HE石蜡切片

石蜡切片HE染色1.脱蜡：二甲苯1，二甲苯2，二甲苯3中各浸泡10分钟。

梯度酒精复水（100％100％，100％，95％，80％，70％）各5分钟。

2.清洗：用PBS洗1次，3分钟。

3.苏木素染色：取苏木素染液用去离子水按1：4稀释，然后染色约5 min（具体时间根据染色的组织而定，一般看到核有较深的蓝紫色就可以了）。

用自来水终止染色。

4.分化：染色后的切片在0.1%盐酸酒精分化3~5 s（具体时间根据染色的情况而定，分化的目的主要是让胞质与核的染色能够区分开，苏木素染色过了的话也可以通过分化后重新染色，这时处理时间需要长一些，如果分化过头即片子着色不深的时候可以再用苏木素染色)。

5.返蓝：分化后的片子置于自来水中，流水返蓝10～30min（具体时间根据染色情况而定，苏木素在碱性溶液中呈蓝色，别人做的时候都是先用弱碱性溶液返蓝后再用自来水冲洗，用时较短，我们是直接用自来水返蓝，由于自来水呈弱碱性，可以达到返蓝效果）。

6.伊红染色：伊红染液用95%酒精按1：1配制成工作液（伊红的贮备液瓶子上有注明），染色30s~1min（时间根据染色情况调整，建议是染深一点好，因为所用的染色伊红为水溶性，弱醇溶性的，在后面的脱水透明的时候非常容易掉色），染色后用去离子水洗1～3s（放在去离子水缸中立即拿去脱水透明）。

7.脱水透明：通风橱里梯度酒精（95％，100％，100％）脱水各30s，二甲苯1，二甲苯2，二甲苯3透明各3分钟。

（说明：这是我做的时候的步骤，因为按照一般的脱水透明的步骤，最后伊红的着色一般都没有了，原因我前面也说了是由于伊红为水溶性弱醇溶性的，但是按着这样的步骤比较容易污染95%酒精，后来看了相关的资料我的想法是伊红染色后先用95%酒精洗一下，再去通风橱从95%酒精梯度脱水，这样不会污染。

）8.封片：中性树胶封片（一般两滴就够了，从二甲苯中拿出时建议尽量不要让二甲苯干，这样中性树胶能够很快分散开，不会形成气泡）。

HE石蜡切片步骤一、苏木精-伊红对染法——paraffinsection一、器材及试剂：切片刀，切片机，恒温箱，蜡杯，酒精灯，解剖刀，解剖剪，解剖盘，培养皿，镊子，单面刀片，毛笔，上皮组织盒，染色缸，盖玻片，载玻片，玻片盘，一棵胶，树胶瓶，显微镜，温度计，脸盆，水浴锅。

切片机，切片刀，温台，恒温箱，解剖刀，镊子，剪刀，解剖学针，单面刀片，大台木，洒精灯，包埋纸盒，染色缸，烧杯，水盆，熔蜡炉，蜡杯。

中性福尔马林紧固液、各种浓度的酒精、二甲苯、石蜡、蜂蜡、苏木精染液，1%伊红酒精溶液，1%盐酸酒精溶液，甘油蛋白粘片剂，中性树胶。

卡诺（carnoy）紧固液，埃利希苏木精染液，1%伊红酒精溶液，1%盐酸乙醇液，各级酒精（30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%），二甲苯，甘油蛋白黏片剂，中性树胶。

鼠肝、肾、心肌、骨骼肌或其他组织、大豆或小麦、绿豆、洋葱、大蒜、蚕豆的木、茎、叶等。

二、实验原理：石蜡切片就是最基本的切片技术，冰冻切片和轻薄切片等都就是在石蜡切片基础上发展起来的。

苏木素与伊红对比染色法（简称h.e.对染法）是组织切片最常用的染色方法。

这种方法适用范围广为，对组织细胞的各种成分都可以着色，易于全系列面观察组织构造，而且适用于各种固定液固定的材料，染色后不易褪色可长期保存有。

经过he染色，细胞核被苏木素涂成蓝紫色，细胞质被伊红染色呈圆形粉红色。

三、试剂配法：1．中性甲醛紧固液：甲醛（37%-40%，市售，本所购买即为此浓度）100ml磷酸氢二钠6.5磷酸二氢钾（钠）4g双蒸水900ml2．苏木精、伊红染色液为碧云天产品3．1%盐酸乙醇液70%酒精100份4．甘油蛋白张贴片剂：蛋白50ml甘油50ml水杨酸钠（防腐剂）1g酿制时将鸡蛋一个超越进碗或杯中，回去蛋黄遗留下蛋白，用玻棒调打为雪花状泡沫，然后用粗纸或双层纱布过滤到量筒中，经数小时或一夜，即可滤出透明蛋白液。

