HPLC_荧光检测法测定大鼠脑组织中的单胺类神经递质及相关物质

高效液相色谱法对大鼠各器官中单胺类神经递质的测定毛有彦;李爱芝【期刊名称】《中国误诊学杂志》【年(卷),期】2007(7)25【摘要】目的:以高效液相色谱法同时测定五种神经递质的含量,为神经递质的检测探索新的实验方法。

方法:色谱柱为C18柱,流动相为甲醇水(体积比为4∶6,其中每升中含EDTA-Na20.028g、SDS0.15g及浓硫酸0.22ml),流速1.0ml/min。

结果:本实验方法对大量样品进行过测定,其中包括正常、肝气郁症、肝气逆症等动物模型测定及用药后动物模型的测定,取得了可靠的结果。

结论:本方法实验成本低、样品处理量大,为稳定性及精密度、准确性都可靠的检测方法。

【总页数】2页(P5983-5984)【关键词】色谱法;高压液相;神经递质/分析;生物源单胺类/分析;动物【作者】毛有彦;李爱芝【作者单位】山东省潍坊市人民医院检验科;山东省潍坊市市立医院妇产科【正文语种】中文【中图分类】R122.11【相关文献】1.库仑阵列电化学高效液相色谱法测定大鼠脑组织中单胺类神经递质及代谢产物[J], 张向晖;刘军;苏林雁2.荧光-反相高效液相色谱法同时测定小鼠脑组织中3种单胺类神经递质 [J], 魏小娟;许建华3.库仑阵列电化学-高效液相色谱法同时检测大鼠不同脑区中的8种单胺类神经递质 [J], 邓少东;卢洪梅;林励;肖凤霞;成晓燕4.高效液相色谱法测定百草枯染毒后小鼠脑组织中8种单胺类神经递质的含量变化[J], 昝富文; 解裴育; 贾昊然; 刘迎; 马莉5.柱前衍生-高效液相色谱法同时测定血清中氨基酸类及单胺类神经递质 [J], 白洁;王妲;刘泽平;张佳琪;刘丽艳;韩艳梅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

高效液相色谱-荧光检测法同时测定大鼠不同脑区中的8种单胺类神经递质赵燕燕;刘丽艳;韩媛媛;白洁;杜光玲;高茜【摘要】A method for the simultaneous detection of L-dihydroxyphenylalanine , norepinephrine, epinephrine , dopamine ,3,4-dihydroxyphenylacetic acid , serotonin hydrochloride, 5-hydroxyindole-3-acetic acid and homovanillic acid in the different sections of mouse brains was established by using high performance liquid chromatography ( HPLC ) with fluorescence detection and isocratic elution. Before analysis, the sample was deproteinized by 0.60 mol/L perchloric acid, followed by adjusting pH value of the sample with 1.20 mol/LK2HPO4, addition of 0.1 g/L L-cysteine as antioxidant and 0.50 mmol/LNa2EDTA as complexing agent. The separation column was a Shim-packC18 column ( 250 m m ×4.6 mm, 5 μm ) and the mobile phase ( pH 3.8 ) was 13％ methanol containing 50 mmol/L citric acid , 50 mmol/L sodium acetate . 0.5 mmol/L 1-heptanesulfonic acid sodium salt, 5 mmol/L triethylamine and 0.5 mmol/L Na2EDTA. The flow rate was 1.0 mL/min. The injection volume was 10 μL. The emission and excitation wavelengths were 330 nm and 280 nm , respectively. Under the optimized separation conditions, the calibration curves showed good linearity within the concentrations of 1.25 -5000 μg/L ( r＞0.9999 ). The limits of detection were between 0.20 - 5.00 μg/L, the average recoveries were between 94.83％and 99. l9％. and the relative standard deviations ( RSDs ) were between0.08％ and 2.51％. The advantages of the method include easy and prompt operation,high recovery, low detection limit, good separation effect, high accuracy and precision. The method has practical value for detecting 8 monoamine neurotransmitters in biological samples.%采用高效液相色谱-荧光检测法同时测定了大鼠不同脑区中的左旋多巴、去甲肾上腺素、肾上腺素、多巴胺、二羟基苯乙酸、5-羟色胺、5-羟基吲哚乙酸及高香草酸8种单胺类神经递质的含量.样品经组织裂解液(0.60 mol/L 高氯酸、0.50 mmol/L Na2 EDTA、0.1 g/L L-半胱氨酸的混合水溶液)处理后,冷冻离心得到上清液;上清液中加入高氯酸沉淀剂(1.20 mol/L K2 HPO4、2.00 mmol/L Na2 EDTA的混合水溶液)处理后,冷冻离心、过滤.在该优化的色谱条件下,8种单胺类神经递质在1.25～5 000μg/L范围内线性关系良好(r＞0.999 9),最低检出限在0.20～5.00μg/L之间,平均回收率在94.83%～99.19%之间,相对标准偏差在0.08%～2.51%之间.该方法具有操作简便、快捷、回收率高、检出限低、分离度好、结果准确可靠等优点,可以用于体内8种单胺类神经递质的同时检测与分析.【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2011(029)002【总页数】6页(P146-151)【关键词】高效液相色谱;荧光检测;单胺类神经递质;脑;大鼠【作者】赵燕燕;刘丽艳;韩媛媛;白洁;杜光玲;高茜【作者单位】河北大学医学实验中心,河北,保定,071000;河北大学化学与环境科学学院,河北,保定,071002;河北大学化学与环境科学学院,河北,保定,071002;河北大学医学实验中心,河北,保定,071000;河北大学医学实验中心,河北,保定,071000;河北大学医学实验中心,河北,保定,071000;河北大学化学与环境科学学院,河北,保定,071002【正文语种】中文【中图分类】O658单胺类神经递质包括儿茶酚胺类化合物(去甲肾上腺素、肾上腺素、多巴胺)、吲哚胺类化合物(5-羟色胺)及相关代谢产物(多巴胺代谢前体左旋多巴、多巴胺代谢产物二羟基苯乙酸和高香草酸、5-羟色胺代谢产物5-羟基吲哚乙酸)。

