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RP-HPLC测定烟叶和烟叶提取物中茄尼醇的含量

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表 ２ 烟叶和烟叶提取物中茄尼醇的含蛋
的 样 作 检出 得 外 测 ） ． ＂ ｏ 进 量 为 限， 紫 检 限 Ａ０ ， ＇ ８ｇ Ｌ ｉ ｌ ｍ －
２６ ． 精密度试验 取同一份样品溶液， 重复进样 ５ 次，测定峰面 积， 计算得 ＲＤ二 ．％， Ｓ １ ３ 说明精密度良 好。 ２７ ． 重现性试验 取０００ 批烟叶提取物，处理方法同供试品 ５３９ 溶液制备，重复测定 ６次，计算得 ＲＤ ． Ｓ ＝ ％， ０９
醇均为色谱纯；烟叶产于湖南省浏阳市，烟叶提取 物由本公司自 （ 产 批号 ０００， ３１ ００１， ５３９ ００１， ３６ ５ ５ ００２） 茄尼醇对照品购于 Ｓ ｍ 公司 （ ５３１； ｉａ ｇ 含量
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［〕 ５ 张明时， 黄俊学 高效液相色谱法测定烟叶提取物中茄
呢醇的含量［］ 色语 ， ０ ， （ ）４０４ １ Ｊ． ２ １１ ５ ： －７ ． ０ ９ ７
［」 ６ 李春英， 赵春建， 祖元刚， 高效液相色 谱法同时测定烟叶中 茄尼醇和辅酶Ｑ 的含 Ｊ． 化学１０，（）２－ ７ ， 量［ 应用 。 ］ ２ ６ ３５：４ Ｚ ０ ２ ５ ５
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的 测定。
〔 反相高效液相色谱法； 关键词〕 茄尼醇； 烟叶
茄尼醇 （ｏ ｎｓ ）是一种九聚异戊二烯伯 Ｓｌ ｅ ｌ ａ ｏ 醇，主要存在于茄科类植物中，是一种三倍半菇 烯， 具有较强的抗癌生物活性。同时，是合成辅酶
４６ ｍ 大连江申分离科学科技公司） ． ）（ ｍ ，流动相：
Ｓｃ ， ０ ， ２ （ ） １２２ １２３ ２ １４ ８ ： ４８ 一４８． ｏ ２０ ． ４ 〔 ］ ｅ ｏ Ｒ Ｇｓ ｏ ａ ｇ ｐｉｍ ｔ ｄ ｔ ｄｔｍ－ ３ ｖ ｓ Ｆ ａ ｃｒ ｔ ｒ ｈ ｅ ｏ ｆ ｈ ｅ ｒｉ Ｓ ｒ ｎ ． ｈ ｍ ｏ ａ ｃ ｈ ｏ ｅ ｅ ｅ ｒ
茄 醇 ｍ ９’ 尼 ／ｇ 一
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烟叶 １ 烟叶 ２
汁 ，ｎ＝３
表明本法重现性良 好。 ２８稳定性试验 ． 取待测供试品溶液，于 ０ ２ ４ ６ ８ １ｈ ， ， ， ， ， ２ 分别测定茄尼醇峰面积，计算得 ＲＤ二 ．％，测 Ｓ １３ 定结果表明样品在 １ｈ ２ 内基本稳定。 ２９回收率试验 ． 取 已知含 量 的烟 叶，分 别 加 入 ０２ ０４ ． ， ， ．
［ 作 通讯 者Ｉ ’ 荣， ｅ （ ３） ０８一０， ｍｉ ｊ ｍ ｏ ｙ ｏ ｃ ． 。 缪建 Ｔ ； １ ３ ７ ２ Ｅ ａ： 直＠ ｏ ｏ 。 ｌ ０ ７ ２ ８ ２ 一 ｌ ｒ ａ ． 。 ８ ＿ ａ ｈ ｍ
