水貂阿留申病毒结构蛋白与非结构蛋白在疾病诊断与疫苗研发中的应用

复制 性 细小 病毒 ， 细小 病 毒 科 （ ａ ｖ ｖｒ ａ ） 属 Ｐ ｒ ｏ ｉｄ ｅ 、细
小 病 毒 亚 科 （ ａ ｖ ｖｒａ ） 阿 留 申 病 毒 属 Ｐ ｒ ｏ ｉｎ ｅ 、
（ Ａｍｄ ｖｒ ｓ 。 为 阿留 申病毒 属惟 一 的成 员 ， ｏ ｉｕ ） 作 ＡＭ— ＤＶ 具有 自身 的 特 点 。病 毒 没 有 囊 膜 ， 构 比较 坚 结 实 ， 外 界抵 抗力 较 强 。病 毒 粒 子 三 维 空 间构 象 表 对 明 ， 壳 中 凸起 结 构 与 其 对 机 体 的 致 病 性 和 免 疫 反 衣 应 有关 ｎ 。病 毒 的致 病 特 点 较 为 复 杂 ， 引起 机 体 ］ 常
和疫 苗研 究 也不 断 深入 ， 病毒 的结 构 蛋 白和 非 结 构 蛋 白在 疾 病 诊 断 和 疫 苗 研 发 中 的 作 用 也 越 来 越 重 要 ， 章对 这 一方 面 的研究 进展 进行 了归纳 、 结 和 文 总
分析 。
构 蛋 白 和 非 结 构 蛋 白 的抗 体 以 及 自身 抗 体 。虽 ］
ＮＳ 蛋 白的 活 性 有 一 定 影 响［ １ １ 。ＮＳ 蛋 白还 能 诱 １ 导细胞 病 变［３ 具 有 细 胞 毒 性 作用 ， 通 过 调 节 酪 １， ９ 它
蛋 白激 酶 Ⅱ对 原 肌球 蛋 白的 磷 酸化 作 用 ， 引起 底 物 磷 酸化 ， 从而 发挥 细胞 毒 性作 用 ， 使 细胞 死 亡Ｌ 促 ２ 。 ＮＳ ｌ蛋 白的细胞 毒性与 它结 合 酪蛋 白激 酶 Ⅱａ的 能
ＡＭＤ 的分 子 生 物学 和免 疫 学 等 方 面 的 研 究 Ｖ
有 了 一 定 的理 论 基 础 ， 貂 阿 留 申 病 毒 的 诊 断 方 法 水
细胞 弥漫 性增 生 ， 清 中大量 ７球蛋 白 的产 生 ， 体 血 机
体 液免 疫 反应 强 烈 ， 染 动 物体 内 产 生 大 量 针 对 结 感
研发 过程 中作 用不 明显 ， 不是 主要 的抗 原蛋 白。
ＶＰ ２蛋 白是构 成 病 毒衣 壳 的 主要 蛋 白 ， 病毒 在 的遗 传进化 方面有重 要 的作用 ， ＡＭＤＶ致病性密 与 切相关［ 。ＶＰ １ ］ ２蛋 白作 为 病 毒 的 主 要 表 面抗 原 ， 具
有 良好 的免疫原性 ， 可刺激机 体 产生 中 和抗体 ， 是作
动 物 医 学 进 展 。Ｏ １ ３ （ ） ６ —２ ２ １ ， ２ １ ：９７
Ｐｒ ｇｒ ｓ ｎ Ｖ ｅ ｅ ｉ ｒ ｅ ｃ ｎｅ ｏ ｅ ｓ ｉ ｔ ｒｎａ ｙ Ｍ ｄｉｉ
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瞩 文献综述
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水 貂 阿 留 申病 毒 结 构 蛋 白 与 非 结 构 蛋 白在 疾 病 诊 断 与 疫 苗 研 发 中 的 应 用
７ ０
动 物 医 学 进 展 ２ ｌ 年 Ｏ１
第 ３ ２卷 第 ｌ （ 第 ２ ｌ ） 期 原 因 尚 不 清 楚 。Ｃ ｓｅ ｕｚＹ 病 具 ａｔｌ ｉ ｒ
等 ｎ 过 构 建 ＡＭ ＤＶ 的 ＤＮＡ 疫 苗 来 免 疫 水 貂 ， 。通 结
