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五分类血细胞分析仪的原理及使用 ppt课件

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现代五分类血细胞分析仪的原理及使用讲课文档

现代五分类血细胞分析仪的原理及使用讲课文档
科对CBC异常结果基不或很少进行人工显微镜复查 ，这种现 象在经济发达的沿海地区更是普遍 。有资料显示 ，国内各医 院 CBC实际镜检率在0% ～15% ，大部分医院镜检率< 5% 或者不镜检 。这种现象引发了不少的医疗投诉 、纠纷或事故 。 分析这类题出现的原因可能有 : (1)认识不够 ，认为血细胞分析
血液分析仪优势 检测项目多 速度快 精度高 易操作
第二页，共95页。
• 血液细胞分析仪是医院检验科、化验室的常规设备之一，也是 发展最快、应用最普及的检验仪器，当前血液细胞分析仪分为 三分群和五分类两种。国际市场上五分类血液细胞分析仪已经 成为发达国家医院血液临床检验的主流产品，但由于五分类血 液细胞分析仪需集光学、电子、气路、液路、计算机等技术于 一体，技术含量非常高，纵观全球，也仅有美国、法国、日本
复查完毕后的报告签发模式。
• 6、直方图、散点图的利用。
第二十八页，共95页。
血细胞自动分析异常结果人工显 微镜复检
• 1、镜检复核的现状
• 血细胞分析仪仍只能作为CBC 分析的一种过筛手段 ，当遇到可
疑情况 ，尤其是在病理条件下 ，其测定结果并不可靠 ，需要人 工以显微镜复查 ，这已是不争的事实 。但是 ，国内目前各医院检验
第二十二页，共95页。
0°：前角光散射（1°～3°），可粗略测定 细胞大小。
10°：狭角光散射（7°～11°），可测定
细胞内部结构相对特征。
90°：垂直光散射（70°～110°），测定
细胞核分叶情况。
90°：消偏振光散射（70°～110°），区 分嗜酸性粒细胞与其他细胞。
第二十三页，共95页。
第二十四页，共95页。
• 值得一提的是市面上偶见假五分类血球仪。假 五分类血球仪则不用上述原理分析血细胞成分, 更多的使用电脑软件的分析而得出五分类结 果。分辨是否真五分类技术的血球仪，如果 是试剂法,试剂不应该少于四种,如果是激光法, 试剂不少于三种。

五分类血细胞分析仪的原理及使用

五分类血细胞分析仪的原理及使用
复查完毕后的报告签发模式。 • 6、直方图、散点图的利用。
血细胞自动分析异常结果人工
显微镜复检
• 1、镜检复核的现状
• 血细胞分析仪仍只能作为CBC 分析的一种过筛手段 ，当遇到 可疑情况 ，尤其是在病理条件下 ，其测定结果并不可靠 ， 需要人工以显微镜复查 ，这已是不争的事实 。但是 ，国内 目前各医院检验科对CBC异常结果基不或很少进行人工显微 镜复查 ，这种现象在经济发达的沿海地区更是普遍 。有资料 显示 ，国内各医院 CBC实际镜检率在0% ～15% ，大部 分医院镜检率< 5%或者不镜检 。这种现象引发了不少的医疗 投诉 、纠纷或事故 。分析这类题出现的原因可能有 : (1)认识 不够 ，认为血细胞分析仪尤其是五分群的血细胞分析仪的检 测结果可靠 ，不需要复查 ； ( 2)工作量大 ； ( 3 )怕麻烦 ， 图省事 ； ( 4 )目前没有一个可参照的执行标准 ，即对CBC结 果的人工复查的标准 、内容 、方法及程序尚无明确的规定 。
• 在激光技术中目前有半导体 激光和气体激光。半导体激 光功率弱,但作为细胞分类自 己足够;气体激光功率强。二
者比较半导体激光具有寿命 长(7~10年)体积小,启动快,耗 电小,对稳压要求低,更为经济 适用等特点。
• （1） 电阻抗、高频电导及激光散射联 合检测法
• 即库尔特公司的VCS技术。
• V:代表体积容量。电阻法微孔技术应用于计数血细胞和测 定其体积的大小。
• 血细胞五分类技术是一种综合应 用光学、 机械学、流体力学、电子计算机、细胞生 物 学、免疫学等学科技术，让被测溶液流 经测量区域 并逐一检测其中每一个细胞的 物理和化学特性从而对 高速流动的细胞或 亚细胞进行快速定量测定和分析的 方法。
它一秒钟能分析几千个细胞，并同时测定 细胞 的多个参数。阻抗法也在五分类血细 胞仪中被采用，即所谓的鞘流阻抗法。

