被氧化，
按作用部位分：
作用于五元不饱和内酯
）、
C-1
7位
不
饱和内酯环的颜色反应
甲型强心苷的特征反应，因为五元不饱和内酯环上的双键位移产生C-22活性亚甲
基乙型强心苷为六元不饱和内酯环，故不能反应。

T（Girard T）或吉拉尔P（Girard P）两种试剂。

借此与不含羰基的皂苷元分离。

天然药物化学专题汇总
用于甾体中
如：螺甾烷醇和呋甾烷醇的鉴别
7.分类
糖类单糖：五碳醛糖、六碳醛糖、六碳酮糖、甲级五碳醛糖、支碳链糖、氨基糖、去氧糖、糖醛酸、糖醇、环醇低聚糖：蔗糖、棉子糖
多聚糖：淀粉、纤维素、果聚糖、半纤维素、树脂、黏液质
苯丙素类苯丙素类
香豆素类简单香豆素类、呋喃型香豆素（补骨脂）、吡喃型香豆素、其他香豆素
木脂素类二苄基丁烷型、二苄基丁内酯型、芳基萘型、四氢呋喃型（7-7’、7-9’、9-9’）骈双四氢呋喃型、联苯环辛烯型
醌类苯醌、萘醌（紫草）、蒽醌（大黄素型和茜草素型）、菲醌
黄酮黄酮类黄酮醇类二氢黄酮类二氢黄酮醇类异黄酮类查耳酮类二氢查耳酮类黄烷醇类
花青素类
萜类四环三萜达玛烷型、羊毛脂烷型、环阿屯烷型、甘遂烷型、葫芦烷型、楝烷型五环三萜齐墩果烷型、乌苏烷型、羽扇豆烷型、木栓烷型
甾体类C21甾类、强心苷类（甲型强心苷和乙型强心苷）、甾体皂苷类、植物甾醇、昆虫变态激素、胆酸类生物碱。

天然药物化学总结1、溶剂提取法的基本原理：是根据 “相似者相溶”这一原理进行的，通过选择适当溶剂和方法将中药中的化学成分从药材中提取出来，溶剂法提取中药有效成分常用的方法，如浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法、连续回流提取法2、根据物质在两相溶剂中的分配比不同进行分离3、根据物质的吸附性差别进行分离4、根据物质分子大小差别进行分离：①分离天然化合物常用的方法有凝胶过滤法和膜分离技术；②常用的凝胶有葡聚糖凝胶 和羟丙基葡聚糖凝胶5、根据物质解离程度不同进行分离：糖的化学性质：氧化反应；糠醛形成反应（Molish 反应）；羟基反应：醚化反应（甲基化）、酰化反应（酯化反应）、缩酮和缩醛化反应；羰基反应；和硼酸络合反应。

糖的提取分离②分离：活性炭柱色谱、 。

2、糖的鉴定和糖链结构的测定 。

1.苯丙素定义：一类含有一个或几个C6-C3单位的天然成分。

1.香豆素的基本母核：香豆素（香豆精）是具有苯并 -吡喃酮母核的一类化合物的总称。

环上常有-OH 、OCH 3、异戊烯基等取代基。

(1).简单香豆素类(2).呋喃香豆素类(furocoumarins)(线型和角型)(3).吡喃香豆素类(pyranocoumarins) (线型和角型)香豆素的理化性质：（一）性状 UV 下显蓝色荧光 （二）溶解性（三）碱水解反应和内酯性质 异羟肟酸铁反应（识别内酯） （四）呈色反应 Gibb 反应和Emerson 反应有游离酚羟基，且其对位无取代者——呈阳性 提取分离：1.酸碱分离法 内酯遇碱能皂化，加酸能恢复的性质。

O O 23456788a 4a O O H 3CO OCH 3O2.层析方法 木脂素（lignans ）：一类由苯丙素氧化聚合而成的天然产物。

理化性质：溶解性：游离——亲脂性，难溶水，溶苯、氯仿等 成苷——水溶性增大 挥发性：多数不挥发，少数有升华性质 旋光性：大多有光学活性，遇酸易异构化。

第四章 醌类化合物定义：指分子内具有不饱和环二酮的结构或容易转变成这样结构的天然有机化合物。

醌类化同颜色反应鉴别特点及意义香豆素显色反应的鉴别特点和意义判断香豆素的C－6位是否有取代基的存在，可先水解，使其内酯环打开生成一个新的酚羟基，然后再用Gibbs或Emerson反应加以鉴别，如为阳性反应表示C-6位无取代。

木脂素没有特征性的理化检识方法，常用的检识方法主要是针对木脂素结构中的功能基如酚羟基、亚甲二氧基及内酯结构等而进行的检识。

1．三氯化铁反应——检查酚羟基2．Labat反应（没食子酸、浓硫酸）——检查亚甲二氧基（阳性呈蓝绿色）3．Ecgrine反应（变色酸、浓硫酸）——检查亚甲二氧基（阳性呈蓝紫色）表6-3 黄酮类化合物的还原显色反应3-OH、5-OH的存在。