RP-HPLC-荧光法测定大鼠海马组织中5种氨基酸类神经递质白钰;张莉;马晓丽;孔彬;李新霞;李新宇【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2014(000)001【摘要】目的：采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）-荧光检测技术建立一种用于测定脑海马组织中5种氨基酸[天门冬氨酸（Asp）、谷氨酸（Glu）、天冬酰胺（Aspa）、谷胺酰胺（Gln）、甘氨酸（Gly）]类神经递质的方法。

方法采用甲醇∶水＝1∶1提取大鼠脑海马组织中多种氨基酸类神经递质。

用6-氨基喹啉基-N-羟基-琥珀酰亚胺氨基甲酸酯（AQC）柱前衍生RP-HPLC-荧光法测定海马组织中Asp、Glu、Aspa、Gln、Gly含量。

结果5种氨基酸类神经递质在15 min内完全分离，分离效果良好；在0．5～100．0μg/μL范围有较好的线性关系，相关系数（r）≥0．99990；Asp、Glu、Aspa、Gln、Gly的检出限分别为0．05、0．068、0．037、0．05、0．02μg/μL。

精密度[相对标准偏差（RSD）]为0．4％～2．5％，加样回收率为70．27％～128．20％，RSD均＜5％；8只正常大鼠海马组织中Asp、Glu、Aspa、Gln、Gly含量分别为38．98±9．66、126．42±34．06、216．00±0．75、90．44±33．75、（12．95±4．42）μg/g。

结论 RP-HPLC-荧光法快速、准确、灵敏度高，适用于脑组织中氨基酸类神经递质含量的测定。

【总页数】4页(P69-72)【作者】白钰;张莉;马晓丽;孔彬;李新霞;李新宇【作者单位】新疆医科大学附属中医医院，新疆乌鲁木齐830011;石河子大学医学院，新疆石河子832002;新疆医科大学分析测试中心，新疆乌鲁木齐830011;新疆医科大学分析测试中心，新疆乌鲁木齐830011;新疆医科大学分析测试中心，新疆乌鲁木齐830011;兰州军区乌鲁木齐总医院，新疆乌鲁木齐830011【正文语种】中文【中图分类】Q517【相关文献】1.高效毛细管电泳测定海马组织和脑脊液中氨基酸类神经递质 [J], 宣柳;沈佐君;何晓东;伊茂礼;金鑫;鲁明;傅先明2.AQC柱前衍生RP-HPLC荧光法测定颅脑损伤患者脑脊液中氨基酸类神经递质[J], 陈为;柯雪红;杨小催3.反相高效液相色谱荧光法测定大鼠脑组织中氨基酸类神经递质 [J], 吴强恩;郑力行;谢芳;吴同俊;阮国洪;周志俊4.高效液相荧光法测定大鼠脑内氨基酸类神经递质方法的改良 [J], 张丽;叶翠飞;沈芊;李林5.反相高效液相色谱荧光法测定氨基酸类神经递质 [J], 顾拥军;倪文因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