SYSMEX五分类血球检测原理

SYSMEX五分类血球检测原理

二、速度的提升
❖ CBC: ❖ CBC+DIFF: ❖ CBC+DIFF+RET: ❖ CBC+RET:
100 个样本/小时 100 个样本/小时
80 个样本/小时 80 个样本/小时
三、新增血液报告参数
IG#&%
<DIFF通道>
RET-HE
<RET/PLT-O通道>
出新才精彩
关
谢注 生 命
谢追 ！求
中 性
嗜酸
NRBC通道
❖NR 溶血素
➢ 白细胞膜上打孔 ➢ 有核红细胞溶解为裸核 ➢ 完全溶解红细胞、血小板
❖NR 染液
➢ 对DNA/RNA染色
NRBC通道
❖ 纵坐标：前向散射光〔FSC,反映细胞大小 ❖ 横坐标：侧向荧光〔SFL,反映核酸含量
NRBC
WBC
在XE-2100 上有更好的有核红 细胞测定方法,在专用的NRBC通 道中自动进行检测. NRBC被专门计数,同时WBC计数 值和淋巴细胞分类值被自动校 准.
XT2000i/ XT4000i
√
√ √√√ √
×
××
XT1800i √ √ √ √ √ × × × ×
XS
√ √ √√× × × × ×
XE5000比XE2100增加的功能
一、全自动体液检测功能 样本类型：胸水、腹水、脑脊液、关节液
等 计数+分类 由DIFF通道测定,速度：38标本/小时
二、40微升微量血:CBC+DIFF+RET
鞘流阻抗法
RBC/PLT-I通道
前鞘流：避免多颗粒同时通过宝石孔——少计数 避免颗粒侧流——多计数
后鞘流：避免颗粒回流——多计数

现代五分类血细胞分析仪的原理和使用

现代五分类血细胞分析仪的原理和使用

一、常见血细胞分析仪品牌
• 1、库尔特 • 2、希思美康 • 3、迈瑞 • 4、雅培 • 5、光电 • 6、拜耳 • 7、……
二、五分类血细胞分析仪的检测原理
（一）、仪器基本结构 1、机械系统 2、电学系统 3、光学系统
（二）、分类计数的基本原理
• 1、电阻抗的利用
• 2、激光技术、射频技术、组织化学技术的 应用
（3）电阻抗和射频电导联合检测法
• 这种方法是分别采用四个检测系统来检测不同类 型的细胞
• ①淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞检测系统:在 细胞悬浮液中加入溶血剂使红细胞溶解,而使白细 胞保持完整细胞浆及核形态近似于生理状态,当这 些细胞通过检测系统时,对白细胞进行电阻抗法(测 量细胞体积)和射频电导法(检测细胞核和颗粒密 度)的联合检测,结果将细胞分成淋巴细胞、单核细 和中性粒细胞三个群体。
正常白细胞直方图
异常白细胞直方图
2、红细胞直方图
（1）正常红细胞分布：50～200fl （2）异常红细胞直方图
3、血小板直方图
正常血小板直方图呈左偏态分布：2～30fl 分布，主要在2～15fl。
异常血小板直方图
血液分析仪
江苏大学基础医学与医学技术学院 朱伟
血细胞分析仪教学要求
• 掌握血细胞分析仪的概念、库尔特原理、 仪器的基本结构。
现代五分类血液分析仪 原理及使用
血液分析仪,临床血液一般检查最常用仪器。 50年代，美国库尔特（W.H.Coulter）发明 电子血细胞计数仪并申请专利。 1982 年，Technicon 公司生产了 H6000 型血液细胞，分析仪器，应该是首款具有白 细胞五分类能力的仪器。同时代日本日立公 司推出图像分析法的白细胞分析仪HITACHI 8200 型，仅仅是用于完成白细胞血片分类 的仪器，没有其他血细胞计数分析能力。