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万方数据
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学法［和Ｈ Ｌ 法〔６ 其中 ４ ＰＣ ５１ １ －。 气相色谱法要经过衍
生化反应， 样品处理麻烦且重现性差。而高效液相 色谱法采用正相柱时容易引起柱的污染，由于茄尼 醇的紫外吸收在紫外区的末端，与溶剂的吸收波长
释制 成每 １Ｌ中含。 ０ｍ 茄尼醇的溶液， ｍ ． ｇ ２０ 作为
对照品溶液。
精称茄 对品量加醇 解稀 醇 照 适 ， 甲 溶 并 密取尼
［］河南大学学 自 科学 ， ９， （） ７４． Ｊ． 报（ 然 版）１ ５２ ２ ： － ９ ５ ３ ０ ［ ｉｈｔ Ｈ ＭｌｒＰ Ｐ ｉ ｒ ｅａ Ａ ｒ Ｈ ｈ ２ ｐ ｕ Ｂ ｏａ ， ｅＳ ｔ ｓ ｔ ｉ－ ］ ｓ ｚ ， Ｌ ｄ ｆｆ Ｓ ｌ ｈ ， ｅ ， ． ｏ ｇ ｌＥｉｅｔ ｈ ｉ ｆ ｎ ｍ Ｑ Ｊ．． Ｃｅ． Ｓ ｔ ｓ ｏＣｅｚ ｅ 〔］Ｊ Ａ ． ｍ ｙ ｃｎ ｙ ｅｓ ｏ ｙ ， ｆｉ ｎ ｆ ｏ ｍ ｈ
容量 加甲 稀释 瓶， 醇 至刻度， 摇匀， ． 用０ ５ ４Ｒ ｍ滤
膜过滤， 必要时稀释， 作为供试品溶液。 ２３系统适用性试验 ． 取样品溶液， 在上述色谱条件下进样测定，理 论板数按茄尼醇峰计算应不低于３ ， ００ 茄尼醇主 ０ 峰与相邻峰的分离度应不低于 １５ ．。供试品及对照 品溶液的色谱图见图１ ２ 一０
ｔ ｒ １７ １９ ２９２２ ， ３ ： ６ 一８ ｏ ， ７ ｇ ９
［」刘块之， ４ 李亮． 库仑法滴定烟叶提取物中茄尼醇［］化 Ｊ． 参考文献
［」 １ 孙心齐， 赵瑾， 王超杰． 从低次烟叶中 提取茄尼醇的研究
学研究， ７８３ ： ５ ． ９ ，（ ）５ －９ １ ９ ６
Ｒ ＨＬ Ｐ一 Ｐ Ｃ测定烟叶和烟叶提 取物中茄尼醇的含量
缪建荣＊ 罗丽娟 ， （ 湖南九汇现代中药有限公司， 湖南 长沙 ４０２） １ ９ ３
〔 摘要ｌ目的： 建立高效液相色谱法测定烟叶与烟叶提取物中茄尼醇含量的方法。方法：以甲醇一 乙醇 （：）作 ７ ３
流 相， 速：ｍ ＂ｉ ＇ 检 波长为２ ｎ。 动 流 １Ｌｍ － 测 ｎ， １ ｍ 结果： ０ 茄尼醇在０ － ， 积和 ． ０ 峰面 浓度呈良 线性关系， ＝ ２ Ｒ ４ ｇ 好的 ｒ ０ ９９ 该 法的 测限 ． － ＇ 结 该 法简 快速、 确， 用于 和烟叶 ． ９ ， 方 检 为０ ８ Ｌ 论： 方 便、 ９ ０ｊ ｍ － ｉ ｇ 。 准 可 烟叶 提取物中 茄尼醇含 量
高且仪器背压高， 所以选择价格便宜的甲醇和乙醇
作为流动相体系来优化分离条件。选择不同体积比 的甲醇和乙醇来洗脱， 实验结果表明，随着乙醇的
增加， 茄尼醇出峰越快，容易与其他杂质峰重叠。 在甲醇 一 乙醇 （：）时，能获得最好的分离结果。 ７ ３ 所以本实验选择甲醇 一 乙醇 （：）作流动相。 ７ ３ ３２ ． 检测波长的选择 分别考察了以２０ ２０ ２５ｍ作检测波长时 ０ ， ， ｎ １ １ 茄尼醇的响应情况，茄尼醇在２０ｍ波长处有最大 ０ｎ 吸收， １ｎ ２０ｍ波长处有较大吸收，在 ２５ｍ处的吸 １ｎ 收只有 ２０ｍ处的３％，但由于检测波长为２０ ｍ ０ｎ ０ ０ｎ 时与甲醇和乙醇的吸收波长相近， 仪器干扰大且难 于稳定，因此选择检测波长为２０ｍ １ｎ ｏ 利用反相色谱柱测定烟叶和烟叶提取物中茄尼 醇的含量，该方法操作简便、重现性好，具有良好 的精密度和准确性，适用于烟叶和烟叶提取物中茄
