动物细胞培养和核移植技术1．对某种动物的肝肿瘤细胞进行细胞培养，下列说法正确的是( )A．取单个肝肿瘤细胞进行培养，获得细胞群的方法不属于克隆培养法B．细胞培养过程中不需考虑细菌的污染问题C．该培养液也能用来培养乙肝病毒D．在原代培养过程中，培养的细胞最终也会出现停止增殖的现象解析：A选项的描述属于细胞层次的克隆，A项错误。
培养液受细菌污染后，其中营养成分要发生改变，不利于细胞的培养，B项错误。
病毒的生存离不开细胞，用培养液不能培养病毒，C项错误。
一般的细胞繁殖10代后，将停止增殖，D项正确。
答案：D2．动物细胞培养过程的顺序是( )①原代培养②传代培养③用胰蛋白酶处理组织，形成分散的细胞悬液A．①②③B．①③②C．②①③D．③①②解析：动物细胞培养过程的程序为选取幼龄动物或早期胚胎组织作培养材料→用胰蛋白酶处理组织，制备细胞悬液→原代培养→传代培养。
答案：D3．用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织或细胞( )A．容易产生各种变异B．具有更高的全能性C．取材十分方便D．分裂增殖的能力强解析：用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织，主要因为胚胎或幼龄动物的器官或组织分裂能力旺盛。
答案：D4．某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养。
下列叙述正确的是( )A．制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶处理肝组织块B．恒温培养箱中的CO2浓度维持在5%左右，以促进细胞呼吸C．为了保证细胞培养所需的无毒环境，需大量添加各种抗生素D．本实验应设置对照实验，以检测药物对甲、乙的毒性大小解析：在利用肝组织块制备肝细胞悬液时，常用胰蛋白酶，不能使用胃蛋白酶，因为胃蛋白酶需要在强酸环境下才能起作用，但这样的环境不适于细胞生存，A项错误；细胞培养应在含CO2恒温培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液的pH值，B项错误；抗生素是用来杀菌的，不是杀病毒的，C项错误；本实验应设置对照实验，用添加甲药物、乙药物的培养液分别培养细胞，根据变异细胞占培养细胞的比例，以检测药物对甲、乙的毒性大小，D项正确。
答案：D5．如图表示动物细胞培养程序图，请据图回答下列问题。
①取动物组织块↓②________③处理组织分散成单个细胞↓④制成________↓⑤转入培养液中进行培养↓⑥处理贴壁细胞分散成单个细胞，制成________↓⑦转入培养液中进行培养(1)过程②表示________________________________________。
(2)过程③和⑥用________处理组织或贴壁细胞分散成单个细胞，这样做的目的是_______________________________________________________________________。
(3)④和⑥的过程都要把分散的细胞制成__________________。
(4)过程⑤进行的细胞培养是________，细胞适于____生长增殖。
(5)过程⑦进行的细胞培养是________，一般传至______代后就不易传下去了，传至________继续培养时，增殖会逐渐缓慢，以至于完全停止，部分细胞的________会发生改变。
继续培养时，少部分细胞发生了________，朝着等同于________的方向发展。
解析：进行动物细胞培养时，首先将组织块剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，使其分散成许多单个细胞，然后，用培养液将分散的细胞稀释制成细胞悬液，再将细胞悬液放入培养瓶内，置于适宜环境中培养。
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。
以后，细胞进行有丝分裂，数目不断增多。
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。
人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。
贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分别继续培养，让细胞继续增殖，这样的培养过程通常被称为传代培养。
答案：(1)剪碎组织(2)胰蛋白酶解除由于接触对细胞生长和繁殖的抑制(3)细胞悬液(4)原代培养贴壁(5)传代培养10 10～50代细胞核型突变癌细胞A级基础巩固1．动物细胞培养与植物组织培养的重要区别在于( )A．培养基不同B．动物细胞培养不需要在无菌条件下进行C．动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能D．动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株解析：此题考查的是动物细胞培养与植物组织培养的区别与联系。
动物细胞培养的培养基与植物组织培养的培养基不同，动物细胞一般用液体培养基培养，而植物组织培养一般用固体培养基，与植物组织培养的培养基相比，动物细胞培养的培养基中还要加动物血清等，A项正确。
它们都是在无菌条件下进行的，都可以传代培养，且都能够大量培养。
B、C、D 项的叙述有误。
答案：A2．下列关于动物细胞培养的说法正确的是( )A．连续细胞系不具有异倍体核型B．动物组织细胞间的胶原纤维可用纤维素酶水解C．原代培养细胞、有限细胞系比无限细胞系、肿瘤细胞更容易克隆D．提高动物细胞克隆形成率需要以滋养细胞支持生长及激素刺激等条件解析：连续细胞系大多数具有异倍体核型；动物组织细胞间的胶原纤维的主要成分是胶原蛋白，可以用胰蛋白酶酶解，不能用纤维素酶水解；在进行细胞克隆时，原代细胞、有限细胞系通常不如无限细胞系、肿瘤细胞。