现代五分类血细胞分析仪的原理及使用[可修改版ppt]

现代五分类血细胞分析仪的原理及使用[可修改版ppt]

（3）电阻抗和射频电导联合检测法
• 这种方法是分别采用四个检测系统来检测不同类 型的细胞
• ①淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞检测系统:在 细胞悬浮液中加入溶血剂使红细胞溶解,而使白细 胞保持完整细胞浆及核形态近似于生理状态,当这 些细胞通过检测系统时,对白细胞进行电阻抗法(测 量细胞体积)和射频电导法(检测细胞核和颗粒密 度)的联合检测,结果将细胞分成淋巴细胞、单核细 和中性粒细胞三个群体。
血液分析仪优势 检测项目多 速度快 精度高 易操作
• 血液细胞分析仪是医院检验科、化验室的常规设备之一， 也是发展最快、应用最普及的检验仪器，当前血液细胞分 析仪分为三分群和五分类两种。国际市场上五分类血液细 胞分析仪已经成为发达国家医院血液临床检验的主流产品， 但由于五分类血液细胞分析仪需集光学、电子、气路、液 路、计算机等技术于一体，技术含量非常高，纵观全球， 也仅有美国、法国、日本等国家的 6 个厂家能够生产真正 意义上的五分类血液细胞分析仪。
一、常见血细胞分析仪品牌
• 1、库尔特 • 2、希思美康 • 3、迈瑞 • 4、雅培 • 5、光电 • 6、拜耳 • 7、……
二、五分类血细胞分析仪的检测原理
（一）、仪器基本结构 1、机械系统 2、电学系统 3、光学系统
（二）、分类计数的基本原理
• 1、电阻抗的利用
• 2、激光技术、射频技术、组织化学技术的 应用
• 白细胞化学染色
• 在稀释液中加入过氧化酶(MPO)的底物及显 色剂,根据白细胞对MPO的反应分类。中性 细胞MPO为强阳性,嗜酸性细胞阳性更强,单 核细胞为弱阳性,淋巴细胞阴性,嗜碱性细胞 亦为阴性,故综合光散射和细胞化学染色的特 点, 可得到二维或三维图像-----不同颜色的散 点图。由于嗜碱性细胞不含此酶,不能被检测, 因此一些仪器专门设置了嗜碱性细胞检测系 统,它的测量通道采用时间差的方法,与RBC、 PLT的测量系统共用一个通道。

血细胞分析仪测定原理与参数解析ppt课件

血细胞分析仪测定原理与参数解析ppt课件

射频电导法结合其他检测原理一起
应用于血细胞分析仪中。
ppt课件完整
射频电流检测原理
9
三、激光散色法流式细胞术检测原理
➢ 将经试剂稀释、染
色、球形化的细胞（或
其他颗粒）悬液注入鞘
液流中央，单个细胞随
悬液和鞘流液两股液流
整齐排列，以恒定流速
定向通过石英毛细管。
鞘流技术
1.检测光；2.细胞流；3.前鞘流；
血细胞分析仪测定原理与参数解析
➢太航医院检验科 ➢乔军军
ppt课件完整
1
➢简 介
➢血细胞分析仪检测原理
➢血细胞分析仪检测参数原理
➢检测参数（报警）
➢临床应用
ppt课件完整
2
➢简 介
ppt课件完整
3
➢ 自动血细胞分析仪,早年称血细胞技术
仪，已是目前国内外临床检验最常用的筛检 仪器之一。
➢
20世纪50年代初，美国W.H.Coulter
光检测器
接受来自各种角度的散射光或吸收光信号，并转换成相应 特征的电信号
ppt课件完整
13
➢血细胞分析仪检测参数原理
一、白细胞系列参数检测原理
二、成熟红细胞系列参数检测原理
三、血小板系列参数检测原理
四、血红蛋白浓度测定检测原理
ppt课件完整
14
一、白细胞系列参数检测原理
ppt课件完整
15
1、流式细胞术、电阻抗、射频和特殊细胞染色法 检测通道：
➢ “精度高、速度快、易操作、功能强”
是血细胞分析仪的强劲优势，还可和血涂 片制备和染色仪进行组合，由后者完成血 细胞分析仪检测后的形态学复检。
ppt课件完整
5
➢ 现代血细胞分析仪的功能有:1.全血细