０ 卜
表 １ 茄尼醉加样回收率试验结果
样品中 加入茄 实测茄 取样 回收率 平均回 茄尼醇 尼醇里 尼醇总 ／％ 收率／ ％ 且／ ｍｇ 含最／ ｇ ｍ ｍ ／ ｇ 留 ｍ ｇ
０ ４ １ ．７ ２
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２０ ２０ ２０ ２０ 一４０
０ ６ ８２ ．６
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９ ． ９ １
０６ ．４
０ ８ ３ ．５ ９
０ ８ ４９ ．６
０ ， ， １， ４ ［ 的 ． ２ ５ ０ ２， 溶液， 述 液 ２ ． ， ０ ０ ５ ｇ ， １ 取上 溶 各ＷＬ， Ｉ 注入液相色谱பைடு நூலகம்， 浓度为横坐标， Ｌ 以 峰
面积为纵坐标， 绘制标准曲线，得到线性方程Ｙ 二 １６ Ｘ一１ ， ０９９ ７ ５１ ２ ３４ ｒ ． ９ １ ＝ ９ ，茄尼醇在 ０２－ ．
为９．％） ７８ 。
２ 方法与结果 ２１ ． 色谱条件 色 谱 柱：Ｓｈｒｅ ， ５ ｍ ２ ｍ ｘ ｐｅｇ Ｃ （ ， ０ ｍ ｉｌ ￥ Ｒ ５
６ ８ ０ ２ ４ １ １ １ １ ６
１ ２ ８ ０ ｔ ｎ ／ ｍｉ
图 １ 茄尼醇对照品Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ图
１ ｍ 的 醇对照品 ． 茄尼 ２ｇ 进行回收试验。 每个样品平
行处理５ 按照样品测定的方法进行分析， 份， 计算 平均回收率， 见表 ｔ ｏ ２１ 样品的测定 ．０
按照上述条件，测定烟叶和烟叶提取物中茄尼 醇的含量， 测定结果见表２ ０
３ 讨论
３１ ． 流动相的选择 文献报道茄尼醇的反相色谱流动相体系主要是
功 叫 协 价 一
ｎ ｝
，
陷〔。 研 一种 用反相色 “ 本文 究了 利 」 谱柱测定烟叶 提
取物中茄尼醇含量的方法， 该方法操作简便、重现
Ｊ 性好， 具有良 好的精密度和准确性 ，可用于烟叶和 烟叶提取物中茄尼醇含量的测定。 １ 仪器与试剂
岛津Ｌ Ｉ ｖ Ａｐ高效液相色谱仪， Ｐ Ｉ ｖ Ｃ Ｏ ＳＤ ｐ Ｏ Ａ 紫外检测器， Ｉ一 Ｏｄｐ自 Ｓ １Ａｖ 动进样器。甲醇和乙 Ｌ
Ｑ０ 维生素 Ｋ 抗溃疡及抗癌药物的中间体，而 １、 、 且它本身也具有抗菌、 消炎和止血的作用［１ １。 ， ２ 茄尼醇的测定方法主要有气相色谱法［、电化 ３ １
甲醇 一 乙醇 （：） 流速： ｍ ・ｉ－ ７ ； ３ １ ｎ 检测波长： Ｌｍ Ｉ ， ２０ ， １ ｎ 柱温： ０Ｃ 进样体积为１ｗ ｏ ｍ ３ｃ， ０Ｌ ２２ ． 对照品及供试品溶液制备
选择异丙醇 一 乙睛，因使用异丙醇和乙睛时， 价格
１ ８
万方数据
第９ 第 ８ 卷 期 ２０ 年 ８ ０７ 月

