5环境中微生物的检测

探究题04 检测不同环境中的细菌和真菌 1. 提出问题：洗手能减少手上的细菌和真菌数量吗?2.作出假设： 洗手能减少手上的细菌和真菌数量。

3. 图示过程 4. 实验变量：细菌和真菌。

对照组：①号培养皿。

5. 实验现象：25°C 恒温培养一段时间后，①号培养皿中无菌落，②号培养皿中有较多菌落，③号培养皿有较少菌落。

6. 结论：洗手能减少手上的细菌和真菌数量。

1. 培养细菌和真菌的方法：配制培养基(含有机物)→高温灭菌→接种-→恒温培养。

2. 培养皿高温处理的目的：高温杀死培养皿和培养基上的杂菌，排除其他杂菌的污染。

3. 接种问题：实验中要使用无菌棉棒进行接种，不能将培养基暴露在空气中，目的是防止棉棒上的微生物污染培养基。

4. 结果记录问题：及时登记观察结果，这时一定要登记好日期，千万不要在实验过程中打开培养皿。

一、单选题1．细菌和真菌的培养通常包括以下步骤，请选择正确的排列顺序（ ） ①配制培养基；②将接种后的培养基放在适宜的温度下培养；③接种；④高温灭菌冷却图解实验针对演练A．①④③②B．①②③④C．②①③④D．①③②④【答案】A【详解】细菌和真菌的生活需要一定的条件，如水分、适宜的温度、还有有机物。

因此，①首先要配制含有营养物质的培养基，可以用牛肉汁加琼脂熬制，然后把培养基和所有用具进行，④高温灭菌，以防杂菌对实验的干扰，为防止高温杀死细菌、真菌，要等冷却后，在进行③接种，接种后②放在温暖的地方进行恒温培养。

注意定期观察并详细记录实验现象。

故选A。

2．幼儿园的老师想让孩子知道手上有细菌或真菌，用无菌棉棒蘸取手心处，在培养基上轻轻涂抹，此步骤属于细菌、真菌一般培养方法中的（）A．接种B．灭菌C．配置培养基D．放在适宜的环境下培养【答案】A【详解】细菌和真菌的生活需要一定的条件，如水分、适宜的温度、还有有机物。

因此首先要配制含有营养物质的培养基，可以用牛肉汁加琼脂熬制，然后把培养基和所有用具进行高温灭菌，以防杂菌对实验的干扰，为防止高温杀死细菌、真菌，要等冷却后，再进行接种，接种后放在温暖的地方进行恒温培养。

纯牛奶五微生物项目检验方案
纯牛奶五微生物项目检验方案是指对纯牛奶进行检验时，需要检测的五项微生物指标，包括大肠杆菌群、酵母菌、乳酸菌、沙门氏菌和致病菌。

纯牛奶五微生物项目检验方案的实施步骤如下：
1.采集样品：采集纯牛奶样品，并将其分装到检测用的容器中；
2.灭菌：将采集的样品灭菌，以防止样品中的细菌污染；
3.培养：将灭菌后的样品放入培养基中，在适宜的温度和湿度条件下培养；
4.分离：将培养后的样品进行分离，以便检测；
5.检测：对分离后的样品进行检测，检测大肠杆菌群、酵母菌、乳酸菌、沙门氏菌和致病菌；
6.结果分析：根据检测结果，对纯牛奶的微生物指标进行分析，以判断纯牛奶的质量。

纯牛奶五微生物项目检验方案是确保纯牛奶质量的重要手段，可以有效检测纯牛奶中的微生物指标，从而确保纯牛奶的质量。

微生物取样方法、微生物检测标准举例一：一、空气采样及检验方法1培养基：普通营养琼脂平板，按GB4789.28中3.7条配制2采样（空气沉降法）2.1布点：面积小于30平方米的车间，设一对角线，在线上取3点，即中心一点，两端在距墙1米处各取一点；面积大于30平方米的车间，设东、西、南、北、中5个点，其中东、西、南、北点均距墙1米。