五分类血细胞分析仪的进展ppt课件

五分类血细胞分析仪的进展ppt课件

缺点：
异常标本中的小RBC、WBC碎片容易混作PLT计数 特殊病例（如化疗）容易错误判断出血倾向
——更准确的PLT检测结果
两种方法检测PLT
RET/PLT-O通道：激光形态检测 优点
激光法对PLT的形态鉴别能力强
异常标本中的小RBC、WBC碎片、或PLT数目较少 时，激光法能更准确地将PLT鉴别出来
五分类血细胞分析仪的进展
血细胞分析仪的概念

分析外周血细胞的仪器
– 分析对象以外周血中成熟细胞（红细胞、白细胞、 血小板）为主

不同发展水平的产品
– – – – 白细胞二分类 三分类 五分类。。 模块式自动化。。。。

单机自动化：筛选
五分类+推/染片机+读片机
五分类血细胞分析仪的发展
五分类仪器的发展概要 完善对成熟细胞分析的方法学 – EO/BA、血小 板 检测幼稚细胞
总
结
先进技术象征
前瞻性的技术研发项目
– – – – – –
白细胞分类技术 网织红细胞技术 幼稚细胞检测技术 有核红细胞技术 血小板双方法检测术 流水线系统
Alpha 流水线系统
系统扩展
谢
谢
（细胞内部结构，如 核的大小）
前向散射光
（细胞大小） 激光 （波长633nm）
白细胞五项分类技术
核酸染料Polymethine（多次甲基）的作
用：
– IG：准确的未成熟粒细胞 – OTHER：异常淋巴、原粒细胞 – 更准确的WBC分类结果
新的血液学信息
IG-不成熟粒细
胞。 可精确计数不成 熟粒细胞。


和CD-34+细胞良好的相关性, 无需任何前处理，只需40秒检测时间 即得知捕获末梢血干细胞 的最佳时间

SYSMEX五分类血液分析仪XT-2000i检测原理及临床应用PPT课件

SYSMEX五分类血液分析仪XT-2000i检测原理及临床应用PPT课件
.
P-LCR
参考值：0.13-0.43 体积超过12fl的PLT占总PLT的比率 对检测血小板凝集、与红细胞的重叠以
及监视血小板造血功能等有意义
.
MPV
参考值：9.4-12.5 fl 是反映骨髓造血功能是否良好的指标。 用于病情观察：白血病化疗时，MPV增加是
骨髓恢复的第一个征兆
.
MPV与PLT联合检测的临床意义
针刺采血： ①皮肤刺破后，导致血小板形成红色血栓 ②活化血小板，使血小板聚集 ③同时在血管中间形成一运动迅速，成分含量高的液流
.
五分类血液分析仪标本采集要求
1、最好一次穿刺采血成功 2、使用封闭式真空注射器和厂家生产的
EDTA-K2抗凝管 3、采血后应立即颠倒混匀数次，使血液与抗
凝剂充分混合，防止血液凝集 4、只能在室温下保存标本，低温（4℃）保存
SYSMEX五分类血液分析仪 XT-2000i检测原理及临床应用
.
血细胞分析仪的发展简史
二分群时代：淋巴细胞、非淋巴细胞 三分群时代：（大细胞、中间细胞、小细胞） 五分类时代：淋巴、单核、中性粒、嗜酸粒、
嗜碱粒
.
五分类血球方法学概览
方法学 – 第一代：纯物理原理(CD-3700，SE-9000) – 激光、射频、电阻 – 第二代：物理+化学（SYSMEX SF-3000，） – 酶染色、颗粒染色 – 特异性溶血 – 第三代：物理 +分子生物学（SYSMEX XT1800i/XT-2000i） – 分子生物学技术（DNA、RNA染色）
可使血小板计数结果减低
.
HST 流水线系统
.
Alpha 流水线系统
.
XS-系列仪器
XS-1000 i