若有3-OH和（或）5-OH，加二氯氧锆显黄色。

若只有5-OH，加枸橼酸后黄色减褪，若有3-OH，则加枸橼酸后黄色不变，因此可用于区分黄酮和黄酮醇。

用于鉴别3-OH的存在。

二酚羟基或兼有3-羟基、4-酮基或5-羟基、4-酮基结构的化合物反应生成沉淀。

而碱式醋酸铅的沉淀能力要大得多，一般酚类化合物均可与其发生沉淀反应。

①二氢黄酮易在碱液中开环，转变成相应的异构体查耳酮，显橙色至黄色。

②黄酮醇类在碱液中先呈黄色，通入空气后变为棕色。

③分子结构中有邻二酚羟基或3，4’-二羟基取代时，在碱液中不稳定，易被氧化，产生沉淀。

1）、甾体母核的显色反应图9-3 强心苷的显色反应2）、C-17位不饱和内酯环的颜色反应 甲型强心苷的特征反应，因为五元不饱和内酯环上的双键位移产生C-22活性亚甲基乙型强心苷为六元不饱和内酯环，故不能反应。

3）、α-去氧糖反应 作用于五元不饱和内酯环分离含有羰基的甾体皂苷元，常用季铵盐型氨基乙酰肼类试剂，如吉拉尔T（Girard T）或吉拉尔P（Girard P）两种试剂。

借此与不含羰基的皂苷元分离。

氨基酸的显色反应蛋白质的显色反应表10-3 生物碱沉淀反应类型及特点表3-2 苷的显色反应。

名称试剂条件阳性反应鉴别结构碘化铋钾KBiI4稀酸水溶液黄至橘红色沉淀生物碱碘化汞钾K2Hg4同上白色沉淀同上碘-碘化钾KI-I2同上红棕沉淀同上硅钨酸SiO.12WO3.nH2O同上淡黄或灰白同上磷钼酸H3PO4.12MO3.nH2O同上白色，黄褐沉淀同上苦味酸2,4,6-三硝基苯酚酸或中性黄色同上雷氏铵盐NH4[Cr（NH3）2(SCN)4]同上红色同上Molishα-萘酚-浓硫酸浓硫酸产生有色化合物糖硼酸（钼酸，碱土金属）络合邻二羟基Feigl醛类及邻二硝基苯碱，加热紫色化合物醌类无色亚甲蓝无色亚甲蓝蓝色苯醌，萘醌专用显色剂Bornträger碱单OH、非邻，橙-红；1,4，紫；邻二，蓝羟基蒽酮Kesting-Craven 活性次甲基（乙酰乙酸酯etc）碱性蓝绿色或蓝紫色苯醌，萘醌专用显色剂与金属离子乙酸镁蒽醌：1,4 紫；1，2蓝；其他 橙-红/二氢黄酮（醇），天蓝色荧光；黄酮（醇），异黄酮-（橙）黄，褐色蒽醌OH基取代/黄酮类区别对亚硝基二甲苯胺对亚硝基二甲苯胺紫绿蓝灰等蒽酮异羟月亏酸铁异羟月亏酸铁碱-酸红色内酯三氯化铁三氯化铁绿，墨绿沉淀。

蓝（黑）（沉淀）水鞣；绿→缩合酚羟基重氮化试剂红，紫红酚羟基（邻对位无取代）Gibb's反应2,6-二氯苯醌氯亚胺（gibb's试剂）碱蓝色酚羟对位无取代Emerson Emerson试剂（4氨基安替比林和铁氰化钾）红色酚羟对位无取代Labat反应浓硫酸-没食子酸蓝绿色亚甲二氧基盐酸-镁粉浓盐酸-镁粉橙红-紫红（少数蓝）NaBH4NaBH4,1min，浓酸紫，紫红二氢黄酮三氯化铝三氯化铝颜色加深（紫外天蓝荧光）酚羟基锆盐-枸橼酸ZrOCl2-枸橼酸3OH,5OH鲜绿色，加枸橼酸5OH 褪色3/5OH氨性氯化锶SrCl2，氨气绿色-棕色-黑色沉淀邻二酚羟基乙酸铅（碱性-酚类都可）乙酸铅黄-红色沉淀邻二、3/5羟基碱性黄酮→橙；查耳酮、橙酮、二氢△→（紫）红；黄酮醇空气→棕色；邻三酚→暗绿纤维沉淀与蛋白质蛋白质沉淀鞣质与重金属盐醋酸铅等NaOH溶液沉淀鞣质与生物碱生物碱同上同上与三氯化铁三氯化铁参照18与铁氰化钾氨溶液铁氰化钾氨溶液深红转棕双键加成HX,Br2，亚硝酰氯（Tilden试剂）结晶（溴红色退去），紫蓝绿含薁类双键伯胺、仲胺常用六氢吡啶结晶萜烯的亚硝基衍生物DA反应顺丁烯二酸酐结晶共轭二烯亚硫酸氢钠加成亚硫酸氢钠结晶（加成物，酸或碱下复原）醛，甲基酮或环酮C<8吉拉德试剂加成吉拉德试剂（带季铵的酰肼）水溶加成物(酸下还原）含羰基萜硝酸银的氨溶液硝酸银的氨溶液银镜反应醛基等还原2,4-二硝基苯/氨基脲/羟胺结晶形沉淀醛酮无水甲醇-浓硫酸无水甲醇-浓硫酸紫或蓝薁类乙酸酐-浓硫酸乙酸酐-浓硫酸三萜：黄-红/甾体：红-紫-蓝-绿-污绿甾体/三萜母核五氯化锑五氯化锑的三氯甲烷60°-70°蓝色，灰蓝，灰紫同上三氯乙酸三氯乙酸100℃/60℃红色渐变紫同上三氯甲烷-浓硫酸三氯甲烷-浓硫酸硫酸→红/紫；三氯甲烷 绿荧同上冰乙酸-乙酰氯两者+氯化锌淡红/紫红同上legal反应亚硝酰铁氰化钾深红/蓝活性亚甲基raymond反应间二硝基苯紫红/蓝同上Kedde反应3,5-二硝基苯甲酸紫红/红同上Baljet碱性苦味酸橙红/红同上K-K反应三氯化铁→浓硫酸蓝2-去氧糖呫吨氢醇呫吨氢醇试剂水浴红2-去氧糖A试剂红色F环闭环或开环E试剂黄色F环开环原理应用酸下产生难溶复盐或络合物生物碱鉴定同上同上同上同上同上同上及含量测定同上同上同上同上同上同上及分离季铵碱浓硫酸下，糖形成的糠醛衍生物与α-萘酚缩合成有色化合物糖，苷p95糖（呋喃糖>单糖>吡喃糖）苷醌起传递电子媒介作用醌类蒽醌化合物区别蒽醌上OH基苯醌，萘醌专用显色剂蒽醌OH基取代/黄酮类区别羰基对位C-H2活泼氢蒽酮定性碱下开环，与盐酸羟胺缩合生成异羟亏酸，酸下与铁离子络合香豆素鉴别香豆素/黄酮酚OH/挥发油中酚类（蓝、蓝紫、绿）香豆素C6无取代酚羟对位无取代木质素中特殊基团查耳酮，花色素，橙酮酸下变色黄酮（醇），二氢黄酮（醇）阳性被NaBH4还原与锆盐络合黄酮类羟基萜烯/挥发油与脂溶性非羰基萜分离挥发油羰基挥发油羰基挥发油羰基甾体/三萜母核鉴别及区别同上甾体/三萜母核鉴别及区别同上同上活性亚甲基同上同上同上强心苷强心苷甾体皂苷区别。

