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血培养操作指南血培养是一种常见的实验技术，用于检测病原微生物在血液中的生长。
它可以帮助诊断生物样本中的病原微生物感染，并确定其对不同抗生素的敏感性。
本文将介绍血培养的操作指南，包括准备工作、操作步骤和结果解读等内容。
一、准备工作1. 清洁操作区域：确保操作区域干净整洁，避免细菌的交叉污染。
可以使用70%酒精或其他消毒剂对操作台面进行消毒。
2. 准备培养基和试剂：血培养通常使用含有富营养物质的寒天培养基，如血琼脂（Blood agar）或巧克力琼脂（Chocolate agar）。
此外，还需要溶血素试剂用于检测细菌的溶血能力。
3. 样本采集器具：准备血液采集器具，如一次性血管采血器、针头和注射器等，确保采集的血液样本干净无菌。
4. 实验器具消毒：对使用的实验器具进行彻底消毒，如培养皿、注射针、试管等。
二、操作步骤1. 血液样本采集：选择合适的采集部位和采集方法，确保血液样本的质量。
常见的采集部位包括静脉、手指或动脉，具体采集方法请按照医学标准操作。
2. 分配样本：使用无菌的技术将采集的血液样本分配到不同的培养皿中。
常见的分配量为每个培养皿2-5毫升。
3. 涂布培养基：使用无菌的匀涂棒或玻璃棒，将血液均匀涂布在准备好的血琼脂或巧克力琼脂培养基上。
4. 培养条件设置：将涂有血液的培养皿放入恒温培养箱中，设置适当的温度和培养时间。
一般情况下，37℃是最常用的培养温度。
5. 观察培养结果：在培养箱中观察培养皿的生长情况。
如果有细菌或真菌的生长，会在琼脂表面形成菌落。
通常需要培养24小时以上才能获得可靠的结果。
6. 溶血试验：将生长的培养物用溶血素试剂滴于琼脂表面，观察是否有细菌对血细胞进行溶血作用。
7. 结果解读：根据生长的菌落形态和溶血试验的结果，可以初步判断感染的病原菌种类和性质。
进一步的鉴定和确认需要进行进一步的实验和检测。
三、注意事项1. 严格遵守无菌操作：整个实验过程中应遵守严格的无菌操作，防止细菌和真菌的污染。
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微生物CLSI文件集锦（你想要的都在这里）说起临床微生物的CLSI文件，大家首先想到的就是CLSI M100S——《抗微生物药物敏感性试验的执行标准》。
但是其实，与临床微生物相关的CLSI文件很多，截至2017年7月，已多达43个。
下面，小编就给您简单介绍一下吧。
1、M02-A12:Approved Standard中文：抗菌药敏试验的性能标准英文：Performance Standards for Antimicrobial Disk Susceptibility Tests内容与解释：介绍药物纸片扩散法的质量控制标准和最新折点标准。
2、M06-A2: Approved Standard中文：脱水MH琼脂的评估程序英文：Protocols for Evaluating Dehydrated Mueller-Hinton Agar内容与解释：略3、M07-A10:Approved Standard中文：需氧菌稀释法抗菌药物敏感性试验英文：Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility T ests for Bacteria That Grow Aerobically内容与解释：描述了肉汤稀释法和琼脂稀释法，而且还包含这些方法的标准化操作流程和CLSI推荐方法的性能，局限性，适应性。
4、M11-A8:Approved Standard中文：厌氧菌抗菌药物敏感性试验英文：Methods for Antimicrobial Susceptibility Testing of Anaerobic Bacteria内容与解释：在过去的几年内，大部分厌氧菌的耐药表型都发生了很大的改变，导致了许多菌种的经验用药的面临很大的挑战。
对于厌氧菌，琼脂稀释法仍然是参考方法，对于调查研究和科研同样都适用。
而且其他的方法的对比标准也进行了说明，肉汤稀释法也应用于临床实验室，但是现在对脆弱拟杆菌和一些抗生素没有标准。
