CLSI血培养推荐指南

血培养操作指南血培养是一种常见的实验技术，用于检测病原微生物在血液中的生长。

它可以帮助诊断生物样本中的病原微生物感染，并确定其对不同抗生素的敏感性。

本文将介绍血培养的操作指南，包括准备工作、操作步骤和结果解读等内容。

一、准备工作1. 清洁操作区域：确保操作区域干净整洁，避免细菌的交叉污染。

可以使用70%酒精或其他消毒剂对操作台面进行消毒。

2. 准备培养基和试剂：血培养通常使用含有富营养物质的寒天培养基，如血琼脂（Blood agar）或巧克力琼脂（Chocolate agar）。

此外，还需要溶血素试剂用于检测细菌的溶血能力。

3. 样本采集器具：准备血液采集器具，如一次性血管采血器、针头和注射器等，确保采集的血液样本干净无菌。

4. 实验器具消毒：对使用的实验器具进行彻底消毒，如培养皿、注射针、试管等。

二、操作步骤1. 血液样本采集：选择合适的采集部位和采集方法，确保血液样本的质量。

常见的采集部位包括静脉、手指或动脉，具体采集方法请按照医学标准操作。

2. 分配样本：使用无菌的技术将采集的血液样本分配到不同的培养皿中。

常见的分配量为每个培养皿2-5毫升。

3. 涂布培养基：使用无菌的匀涂棒或玻璃棒，将血液均匀涂布在准备好的血琼脂或巧克力琼脂培养基上。

4. 培养条件设置：将涂有血液的培养皿放入恒温培养箱中，设置适当的温度和培养时间。

一般情况下，37℃是最常用的培养温度。

5. 观察培养结果：在培养箱中观察培养皿的生长情况。

如果有细菌或真菌的生长，会在琼脂表面形成菌落。

通常需要培养24小时以上才能获得可靠的结果。

6. 溶血试验：将生长的培养物用溶血素试剂滴于琼脂表面，观察是否有细菌对血细胞进行溶血作用。

7. 结果解读：根据生长的菌落形态和溶血试验的结果，可以初步判断感染的病原菌种类和性质。

进一步的鉴定和确认需要进行进一步的实验和检测。

三、注意事项1. 严格遵守无菌操作：整个实验过程中应遵守严格的无菌操作，防止细菌和真菌的污染。

临床微生物血培养操作指南最新版下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

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微生物CLSI文件集锦（你想要的都在这里）说起临床微生物的CLSI文件，大家首先想到的就是CLSI M100S——《抗微生物药物敏感性试验的执行标准》。

但是其实，与临床微生物相关的CLSI文件很多，截至2017年7月，已多达43个。

下面，小编就给您简单介绍一下吧。

1、M02-A12:Approved Standard中文：抗菌药敏试验的性能标准英文：Performance Standards for Antimicrobial Disk Susceptibility Tests内容与解释：介绍药物纸片扩散法的质量控制标准和最新折点标准。

2、M06-A2: Approved Standard中文：脱水MH琼脂的评估程序英文：Protocols for Evaluating Dehydrated Mueller-Hinton Agar内容与解释：略3、M07-A10:Approved Standard中文：需氧菌稀释法抗菌药物敏感性试验英文：Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility T ests for Bacteria That Grow Aerobically内容与解释：描述了肉汤稀释法和琼脂稀释法，而且还包含这些方法的标准化操作流程和CLSI推荐方法的性能，局限性，适应性。

4、M11-A8:Approved Standard中文：厌氧菌抗菌药物敏感性试验英文：Methods for Antimicrobial Susceptibility Testing of Anaerobic Bacteria内容与解释：在过去的几年内，大部分厌氧菌的耐药表型都发生了很大的改变，导致了许多菌种的经验用药的面临很大的挑战。