糖 邻二羟基--银镜反应、斐林反应、硼酸形成络合物糠醛衍生物+芳胺或酚类 缩合 显色 Molish 反应：样品+浓硫酸+α萘酚-------棕色环（多糖、低聚糖、单糖、苷类均阳性） 香豆素：试剂：Gibb ——2,6-二氯(溴)苯醌氯亚胺Emerson ——氨基安替匹林和铁氰化钾条件：有游离酚羟基，且其对位无取代者——呈阳性异羟肟酸铁反应（识别内酯）醌类 颜色反应①Feigl 反应：醌类化合物在碱性加热条件下与醛类及临二硝基苯反应生成紫色化合物（反应前后醌类化合物无变化，只起到电子传作用）②Bornträger 反应：羟基蒽醌类遇碱显红-紫红色羟基醌类遇碱颜色加深，呈橙、红、紫红及蓝色蒽酚、蒽酮、二蒽酮需氧化成羟基蒽醌后才显色③无色亚甲蓝反应：苯醌及萘醌，用于PC,TLC 的喷雾剂，显蓝色斑点④与活性次甲基试剂的反应：苯醌及萘醌类：醌环上有未被取代的位置，可在氨碱性条件下与活性次甲基试剂（乙酰醋酸酯、丙二酸酯等）反应生成蓝绿或蓝紫色。

⑤与金属离子的络合反应：具有α-OH 或临二酚OH 的蒽醌，与Pb2+、Mg2+络合显色与醋酸镁络合具有一定的颜色-----鉴定黄酮类HCl-Mg 反应含黄酮（醇）、二氢黄酮（醇） （+）橙红色-紫红色查耳酮、橙酮、黄烷（醇）类 （-）不显色操作方法：1ml 样品 + Mg 粉 + 几滴浓HCl（花色素及部分橙酮、查耳酮在浓盐酸中会变色，故需做对照）香豆素GibbEmerson 试剂与酚羟基对位活性氢缩合蓝色红色铝盐：1% AlCl3或Al （NO2）3 黄色定性、定量铅盐：1%醋酸铅或碱式醋酸铅黄~红色沉淀锆盐：2%ZrOCl2的甲醇溶液黄色游离的3，5-羟基锆-枸橼酸反应：黄绿色荧光镁盐：二氢黄酮（醇）类天蓝色5-酚羟基色泽更明显氯化锶：氨性甲醇溶液（具有邻二酚羟基）绿色~棕色~黑色沉淀三氯化铁：酚类显色剂三氯化铁-铁氰化钾碱性试剂显色反应：（碱：氨蒸汽可逆；碳酸钠水溶液不可逆）二氢黄酮类开环橙色~黄色黄酮醇类黄色~棕色（通入空气）其他黄酮无次反应含有邻二羟基或3,4’-二羟基取代的黄酮类不稳定易氧化黄色~深红色~绿棕色萜类不饱和萜类与亚硝酰氯反应;生成的氯化亚硝基衍生物多呈蓝色至绿色结晶挥发油功能团的鉴定：酚类：三氯化铁乙醇溶液——蓝色、蓝紫或绿色羰基化合物：硝酸银氨溶液——银镜反应——醛类挥发油的乙醇溶液+2,4-二硝基苯肼、氨基脲、羟胺等试剂——结晶性衍生物沉淀——醛或酮类不饱和化合物和薁类衍生物：挥发油的三氯甲烷+溴的三氯甲烷溶液——红色褪去——含有不饱和化合物，继续滴加，如果产生蓝、紫、绿——含有薁类化合物挥发油的无水甲醇溶液加浓硫酸——蓝色、紫色——含有薁类衍生物内酯类化合物：挥发油的吡啶溶液+亚硝酰氰化钠及氢氧化钠溶液——出现红色并逐渐消失——含有不饱和内酯类化合物三萜化合物（萜类）显色反应强心苷：1）甾体母核颜色反应与三萜类相同（但全饱和的甾体、C3无羟基的呈阴性）2）不饱和内酯环产生的反应：样品硼酸草酸枸橼酸黄色并有绿色荧光黄色，无荧光丙酮3) 2-去氧糖产生的反应：A Keller-Kilianli反应强心苷Fe3+-冰醋酸溶液要有游离2-去氧糖或能水解出2-去氧糖的强心苷才发生反应，醋酸层渐呈蓝色。