此时在其中再提等量的甘油，稍稍振摇使两者混合。

石蜡制片法（用于免疫组织化学，HE染色）实验原理：HE染色是一种以形态为基础，结合应用化学技术对组织、各种细胞进行染色的实验技术，用于研究组织细胞的生理、病理和化学结构。

基本原理：去氧核糖核酸（DNA）两条链上的磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。

苏木精在碱性溶液中称蓝色，所以细胞核被染成蓝色。

伊红Y是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明对比。

伊红是细胞浆的良好染料。

石蜡制片法是将材料经固定、脱水、透明、浸蜡后包埋在石蜡里面进行切片的方法。

此法适用范围，制片手段完备，能将材料切成极薄的片子（可切至2-8微米左右），并能制成连续的片子，这是其它制片法难以达到的，因此在光学显微镜的制片技术上它是最常用的一种方法。

除了一些经不住石蜡切片法中所应用的各种药剂处理的材料不能应用石蜡切片以外，一般的材料都可以用此法制片，但有制作时间较长，操作过程复杂以及材料易发硬或发脆等缺点。

该法多采用旋转式切片机进行切片。

石蜡制片操作程序如下：（一）材料的采集与分割采集材料应根据制片的目的和要求而定，材料要有代表性，无病虫害或其它损伤，如要观察病理解剖，则要取病斑、病症部位。

采下的材料应立即放在标本箱或湿布包起来带回实验室进行分割固定（如有条件也可在试验地采集后进行分割固定）。

为使固定液能迅速的渗透材料，材料要进行分割。

分割时动作要迅速，以防材料萎蔫。

分割块的大小，宜小不宜大，一般不超过1cm3，分割后立即杀死固定。

（二）杀死与固定利用药剂迅速把细胞杀死，以保持材料本来的状态和结构。

常用的固定有F.A.A固定液、卡诺固定液等。

将固定液放在具塞小瓶中，投入材料，盖好瓶盖。

用F.A.A固定液固定，时间至少24小时。

F.A.A固定液既是良好的固定剂，也是保存剂，因此材料可长期保存在固定液中备用。

石蜡切片制作和HE染色实验报告自查报告。

实验名称，石蜡切片制作和HE染色实验。

实验日期，2021年10月15日。

实验目的，通过石蜡切片制作和HE染色实验，观察组织结构和细胞形态，掌握组织学技术操作和HE染色方法。

实验步骤：
1. 取得组织标本，进行脱水、透明和浸蜡处理。

2. 将标本置于蜡块中，进行切片制作。

3. 将切片置于载玻片上，进行HE染色处理。

4. 用显微镜观察切片的组织结构和细胞形态。

实验结果，实验中成功制作了石蜡切片，并进行了HE染色处理。

观察切片时，能清晰地看到组织的细胞结构和染色效果良好。

实验分析，通过本次实验，我掌握了石蜡切片制作和HE染色的
基本操作技能，了解了组织学技术的重要性。

同时，观察到了组织
结构和细胞形态的细微变化，对细胞学和组织学有了更深入的了解。

存在问题，在实验中，切片制作过程中需要更加细心，避免切
片出现断裂或者变形的情况。

同时，染色处理的时间和浓度也需要
进一步优化，以获得更好的染色效果。

改进措施，在今后的实验中，我将更加细致地操作每一个步骤，提高操作技能和经验。

同时，我会针对染色处理的时间和浓度进行
实验设计，找到最适合的条件。

结论，本次实验通过石蜡切片制作和HE染色实验，使我对组织
学技术和细胞形态有了更深入的了解，同时也发现了自身在操作技
能和实验设计方面的不足之处。

通过今后的努力和实践，我相信能
够不断提高自己的实验技能和科研水平。

详细论述常规石蜡切片he染色的基本流程下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。

文档下载后可定制修改，请根据实际需要进行调整和使用，谢谢!本店铺为大家提供各种类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by this editor. I hope that after you download it, it can help you solve practical problems. The document can be customized and modified after downloading, please adjust and use it according to actual needs, thank you! In addition, this