对于厌氧菌，琼脂稀释法仍然是参考方法，对于调查研究和科研同样都适用。

而且其他的方法的对比标准也进行了说明，肉汤稀释法也应用于临床实验室，但是现在对脆弱拟杆菌和一些抗生素没有标准。

血培养检测规范化操作（世上最全基本操作流程）2016-08-22来源:南方检验医学网阅读: 1291次【字号：大中小】导读：一、血培养检测采血指征：对入院的危重患者未进行系统性抗生素治疗前，应及时进行血液培养，患者出现以下体征时可作为采集血培养的重要指征： 1．发热（38℃）或低温（36℃）。

2．寒战。

3．白细胞增多（1010 9/L，特别有核左移未成熟的或带状的白细胞一、血培养检测采血指征：对入院的危重患者未进行系统性抗生素治疗前，应及时进行血液培养，患者出现以下体征时可作为采集血培养的重要指征：1．发热（≥38℃）或低温（≤36℃）。

2．寒战。

3．白细胞增多（>10×10 9/L，特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多。

4．粒细胞减少（成熟的多核白细胞<1×10 9/L）。

5．血小板减少。

6．皮肤粘膜出血。

7．昏迷。

8．多器官衰竭。

或同时具备上述几种体征时应采血培养。

在评估可疑新生儿败血症时，除发热或低烧外，很少培养出细菌，应该补充尿液和脑脊液培养。

肺炎链球菌与流感嗜血杆菌菌血症的患儿（特别是2岁以下的幼儿）一般多见于门诊，常伴有明显发热（≥38.5℃）和白细胞增多（≥20×109/L）。

老年菌血症患者，可能不发热或不低热，如伴有身体不适，肌痛或中风可能是感染性心内膜炎的重要指征。

血培养检测皮肤消毒程序：血培养为防止皮肤寄生菌污染，可使用消毒剂（碘酊或碘伏）对皮肤进行严格仔细的消毒处理，最大限度地减低皮肤污染。

感染性心内膜炎，特别是心脏瓣膜修复术的感染，可能由皮肤寄生的微生物引起（例如：表皮葡萄球菌或棒杆菌属）。

因此，在采集过程中血培养的污染一定要减小至最低程度。

用做培养的血液均不应该在静脉或动脉的导管中抽取，除非静脉穿刺无法得到血液或用来评价与导管感染相关性指标。

如果抽取了导管血，也应同时在其他部位穿刺获取非导管内静脉血液进行血培养。

皮肤消毒严格按以下步骤进行：1．首先用70%酒精擦拭静脉穿刺部位待30秒钟以上。

C L S I推荐的静脉血标本采集顺序下图为美国临床及实验室标准研究院(CLSI)[原美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）]推荐采血顺序，在实际工作中，如患者静脉条件较差，有可能采血不足，则应首先考虑凝血1（蓝帽）和血沉（黑帽）检测管，因为这两种样本对血量要求最严格。

血液标本的采集1.静脉血标本静脉血标本是医护人员采用一次性注射器（推荐使用真空采血技术），从患者肘静脉或其它部位的静脉取血。

在取得静脉血标本时应注意：●●在肌肉注射或静脉输含有葡萄糖或电解质（含钾、钠、氯离子）的液体时，建议3小时以后采集静脉血标本进行这些项目的检验，以防止上述检验项目因输液引起的假性升高。

如因抢救等原因需要在输液同时采血的，一定要在输液对侧采集标本，医生应正确评价检测结果。

禁止从中心静脉插管、肝素帽等保留的治疗通道中采集血液标本。

●●止血带使用时间应少于1分钟（建议在针头穿刺进入血管后即放松止血带），以免引起血液淤滞，局部组织缺氧，造成血液某些成分的改变，特别是测定乳酸时不可使用止血带，否则结果偏高。

●●血标本应防止溶血。

引起溶血的原因有①注射器采血时抽吸力太大；②血液与抗凝剂比例失调；③混匀标本时过度振荡；④注射器或盛血容器带水或容器污染；⑤全血放置时间长或突然受冷或受热；⑥注射器中的血沫注入试管；⑦真空采血时如未采满至相应刻度，可由于残存负压造成红细胞破裂；⑧不拔针头直接注入采血管；⑨标本离心时离心力过大等等。