Molish反应--是糖和苷类的检识反应。

样品+浓硫酸+a萘酚=界面处紫色环。

碳苷和糖醛酸与Molish阴性。

Smith降解—检测糖的种类，连接方式，氧环大小·特点：反应条件温和、易得到原苷元适用：苷元不稳定的苷和碳苷，不适合苷元上有邻二醇羟基或易被氧化的基团的苷。

样品（含稀醇）+ NaIO4=糖开裂成醛+ NaBH4=伯醇，再调pH=2，放置。

Smith裂解获得连一个醛基的苷元异羟肟酸铁反应---鉴定内酯环的存在：碱性条件下，香豆素内酯开环，并与盐酸羟胺缩合成异羟肟酸，再在酸性条件下与三价铁离子络合成盐而显红色。

酚羟基反应：具酚羟基取代的香豆素类在水溶液中可与三氯化铁试剂络合而产生不同的颜色。

酚羟基的对位未被取代，6-位上没有取代，内酯环碱化开环后，可与Gibb’s试剂、Emerson试剂反应。

Gibb’s反应：2,6-二氯(溴）苯醌氯亚胺试剂蓝色。

Emerson反应： 2%的4-氨基安替匹林和8%的铁氰化钾试剂红色。

.Feigl反应碱性加热与醛类及邻二硝基苯紫色化合物。

无色亚甲基蓝显色反应—苯醌及萘醌类的专用显色剂（蓝色斑点）与蒽醌区别。

Borntrāger`s反应，羟基醌碱性溶液颜色加深，多呈橙，红，紫红色，蓝色。

活性次甲基试剂的反应（K-C法）苯醌及萘醌类环上有未被取代的位置氨碱性 ==蓝绿色或蓝紫色。

与金属离子的反应（α-酚羟基、邻位二酚羟基；Pb2+,Mg2+）。

盐酸-镁(锌)粉反应黄酮(醇) 二氢(醇)红色至紫红色异黄酮、查尔酮无色四氢硼钠(钾)反应---二氢（醇）专属反应（红色、紫红色）锆盐-枸椽酸显色反应。

区别3，5-OH 3-OH+ZrOCl2黄色褪5-OH+ZrOCl2黄色不褪氯化锶(SrCl2)。

具邻二酚羟基生成绿-棕色、黑色沉淀Sabety反应：挥发油1 滴→1ml氯仿＋5%溴的氯仿溶液→产生蓝紫色或绿色与Ehrlich试剂(对-二甲胺基苯甲醛浓硫酸)反应产生紫色或红色浓硫酸-醋酐（L-B反应）：三萜-红甾体-绿三氯化锑反应：三萜显黄色、灰蓝、灰紫斑点，UV下蓝紫色荧光。

天然药物化学重点总结1、主要生物合成途径醋酸——丙二酸（AA-MA）：脂肪酸、酚类、蒽酮类脂肪酸：碳链奇数：丙酰辅酶A、支链：异丁酰辅酶A、α-甲基丁酰辅酶A、甲基丙二酸单酰辅酶A、碳链偶数：乙酰辅酶A甲戊二羟酸途径（MVA）桂皮酸途径和莽草酸途径氨基酸途径复合途径2、分配系数：两种相互不能任意混溶的溶剂K=C/ C（C 溶质在上相溶剂的浓度、C溶质在下相溶剂的浓度） UL UL3、分离难易度：A、B两种溶质在同一溶剂系统中分配系数的比值β=K/K （β>100一次萃取分离；10<β<100萃取10-12次；β<2一百以上；β=1不能分离） AB --+4、分配比与PHPH=pKa+lg[A]/[HA](pKa=[A][HO]/[HA]) 35、离子交换树脂阳离子交换树脂：交换出阳离子，交换碱性物质阴离子交换树脂：交换出阴离子，交换酸性物质1、几种糖的写法：D-木糖（Xyl）、D-葡萄糖（Glc）、D-甘露糖（Man）、D-半乳糖（Gal）、D-果糖（Flu）、L-鼠李糖（Rha）2、还原糖：具有游离醛基或酮基的糖非还原糖：不具有游离醛基或酮基的糖3、样品鉴别：样品+浓HSO+α-萘酚—?棕色环 244、羟基反应：醚化反应（甲醚化）：Haworth法—可以全甲基话、Purdic法—不能用于还原糖、Kuhn法—可以部分甲基化、箱守法—可以全甲基化、反应在非水溶液中5、酸水解难易程度：N>O>S>C芳香属苷较脂肪属苷易水解：酚苷>萜苷、甾苷有氨基酸取代的糖较-OH糖难水解，-OH糖较去氧糖难水解（2，6二去氧糖>2-去氧糖>3-去氧糖>羟基糖>2-氨基糖）易?难呋喃糖苷较吡喃糖苷易水解酮糖较醛糖易水解吡喃糖苷中：C取代基越大越难水解（五碳糖>甲基五碳糖>六碳糖>七碳糖） 5 C上有-COOH取代时最难水解 5在构象中相同的糖中：a键（竖键）-OH多则易水解苷元为小基团—苷键横键比竖键易水解；即e>a苷元为大基团—苷键竖键比横键易水解；即a>e6、 smith降解（过碘酸反应）：NaSO、NaBH，易得到苷元（人参皂苷—原人参二醇） 2447、乙酰解反应：β-苷键的葡萄糖双糖的反应速率（乙酰解反应的易难程度）（1——6）》（1——4）》（1——3）》（1——2）8、提取方法：水提醇沉、热水提冷水沉1、生物碱：生物碱是含负氧化态氮原子、存在于生物有机体的环状化合物。