shop provides you with various types of practical materials, such as educational essays, diary appreciation, sentence excerpts, ancient poems, classic articles, topic composition, work summary, word parsing, copy excerpts, other materials and so on, want to know different data formats and writing methods, please pay attention!常规石蜡切片HE染色是组织学研究中常用的一种方法，它可以用于观察组织结构和细胞核的形态及染色质的颜色，以帮助医学和科研人员进行疾病诊断和研究。

石蜡切片制作和he染色实验报告石蜡切片制作和HE染色实验报告摘要：本实验旨在了解石蜡切片制作和HE染色技术的基本原理和步骤，并通过实验验证其在组织学研究中的应用效果。

实验结果表明，石蜡切片制作和HE染色技术能够有效地显示组织细胞的形态结构和染色特性。

一、引言组织学研究是生物学和医学领域中的重要分支，它通过研究组织细胞的结构和功能来揭示生物体内部的机理和疾病发生的原因。

石蜡切片制作和HE染色是组织学研究中常用的技术手段，它们能够使组织切片具备一定的透明度和染色特性，从而方便观察和分析组织细胞的形态结构。

二、材料与方法1. 实验材料：新鲜组织样本、10%缓冲福尔马林、乙醇、石蜡、甘油、HE染色液等。

2. 组织固定：将组织样本放入10%缓冲福尔马林中固定24小时。

3. 组织脱水：将固定的组织样本依次脱水处理，使用不同浓度的乙醇洗涤。

4. 组织浸透：将脱水的组织样本浸入石蜡中，进行多次浸透处理，确保组织样本被石蜡充分浸透。

5. 组织包埋：将浸透后的组织样本放入石蜡模具中，加热使石蜡固化。

6. 切片制作：使用石蜡切片机将石蜡块切割成薄片，厚度一般为4-6微米。

7. 切片染色：将切片放入HE染色液中浸泡一定时间，然后进行漂洗和脱水处理。

8. 封片与观察：将染色后的切片放置于显微镜玻片上，加入甘油封片，观察组织细胞的形态结构。

三、结果与讨论经过石蜡切片制作和HE染色处理后，观察到切片中的组织细胞呈现出明显的染色效果。

HE染色液中的酸性染料溶液（伊红）染色细胞核呈红色，而碱性染料溶液（伊红）染色细胞质呈蓝色。

这种染色方式能够清晰地显示组织细胞的核与质的结构特征，有助于观察和分析细胞的形态和组织结构。

石蜡切片制作是为了使组织样本具有一定的刚性和透明度，便于切割和观察。

石蜡能够渗透并包裹组织样本，使其变得坚硬而易于切割。

切片厚度一般为4-6微米，这样可以保证切片的透明度和细胞结构的清晰度。

HE染色技术是组织学研究中最常用的染色方法之一。

石蜡切片制作和HE染色实验报告自查报告。

实验名称，石蜡切片制作和HE染色实验。

实验日期，2022年10月10日。

实验地点，实验室。

实验目的，通过石蜡切片制作和HE染色实验，观察细胞结构和组织形态，掌握组织切片技术和染色技术。

实验步骤：
1. 取得组织样本并固定。

2. 组织脱水和浸蜡。

3. 制作石蜡切片。

4. 进行HE染色。

5. 观察切片并记录结果。

实验结果：
1. 成功制作了石蜡切片。

2. 经过HE染色后，细胞核染成紫色，胞质染成粉红色，细胞结构清晰可见。

3. 观察到组织细胞的形态和结构特征。

实验总结，通过本次实验，我掌握了石蜡切片制作和HE染色的基本技术，对细胞结构和组织形态有了更深入的了解。

在实验过程中，我注意到了一些操作细节上的不足，例如在脱水和浸蜡过程中需要更加细心，以避免组织变性和失真。

在未来的实验中，我将更加注重细节，提高实验操作的精准度和效率。

实验人员签名，__________ 日期，__________。

石蜡切片制作和HE染色一、目的要求：简要介绍石蜡切片的制作和苏木精、伊红染色法（简称H.E染色法），借以了解石蜡切片制作的基本原理和一般方法。

二、实验原理：易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性和嗜酸性;而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性。

