高效液相色谱技术在药物分析中的应用

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超高效液相色谱在药物分析中的应用观察

作者：周之鸽

来源：《现代养生·下半月》2014年第05期

【摘 要】在研究微量复杂混合物的高通量与分离的过程中，超高效液相色谱为其深入研究提供了平台。超高效液相色谱技术适用于药物制剂或者是药物的分析、检测、代谢以及质量控制等研究。本文主要对超高效液相色谱的本质以及原理进行阐述，进而分析超高效液相色谱的优缺点，对其在药物分析过程中的应用做深入分析。

【关键词】超高效液相色谱；应用；药物分析；高效液相色谱

在化学成分的分离中，高效液相色谱属于常规的检测技术，最近几年以来，在药物分析中得到普遍使用。高效液相色谱的主要优点为处理样品的方法比较简便、全自动化检测、具有较宽的适用范围、分离药物成分的效率比较高、检测中具有较高的灵敏度等[1]。随着科学技术的不断发展，超高效液相色谱作为一个新的研究方向，在药物分析领域中的应用得到广泛的认可，本文主要阐述超高效液相色谱在药物分析中的应用。

1 超高效液相色谱技术

1.1 作用原理

超高效液相色谱主要是结合了小颗粒填料色谱柱中的液相色谱技术，这样能使分离色谱峰的程度以及检测的灵敏度得到改善，同时能有效的缩短分析样品所需周期。超高效液相色谱的理论基础就是范德米特方程，方程式：HETP=AdP+B/v+CdP2v[2]。流动相线速度表示v，传质因子表示C，分子径向扩散系数表示B，粒径表示dP，涡流扩散系数表示A，理论塔板高度表示HETP。如果微粒具有较小的颗粒度，色谱柱会随之升高；微粒的不同颗粒度大小会与其色谱柱流速相对应；颗粒度越小，线速度的范围也就越宽；颗粒度越小，其效点会逐渐移动到高流速的方向。由此可见，在微粒颗粒度降低的同时，能使色谱柱效以及速度会得到提高。在色谱柱中的填料颗粒如果发生粒径下降，那么会提高色谱的分离度。通过研究可以发现，填料颗粒粒径在2μm以下时，会扩大上述方程式所包含的理论塔板高度值的范围，说明微粒粒径在2μm以下时，所得的色谱柱效更高，不对影响分离高度，能使分析样品速度以及微粒流速得到提高。如图1所示。

高效液相色谱 -质谱联用技术在药物分析中的应用

摘要：近些年，诞生了诸多新型的药物分析方式，比如说高效液相色谱-质谱联用技术，其在药物分析中的应用比较广泛，其先进性极高。为此，文章阐明了高效液相色谱-质谱联用技术在药物分析中的应用的研究背景，深入分析了高效液相色谱-质谱联用技术在药物分析中的具体应用，希望能为相关同行业者提供有价值的参考。

关键词：高效液相色谱-质谱联用技术；药物分析；具体应用

前言：色谱法的一个重要分支是高效液相色谱技术，其在具体运用中流动相为液体，相较于单独的任何一种色谱检测技术，高效液相色谱技术的优势在准确、快速。目前，质谱分析方法也与其进行了高效结合，即高效液相色谱-质谱联用技术，也就是此次研究的主要方式，该种技术被广泛应用于有机化学领域中，为药物分析工作奠定了坚实可靠的基础。

1研究背景

药物分析是将药物应用到临床实践过程中的必要环节，因此一种有效地药物分析方法是十分重要的。色谱技术的主要作用是分离分析复杂的化合物，而质谱法则能够在一次分析中体现出较为完整的结构信息。高效液相色谱—质谱联用是分离化学检验的一次突破，其将色谱技术和质谱技术检测的优点进行了充分的结合，能够应对药物分析的检测需要。

高效液相色谱技术是以经典液相色谱技术为基础，同时融入了气相色谱技术而发展起来的一项检测技术。其在应用过程中，能够快速的完成分析过程，同时在最大程度上保持检验的质量。质谱分析方法的主要作用是对离子荷质比的测量，给结构定性提供较为全面的信息。液相色谱—质谱联用是有机质谱仪的重要种类，具有很高的灵敏度，促进色谱和质谱的匹配程度，更大程度上提高离子化效率。二者联用，能够最大程度上发挥出互补优势，给药物分析工作带来极大的便利。