天然药物化学是运用现代科学理论与方法研究天然药物中化学成分的一门学科1、溶剂提取法的基本原理：是根据 “相似者相溶”这一原理进行的，通过选择适当溶剂和方法将中药中的化学成分从药材中提取出来，溶剂法提取中药有效成分常用的方法，如浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法、连续回流提取法2、根据物质在两相溶剂中的分配比不同进行分离： 。

3、根据物质的吸附性差别进行分离4、根据物质分子大小差别进行分离：①分离天然化合物常用的方法有凝胶过滤法和膜分离技术；②常用的凝胶有葡聚糖凝胶 和羟丙基葡聚糖凝胶5、根据物质解离程度不同进行分离：2、糖的化学性质；氧化反应；糠醛形成反应（Molish 反应）；羟基反应：醚化反应（甲基化）、酰化反应（酯化反应）、缩酮和缩醛化反应；羰基反应；和硼酸络合反应。

1、糖的提取分离②分离：活性炭柱色谱、 。

2、糖的鉴定和糖链结构的测定 。

1.苯丙素定义：一类含有一个或几个C6-C3单位的天然成分。

1.香豆素的基本母核：香豆素（香豆精）是具有苯并 -吡喃酮母核的一类化合物的总称。

环上常有-OH 、OCH 3、异戊烯基等取代基。

(1).简单香豆素类(2).呋喃香豆素类(furocoumarins)(线型和角型)(3).吡喃香豆素类(pyranocoumarins) (线型和角型)4.香豆素类化合物的提取分离 (1).提取O O 23456788a4a 回收溶剂加水苯EtOH O O H 3CO OCH 3O(2).分离主要包括：酸碱分离法，色谱方法等。

5.香豆素类化合物的结构鉴定(1).核磁法鉴定香豆素结构的意义：结构新颖的香豆素化合物不仅为创制新药提供了先导化合物，还为设计药效高、毒性低的理想药物提供了独特的化学结构,而核磁谱提供的信息是化合物结构鉴别的主要依据。

3.提取分离(1).提取：多用乙醇或丙酮等提取后，再用极性较小的溶剂如：乙醚、氯仿等进行萃取。

(2).分离：色谱法、溶剂萃取法、分级沉淀法、重结晶法.4.结构鉴定(1).化学法：水解反应、氧化反应。

天然药物化学显色反应总结
醌类化合物不同颜色反应鉴别特点及意义
醌类化合物可以通过不同的反应类型进行鉴别，包括Feigl反应、Bornträge反应、Kesting-Craven反应和活性亚甲基试剂反应。

这些反应试剂包括碳酸钠、甲醛、邻二硝基苯、醋酸镁和碱液等。

不同的反应类型会产生不同的颜色反应，如紫色、蓝色、红、紫红和蓝绿等。

这些颜色反应可以用于鉴别不同的醌类化合物，如苯、萘、菲、蒽醌等。

香豆素显色反应的鉴别特点和意义
香豆素可以通过Gibbs或Emerson反应进行鉴别。

这些反应可以判断香豆素的C－6位是否有取代基的存在。

如果反应呈阳性，表示C-6位无取代。

此外，木脂素也可以通过检测其结构中的功能基进行检测，如酚羟基、亚甲二氧基及内酯结构等。

常用的检测方法包括三氯化铁反应、Labat反应和Ecgrine 反应等。

黄酮类化合物的还原显色反应
黄酮类化合物可以通过不同的反应类型进行鉴别，包括盐酸-镁粉反应、四氢硼钠、铝盐、铅盐、锆盐、镁盐、氯化锶、三氯化铁、硼酸显色反应和碱剂显色反应等。

这些反应可以鉴别黄酮、二氢黄酮、黄酮醇、二氢黄酮醇等不同的化合物。

不同的反应类型会产生不同的颜色反应，如橙红、紫红、红、黄色络合物等。

这些颜色反应可以用于鉴别不同的黄酮类化合物，如二氢黄酮、二氢黄酮醇、5-羟基黄酮及2-羟基查耳酮类等。

天然药物化学鉴别题知识点总结糖和苷1．Molish反应：（苷元和苷，苷成阳性）样品+ α-萘酚+ 浓H2SO4 →棕色环香豆素类1.异羟肟酸铁反应：香豆素有内酯结构，在碱性条件下，能与盐酸羟胺所合成异羟肟酸，再与酸性条件下与三价铁离子络合成盐而显红色。