构成组织内蛋白质的氨基酸的种类很多，它们有不同的等电点。

在普通染色法中，染色液的酸碱度为pH6左右，细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色，这些物质称为嗜碱性。

而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色，这些物质称为嗜酸型。

如果改变染色液的酸碱度，pH值升高时，则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性;pH值降低时，原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。

所以说染色液的pH值可以影响染色的反应。

脱氧核糖核酸(DNA)两条链上的磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。

苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。

伊红Y是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明对比。

伊红是细胞浆的良好染料。

由于组织或细胞的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。

经苏木精染色后，细胞核及钙盐粘液等呈蓝色，可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝，如处理适宜，可使细胞核着清楚的深蓝色，胞浆等其它成分脱色。

再利用胞浆染料伊红染胞浆，使胞浆的各种不同成分又呈现出深浅不同的粉红色。

故各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。

三、实验用具：单面刀片、切片刀、切片机、载玻片、盖玻片、烧杯、量筒、染色缸、树胶瓶、毛笔、熔蜡箱（或恒温箱）、展片台（或烫板）、烤片盒、切片托盘。

He染色切片制作（各动物、全过程、操作要点、注意事项）石蜡切片制备基本步骤一、准备工作（一）洗涤实验所需器皿：（玻璃器皿的清洗）1、用洗衣粉将玻璃器皿表里擦洗干净反复洗刷2、将器皿在自来水下冲洗干净3、将器皿倒扣在铺有吸水纸或纱布的桌子上控干注：一般情况下，经以上步骤后，用蒸馏水洗过1~3次即可烘干备用，如果做特殊染色还需浸泡在酸性清洁液内12~24小时，再经自来水彻底冲洗，再用蒸馏水过洗1~3次烘干备用。

（二）配制：硫酸洗液的配制清洁液（洗液）的配制：成分强酸液次强酸液弱酸液浓硫酸（ml） 1000 200 100重铬酸钾（mg） 63 120 100蒸馏水（ml） 200 200 1000重铬酸钾1200g蒸馏水 2000ml将2000ml浓硫酸缓缓倒入上述溶液中，边倒边用木棒轻轻搅拌（三）载玻片与盖玻片的处理1. 将所需载玻片与盖玻片清洗后，放入硫酸重铬酸钾溶液中浸泡24小时2. 流水冲洗，再用蒸馏水冲洗3遍3. 95%~100%酒精浸泡24小时，用绸布擦干备用注：在将载玻片与盖玻片放入清洁液中时，要一片片地投入，使其不致重叠。

二、常用液体的配制（一）缓冲溶液：1．磷酸盐缓冲液A液：0.1mol/L磷酸二氢钠B液：0.1mol/L磷酸氢二钠A液与B液按比例混合调整到所需的PH值（3：7≈PH7.0）2．枸椽酸缓冲溶液A液：0.1mol/L枸椽酸B液：0.1mol/L枸椽酸钠A液与B液按比例混合调整到所需的PH值（6.2：42.8≈PH6.2）（二）固定剂：1．甲醛：10%甲醛福尔马林 100ml蒸馏水 900ml注：实际甲醛含量只有3.6~4.0%但习惯上都将其视为10%。

2．10％中性福尔马林钙固定液甲醛液 10ml蒸馏水 90ml加碳酸钙至过饱和(以容器底部碳酸钙沉淀1~2cm厚为适度)充分振荡混合后，放置24小时取上清液使用。

