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生化分离工程习题库

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武汉生物工程学院课程考试 试题纸（第10页共17页）

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生化分离工程试题

一、选择题

I. 下列哪项属于初步纯化的单元操作（ ）

A. 萃取 B.结晶 C.离子交换层析 D.亲和层析

2•在悬浮液的预处理过程中，常采用哪些具体的方法 .（）

A. 加热 B.调节悬浮液的PH值

C.凝聚和絮凝 D.使用助滤剂

3•在悬浮液中去除杂蛋白操作中 ，下列哪些方式是不可逆变性沉淀杂蛋白 •（）

A. 加热 B.有机溶剂沉淀

C.盐析 D.金属离子沉淀

4•在悬浮液的预处理过程中，哪种方法改变了滤饼的结构 .（）

A. 稀释 B.凝聚 C•絮凝 D.使用助滤剂

5•下列预处理方法中，因架桥作用促进过滤的方法是 （）

A. 调节pH B.絮凝 C.加热 D.加助滤剂

6•下列预处理方法中，能使菌体聚集而易于过滤的方法是 （）

A. 调节pH B.絮凝 C.加热 D.稀释

7. 凝聚是指由于胶粒间双电层电排斥作用 ，而使胶体体系不稳定的现象。

A、降低，电位下降 B、降低，电位上升 C升高，电位上升 D.升高，电位下降

8. 发酵液中通常含有大量的无机离子需要在预处理时将其去除， 用下列哪种试剂去除发酵

液中的Ca2+最合适（ ）

A.草酸 B.草酸钠 C.碳酸 D.碳酸钠

9. 在蛋白质固相析出操作中，下列哪些方式易导致卵清蛋白发生不可逆变性沉淀 .（）

A.硝酸汞 B.丙酮 C.硫酸铵 D. 10%TCA

10. 在蛋白质固相析出操作中，下列哪些方式易导致蛋白发生可逆沉淀 .（）

A.加热 B.有机溶剂沉淀

C.盐析 D.重金属离子沉淀

II. 有机溶剂沉淀蛋白质中，理论上主要基于何种原因导致蛋白发生可逆不变性沉淀 .（）

A.破坏水膜 B.滑动面电位下降 C.溶剂介电常数降低 D形成络合物

12. 在细胞破碎的操作中，下列哪些方法属于固体剪切力导致细胞破碎的方式 .（）

A.超声波 B.冻结融化 C.球磨法 D.X-press

13. 在分离基因工程蛋白时，采用下列哪种方法进行细胞破碎对蛋白的破坏最轻（

A.超声波法 B. 高压匀浆法 C. X-Press 法 D. 干燥法 武汉生物工程学院课程考试 试题纸（第10页共17页）

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14. 下列细胞破碎方法哪种属于非机械法（ ）

A.超声波法 B.高压匀浆法 C.细胞破碎 D.渗透压冲击

15. 利用高速球磨法破碎细胞，在同样的破碎条件下，下列哪种微生物的细胞破碎率最高

（ ）

A.革兰氏阳性菌 B.革兰氏阴性菌 C.酿酒酵母 D.热带假丝酵母 武汉生物工程学院课程考试 试题纸（第10页共17页）

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16. 利用高压匀浆法破碎细胞，在同样的破碎条件下，下列哪种微生物的细胞破碎率最高 （ ）

A.面包酵母 B.大肠杆菌 C•酿酒酵母 D.热带假丝酵母

17. 在细胞破碎的操作中，下列哪种方法属于液体剪切力导致细胞破碎的方式 .（）

A.超声波 B.冻结融化 C.球磨法 D.匀浆法

18. 花生四烯酸即二十二碳四烯酸是婴幼儿成长必需的不饱和脂肪酸, 实现工业化生产。其提取过程中通常要采用辛烷萃取，如果增大水相 系数会发生下列哪种变化（ ）

A.增大 B. 减小 C. 不变 D.