2.Gibbs,Emerson反应：酚羟基对位无取代或6位碳无取代成阳性。

Gibbs试剂呈蓝色，Emerson试剂呈红色。

Gibbs试剂：2,6-二氯苯醌亚胺Emerson试剂：氨基安替匹林和铁氰化钾醌类化合物1．菲格尔（Feigl）反应—各种醌类（+）醌类衍生物在碱性下加热能迅速与醛类及邻二硝基苯反应→紫色化合物。

2．无色亚甲蓝显色试验苯醌、萘醌——区别于蒽醌，苯醌和萘醌的薄层色谱上喷无色亚甲蓝试剂，出现蓝色斑点。

3．碱液呈色反应（Borntrager’s反应）羟基蒽醌遇碱液显红或紫红色黄酮类化合物1．盐酸-镁粉反应样品/乙醇中加入少许镁粉振摇无色，后滴加几滴浓HCl，黄酮（醇），二氢黄酮（醇）显橙红～紫红色2．四氢硼钠反应3．ZrOCl2（锆盐）5-OH黄酮和3-OH黄酮的甲醇溶液，加入2% ZrOCl2溶液显黄色，再加2%枸橼酸后，3-OH黄酮不退色而5—OH退色。

4．氯化锶（SrCl2）鉴别邻二羟基邻二酚—OH黄酮类加氨性氯化锶溶液有绿色至黑色沉淀。

萜类和挥发油1．卓酚酮类金属络合：Cu+2——绿色2．萜类的羰基与硝基苯肼加成反应反应出现黄色结晶三萜及其苷类1．UV紫外光谱鉴定孤立双键：205~250nm异环共轭双键：240、250、260nm同环共轭双键：285nmC=C-C=O: 242~250nm2．核磁共振氢谱鉴定没有固定规律。

甾体及其苷类1．三氯醋酸反应样品液/滤纸+ 25%CCl3COOH→→加热60℃红~紫（甾体皂苷）→加热100℃红~紫（三萜皂苷）2．呋甾烷醇型皂苷和螺甾烷醇型皂苷呋甾烷皂苷+HCl.对二甲氨基苯甲醛→红螺甾烷皂苷+HCl.对二甲氨基苯甲醛→不显色3．螺甾烷醇型皂苷和异螺甾烷醇型皂苷用红外光谱鉴定，在下面四个谱带中，920 cm-1左右峰强的是异螺甾烷，900 cm-1左右峰强的是螺甾烷。

天然药化常见的鉴别反应（部分）一、颜色反应的对比（一）、三萜类的颜色反应1.Liebermann-Burchard反应将样品溶于乙酸酐中，加浓硫酸-乙酸酐（1：20）数滴，可产生黄→红→紫→蓝等颜色变化，最后褪色。

2.Kahldenberg反应将样品的氯仿或醇溶液点于滤纸上，喷20%五氯化锑的氯仿溶液（或三氯化锑饱和的氯仿溶液），干燥后60℃～70℃加热，显蓝色、灰蓝色、灰紫色等多种颜色。

3.Rosen-Heimer 反应将样品溶液滴在滤纸上，喷25%三氯乙酸乙醇溶液，加热至100℃，呈红色，逐渐变为紫色。

4.Salkowski反应将样品溶于氯仿，加入浓硫酸后，在硫酸层呈现红色或蓝色，氯仿层有绿色荧光出现。

5.Tschugaeff反应将样品溶于冰乙酸中，加乙酰氯数滴及氯化锌结晶数粒，稍加热，则呈现淡红色或紫红色。

（二）、甾体类化合物的颜色反应1.Liebermann-Burchard反应将样品溶于氯仿中，加浓硫酸-乙酸酐（1：20）数滴，可产生红→紫→蓝→绿→污绿等颜色变化，最后褪色。

也可将样品溶于冰乙酸，加试剂产生同样的反应。

2.Kahldenberg反应将样品的氯仿或醇溶液点于滤纸上，喷20%五氯化锑的氯仿溶液，干燥后60℃～70℃加热，样品斑点显蓝色、灰蓝色、灰紫色等多种颜色。

3.Rosen-Heimer反应将样品溶液滴在滤纸上，喷25%三氯乙酸乙醇溶液，加热至60℃，呈红色，逐渐变为紫色。

4.Salkowski反应将样品溶于氯仿，加入浓硫酸后，在硫酸层呈现红色或蓝色，氯仿层有绿色荧光出现。

5.Tschugaeff反应将样品溶于冰乙酸中，加乙酰氯数滴及氯化锌结晶数粒，稍加热，则呈现淡红色或紫红色。

二、强心苷的颜色反应1.C17位上不饱和内酯环的颜色反应甲型强心苷在碱性醇溶液中，五元不饱和内酯环上的双键移位产生C22活性亚甲基，能与活性亚甲基试剂作用而显色。

乙型强心苷在碱性醇溶液中，不能产生活性亚甲基，无此类反应。

1.黄酮类化合物(1).盐酸镁粉（锌粉）反应：多数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇都显示红色至紫红色，少数显示紫色至蓝色。