2.2采样高度：与地面垂直高度80-150厘米。

2.3采样方法；用直径为9厘米的普通营养琼脂平板在采样点上暴露20分钟盖上送检培养。

3培养：于37℃培养24小时。

4检测频率：每周空气质量标准：生车间、熟车间、成品车间：低于100个半成品库、成品库：低于10个二、设备的采样与检验方法根据生产过程所要求的重点卫生部位，实验室对其进行涂抹采样，进行细菌总数检验。

1采样方法1.1涂抹法（适用于表面平坦的设备和工器具产品接触面）取经过灭菌的铝片框（框内面积为50平方厘米）放在需检查的部位上，用无菌棉球蘸上无菌生理盐水擦拭铝片中间方框部分，擦完后立即将棉球投入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。

1.2贴纸法（适用于表面不平坦的设备和工器具接处面）将无菌规格纸（5×5厘米，纸质要薄而软）用无菌生理盐水泡湿后，于需测部分分别贴上两张，两张纸面积共50平方厘米，然后取下放入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。

2检验方法2.1细菌总数的检验将上述样液充分振摇，根据卫生情况，相应地做10倍递增稀释，选择其中2-3个合适的稀释度作平皿倾注培养，培养基用普通营养琼脂，每个稀释度作2个平皿，每个平皿注入1毫升样液，于37℃培养24小时后计菌落数。

结果计算表面细菌总数（cfu/cm2）=平皿上菌落的平均数×样液稀释倍数/30×22.2致病菌的检验沙门氏菌，参照GB4789.4进行金黄色葡球菌，参照GB7918.5进行4.检验合格标准：细菌总数10－100个∕cm2，5.关键点：细菌总数≤10个∕cm2一般区域：细菌总数≤100个∕cm2三、人员手表面细菌污染情况的检验1. 采样方法：用一支蘸有无菌生理盐水的棉拭子涂擦被检对象手的全部，反复两次，涂擦的时候棉拭子要相应地转动，擦完后，将手接触部分剪去，将棉拭子放入装有10毫升无菌生理盐水的试管内送检培养。

如何用BOD5测定仪正确检测BOD5BOD5测定仪由微处理器、放大器、打印机、BOD培育瓶和生化培育箱等构成。

BOD5测定仪是环境水质监测中常用的仪器。

下面将介绍BOD5测定仪的原理。

BOD5是一种紧要的污染物指标，通过检测水体中微生物在新陈代谢过程中消耗的溶解氧量，间接计算出有机物对水体的污染程度。

一、BOD5测定仪的检测方法：将bod检测仪置于培育箱中，依据预先选定的量程和测量范围，将定量体积的水样倒入培育瓶中，置于搅拌器上进行连续搅拌。

培育箱内温度掌控在20℃±1℃，水样先进行恒温，然后进行五日培育。

必需确保培育瓶中有充足的溶解氧。

样品中的有机物经过生物氧化作用，转化为氮、碳和硫的氧化物，在此过程中，水样中释放的气体二氧化碳，被氢氧化锂汲取。

因此，瓶内气压的降低相当于微生物消耗的溶解氧量。

这样，样品的BOD值与瓶内气压降低的程度成正比。

BOD值可以通过测量气压的变化来获得。

加添或削减取样量可以加添或削减压力降低值。

这使操无需多而杂的稀释步骤即可精准测量大范围的BOD值。

通过压力传感器检测培育瓶内气压的变化，通过液晶显示屏循环显示每个样品的BOD值和生化反应曲线。

二、使用BOD5测定仪进行检测的优点：这种检测方法摒弃了直接使用汞柱读取压差的方法，一方面除去了水银挥发对人体造成的危害，另一方面操作更加简便、智能，采纳智能电子压力传感器，提高了测量的精准度，并拓宽了BOD的测量范围。

三、BOD5测定仪的原理：放大器置于培育箱内，并按预先选择的量程及测量范围，定量体积的水样倒入培育瓶，放在放大器上连续搅拌。

培育箱内温度掌控在20℃±1℃，水样恒温后进行五日培育。

培育瓶中必需保证充足的溶解氧。

样品中的有机物经过生物氧化作用，变化成氮、碳和硫的氧化物，在这一过程中，从水样中跑出来的气体二氧化碳被氢氧化钠（或氢氧化钾）汲取。

因此，瓶中空气压力削减量，相当于微生物所消耗的溶解氧量，这样，样品BOD5值与瓶中空气压力削减的程度成正比，通过测量空气压力的变化可以得到BOD5值。

一、空气中微生物的检测方法------细菌总数（营养琼脂，121℃高压灭菌20min，培养时间37℃,48h）1.两种方法（1）撞击法(二级或者六级微生物采样器)（2）自然沉降法（暴露5min）采样：梅花布点，高度：1.2~1.5m；离墙：1m。