答案：D3．一只羊的卵细胞被另一只羊的体细胞核移植后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下了一只羊羔，这种克隆技术具有多种用途，但是不能( ) A．有选择地繁殖某一性别的家畜B．繁殖家畜中的优秀个体C．用于保存物种D．改变动物的基因型解析：目前的克隆技术是将动物的一个细胞的细胞核植入一个去核的卵细胞，经过试管培养一段时间后，再移入另一个体的子宫内发育、分娩的技术。
通过该技术能够保持亲本的优良性状，保持性别不变，也能够用于保存物种，但不能改变动物的基因型。
答案：D4．据英国《卫报》披露，纽卡斯尔大学研究人员不久前成功实现一项生殖医学技术，将患有线粒体疾病妇女的受精卵中的细胞核移植到健康妇女捐献的去核卵子中，最终产下了健康的婴儿。
下列叙述错误的是( )A．此项技术的基础是动物的细胞和组织培养B．此项技术的原理与克隆羊“多莉”完全相同C．健康妇女捐献的卵子的细胞质具有调控移入细胞核发育的作用D．婴儿出生后具有患病夫妇以及捐献健康卵子的妇女三方的遗传特征解析：动物克隆技术的基础是动物细胞和组织培养，A项正确；此项技术用的受精卵的细胞核，而克隆羊用的是高度分化的乳腺细胞，分化程度不同，B项错误；卵细胞的细胞质具有调控移入细胞核发育的作用，C项正确；该婴儿细胞的核基因由形成受精卵的夫妇提供，质基因由提供去核卵子的妇女提供，D项正确。
答案：B5．2015年2月3日，英国国会表决同意允许医学界利用3个人的基因共同育子，成为全世界第一个准许“三亲育子”的国家。
“三亲育子”技术是将父母细胞核基因与一位妇女捐赠者的健康线粒体结合在一起，引入的基因只占婴儿总基因的0.1%。
这项技术旨在防止因线粒体基因缺陷引起的严重遗传疾病。
下列相关描述正确的是( )A．线粒体基因缺陷引起的遗传病是母系遗传病，传女不传男B．“三亲育子”可能会用到人工授精技术、胚胎移植技术等C．通过“三亲育子”技术得到的“三亲婴儿”的健康线粒体基因不一定能传给其后代D．若父亲患有线粒体基因缺陷病，需要通过“三亲育子”技术避免将有缺陷的基因传给下一代解析：线粒体基因缺陷引起的遗传病是母系遗传病，是由母亲的卵细胞传给子代的，表现为母亲患病子女都患病，A项错误；“三亲育子”技术主要利用的是胚胎工程技术，目前在生产实践中应用较多的是体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植，B项错误；通过“三亲育子”技术得到的“三亲婴儿”如果是个女孩，其健康线粒体基因可以通过卵细胞传给其后代，如果是个男孩，其健康线粒体基因一般不能通过精子传给子代，C项正确；精子的线粒体都集中在尾部，且受精时只有精子的头部进入卵细胞，故男子的线粒体基因一般不能通过精子传给子代，若父亲患有线粒体基因缺陷病，子代一般不会患病，D项错误。
答案：CB级能力训练6．现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质，实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性，并比较二者毒性的强弱。
请你以一个研究人员的身份参与此项研究，完成下列实验报告并回答有关问题。
实验原理：有毒物质能诱导细胞产生变异，根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值)，可判断该化学物质的毒性。
实验材料：活的小白鼠胚胎。
药品用具：胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、培养瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂各时期高倍显微照片。
实验步骤：(1)制备细胞悬浮液：把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入______________处理，使胚胎组织分散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液。
(2)进行细胞培养：①取A、B、C三个洁净的培养瓶，________________，加入等量的细胞悬浮液。
②向A培养瓶中加入化学物质甲，向B培养瓶中加入___________，向C瓶内加入等量的生理盐水，并将培养瓶摇匀。
③在实验中，C培养瓶起什么作用？_______________________________________________。
(3)制作临时装片：①当细胞增殖到大约第8代时，同时从恒温箱中取出三个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，使培养的细胞____________________，再加入动物细胞固定液以便迅速杀死细胞并固定细胞。
②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，用_______________染色，3～5 min后，盖上盖玻片。
(4)镜检和统计：把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜，寻找处于________________期的细胞，并与C组对比以确认发生变异的细胞，同时统计________________________________________________________________________________________________________。
(5)结果与结论：经研究人员实验得知：A、B、C三个培养瓶的Q值依次为：QA＝1.3%、QB＝12.5%、QC＝0.1%，由此可知该实验的结论是______________________________________________________________________________________________________。