学报Journal of China Pharmaceutical University2010，41（4）：367－371高效液相色谱-荧光法测定小鼠脑组织中单胺递质及其相关物质张璐璐1，冯芳1，2*，叶小敏1，朱杰1，马冯飞1（中国药科大学1药物分析教研室；2药物质量与安全预警教育部重点实验室，南京210009）摘要建立高效液相色谱-荧光分析方法，研究小鼠脑皮层、海马、纹状体、丘脑等不同部位的单胺类神经递质及其相关物质。

脑组织样本经高氯酸沉淀蛋白后进行色谱分析，采用Lichrospher C18柱（250mmˑ4.6mm，5μm），流动相为pH 3.06缓冲液（含1mmol/L庚烷磺酸钠；30mmol/L磷酸二氢钠-磷酸溶液）-甲醇（85ʒ15）；流速：1.0mL/min；柱温：35ħ。

荧光检测：激发波长为280nm，发射波长为315nm。

采用建立的方法，鉴别出小鼠脑中存在去甲肾上腺素（NE）、多巴胺（DA）、5-羟色胺（5-HT）、酪氨酸、色氨酸、3，4-二羟苯乙酸和5-羟吲哚乙酸等物质；对NE、DA和5-HT进行定量研究，确定它们的线性范围分别为2.4 471.0ng/mL（r=0.9996），2.6 519.5ng/mL（r=0.9994），2.4 469.3ng/mL（r= 0.9991），日内、日间RSD均小于9.0%，准确度达到限度要求，提取回收率大于90%。

本法专属性好，准确度高，可以反映不同鼠脑区域单胺类神经递质及相关物质含量上的差异。

关键词高效液相色谱-荧光分析；单胺类神经递质；相关物质；脑组织中图分类号R917文献标识码A文章编号1000－5048（2010）04－0367－05Determination of monoamine neurotransmitters and related substances in mouse brain tissue by HPLC-FLDZHANG Lu-lu1，FENG Fang1，2*，YE Xiao-min1，ZHU Jie1，MA Feng-fei11Department of Pharmaceutical Analysis;2Key Laboratory of Drug Quality Control and Pharmacovigilance(Ministry of Education)，China Pharmaceutical University，Nanjing210009，ChinaAbstract To establish an HPLC-FLD method for the investigation of monoamine neurotransmitters and related substances in mouse frontal cortex，hippocampus，striatum，and hypothalamus.Mouse brain samples were depro-teinized by perchloric acid and analyzed.The separation was carried out on a Lichrospher C18column(250mmˑ4.6mm，5μm).The mobile phase was composed of pH3.06buffer(including1mmol/L heptanesulfonic acidsodium salt，30mmol/L NaH2PO4-H3PO4solution)and methanol in the ratio of85ʒ15;the flow rate was1.0mL/min and the column temperature was35ʎC.Fluorescence detection:the excitation and emission wavelengthswere set atλex =280nm，λem=315nm.Under the optimized conditions，norepinephrine(NE)，dopamine(DA)，5-hydroxytryptamine(5-HT)，3，4-dihydroxy-phenyl acetic acid(DOPAC)，5-hydroxyindoleacetic acid(5-HIAA)，tyrosine(Tyr)，and tryptophan(Trp)in mouse brain were detected.NE，DA，and5-HT were quantified.The line-arity ranges of NE，DA，and5-HT were2.4-471.0ng/mL(r=0.9996)，2.6-519.5ng/mL(r=0.9994)，and 2.4-469.3ng/mL(r=0.9991)，respectively.The intra-and inter-day precision was always lower than9.0%．The accuracy could attain the demands and the absolute recovery values were always higher than90%．The pro-posed method has good specificity and accuracy.It could be used to analyze the content differences of monoamine neurotransmitters and related substances in different mouse brain areas.Key words HPLC-FLD;monoamine neurotransmitter;related substances;brain tissueThis study was supported by the National Natural Science Foundation of China(No.30973858)763*收稿日期2010-03-12*通讯作者Tel：025－83271301E-mail：fengfang1@基金项目国家自然科学基金资助项目（No.30973858）学报Journal of China Pharmaceutical University第41卷单胺神经递质，如去甲肾上腺素（NE）、多巴胺（DA）和5-羟色胺（5-HT）是中枢神经系统中非常重要的生物活性物质，它们的前体是酪氨酸（Tyr）和色氨酸（Trp），酸性代谢产物有3，4-二羟苯乙酸（DOPAC）、5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）等。