19. 红霉素为一弱碱性物质，其提取过程中通常要采用乙酸戊酯萃取，如果增大水相 pH,

其萃取的分配系数会发生下列哪种变化（ ）

A.增大 B. 减小 C. 不变 D. 不能确定

20. 采用由阳离子表面活性剂形成的反胶团溶液萃取蛋白质， 理论上下列方法中有利于增

大蛋白质的分配系数有（ ）

A.增加无机盐浓度 B.适当调节水相pH大于该蛋白等电点

C.降低无机盐浓度 D.适当调节水相pH小于该蛋白等电点

21. 下列关于超临界流体说法正确的是（ ）

A. 是物质介于气态和液态之间的一种状态

B. 超临界流体的溶解性接近液体

C. 超临界流体的溶解能力与其密度有关

D. 超临界流体的扩散系数大于该物质处于液态时的扩散系数

A.增加无机盐浓度 B.适当调节水相pH大于该蛋白等电点

C.降低无机盐浓度 D.适当调节水相pH小于该蛋白等电点

23. 利用PEG/DEX双水相体系萃取蛋白质，下列哪种方法可使蛋白质富集在上相（ ）

A.增加PEG分子量 B.减小PEG分子量

C.增加DEX分子量 D.减小DEX分子量

24下图所示为双水相相图，线段 AB为系线，M和N分别为总浓度不同两个双水相体系，

下列说法正确的是（）

A. 图中M和N所示的双水相体系在分相后两相体积比相等

B. 同一种蛋白质在M和N的上相和下相分配系数不同

C. M的上下相组成与 N的上下相组成一样

D. M的上下相组成与 N的上下相组成不一样

25. 有关双水相萃取说法正确的是（ ）

A. 系线越长，分配系数越大

B. 系线越长，分配系数越小

C. 系线越长，上下相差别越大 现已通过发酵表达

pH,其萃取的分配

不能确定

22. 采用由AOT形成的反胶团溶液萃取蛋白质,

配系数有（） 理论上下列方法中有利于增大蛋白质的分 武汉生物工程学院课程考试 试题纸（第10页共17页）

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D. 系线越长，上下相差别越小

26. 关于发酵液的乳化现象，不正确的说法是（ ）

A•主要是由于蛋白质引起的

B. 是W/0型乳浊液

C. 发酵液中存在表面活性剂

D. 可以通过离心或在发酵液中加入 SDS来降低乳化现象

27. 采用PEG/Dextran双水相萃取蛋白时，下列方法一定能使蛋白向上相富集的是（ ）

A.增大Dextran分子量 B.增大pH C.降低PEG浓度 D.加入少量KCI

28. 下列关于多级逆流萃取说法正确的是（ ）

A. 在同等条件下比多级错流萃取的萃取率高

B. 与单级萃取相比溶剂用量更大

C. 萃取相中的产物浓度较大

D. 多级逆流萃取与索氏提取器的原理基本相同

29. 多级逆流萃取与多级错流萃取相比， 萃取剂消耗（ ）

A、多 B、少 C、差不多 D.以上都不对

30. 下列哪种方法不属于非机械法导致细胞破碎的方式 （ ）

A.超声波 B.冻结融化 C.渗透压冲击 D.溶菌酶法

31化学法破碎细胞具有什么特点 （）

A.破碎率高 B.产物释放完全 C.通用性差 D.杂质含量高

32. 下列膜分离技术中，可用于蛋白质类产品脱盐的方法有（ ）

A.电渗析 B.透析 C.超滤 D.反渗透

33. 下列哪一种膜分离过程不是依据筛分的原理进行分离的（ ）

A.超滤 B.微滤 C.电渗析 D.纳滤

34浓差极化常发生于膜分离过程中， 通常可以采取下列何种操作来缓解浓差极化效应 （）

A.高流速 B.高温 C.较高料液浓度 D.高压

35. 下列哪种膜材料表面带有电荷 （）

A.超滤膜 B.微滤膜 C.纳滤膜 D.反渗透膜

36. 常用下面的哪种方法除去生啤中的酵母菌及细菌（ ）

A.高温高压灭菌 B.微滤 C.超滤 D.电渗析

37. 以下关于几种膜分离方法说法正确的有（ ）

A. 超滤的操作压力高于反渗透膜分离操作压力

B. 利用截流分子量为 200的纳滤膜分离技术不能将 SO42-截流

C. 纳滤膜有明显的孔道结构

D.相冋条件下，反渗透膜的水通量大于纳滤膜的水通量

38.可用于链霉素浓缩的方法有： ()