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超高效液相色谱法测定烟叶中的茄尼醇含量

超高效液相色谱法测定烟叶中的茄尼醇含量

超高效液相色谱法测定烟叶中的茄尼醇含量张婕;汪云松;蔡凯;向章敏;周淑平;许冬青;耿召良【摘要】为了更简便高效地分析烟叶中游离茄尼醇的含量,建立了一种超高效液相色谱(UPLC)快速分析方法.将烟叶样品用甲醇超声提取10 min,经膜过滤直接进行超高效液相色谱分析；在1.7μm BEH C18色谱柱上用甲醇洗脱,在5 min 内实现了茄尼醇的快速分离,并用电喷雾四级杆-飞行时间质谱(Q-TOF-MS)对 m/z 613.57和631.58进行了定性分析.结果表明,茄尼醇的质量浓度范围为0.765~76.5μg/mL 时,峰面积与质量浓度具有良好的线性关系,相关系数为0.99924,方法的检出限7.65 ng/mL,RSD 为2.62%,平均回收率为91.1%.该方法适合于烟叶中游离茄尼醇含量的快速准确测定.%10.3969/j.issn.1007-5119.2012.06.016【期刊名称】《中国烟草科学》【年(卷),期】2012(000)006【总页数】5页(P80-84)【关键词】茄尼醇;烟叶;超高效液相色谱;四级杆-飞行时间质谱【作者】张婕;汪云松;蔡凯;向章敏;周淑平;许冬青;耿召良【作者单位】贵州省烟草科学研究所,贵阳 550081;云南大学,昆明 650091;贵州省烟草科学研究所,贵阳 550081;贵州省烟草科学研究所,贵阳 550081;贵州省烟草科学研究所,贵阳 550081;贵州省烟草科学研究所,贵阳 550081;贵州省烟草科学研究所,贵阳 550081【正文语种】中文【中图分类】S572.03茄尼醇（C45H74O）是一种主要存在于茄科植物叶中的无环四倍半萜烯醇化合物，于 1956年首次从烤烟中分离出来，在烟草叶片中的含量最高[1-2]。

茄尼醇是药物合成的重要原料和泛醌类药物的关键中间体，具有重要的医药开发价值[1-4]。

同时，茄尼醇在卷烟燃吸过程中可以热解产生多种香气成分和多环芳烃等有害物质，对烟草制品的品质和安全性具有很大影响[5]。

辅酶Q10的物理

辅酶Q10的物理

辅酶Q10的液相制备色谱的初探摘要：本文依据相关文献，首先介绍了辅酶Q10（Coenzyme Q10,CoQ10）研究和使用的发展过程，并对其物理、化学性质、药理临床作用以及制备检测方式进行了综述。

而后，本文着重介绍了高效液相色谱法（HPLC),并以高效液相色谱法提取烟叶中辅酶Q10的实验为例，介绍一种辅酶Q10的高效液相色谱分离方法。

最后，本文讨论了降低辅酶Q10生产成本、提高纯度的方法。

Abstract: With references to relating documents, this paper first introduces the process of development of the studies and utilization of Coenzyme Q10, and describes its physical and chemical properties, its clinical functions, and preparation and detection methods. Afterwards, this paper focuses on introducing the High Performance Liquid Chromatography (HPLC), and uses an experiment of extracting Q10 from tobacco leaf using the HPLC to present the separation method of the HPLC. Finally, this paper discusses measures for lowering the production cost and increasing the pureness of Q10.引言辅酶Q10（Coenzyme Q10,CoQ10）是一种脂溶性抗氧化剂，辅酶Q10是人类生命不可缺少的重要元素之一，能激活人体细胞和细胞能量的营养，具有提高人体免疫力、增强抗氧化、延缓衰老和增强人体活力等功能，医学上广泛用于心血管系统疾病，国内外广泛将其用于营养保健品及食品添加剂。

RP-HPLC法测定烟叶中的茄尼醇含量

RP-HPLC法测定烟叶中的茄尼醇含量

RP-HPLC法测定烟叶中的茄尼醇含量摘要】实验采用反相高效液相色谱法，以甲醇-乙醇（75:25）混合溶剂做流动相，流速1.0mL/min，用PDA检测器于211nm处测定了烟叶原料及国内外烟草制品中茄尼醇的含量。