因血液中红细胞内外成分有很大差异，溶血可造成红细胞内的物质向细胞外转移，如K+、Mg2＋和某些酶类（LD、AST、ALT、ACP）；另外，溶血还可干扰某些化学项目（如TBil、DBil、TC等）的测定，严重影响结果的准确性。

●●正确选择采血管。

通常情况下临床检验多采用血清为标本（不抗凝），但一些特殊检验项目需要使用抗凝剂时，应注意选择合适的抗凝剂并注意抗凝剂与血液的比例，以防止标本凝血或红细胞形态的改变；抗凝血标本采集后立即轻轻摇匀（上下颠倒8次），以防凝血发生。

clsi血培养推荐指南汇报人：日期:•引言•血培养概述•clsi血培养指南•clsi血培养指南应用及效果•clsi血培养指南与临床实践•clsi血培养指南未来发展及展望01引言目的背景目的和背景适用对象适用范围指南范围02血培养概述血培养是一种实验室检测方法，用于检测血液中的微生物，以帮助诊断感染性疾病。

血培养可以检测出导致感染的细菌、真菌或寄生虫等微生物。

血培养的定义血培养的采集血培养的采集通常是通过静脉采血进行的。

采血前需要了解患者的病史和用药情况，以确定是否需要采集多个样本或更改采集方法。

采血时需要使用无菌技术，以避免污染样本。

血培养的常见问题血培养结果需要结合患者的临床表现和其他实验室检查结果进行综合分析，以确定感染的病原体种类和感染部位。

血培养结果阴性不能排除感染的存在，需要结合其他检查结果进行综合判断。

血培养的阳性率受到多种因素的影响，如患者用药情况、采血时机、培养基质量等。

03clsi血培养指南对于儿童患者，推荐使用单培养瓶进行血培养，以减少采血量应根据儿童的年龄和体重进行适当调整，以避免特殊情况下血培养指南对于免疫抑制患者，如接受化疗或器官移植的患者，建议使用双培养瓶进行血培养，以增加病原菌的检出率。

对于接受抗菌药物治疗的患者，建议在更换新抗菌药物前采集血液样本，以监测病原菌是否对当前抗菌药物产生耐药性。

对于疑似血流感染的患者，建议在患者发热期间或使用抗菌药物前采集血液样本，以增加病原菌的检出率。

04clsi血培养指南应用及效果指南应用临床应用实验室人员可以根据该指南进行血培养的实验操作，确保实验过程的标准化和规范化，提高实验结果的可靠性。

实验室应用科研应用实验室效果该指南的应用有助于规范实验室操作，提高实验结果的可靠性，为实验室人员提供了更科学的实验指导。

临床效果该指南的应用有助于提高血培养的阳性率和准确性，为临床医生提供了更可靠的诊断依据，有助于提高诊断准确性和治疗效果。

科研效果该指南的应用为科研人员提供了更科学的研究设计和实施方案，有助于推动相关领域的研究发展，为医学进步做出贡献。

建议血培养使用双瓶What is a classic? It takes about 100 years to become a classic.
建议血培养使用双瓶需氧/厌氧培养
血流感染严重威胁人类生命,其中绝大多数致病菌都是兼性厌氧菌,坚持需氧和厌氧双瓶培养,不仅可以获得双倍的培养血量,还可以增加兼性厌氧菌的检出率.且一些细菌在厌氧环境更早报告阳性或只在厌氧瓶中生长.建议临床科室常规血培养使用配对需氧/厌氧血培养瓶.
以下为血培养应重视的一些关键环节.
1.适应诊断的临床疾病
血流感染；
感染性心内膜炎；
临床不明原因感染；
假体植入后感染；
导管相关血流感染；
关节炎；
细菌性肺炎.
2.最佳采血时间
尽可能在抗菌药物使用前或下次用药前采集；
尽可能在寒战和发热初起时；
一旦怀疑感染性心内膜炎,宜立即采集,采用间隔式采血法.
3.标本的采集和运送
推荐常规血培养包括配对的需氧/厌氧血培养瓶；
CLSI要求每次采集2～3套标本,每套包括一个需氧培养瓶和一个厌氧培养瓶；
成人血培养量8～10ml/瓶,婴幼儿2～8ml/瓶；
2小时内送检,常温保存,无须冷藏.
4.采集注意事项
皮肤消毒；
医务人员手消毒预防血培养污染；
多次采血从不同部位采集静脉血；
除非无法做静脉穿刺取血,否则不应从留置导管内取血；留置导管取血仅为怀疑导管相关血流感染时；
从静脉植入管取血,不要弃用初段血,不用抗凝剂.。