血液细胞分析仪原理及应用PPT课件

血液细胞分析仪原理及应用PPT课件

۩ 经过溶血剂处理后的白细胞根据体 积大小可以初步确认其相应的种类：
۩ 第一亚群（小细胞群）是淋巴细胞 LYM；
۩ 第二个亚群是单个核细胞群MONO， 也被称为中间细胞MID；
۩ 相当于粒细胞的细胞群GRAN位于第三 亚群（大细胞群）。
二、血细胞计数检测原理
二、血细胞计数检测原理
۩ 仪器根据各细胞群占总体积的比例计算出 各细胞群的百分比，如果与该标本为的白 细胞总数相乘，即得到各项的绝对值
۩ 采用库尔特电阻抗原 理测量血细胞的体积 和数量，采用单色光 比色原理检测血红蛋 白，并根据血细胞体 积分布直方图得出白 细胞的三分类。
۩ 每小时可作35～50个 样本
۩ WBC,RBC,HGB,PLT ,LY,MO,GI
三、Coulter ACT diff血细胞分析仪的结构
۩ 卡槽
۩ 卡与试剂的批次相 对应
二、血细胞计数检测原理
۩ 因540nm和690nm相差不远，可以 吧AS1和AS2视为相等。因此透过比 色皿的参考信号和样品信号的吸光 度之差ΔA为：
A ( K 2 K 1 )CL
二、血细胞计数检测原理
5. 血小板计数原理
۩ 血小板随红细胞一起在一个系统中进行检 测，由于血小板体积与红细胞体积有明显 的差异，仪器设定了特定的阈值，将高于 阈值者定于红细胞，反之为血小板 。
۩ 正常成年人的红细胞比容,男性为40%50%,女性为37%-48%。
二、血细胞计数检测原理
4. 血红蛋白测定原理
۩ 一般采取比色法 ۩ 加入溶血剂，释放血红蛋白 ۩ 用HiCN 生成氰化血红蛋白 ，或是
用SLS，光谱最大吸收在540nm附 近。
二、血细胞计数检测原理
二、血细胞计数检测原理

五分类血细胞分析仪的原理及使用

五分类血细胞分析仪的原理及使用

五分类血细胞分析仪的原理及使用目录一、血细胞分析仪概述 (2)1. 血细胞分析仪的发展历程 (3)2. 血细胞分析仪的分类 (4)3. 血细胞分析仪的主要功能 (5)二、五分类血细胞分析仪原理 (6)1. 光学原理 (7)1.1 光源与检测器 (8)1.2 测量原理 (9)2. 电学原理 (10)2.1 电阻抗原理 (11)2.2 电容原理 (12)3. 细胞识别与分类技术 (13)3.1 基于形态学的分类 (14)3.2 基于流式细胞术的分类 (16)三、五分类血细胞分析仪使用 (17)1. 仪器准备与校准 (18)1.1 仪器安装与启动 (19)1.2 校准操作 (20)2. 样本制备与处理 (21)2.1 样本采集与保存 (22)2.2 样本制备过程 (23)3. 上机操作与数据分析 (23)3.1 上机操作流程 (25)3.2 数据分析与解读 (26)4. 结果审核与报告出具 (27)4.1 结果审核流程 (29)4.2 报告出具与解读 (30)四、常见问题与维护保养 (31)1. 常见问题及解决方法 (32)2. 仪器维护与保养指南 (33)一、血细胞分析仪概述血细胞分析仪是一种先进的医疗检测设备，广泛应用于临床血液学诊断和研究。