A.纳滤 B.超滤 C.微滤 D.反渗透

39.除去发酵液中的热源通常用（ ) 武汉生物工程学院课程考试 试题纸（第10页共17页）

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A.反渗透 B超滤 C.透析 D.微滤

40.电渗 析其 装置由 许多阴 离子和阳离子 交换膜交 替排 列而 成，其中 RSO3Na为 膜，可使 离子选择性透过。

A.阳离子交换膜，阴 B.阴离子交换膜，阳 C.阳离子交换膜，阴 D.阴离子交换膜，阴 41在食品工业，生物化工以及水处理方面，下列哪种膜操作可以截留大部分单价盐而使溶 武汉生物工程学院课程考试 试题纸（第10页共17页）

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C. 渗析 D. 反渗透

10个氨基酸残基构成的多肽的膜分离方法是。

C.纳滤 D.反渗透

（） 该超滤膜所能截留的最小的溶质的分子量 能完全留流分子量等于截留相对分子量的分子 是指截留率为90%勺溶质相对分子量 是指直径与该超滤膜孔径相当的球状蛋白的分子量

在下列哪种溶剂中吸附力最强（

D•乙酸乙酯

下列哪种溶剂的洗脱能力最弱（

D•乙酸乙酯

54. 下列哪种离子交换树脂适宜制备软水（ ）

A. RSO3Na B. RSO3H C. RCOOH D. RCOONa

55. 在凝胶过滤（分离范围是 5000~400000）中，下列哪种蛋白质最先被洗脱下来 （ ）。

A、细胞色素 C （13370） B 、肌球蛋白（400000）

C过氧化氢酶（247500） D 、血清清蛋白（68500）

56. 下列关于正相色谱与反相色谱说法正确的是（ ）。

A.正相色谱是指固定相的极性低于流动相的极性

B正相色谱层析过程中非极性分子或极性小的分子比极性大的分子移动的速度慢

C.反相色谱是指固定相的极性低于流动相的极性 剂通过，并且操作压力比较高•（）

A.超滤 B. 微滤

42能用于分离和浓缩约由

A.超滤 B.微滤

43.超滤膜的截留相对分子量是指：

A.

B.

C.

D.

44. 利用

A.氯仿

45. 利用

A.氯仿 D101树脂吸附藏红花素,

B.乙醇 C.水

D101树脂吸附藏红花素,

B.乙醇 C.水

46. 利用活性炭作吸附剂，在水溶液中对下列哪种物质的吸附力最弱（

A.蛋白质 B.多肽 C.氨基酸 D.二肽

47•利用硅胶做固定相进行吸附柱层析，下列哪种溶剂的洗脱能力最弱（ A.水 B.乙醇 C.氯仿 D.乙酸乙酯

48. 下列哪种离子与 DEAE-纤维素（Cl型）的亲和力最大（

A F- B. Cl- C. Br- D. I-

49. 非极性分子与非极性分子存在的作用力是（

A. 氢键

B. 定向力

C. 诱导力

D. 色散力

50. 下列分离技术中，不能用于去离子水制备的方法有（

A.离子交换柱层析 B.膜蒸馏

51. 可用于去除注射类药品中热源物质的是

A.透析 B.凝胶层析

52. 根据物质极性大小不同分离的方法是（

A.吸附层析 B.离子交换层析

53. 吸附作用是指物质从

A 液体 B、气体 .(

C.