血培养检测规范化操作（世上最全基本操作流程）2016-08-22来源:南方检验医学网阅读: 1291次【字号：大中小】导读：一、血培养检测采血指征：对入院的危重患者未进行系统性抗生素治疗前，应及时进行血液培养，患者出现以下体征时可作为采集血培养的重要指征： 1．发热（38℃）或低温（36℃）。
2．寒战。
3．白细胞增多（1010 9/L，特别有核左移未成熟的或带状的白细胞一、血培养检测采血指征：对入院的危重患者未进行系统性抗生素治疗前，应及时进行血液培养，患者出现以下体征时可作为采集血培养的重要指征：1．发热（≥38℃）或低温（≤36℃）。
2．寒战。
3．白细胞增多（>10×10 9/L，特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多。
4．粒细胞减少（成熟的多核白细胞<1×10 9/L）。
5．血小板减少。
6．皮肤粘膜出血。
7．昏迷。
8．多器官衰竭。
或同时具备上述几种体征时应采血培养。
在评估可疑新生儿败血症时，除发热或低烧外，很少培养出细菌，应该补充尿液和脑脊液培养。
肺炎链球菌与流感嗜血杆菌菌血症的患儿（特别是2岁以下的幼儿）一般多见于门诊，常伴有明显发热（≥38.5℃）和白细胞增多（≥20×109/L）。
老年菌血症患者，可能不发热或不低热，如伴有身体不适，肌痛或中风可能是感染性心内膜炎的重要指征。
血培养检测皮肤消毒程序：血培养为防止皮肤寄生菌污染，可使用消毒剂（碘酊或碘伏）对皮肤进行严格仔细的消毒处理，最大限度地减低皮肤污染。
感染性心内膜炎，特别是心脏瓣膜修复术的感染，可能由皮肤寄生的微生物引起（例如：表皮葡萄球菌或棒杆菌属）。
因此，在采集过程中血培养的污染一定要减小至最低程度。
用做培养的血液均不应该在静脉或动脉的导管中抽取，除非静脉穿刺无法得到血液或用来评价与导管感染相关性指标。
如果抽取了导管血，也应同时在其他部位穿刺获取非导管内静脉血液进行血培养。
皮肤消毒严格按以下步骤进行：1．首先用70%酒精擦拭静脉穿刺部位待30秒钟以上。
C L S I推荐的静脉血标本采集顺序下图为美国临床及实验室标准研究院(CLSI)[原美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）]推荐采血顺序，在实际工作中，如患者静脉条件较差，有可能采血不足，则应首先考虑凝血1（蓝帽）和血沉（黑帽）检测管，因为这两种样本对血量要求最严格。
血液标本的采集1.静脉血标本静脉血标本是医护人员采用一次性注射器（推荐使用真空采血技术），从患者肘静脉或其它部位的静脉取血。
在取得静脉血标本时应注意：●●在肌肉注射或静脉输含有葡萄糖或电解质（含钾、钠、氯离子）的液体时，建议3小时以后采集静脉血标本进行这些项目的检验，以防止上述检验项目因输液引起的假性升高。
如因抢救等原因需要在输液同时采血的，一定要在输液对侧采集标本，医生应正确评价检测结果。
禁止从中心静脉插管、肝素帽等保留的治疗通道中采集血液标本。
●●止血带使用时间应少于1分钟（建议在针头穿刺进入血管后即放松止血带），以免引起血液淤滞，局部组织缺氧，造成血液某些成分的改变，特别是测定乳酸时不可使用止血带，否则结果偏高。
●●血标本应防止溶血。
引起溶血的原因有①注射器采血时抽吸力太大；②血液与抗凝剂比例失调；③混匀标本时过度振荡；④注射器或盛血容器带水或容器污染；⑤全血放置时间长或突然受冷或受热；⑥注射器中的血沫注入试管；⑦真空采血时如未采满至相应刻度，可由于残存负压造成红细胞破裂；⑧不拔针头直接注入采血管；⑨标本离心时离心力过大等等。
因血液中红细胞内外成分有很大差异，溶血可造成红细胞内的物质向细胞外转移，如K+、Mg2＋和某些酶类（LD、AST、ALT、ACP）；另外，溶血还可干扰某些化学项目（如TBil、DBil、TC等）的测定，严重影响结果的准确性。
●●正确选择采血管。
通常情况下临床检验多采用血清为标本（不抗凝），但一些特殊检验项目需要使用抗凝剂时，应注意选择合适的抗凝剂并注意抗凝剂与血液的比例，以防止标本凝血或红细胞形态的改变；抗凝血标本采集后立即轻轻摇匀（上下颠倒8次），以防凝血发生。