它通过测量和分析血液中的细胞数量、形态和功能，为医生提供有关患者健康状况的重要信息。

血细胞分析仪的发展经历了从手工计数到自动化仪器的发展过程，如今已经发展到了第五代，即五分类血细胞分析仪。

五分类血细胞分析仪是一种先进的白细胞分类器，可以准确地对白细胞进行分类和计数。

它采用了先进的激光技术、电子技术和计算机技术，能够快速、准确地分析大量的血液样本，并提供详细的白细胞分类结果。

与传统的显微镜分类法相比，五分类血细胞分析仪具有更高的准确性和效率，能够有效地提高临床诊断的准确性。

五分类血细胞分析仪的主要原理是通过测量细胞体积、电导率、光散射和荧光等参数，对白细胞进行分类。

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• ②嗜酸性细胞和嗜碱性细胞两种检测系统: 在细胞悬浮液中加入特殊的溶血剂,除嗜酸 性细胞和嗜碱性细胞外,其他细胞均被溶解 或萎缩再对保持完整的嗜酸性细胞或嗜碱 性细胞进行计数。
1、电阻抗原理，又称库尔特原理
孔电流 外电极
-
标本杯
真空 内电极
+ 血细胞 悬液
鞘流技术联合电阻抗的应用
2、激光技术、射频技术、组织化 学技术的应用
五分类仪器与三分类仪器的主要区别在 于：白细胞不再粗略地以大小来进行分群， 而是采用激光技术、组织化学技术、射频技 术等等来对白细胞进行分类。根据仪器厂家 的不同，不同品牌的仪器采用了不同的分类 计数。
血液分析仪优势 检测项目多 速度快 精度高 易操作
• 血液细胞分析仪是医院检验科、化验室的常规设备之一， 也是发展最快、应用最普及的检验仪器，当前血液细胞分 析仪分为三分群和五分类两种。国际市场上五分类血液细 胞分析仪已经成为发达国家医院血液临床检验的主流产品， 但由于五分类血液细胞分析仪需集光学、电子、气路、液 路、计算机等技术于一体，技术含量非常高，纵观全球， 也仅有美国、法国、日本等国家的 6 个厂家能够生产真正 意义上的五分类血液细胞分析仪。
容 量 、 电 导 、 光 散 射 （ volume ， conductivity， scatter, VCS）法
原理
细胞体积技术（测量 细胞大小） 电导性技术（测量细 胞内部结构） 光散射技术（测量细 胞形态、细胞核和细胞 颗粒）。
体积
电导
光散射
VCS可显示3种细胞散点图 DF1（体积值和散射光值） DF2（体积值和电导值） DF3（体积值和电导值）
（2）光散射和细胞化学染色联合应用
• Bayer公司的的DVIA120型和2120型血细胞 分析仪、Sysmex公司的SF-3000型、迈瑞 的BC-5500血细胞分析仪均采用了该原理进 行工作。
• 利用激光散射和过氧化物酶染色技术进行 细胞分类。利用光散射的原理计数血细胞, 因细胞表面结构不同,在不同角度上散射光 有差别,有助于对白细胞的区分。
• 血细胞五分类技术是一种综合应 用光学、 机械学、流体力学、电子计算机、细胞生 物 学、免疫学等学科技术，让被测溶液流 经测量区域 并逐一检测其中每一个细胞的 物理和化学特性从而对 高速流动的细胞或 亚细胞进行快速定量测定和分析的 方法。
它一秒钟能分析几千个细胞，并同时测定 细胞 的多个参数。阻抗法也在五分类血细 胞仪中被采用，即所谓的鞘流阻抗法。
• 2006年 4 月深圳迈瑞 BC-5500推出之前，由于国内没有 掌握该类产品生产制造的核心技术，因而在中国市场销售 的该类产品由国外品牌所垄断，价格都比较昂贵，导致该 类产品不能在中国医院临床检验中大范围推广应用，BC5500 的推出推动了五分类血液细胞分析仪在国内的临床 应用，提高整个国内血液细胞检测的临床应用水平。