荧光法测定脑组织单胺类递质和有关技术问题及其在运动医学中的应用论文题目：荧光法检测脑组织单胺类递质及其在运动医学中的应用摘要：脑组织中的单胺类递质具有重要的生理作用，与精神健康、神经功能和行为发展紧密相关。

近年来，荧光法已成为研究脑单胺类递质的有效解决方案。

本文将首先介绍荧光法检测脑单胺类递质的技术特点、优点和临床应用，然后重点介绍在多种运动医学领域中荧光法检测脑单胺类递质的应用。

本文旨在为科学家提供一种易于操作和可重复性好的荧光检测工具，以进一步研究脑单胺类递质的分布特征、病理变化和调节机制提供一份宝贵的研究贡献。

关键词：荧光法；脑组织单胺类递质；运动医学；神经功能在运动医学中，荧光法检测脑组织单胺类递质的应用形式有很多。

首先，荧光法可以用于研究脑性认知功能和认知障碍中所涉及的单胺类递质分布，这些递质在神经系统发育和功能维持中有特殊的作用。

此外，荧光法还可用于研究运动性疾病，例如脑外伤、脊髓损伤和中风。

在这些疾病中，荧光技术可以用来检测单胺类递质损失及其病理变化，从而开发更有效的治疗策略。

此外，荧光技术还可以被用来检测运动过程中脑组织中单胺类递质的变化，以更深入地了解运动对认知功能和神经功能的影响。

最后，荧光技术可以被用来检测改变认知功能和情绪状态的治疗中涉及的单胺类递质改变，从而验证治疗机制是否有效。

总之，荧光法检测脑组织单胺类递质的应用在运动医学领域有着广泛的应用前景，可以为研究者提供宝贵的信息，为治疗提供有效的指导。

在前述应用中，荧光法检测脑组织单胺类递质有一些独特的优势。

首先，荧光法在神经活动检测和认知障碍研究方面具有很强的敏感性，可以以低污染的方式获得灵敏的检测效果。

此外，荧光技术允许科学家以多种形式进行大范围的实验，并可以紧密结合其他科学技术，为研究者提供更多的信息和数据，以更深入地了解治疗措施的机制。

此外，荧光技术在实验和临床诊断方面也有显著的优势，可以为研究者提供细节和准确的信息，从而更好地解释脑组织中神经成分的作用。

第25卷第2期2006年3月 分析测试学报FENXI CESH I X UEBAO(J ournal of Ins tru m en talAnal ys i s)V ol 25No 290~92高效液相色谱/电化学法测定大鼠血液和脑组织中单胺类物质的含量谭炳炎1,郑 琳1,冯 翔2(1.中山大学 公共卫生学院 中心实验室,广东 广州 510080;2.中山大学 公共卫生学院 营养学系,广东 广州 510080)摘 要:建立了高效液相色谱/电化学检测法测定大鼠脑组织和血液中单胺递质及其代谢产物的方法。

能同时测定去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、3,4-二羟基苯乙酸(DO PAC)、多巴胺(DA)、高香草酸(HAV)、5-羟色胺(5-HT),并能和内标3,4-二羟卞胺(DHBA)分离良好。