B环上有羟基和甲氧基颜色加深。

查尔酮、橙酮、儿茶素无此反应(2).四氢硼钠反应：二氢黄酮类化合物产生红色至紫色。

(5).碱性试剂显色反应：二氢黄酮类易在碱液中开环，转变成异构体——查尔酮显橙色至黄色。

黄酮醇类在碱液中先呈黄色进入空气显棕色。

黄酮类化合物有邻二酚羟基或3,4’二羟基取代时以被氧化：黄色-深红色-绿棕色。

2. 皂苷类（1）醋酐-浓硫酸反应（Liebermann-Burchard 反应）：将样品放于醋酸酐中，加浓硫酸-醋酐（1:20）三萜皂苷：反应慢，最后出现红色甾体皂苷：反应快，最后出现绿色（2）三氯醋酸反应（Rosen-Heimer 反应）：红色→紫色三萜皂苷加热到100℃才显色，甾体皂苷加热到60℃即显色。

（3）呋甾皂苷对E试剂（盐酸二甲氨基苯甲醛）显红色；对A试剂（茴香醛）显黄色。

（3）螺甾皂苷对E试剂不显色；对A试剂显黄色。

3.糖苷类化合物1)糠醛的形成反应:单糖在浓酸(4~10N)加热作用下，失去3分子水，生成具有呋喃环结构的化合物。

多糖先水解成单糖，然后再脱水生成相同的产物。

糖醛酸先脱羧，再形成糠醛。

原理：糠醛衍生物和许多芳胺、酚类可缩合生成有色物质。

由于各类糖形成糠醛衍生物的难易程度不同，产物的挥发性不同，与酚或芳胺的缩合产物呈色不同，因此用此反应鉴别糖类。

试剂：有机酸（三氯乙酸、草酸等）或无机酸（硫酸、磷酸等）酚或胺类：含有活泼亚甲基并有共轭未饱和系统的化合物，如：苯酚，萘酚，苯胺，联苯胺等。

Molish反应：浓硫酸和α-萘酚（紫色环）常用的层析显色剂：邻苯二甲酸和苯胺2）甲基化常用的方法：Kuhn改良法：在二甲基甲酰胺（DMF）溶液中用CH3I和Ag2O,或(CH3)2SO4和BaO/Ba(OH)2进行反应。

箱守法（Hakomori)：在二甲基亚砜（DMSO）中用NaH和CH3I进行反应。

醌类化合物不同颜色反应鉴别特点及意义判断香豆素的C －6位是否有取代基的存在，可先水解，使其内酯环打开生成一个新的酚羟基，然后再用Gibbs 或Emerson 反应加以鉴别，如为阳性反应表示C-6位无取代。

木脂素没有特征性的理化检识方法，常用的检识方法主要是针对木脂素结构中的功能基如酚羟基、亚甲二氧基及内酯结构等而进行的检识。

1．三氯化铁反应——检查酚羟基2．Labat 反应（没食子酸、浓硫酸）——检查亚甲二氧基（阳性呈蓝绿色） 3．Ecgrine 反应（变色酸、浓硫酸）——检查亚甲二氧基（阳性呈蓝紫色）和（或）5-OH ，加二氯氧锆显黄色。

若只有5-OH ，加枸橼酸后黄色减褪，若有3-OH ，则加枸橼酸后黄色不变，因此可用于区分黄酮和黄酮醇。

用于鉴别3-OH 的存在。

二酚羟基或兼有3-羟基、4-酮基或5-羟基、4-酮基结构的化合物反应生成沉淀。

而碱式醋酸铅的沉淀能力要大得多，一般酚类化合物均可与其发生沉淀反应。

①二氢黄酮易在碱液中开环，转变成相应的异构体查耳酮，显橙色至黄色。

②黄酮醇类在碱液中先呈黄色，通入空气后变为棕色。

③分子结构中有邻二酚羟基或3，4’-二羟基取代时，在碱液中不稳定，易被氧化，产生沉淀。

图9-3 强心苷的显色反应 按作用部位分：2）、C-17位不饱和内酯环的颜色反应 甲型强心苷的特征反应，因为五元不饱和内酯环上的双键位移产生C-22活性亚甲基乙型强心苷为六元不饱和内酯环，故不能反应。

作用于五元不饱和内酯环 1． Legal 反应 2. Kedde 反应 3. Raymond 反应 4. Baljet 反应用于甲型与乙型强心苷的鉴别作用于甾核1． 醋酐-浓硫酸（L-B ）反应2． Salkowski （氯仿-浓硫酸）反应 3． 三氯醋酸-氯胺T(Rosenheim)反应 4. 三氯化锑（五氯化锑）反应202221OO23OOHOO CH 3OHOOCH 3OHOOCH 3OHOOHCH 2OHOH作用于a -去氧糖1. Keller-Kiliani （K-K ）反应2. 对二甲氨基苯甲醛反应3. 占吨氢醇反应4. 过碘酸-对硝基苯胺反应 用于 I 型与 II 、III 型强心苷的鉴别分离含有羰基的甾体皂苷元，常用季铵盐型氨基乙酰肼类试剂，如吉拉尔T（Girard T）或吉拉尔P（Girard P）两种试剂。

糖和苷的检识1.菲林反应：还原糖能使碱性酒石酸铜试剂还原，产生砖红色的氧化亚铜2.多伦反应：还原糖与氨性硝酸银试剂反应产生金属银，呈银镜或黑色沉淀3.Molish反应：在糖或糖苷的水或乙醇溶液中加入a萘酚乙醇溶液，沿器壁滴加浓硫酸，二液层交界处呈现紫色环。