2高效液相色谱-质谱联用技术在药物分析中的应用

2.1在复杂成分筛选中的应用

目前，仍有一些成分较为复杂的药物，其具体的成分组成、药效机制、活性成分和代谢途径仍未得到精准确定，使得这些药物的推广应用受到很大阻碍。为此，必须采用一种科学合理的分析方法来对这种药物进行一系列分析。在这种情况下，高效液相色谱-质谱联用技术就得到了有效应用。近年来，国内外很多研究人员应用此项技术对一些较为复杂的药物进行了分析，如一些研究人员应用此项技术对龙胆科和豆科的多种植物进行了成分分析，发现在使用这种方法的前提下，即使是样品的含量很低，也能快速准确地分析出这些植物中具有生物活性的化合物，是液质结合核磁的作用。在得出这一研究结论后，又有研究人员在此基础上对中药中的皂苷类成分进行了分析，结合同类已知结构化合物的裂解规律，给出大量结构信息，或结合其他检测方法，即可对未知成分结构进行直接分析，如采用HPLC-MS联用仪，鉴定中药中的皂苷类有效成分，分离鉴定出保肝活性的茵陈色原酮有，不仅得到了大量的同分异构体，还得到了一系列新的化合物。

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高效液相色谱技术在药物分析中的应用

本科生毕业论文

论 文 题 目: 高效液相色谱技术在药物分析中的应用

学 生 姓 名:孙琮莘

学 号:20XX0000

学 院:药学院

专 业 方 向:中药学

班 级:20XX级03班

指 导 教 师:李*

论文完成日期:20XX年4月

毕业论文(设计)诚信声明书

本人声明:本人孙琮莘(学号:20XX0000)所提交的毕业论文《高效液相色谱技术在药物分析中的应用》是本人在指导教师李*老师指导下独立研究、写作的成果，论文中所引用他人的无论以何种方式发布的文字、研究成果，均在论文中加以说明；有关教师、同学和其他人员对本文的写作、修订提出过并为我在论文中加以采纳的意见、建议，均已在我的致谢辞中加以说明并深致谢意。

论文作者:(签字) 时间: 20XX年 6 月 日

指导教师已阅:(签字) 时间: 20XX年 6 月 日

毕业论文(设计)版权使用授权书

本毕业论文《高效液相色谱技术在药物分析中的应用》是本人孙琮莘(学号:20XX0000)在校期间所完成学业的组成部分，是在指以精心写就精品文档 欢迎下载并关注笔者

导教师李*老师的指导下独立完成的。因此，本人特授权山东中医药大学药学院可将本毕业论文的全部或部分内容编入《山东中医药大学药学院本科生优秀毕业论文集》(非正式出版)。

论文作者: (签字) 时间: 20XX年 6 月 日

指导教师已阅: (签字) 时间: 20XX年 6 月 日

高效液相色谱技术在药物分析中的应用

孙琮莘

(20XX级中药学专业03班 学号:20XX0000)

[摘要]本文着重阐述了高效液相色谱技术在药物分析中的应用，主要包括对于天然药物、抗生素、手性药物、毒性药物、违禁药物、体内药物的分析及杂质检查，并对高效液相色谱技术的应用进行了展望。

[关键词]高效液相色谱技术；药物分析；应用

高效液相色谱法在药物分析领域中的应用刍议

[摘要]本文作者首先介绍了高效液相色谱，然后对在药物分析领域中hplc的应用进行了综述，具体如下文所示。

[关键词]高效液相色谱 药物分析 应用

hplc的出现不过三十多年的时间，但这种分离分析技术的发展十分迅猛，目前应用也十分广泛。其仪器结构和流程也多种多样。高效液相色谱仪一般都具备贮液器、高压泵、梯度洗提装置(用双泵)、进样器、色谱柱、检测器、恒温器、记录仪等主要部件。高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质，因而广泛应用于核酸、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、药物、人体代谢产物、表面活性剂，抗氧化剂、杀虫剂、除莠剂的分析等物质的分析。在中国药典中主要用于药物的含量测定、有关物质检查和鉴别等。

一、高效液相色谱及其特点

1、高效液相色谱仪主要是由色谱及控制器、色谱柱泵、进样器、检测器和数据处理器以及控制五大部分组成

分离原理是一个物理过程，流动相携带着待分析化合物和其他一些共存物质流过色谱柱，利用不同物质在固定相上的保留时间不同，从而出峰时间不同而达到分离。利用保留时间定性，峰高或者峰面积定量，在将分离后的各个成分一次通过一紫外检测器时就可检测出个化合物的浓度来。为了能够迅速地将液体通过色谱柱，必须高压。该方法的分离效能相对来说比较高，比气象色谱的分离效

能高出许多倍。这些方面的优势使得高效液相色谱法在药物分析方面应用很广。

2、高效色谱法特点。高效液相色谱法有“三高一广一快”的特点

一、高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。二、高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。三、高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在ul数量级。四、应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。五、分析速度快、载液流速快：较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。此外高效液相色谱还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点，但也有缺点，与气相色谱相比各有所长，相互补充。高效液相色谱的缺点是有“柱外效应”。在从进样到检测器之间，除了柱子以外的任何死空间(进样器、柱接头、连接管和检测池等)中，如果流动相的流型有变化，被分离物质的任何扩散和滞留都会显著地导致色谱峰的加宽，柱效率降低。高效液相色谱检测器的灵敏度不及气相色谱。