C. C.渗透蒸发

）

亲和层析

）

凝胶层析 D.电渗析

D.离子交换层析

D.亲和层析

浓缩到固体表面的过程。

C、流体 D. 固体

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《生化分离工程》教案

《生化分离工程》教案

转发《浙江省建筑业类企业监督检查

.1

*****本科课程备课教案

*—*学年第1学期

（理论课程）

课 程 名 称 生物工程下游技术

授课专业年级班级 生物技术

学 生 人 数 *

教 师 姓 名

教 师 职 称

转发《浙江省建筑业类企业监督检查

.2 ***学院

总

学 时 48 讲授 48 实验 0 上机 0 其它 0

学

分 3 考核方式 闭卷 成绩组成 80%期末+20%平时

课程性质和目的 主要讲述生物活性物质的各种分离纯化技术，是生物工程中不可缺少的组成部分，通过对本课程的学习，能使学生针对不同产品的特性，较好运用各种分离技术来设计合理的提取和纯化工艺路线或改进现有工艺，并能从理论上解释各种实际问题，提高分析问题和解决问题的能力，是一门理论和实践密切结合的课程

课程教学基本要求 通过课堂教学和实验教学相结合，使学生掌握生化物质分离的常见方法和基本的实验技能，理解生化分离工程在生物工程技术实用化、产业化中的重要地位，了解常见的生化产品生产工艺以及生化分离工程学科的最新研究进展 转发《浙江省建筑业类企业监督检查

.3 教材与参考书（或网络资源） （1）参考教材：

1.曹学君著，《现代生物分离工程》，华东理工大学出版社，上海，2007年1月

2.严希康著，《生化分离工程》，化学工业出版社，北京，2001年2月

3.孙彦著，《生物分离工程》，化学工业出版社，北京，2005年3月

4.欧阳平凯，胡永红著，《生物分离原理及技术》，化学工业出版社，北京，2006年2月

《生化分离工程》思考题与答案

《生化分离工程》思考题与答案

第一章 绪论

1、 何为生化分离技术？其主要研究那些容？

生化分离技术是指从动植物组织培养液和微生物发酵液中分离、纯化生物产品的过程中所采用的方法和手段的总称。

2、 生化分离的一般步骤包括哪些环节及技术？

一般说来，生化分离过程主要包括4个方面：①原料液的预处理和固液分离，常用加热、调PH、凝聚和絮凝等方法；②初步纯化(提取)，常用沉淀、吸附、萃取、超滤等单元操作；③高度纯化(精制)，常选用色谱分离技术；④成品加工，有浓缩、结晶和干燥等技术。

3、 生化分离工程有那些特点，及其重要性？

特点：1、目的产物在初始物料（发酵液）中的含量低；2、培养液是多组分的混合物，除少量产物外，还有大量的细胞及碎片、其他代物（几百上千种）、培养基成分、无机盐等；3、生化产物的稳定性低，易变质、易失活、易变性，对温度、pH值、重金属离子、有机溶剂、剪切力、表面力等非常敏感；4、对最终产品的质量要求高

重要性：生物技术产品一般存在于一个复杂的多相体系中。唯有经过分离和纯化等下游加工过程，才能制得符合使用要求的产品。因此产品的分离纯化是生物技术工业化的必需手段。在生物产品的开发研究中，分离过程的费用占全部研究费用的50％以上；在产品的成本构成中，分离与纯化部分占总成本的40～80％；精细、药用产品的比例更高达70～90％。显然开发新的分离和纯化工艺是提高经济效益或减少投资的重要途径。

4、 生物技术下游工程与上游工程之间是否有联系？ 它们之间有联系。①生物工程作为一个整体，上游工程和下游工程要相互配合，为了利于目的产物的分离与纯化，上游的工艺设计应尽量为下游的分离纯化创造条件，例如，对于发酵工程产品，在加工过程中如果采用液体培养基，不用酵母膏、玉米浆等有色物质为原料，会使下游加工工程更方便、经济；②通常生物技术上游工程与下游工程相耦合。发酵-分离耦合过程的优点是可以解除终产物的反馈抑制效应，同时简化产物提取过程，缩短生产周期，收到一举数得的效果。