3．4%多聚甲醛：8%多聚甲醛多聚甲醛8g蒸馏水 100ml加温至60℃左右，不时搅拌，成为乳白色溶液。

石蜡切片制作和HE染色实验报告
实验目的，通过石蜡切片制作和HE染色实验，观察组织结构和
细胞形态，学习并掌握组织学技术操作方法。

实验原理，石蜡切片制作是将组织标本固定、脱水、透明化、
浸渍石蜡、包埋、切片、贴片、脱蜡、染色、脱水、透明化、封片
的过程。

HE染色是一种常用的组织学染色方法，用于观察组织结构
和细胞形态的染色技术。

实验步骤：
1. 组织标本固定，取得组织标本后，进行快速固定。

2. 脱水，将固定后的组织标本置于不同浓度的乙醇中逐步脱水。

3. 透明化，将脱水后的组织标本置于透明剂中进行透明化处理。

4. 浸渍石蜡，将透明化后的组织标本浸渍熔化的石蜡中。

5. 包埋，将浸渍石蜡后的组织标本置于包埋模具中，倒入石蜡
进行包埋。

6. 切片，用切片机将包埋后的标本切成薄片。

7. 贴片，将切好的薄片贴在载玻片上。

8. 脱蜡，将贴片后的载玻片置于脱蜡剂中进行脱蜡处理。

9. 染色，将脱蜡后的载玻片进行HE染色处理。

10. 脱水，将染色后的载玻片进行脱水处理。

11. 透明化，将脱水后的载玻片进行透明化处理。

12. 封片，将透明化后的载玻片盖上盖玻片封好。

实验结果，通过实验操作，成功制作了石蜡切片并进行了HE染色。

观察下来，组织结构清晰，细胞形态明显，染色效果良好。

实验结论，通过本次实验，我学习并掌握了石蜡切片制作和HE 染色的操作方法，对组织学技术有了更深入的了解。

同时，我也意
识到实验操作中的细节和步骤对结果的影响，需要在以后的实验中更加细心和认真。

详细论述常规石蜡切片he染色的基本流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor.I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!详述常规石蜡切片HE染色的基本流程在病理学研究和临床诊断中，常规石蜡切片HE染色是一种常见的组织学技术。

石蜡切片xx精－伊红（HE）染色方法
（1）选择切片：
组织尽量完整，无分裂；
（2）脱蜡：65℃烤片1h，使用二甲苯进行脱蜡，二甲苯Ⅰ-20min（二甲苯先加热到65℃，然后水浴）→二甲苯Ⅱ-15min（常温）；
（3）水化：
采用乙醇梯度水化，乙醇二甲苯-2min→无水乙醇Ⅰ-2min→无水乙醇Ⅱ-
2min→95%-2min→90%-2min→80%-2min→70%-2min→60%-2min；
（4）RO/UP水冲洗一遍（约10s）；
（5）xx精染色：
水化后的切片放入苏木精染液中浸15min，染细胞核。

RO/UP水冲洗
1min；
（6）1％盐酸乙醇分化10 s;弱碱性水溶液（5%氨水溶液）返蓝10s
（7）自来水冲洗10分钟；
（8）梯度乙醇脱水：60%-70%-80%-90%，各2min
（9）伊红染色：
充分水化后的切片直接入伊红染色液中，染细胞质1min；
（10）梯度乙醇脱水：95%→100%Ⅰ→100%Ⅱ→乙醇二甲苯—二甲苯Ⅰ→二甲苯Ⅱ，各2min；
（11）中性树胶封片，65℃烤片至树胶凝固（3h以上）。

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石蜡切片和HE染色详细步骤
一、石蜡切片制备
1、收集样品：根据样品的性质和形状，选择适当的采样工具和采样
容器，将样品采集到容品中并制冷处理，以防止样品发生腐败。

2、石蜡制备：在制作石蜡切片之前应先量出所需的石蜡，并将其放
入容器中，然后加入酒精等助剂加热溶解，当石蜡完全溶解熔融后，用桶
或温度控制的水浴加热，随着温度的升高，搅拌均匀，使石蜡液完全熔化，熔化后即可用于制作石蜡切片。

3、制备切片：将样品置于熔融石蜡中，用切片机将样品切成指定的
厚度，以便用于染色；将薄片分类清洗，用干净的棉棒涂上几滴石蜡，使
其连接牢固，然后放在凉爽的干燥地方。

二、HE染色
1、润湿：将样品片放入石蜡解决液，轻轻摩擦，使其充分润湿。

2、酒精消切：将石蜡解决液滴入被润湿的样品片，轻轻摇晃，完成
样品的酒精消切。

3、甲醛处理：将样品片放入含醛的苯乙酮溶液中，经摇晃后再放入95%乙醇中搅拌，使样品片可以完全吸收醛，促使样品受醛处理，使样品
片充分脱脂，加快染色效果和特殊部位的显示。

4、HE染色：将脱脂的样品片放入无菌玻璃容器内。