水貂 阿 留申病 毒 （ ｅ ｔ ｎｍｉｋ ｄｓａｅｖｒ ｓ Ａｌｕｉ ｎ ｉ ｓ ｉ ， ａ ｅ ｕ
ＡＭ Ｄ 是 一 种 具 有 持 续 感 染 性 、 细 胞 病 变 的 自主 Ｖ） 无
由于水 貂 阿 留 申病 毒 引起 的疾病 过 程 多为 慢性 经 过 、 性感 染 ， 隐 以及 ＡＭＤ 自身 复杂 的分子 生物 Ｖ 学 和免 疫学 特 性 ， 目前 针 对 水 貂 阿 留 申病 毒 的 多种
申病检 测 技术 ， Ｅ Ｉ Ａ 方 法 和常 规 Ｐ Ｒ方 法灵 比 ＬＳ Ｃ 敏度 高 。吴威 等［ 确 定 了 ＡＤＶ Ｇ的 一个 中和 抗原 １ 叩 —
决定 簇编码 核酸 ， 以及 对 流免 疫 抗 原 结 合 蛋 白位 点
力相 关联 ｌ ＿ ２ 。Ｃ ｒ ｔｎ ｅ ｈ ｉ ｅ ｓｎＪ等［］ 用 杆 状 病 毒 获 ｓ ２利 。
苗来 应用 。
病毒 主要 侵害 机 体 的单 核一 巨噬 细 胞 系 统【 ， ＿ 导 ２ ］
致 正 常的 免疫 系统紊 乱 。在机 体 的 免疫 器 官 与免 疫
细 胞 中增 殖 ， 毒分 散在脾 脏 、 系膜 淋 巴结 以及 单 病 肠 核 细胞 及 骨 髓 细 胞 中［ 。病 毒 在 感 染 机 体 过 程 中 ， ３ ］ 引起体 内 Ｃ ８ Ｔ 淋 巴细胞增 多 、 核 细 胞浸 润 、 Ｄ 单 浆
病毒基 因组 左 侧开 放 阅 读框 中 的 Ｐ ３转 录 启 动 子启 动 ｍＲ ＮＡ 翻译 ＮＳ ｌ和 ＮＳ ２蛋 白。病 毒 编 码 ＮＳ 蛋 白基 因在 遗 传 进 化 方 面 相 对 保 守 ［ ｔ １ 。Ｎ １ Ｓ 蛋 白是 病毒 的核 磷 酸化 蛋 白 ， 多 个启 动 子有 转 录 对 激 活作 用 ， 它是 病毒 基因组 编码 的 反式激 活 蛋 白 ， 具 有 正负 调节 表 达 的 作 用 。病 毒 粒 子 在 完 成 ＶＰ １和 ＶＰ ２的装配后 ， １和 ＮＳ ＮＳ ２蛋 白调控 病毒 复 制 的作 用才 终止 ， １蛋 白在 病毒 复制 与 转 录过 程 中发挥 ＮＳ 作用 时 需 要 ＡＴＰ的 参 与 ， ＡＴＰ 的 结 合 与 水 解 对
标志 ， 高水 平 的 Ｃ Ｔ 淋 巴细 胞 能 诱 导 Ｉ Ｎ一 Ｄ８ Ｆ ７和
Ｉ一 Ｌ ４的 产 生 ， 无 法 有 效 阻 止 持 续 性 感 染 ［ 。 但 ５ ］
收 稿 日期 ： ０ ００ － １ ２ １ — ５２ 基 金 项 目 ： 林 省 科 技 发 展 计 划 项 目（ ０ ８ ２ ３ ２ ０ ０ ３ ） 吉 ２ ０ ０ １ ； ０ ９ ５ １ 作者简 介： 杨 莘 （ ９ ５ ） 男 ， 东烟 台人 ， 士 ， 要从 事 特 种 经 济 动 物 疫病 防控 研 究 。 ＊通 讯 作 者 １８一 ， 山 硕 主
在 ３ ｕ和 ２ ｕ蛋 白上 ， ２ｋ ５ｋ 为制备基 因工 程疫苗 提供
了相应 的理论基 础 。Ｃ ｅ ｎ ｌ ｍｅ ｓ Ｌ等 Ｉ Ｄ ］ 重组 牛痘 病 毒来表达 ＡＭＤ 的 ＶＰ 和 ＶＰ Ｖ １ ２蛋 白， 明其 具 有 证 良好 的免疫 原 性 。Ｗｕ ｗ 等 杆状 病 毒 中表 Ｈ 。在 达 了 ＡＭＤ 的衣壳 蛋 白 ， 明其 可作 为有效 的诊 断 Ｖ 证
果对 ＡＭＤ Ｖ也 没有形 成一 定 的保 护作 用 。
２ 非 结 构蛋 白