血培养最佳采血时机对入院的危重病人未进行系统性抗生素治疗前,应及时进行血液培养发热初期研究表明细菌通常在寒战和发烧前1 小时入血, 此时为采集血培养标本进行病原菌培养的最佳时机;病人出现以下临床表现时也可作为采集血培养的重要指征; 1.发热38℃或低温36℃和寒战初起时 2.白细胞增多>10×10^9/L,特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多或粒细胞减少成熟的多核白细胞<1×10^9/L 3.血小板减少或皮肤、粘膜出血 4.心内膜炎持续性血流感染,5昏迷,6.多器官衰竭,7.血压降低,8.呼吸加快.皮肤消毒严格按以下三步法进行:1、70%酒精擦拭静脉穿刺部位待30秒钟以上;2、用一根碘酊或碘伏棉签消毒皮肤l%~2%碘酊30秒或10%碘伏消毒60秒,从肘上静脉穿刺点向外以1.5cm~2cm 直径画圈进行消毒;3、70%酒精脱碘;严格执行三步消毒后,可行静脉穿刺采血;注意对碘过敏的患者,只能用 70%酒精消毒,消毒60秒钟,待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血;培养瓶消毒程序：培养瓶消毒程序严格按以下三步法进行:1、用70%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子;2、酒精作用待60秒;3、在血液注入血培养瓶之前,用无菌纱布或棉签清除橡皮塞子表面剩余的酒精,然后注入血液;采血套数及血量CLSI要求每次采集2-3套标本,每套应包括一个需氧培养瓶灰白色瓶盖和一个厌氧培养瓶蓝紫色瓶盖,一个静脉穿刺点只能采集1套血培养,采集第2套血培养应该选择第2个静脉穿刺点,成人病人决不能只采1瓶血培养标本,采血量不足和只做1套血培养所得结果是不易正确解释的;每瓶采血8-10毫升,采血方法及要求第一种：消毒工作完毕后,用一次性使用血样采集针蝶翼型见回血后再刺进到血培养瓶橡胶塞里,该瓶有负压血液自动流入,瓶子旁边有每格5毫升刻度值,以便观察流入的血量第二种：用20毫升的注射器和21G的针头,使用注射器采集20毫升血液的标本,把足量的标本尽快分别注入厌氧瓶和需氧瓶中;请在瓶签上标注好采血时间和采血位置,不要在瓶子上的条形码写画任何内容,否则仪器无法识别;标本储存及运送血培养瓶常温保存,无须冷藏；接种标本后请立即送到东院区门诊楼五楼505微生物室上机检测,如果是夜班采集标本,可以放室温保存≤24小时不要冷藏或放到孵箱内,第二天交班请立即送到东院区;微生物室作息时间：周一至周日,上午8：00-12:00下午2:00-5:30;血培养瓶在总院区门诊楼三楼内分泌实验室或在东院区门诊楼五楼微生物实验室病人或家属持记账单都可以领取到;报告发放程序血培养阴性两天发出初步报告五天发出最终报告;血培养阳性立即电话报告医生危机值,3-4天再电话报告和书面报告药敏实验结果;血培养开立步骤医生工作站→医嘱开立→检查/检验单→‘检验’文件夹→微生物测定申请单→无菌体液培养及鉴定指血液,脑脊液,胸水,腹水等记账编码元标本类型请选择“血液”开立一套血培养“需氧+厌氧”,请记账两次无菌体液培养及鉴定 240元 ,如开立两套血培养,请记账四次无菌体液培养及鉴定 480元以此类推;微生物室蒋志涛。