方法的精密度为1.16%,回收率为94.3%～103.3%，RSD%为2.89%，茄尼醇进样量为0.05～1.00ug时，峰面积与进样量之间有良好的线性关系，相关系数为0.9999。

【关键词】反相高效液相色谱法茄尼醇烟叶【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）16-0393-02茄尼醇（Solanesol）化学名九聚异戊二烯醇，主要存在于茄科植物中，尤其在烟草中的含量较大[1]，其结构式见图1。

因茄尼醇含有多个非共轭双键，对自由基的吸收性能非常强烈，不仅能够抗菌、消炎、止血，还是合成维生素K2和治疗心血管疾病、抗癌、抗溃疡等药物（如辅酶Q10）的主要中间体 [2-4], 将含长链烯基的茄尼醇连接在药物上（如抗癌药SBD），可使其获得优良性能[5]，还可以作为抗溃疡药物、抗癌药物的重要合成原料。

茄尼醇是烟草中重要的萜类化合物之一，其与卷烟主流烟气中苯并[α]芘的形成有关，备受烟草行业降焦减害研究者的关注。

茄尼醇裂解过程中能产生柠檬烯（limonene）、法尼醇(fanesol)、3-羟基-2-丁酮(acetoin)等多种影响烟草吸味的香味成分[6]。

本文研究了运用反相高效液相色谱法测定烟叶中茄尼醇的含量，该方法操作简便，结果准确，基线平稳，保留时间合适，分离度好，可用于测定烟叶原料和烟草样品中茄尼醇的含量。

图1 茄尼醇结构式1 材料与方法1.1 仪器与试剂Waters 2690 型高效液相色谱仪，包括泵,自动进样器,柱温箱,waters 996 PDA检测器，色谱工作站和Millinum32软件，T6328B 型万分之一电子天平（上海），超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司)。

烟叶中茄尼醇的提取及检测研究进展

烟叶中茄尼醇的提取及检测研究进展

烟叶中茄尼醇的提取及检测研究进展程传玲;汪文良;管仕栓;林文强;毛多斌【摘要】茄尼醇是烟草的有效成分之一,可用作合成医用辅酶Q10和维生素K2的原料.本文介绍了国内外有关提取及检测烟叶中茄尼醇的各种方法,对茄尼醇的进一步研究有一定指导作用.【期刊名称】《江苏农业科学》【年(卷),期】2010(000)004【总页数】3页(P310-312)【关键词】烟叶;茄尼醇;提取;检测;研究进展【作者】程传玲;汪文良;管仕栓;林文强;毛多斌【作者单位】郑州轻工业学院食品与生物工程学院,河南郑州,450002;郑州轻工业学院食品与生物工程学院,河南郑州,450002;郑州轻工业学院食品与生物工程学院,河南郑州,450002;山东中烟工业公司,山东济南,250013;郑州轻工业学院食品与生物工程学院,河南郑州,450002;郑州轻工业学院食品与生物工程学院,河南郑州,450002【正文语种】中文【中图分类】Q541茄尼醇是烟草中存在的萜类化合物之一,含量高达0.3%～3.0%,在烟叶中以游离态和化合态 2种形式存在。

茄尼醇是非常重要的天然原料,不但具有抗菌、消炎、治疗心血管疾病及抗溃疡等作用,而且是一种重要的药用中间体[1],主要用于合成辅酶Q10(治疗心脏病的药物)、维生素K2、抗癌增效剂 SDB等[2]。

近年国际上以茄尼醇为原料进行新药研制工作受到比较大的重视[3]。

本文主要对国内外烟草中茄尼醇的提取及检测方法进行综述。

1 烟叶中茄尼醇的提取精制1.1 有机溶剂提取法该法是一种传统的提取技术,适用于有效成分遇热不稳定的原料。

姚文等通过研究发现,SOT溶剂体系萃取茄尼醇的能力比 6号汽油和正己烷高 14%～15%[4]。

岑波等用价廉易得的石油醚溶剂代替现有生产上常用的正己烷溶剂[5]。

陶云海等用95%乙醇浸泡烟叶得到烟叶浸膏,用石油醚提取后,得到质量分数为 17.1%的茄尼醇粗品[6]。

董占能等把废次烟叶经干燥、粉碎预处理后,用石油醚或正已烷提取其中的茄尼醇[7]。