• 仪器在单一通道上同时用这三种方法对同 一白细胞进行测量,避免了有些血液分析仪 要设计好几个通道或加染色试剂的麻烦。
• 采用VCS技术的仪器主要是Coulter公司的 STKS型、MAXM型以及Gen.s型五分类血 液分析仪。MAXM型和Gen.s型可计数网织 红细胞,Gen.s型可选配自动制血片机。以 上几种型号还可直接计数CD4和CD8淋巴 细胞,并算出其比率。
五分类血液分析仪 原理及使用
Hematologic Analyzers
血液分析仪,临床血液一般检查最常用仪器。 50年代，美国库尔特（W.H.Coulter）发明 电子血细胞计数仪并申请专利。 1982 年，Technicon 公司生产了 H6000 型血液细胞，分析仪器，应该是首款具有白 细胞五分类能力的仪器。同时代日本日立公 司推出图像分析法的白细胞分析仪HITACHI 8200 型，仅仅是用于完成白细胞血片分类 的仪器，没有其他血细胞计数分析能力。
一、常见血细胞分析仪品牌
• 1、库尔特 • 2、希思美康 • 3、迈瑞 • 4、雅培 • 5、光电 • 6、拜耳 • 7、……
二、五分类血细胞分析仪的检测原理
（一）、仪器基本结构 1、机械系统 2、电学系统 3、光学系统
ห้องสมุดไป่ตู้
（二）、分类计数的基本原理
• 1、电阻抗的利用
• 2、激光技术、射频技术、组织化学技术的 应用
• 在激光技术中目前有半导体 激光和气体激光。半导体激 光功率弱,但作为细胞分类自 己足够;气体激光功率强。二
者比较半导体激光具有寿命 长(7~10年)体积小,启动快,耗 电小,对稳压要求低,更为经济 适用等特点。
• （1） 电阻抗、高频电导及激光散射联 合检测法
• 即库尔特公司的VCS技术。
• V:代表体积容量。电阻法微孔技术应用于计数血细胞和测 定其体积的大小。
• 白细胞化学染色
• 在稀释液中加入过氧化酶(MPO)的底物及显 色剂,根据白细胞对MPO的反应分类。中性 细胞MPO为强阳性,嗜酸性细胞阳性更强,单 核细胞为弱阳性,淋巴细胞阴性,嗜碱性细胞 亦为阴性,故综合光散射和细胞化学染色的特 点, 可得到二维或三维图像-----不同颜色的散 点图。由于嗜碱性细胞不含此酶,不能被检测, 因此一些仪器专门设置了嗜碱性细胞检测系 统,它的测量通道采用时间差的方法,与RBC、 PLT的测量系统共用一个通道。
（3）电阻抗和射频电导联合检测法
• 这种方法是分别采用四个检测系统来检测不同类 型的细胞
• ①淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞检测系统:在 细胞悬浮液中加入溶血剂使红细胞溶解,而使白细 胞保持完整细胞浆及核形态近似于生理状态,当这 些细胞通过检测系统时,对白细胞进行电阻抗法(测 量细胞体积)和射频电导法(检测细胞核和颗粒密 度)的联合检测,结果将细胞分成淋巴细胞、单核细 和中性粒细胞三个群体。
• C:代表传导性即电导(conductivity),指一束电磁波或称射 频,穿透细胞的传导性,它取决于细胞的大小和内部结构;经 校正后的传导性叫opacity即“不透明性”,这时不再反映 细胞大小,而是反映细胞内部的结构,像核的大小,核浆比例 和密度等。
• S:代表散射(scatter),指在不同角度测得的散射光强度。 由于各类细胞的表面结构不同和颗粒大小不同而对光的散 射各异,进而区分各类细胞。