本方法快速、简便,回收率为92%~105%,线性范围2 8~680ng/mL,检出限为0 05ng(S/N=3)。

本方法已应用在服用中药的大鼠下丘脑组织及血液的测定中,数据显示,本法能满足测定要求。

关键词:高效液相色谱;电化学检测;单胺类神经递质中图分类号:O657 1 文献标识码:A 文章编号:1004-4957(2006)02-0090-03D eter m i nati on o fM onoa m i ne T rans m itters i n R at Blood and Brai n T issues byH i gh Perf or m ance L i qu i d Chro m atographyTAN B ing-yan1,Z H E NG Lin1,FE NG X iang2(1.Central L aboratory,Schoo l o f Pub lic H ealth,Sun Y at-sen U n i versity,G uangzhou 510089,China;2.D epart m ent o fNutritiona l Sc i ences,School o f Publi c H ea lth,Sun Y a t-sen U n i versity,G uangzhou 510089,Ch i na) Abstrac:t A m ethod was developed to deter m i n e m onoa m ine trans m itters and their m etabo lites in rat blood and brain tissues by h i g h perfor m ance li q u i d chro m atog raphy w ith electroche m i c al detection.No r-ep i n ephri n e(NE),ep i n rphri n e(E),3,4-d i h ydr oxypheny lacetic acid(DOPAC),dopa m ine hydrochlo-ride(DA),ho m ovan illi c ac i d(HVA),and5-hydr oxytrypta m i n e(5-HT)cou l d be deter m i n ed si m ulta-neously and disti n ctly separated fro m i n ter nal standar d(3,4-dihydroxybenzyla m ine,D H BA)by th is m ethod.The recoveries of these co mpounds w ere bet w een92%and105%and the li n ear range w as2 8-680ng/m L.The detecti o n li m itw as0 05ng(S/N=3).This m ethod was app lied to deter m i n i n gt h e m onoa m i n es i n hypothala mus tissues of rats upon taking traditional Ch i n ese m ed ici n e,and satisfac-to r y resu lts w ere achieved.Key words:H i g h perfor m ance li q u i d chr o m atography;E lectroche m i c al detecti o n;M onoa m ines单胺类神经递质包括去甲肾上腺素(NE),肾上腺素(E),多巴胺(DA),5-羟色胺(5-HT)等物质。

文章编号:1008-9926(2002)03-0143-03 中图分类号:R927.1 文献标识码:AHP LC-电化学检测法测定大鼠脑内的去甲肾上腺素和52羟吲哚乙酸刘建芳①,侯艳宁,吴红海,刘会臣(中国人民解放军白求恩国际和平医院,临床药理室　河北　石家庄　050082)摘　要:目的　建立大鼠脑内单胺递质及其代谢产物的测定方法。

方法　大鼠脑组织匀浆液用高氯酸沉淀蛋白后,上清液直接用于HP LC分析。

采用Irregular2H C18色谱柱,流动相组成为0.1m ol・L-1NaH2PO42甲醇20.01m ol・L-1E DT A-0.2m ol・L-1辛基磺酸钠(87∶15∶1∶2.5,pH3.7),流速为0.8ml/min,温度为35℃,电化学检测器工作电压为0.8V。

结果　去甲肾上腺素和52羟吲哚乙酸分别在6.8～680ng・ml-1和3.8～380ng・ml-1范围内线性关系良好,去甲肾上腺素测定的日内和日间的RSD分别为7.5%和8.1%,52羟吲哚乙酸测定的日内和日间的RSD分别为2.0%和7.5%,两者回收率分别为103.0%和61.6%,检测限分别可达2ng・ml-1和1ng・ml-1。

结论　本法用于脑内单胺递质及其代谢物的测定,快速、简便、准确。

关键词:高效液相;电化学;去甲肾上腺素;52羟吲哚乙酸Determination of N orepinephrine and52hydroxyindoleacetic Acid in R at Brain by HPLC with E lectrochemical DetectionLI U Jian2Fang,H OU Y an2Ning,W U H ong2Hai,LI U Hui2Chen(Department of Clinical Pharmacology,Bethune International Peace H ospital of P LA,Shijiazhuang　050082,Hebei)ABSTRACT:Aim T o develop a HP LC method to determine m onoamine and its metabolites in rat brain.Methods The supernatants of protein2precipitated rat brain tissue hom ogenates by HClO4were directly injected into the chromatographic system.Irregular2H C18column was used for separation,a mixture of0.1m ol・L-1NaH2PO4,methanol,0.01m ol・L-1E D2 T A and0.2m ol・L-1s odium octylsulfonate(87∶15∶1∶2.5)was used as m obile phase,the flow rate was0.8ml/min,the column tem perature was35℃and the detector potential was0.8V.R esults N orepinephrine and52hydroxyindoleacetic acid have g ood linearity within the range of6.8～680ng・ml-1and3.8～380ng・ml-1respectively.Within2day and be2 tween2day precisions of the method were7.5%and8.1%for norepinephrine,2.0%and7.5%for52hydroxyin2 doleacetic acid,respectively.The recoveries of norepinephrine and52hydroxyindoleacetic acid were103.0%and61.6%, the detection limit was2ng・ml-1and1ng・ml-1,respectively.Conclusion The method is fast,sim ple and accurate in the determination of m onoamine and its metabolites in the brain.KE Y WOR DS:HP LC;Rat brain;N orepinephrine;52hydroxyindoleacetic acid 单胺类递质去甲肾上腺素(NE)和52羟色胺(52 HT)在大脑许多功能的控制调节中起重要作用。