非 结构蛋 白（ １和 ＮＳ ） ＮＳ ２ 在病 毒复 制和转 录过
程 中起 重要 作 用 ， 节 Ｄ 调 ＮＡ 复 制 起 始 和 基 因 的 转
录。
体 ， 现结构 蛋 白 ＶＰ 在病 毒感 染 细胞 的过 程 中也 发 １ 发 挥 了重要 作用 ， 是决定 病毒 致病 性 的关 键 因素 ， 也 是 病毒入 侵细胞并 产 生感染过 程 的一 个重 要 的结构 区域 。ＶＰ 蛋 白作 为病 毒 的衣 壳蛋 白 ， 病毒 感 染 １ 在 细胞 过程 中作用 不 可忽 视 ， 其 在 疾 病 诊 断 和疫 苗 但
在 病 毒 的 持 续 性 感 染 过 程 中 ， 构 蛋 白 有 一 定 结
的作 用［ 。Ｖ １ 白是 病毒 复制 和包 装所 必需 的一 ６ ］ Ｐ 蛋
种 结 构 蛋 白 ， 可 稳 定 病 毒 单 链 。 Ｔｈｌ 等 还 ｌｓＧ Ｅ ｉ ］ 构 建 缺 失 病 毒 结 构 蛋 白 ＶＰ １编 码 基 因 的 病 毒 突 变
为基 因工程 疫 苗重 要 的保 护 性 抗 原 ， 病 毒 诊 断方 在
面发 挥重要 作用 ， 研 究 比 ＶＰ 其 １蛋 白更 加 广泛 。 曾
祥伟 等［ 通过 Ｐ ８ ］ ＭＡＬ载体 来 构建 ＶＰ ２蛋 白主 要抗 原表位基 因 的原 核表 达 体 系 ， 立 了 ＶＰ Ｉ Ｅ水 建 ２Ｃ Ｐ 貂 阿留 申病诊 断方法 ， 具有 良好 的特 异性 和灵 敏 性 。 朱 善元等 通过基 因检 测芯 片技术 建 立 了新 的 阿留
然 ， 内存 在大量 的特异性 抗体 ， 当病 毒 再 次感 染 体 但 时 ， 内 的抗体 无法 中和病 毒 ， 而使 感 染 进 一步 加 体 反
重 。Ｃ Ｔ 淋 巴 细 胞 可 做 为 诱 导 细 胞 免 疫 反 应 的 Ｄ８
１ 结 构 蛋 白
ＡＭＤＶ基 因组 右 侧 开 放 阅 渎框 Ｐ ８转 录启 动 ３ 子 ， 动 ｍＲ 启 ＮＡ 翻 译 结构 蛋 白（ １和 ＶＰ ） 结 构 ＶＰ ２， 蛋 白在 病 毒感染 细胞 和机体 的免 疫应 答 中具 有 重要
杨 莘 ， 立 ， 建 科 ， 彬 ， 世 鹏 易 王 罗 程
（ 国农 业 科 学 院 特 产 研 究 所 ， 林 吉 林 １ ２ ０ ） 中 吉 ３ １ ９
摘 要 ： 水貂 阿 留 申病是 由水貂 阿留 申病毒 引起 的 一种 持 续 感 染性 疾 病 ， 害毛 皮 动 物养 殖 业 的发 展 。 危 水貂 阿 留 中病毒 的致病 特点 、 疫机 制等 与其 他 细 小病 毒 不 同 ， 在 自身 的复 杂 性 。 目前 ， 多研 究 者寻 求 免 存 众 新 的 疫 苗来预 防水 貂 阿 留申病 的发 生 ， 没有 取得 理 想 的效 果 。疾 病诊 断及 疫 苗研 发 对 防控 水 貂 阿 留 申病 但
具 有积 极 的 意义 。水貂 阿 留 申病 毒 结构蛋 白在 病 毒 感染 、 体 免疫 过程 中发 挥 关键 作用 ， 机 而非 结构蛋 白在 病
毒 转 录与 复制过 程 中有 着重要 作 用 ， 疾病 的诊 断 和疫 苗 的研 发 均在 二 者 的基 础 上 展 开 。应 用水 貂 阿 留 申病 毒 结 构蛋 白与非结 构蛋 白建 立新 的水 貂 阿 留 中病 毒诊 断方 法 ， 发 新 型基 因工程疫 苗 ， 研 对控制 水貂 阿 留中病