碳苷及葡萄糖醛酸苷与该试剂反应呈阴性4.苯胺-邻苯二甲酸试剂反应：糖类与其生成有色物质醌类化合物显色反应1.Feigl反应：醌类衍生物在碱性条件下与醛类和邻二硝基苯加热，呈紫色2.无色亚甲蓝反应：苯醌类及萘醌类的专用显色剂3.碱性条件下的显色反应：羟基蒽醌类由于酚羟基的存在，在碱性条件下呈色（Borntrager反应）4.活性次甲基试剂反应（Kesting-Craven法）：苯醌类及萘醌类化合物的醌环上有未被取代的位置，可在碱性条件下与该试剂显蓝绿色或蓝紫色，蒽醌类不发生反应香豆素显色反应1.异羟肟酸铁反应：内酯结构，呈红色2.Gibb’s反应：香豆素类化合物具有酚羟基取代且酚羟基的对位无取代，则能与2，6-二氯(溴)苯醌氯亚胺(Gibb’s试剂)反应显蓝色3.Emerson反应：内酯环在碱性条件下开环后与4-氨基安替比林和铁氰化钾(Emerson试剂)反应生成红色缩合物Gibb’s反应和Emerson反应可判断香豆素碳6位是否有取代基的存在木质素类显色反应Labat反应，Labat试剂与亚甲二氧基的化合物反应产生蓝绿色黄酮类显色反应1.盐酸-镁粉反应：多数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮和二氢黄酮醇显色，而异黄酮（少数例外）、查耳酮、橙酮、儿茶素类则为阴性反应2.四氢硼钠反应：二氢黄酮类化合物可被四氢硼钠还原产生红至紫红色，其他黄酮类化合物均不显色。

对二氢黄酮类和二氢黄酮醇类专属性较高的还原剂3.三氯化铝反应：一般样品在紫外灯下显鲜黄色荧光，4/-羟基黄酮醇或7,4/-二羟基黄酮醇类显天蓝色荧光4.锆盐-枸橼酸反应：黄酮中有游离的3-或5-羟基时，可与2%二氯氧锆甲醇溶液反应显黄色，若枸橼酸过多5-羟基黄酮显著褪色、3-羟基黄酮仍显鲜黄色5.氨性氯化锶反应：有邻酚羟基者，产生绿色至棕色乃至黑色沉淀6.硼酸显色反应：5-羟基黄酮和2/-羟基查耳酮呈阳性反应，在酸性条件下，可与硼酸反应产生亮黄色五氯化锑反应：溶于四氯化碳中，加2%五氯化锑的四氯化碳（必须无水），查耳酮类生成红或紫红色沉淀，而黄酮、二氢黄酮及黄酮醇类显黄色至橙色，用于区别查耳酮与其他黄酮。

第一节总论一、绪论1. 天然药物化学是运用现代科学理论与方法研究天然药物中化学成分的一门学科。

2. 有效成分：具有生理活性、能够防病治病的单体物质。

3. 有效部位：具有生理活性的多种成分的组合物。

二、提取方法1. 溶剂提取法（1 ）溶剂选择1）常用的提取溶剂：常用中药成分提取的溶剂按极性由强到弱的顺序: 水〉甲醇＞乙醇〉丙酮〉正丁醇〉乙酸乙酯〉二氯甲烷〉乙醚〉氯仿＞苯＞石油醚。

2）各类溶剂所能溶解的成分：①水：最安全的溶剂。

②亲水性有机溶液：包括甲醇、乙醇、丙酮。

③亲脂性有机溶剂：包括正丁醇、氯仿、乙酸乙酯、二氯甲烷、乙醚、苯、石油醚。

石油醚常用于脱脂；正丁醇是能与水分层的极性最大的有机溶剂。

（2）溶剂提取的方法2. 水蒸气蒸馏法用于具有挥发性、能随水蒸气蒸馏且不被破坏的成分的提取。

主要用于挥发油的提取。

3. 升华法物质受热时不经过熔融直接转化为蒸气，遇冷后又凝结成固体。

如茶叶中的咖啡因、樟木中的樟脑。

第二节苷类一、定义苷类又称配糖体，是糖或糖的衍生物如氨基糖、糖醛酸等于另一类非糖物质通过糖的端基碳原子链接而成的化合物。

其中非糖部分成为苷元或配基，其链接的键则成为苷键。

三、 苷的理化性质1. 苷键的裂解（1） 酸催化水解：苷键具有缩醛结构，易为稀酸催化水解。

催化剂以盐酸最为常用。

（2） 酶催化水解：具有专属性高，反应温和，可获知苷键的构型，保持苷元结构不变的特点。

①麦 芽糖酶能水解a -葡萄糖苷；②苦杏仁酶能水解一般B -葡萄糖苷；③纤维素酶是B -葡萄糖苷水解酶; ④转化糖酶可水解B -果糖苷键。

（3 ）碱催化水解：适于苷元为酯苷、酚苷的水解。

（ 4） Smith 降解法：此法适宜于苷元结构容易 改变的苷及碳苷的水解。

但此法不适用于苷元上有1, 2-二醇结构的苷类。

2. 苷的检识（Molish 反应） 于供试液中加入 3%a -萘酚乙醇溶液混合后，沿器壁滴加浓硫酸，使 酸沉积于下层，在硫酸与供试液的界面处产生紫色环。