生化工程习题

生化工程习题

生化工程习题

一、判断正误

1、间歇培养微生物的减速生长期，微生物的比生长速率小于零。（×）

2、反混指不同物料间有混合的现象。（×）

3、PFR反应器中，沿轴向的反应速度是常数。（×）

4、单级连续培养中，如果调整成D（稀释速率）>μ（比生长速率），最终将发生“冲出”现象。（√）

5、一定温度下，微生物营养细胞的均相热死灭动力学符合化学反应的一级反应动力学。（√）

6、限制性底物指微生物的碳源。（×）

7、单级恒化器连续培养某种酵母达一稳态后，流出液中菌体浓度是培养时间的函数。（×）

8、CSTR反应器中物料的返混程度最小。（×）

9、微生物的比生长速率是指单位时间内菌体的增量。（×）

10、间歇培养好氧微生物时，菌体的对数生长期到来时，菌体的摄氧率大幅度增加。（√）

11亚硫酸盐氧化法可以用于测量真实发酵液的Kla。（×）

12、活塞流反应器中，沿径向的反应速度是常数。（√）

13、返混是指不同停留时间物料之间的混合。（√）

14、任何微生物培养过程的YATP均等于10g/mol左右。（×）

15、连续培养反应器中物料的平均停留时间和稀释速率互为倒数。（√）

16、间歇培养好氧微生物时，菌体耗氧速率是常数。（×）

17、对培养基进行热灭菌必须以霉菌的孢子为杀灭对象。（×）

18、在一定温度下，各种不同微生物的比热死亡速率常数值相等。（×）

19、在有细胞回流的单级恒化器中，总的出口处菌体浓度与恒化器中的菌体浓度完全相等。（×）

20、动态法测量Kla不能用于有菌体繁殖的发酵液。（×）

21、连续反应器中物料的平均停留时间用F/V来计算。（×）

22、在活塞流反应器中进行恒温热灭菌，沿物料流动方向菌体热死灭速率逐渐下降。（√）

23、单级恒化器的稀释速率可以任意调整大小。（×）

24、微生物营养细胞易于受热死灭，其比热死亡速率常数K值很高。（√）

25、建立Kla与设备参数及操作变数之间关系式的重要性在于生物反应器的比拟放大。（√）

《生物分离工程》复习题

《生物分离工程》复习题

1 《生物分离工程》复习题

《绪论 细胞分离》

1.在细胞分离中，细胞的密度ρS越 ，细胞培养液的密度ρL

越 ，则细胞沉降速率越大。

2.表示离心机分离能力大小的重要指标是 。

A.离心沉降速度 B.转数 C.分离因数 D.离心力

3.过滤中推动力要克服的阻力有 阻力和 阻力。

4.简答： 对微生物悬浮液的分离（过滤分离），为什么要缓慢增加操作压力？

5.判断并改错： 在恒压过滤中，过滤速率会保持恒定。

6.简答： 提高过滤效率的手段有哪些/

7.判断并改错： 生长速率高的细胞比生长速率低的细胞更难破碎。

8.简答： 采用哪种方法破碎酵母能达到较高的破碎率？

9.简答： 蛋白质复性收率低的主要原因是什么？

10.简答： 常用的包含体分离和蛋白质复性的工艺路线之一。

11. 可以提高总回收率。

A.增加操作步骤 B.减少操作步骤 C.缩短操作时间 D.降低每一步的收率

12.重力沉降过程中，固体颗粒不受 的作用。

A.重力 B.摩擦力 C.静电力 D.浮力

13.过滤的透过推动力是 。

A.渗透压 B.电位差 C.自由扩散 D.压力差 2 14.在错流过滤中，流动的剪切作用可以 。

A.减轻浓度极化，但增加凝胶层的厚度

B.减轻浓度极化，但降低凝胶层的厚度

C.加重浓度极化，但增加凝胶层的厚度

D.加重浓度极化，但降低凝胶层的厚度

15.目前认为包含体的形成是部分折叠的中间态之间 相互作用的结果。

A.疏水性 B.亲水性 C.氢键 D.静电

16.判断并改错： 原料目标产物的浓度越高，所需的能耗越高，回收成本越大。

17.菌体和动植物细胞的重力沉降操作，采用 手段，可以提高沉降速度。