二、茶具微生物检验方法（一）细菌总数1、生理盐水的制法：将氯化钠（8.5g）溶解于蒸馏水（1000mL）中，分装到试管内，每管10mL，121℃高压灭菌20min。

2、采样：棉拭子湿润生理盐水，在茶具内、外缘涂抹50cm2，即口唇接触处一圈（1~1.5cm），用灭菌剪刀剪去棉签手接触处，将棉拭子放入10mL生理盐水中，4h内送检。

3、检验程序：检样→各1mL加入两块灭菌平皿（若污染严重，可十倍递增稀释）→37℃，48h 培养→菌落计数→报告4、单位：cfu/cm2。

（二）大肠菌群1、培养基：乳糖胆盐发酵培养液（双料的，每管10mL，115℃高压灭菌15min）2、检测方法：发酵法（具体内容课本11页）3、检样（测定细菌总数余下的样品）4、革兰氏染色过程：（阳性菌显紫色，阴性菌显红色）（1）初染：1min，水洗；（2）碘染：1min，水洗；（3）脱色：30s，水洗；（4）复染：1min，水洗，待干，镜检。

5、结果报告：凡乳糖发酵管最终产酸产气，革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌，即可报告检出大肠菌群。

三、毛巾、床上卧具微生物检测方法（一）细菌总数1.采样（1）毛巾、枕巾：对折后两面的中央各25cm2；（2）床单、被单：在上下两部中央25cm2来回涂抹；2、检测程序同茶具细菌总数检测3.计算单位：cfu/25cm2。

(二)大肠菌群（检测程序同茶具大肠菌群检测）1.涂抹法：（用测定细菌总数时采集的样品）四、理发用具微生物检验方法（一）大肠菌群1、采样推子：在推子前部上下部分均匀各涂抹三次；理发刀、剪和修脚工具：在使用的刀、剪面的两侧各涂抹一次采样；两个刀或者两个剪为一份样品。

环境微生物检测标准操作规程作业指导书持有部门：院感办文件编号：
制定者：审核者：版次：1 制定日期：审核日期：执行日期：
一、监测目的
1.感染暴发或感染流行时，环境因素在感染传播中有流行病学意义。

2.监测潜在的危险环境状况，证明有危险的病原体存在或证明危险的病原体已被清除。

3.当某项感染控制措施改变时，评估其效果。

4.目标性监测的需要。

5.询证医学证据支持。

二、空气培养（沉降法）
1.采样时间：Ⅰ类环境在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ类环境在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样。

2.采样高度：距地面垂直高度
80-150cm。

3.采样点设定：
（1）Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ类环境：室内面
积≤30m2，在对角线上设里、中、外3点，里、外两点位置各距。

微生物取样方法、微生物检测标准举例一：一、空气采样及检验方法1培养基：普通营养琼脂平板，按GB4789.28中3.7条配制2采样（空气沉降法）2.1布点：面积小于30平方米的车间，设一对角线，在线上取3点，即中心一点，两端在距墙1米处各取一点；面积大于30平方米的车间，设东、西、南、北、中5个点，其中东、西、南、北点均距墙1米。

2.2采样高度：与地面垂直高度80-150厘米。

2.3采样方法；用直径为9厘米的普通营养琼脂平板在采样点上暴露20分钟盖上送检培养。

3培养：于37°C培养24小时。

4检测频率：每周空气质量标准：生车间、熟车间、成品车间：低于100个半成品库、成品库：低于10个二、设备的采样与检验方法根据生产过程所要求的重点卫生部位，实验室对其进行涂抹采样，进行细菌总数检验。

1采样方法1.1涂抹法（适用于表面平坦的设备和工器具产品接触面）取经过灭菌的铝片框（框内面积为50平方厘米）放在需检查的部位上，用无菌棉球蘸上无菌生理盐水擦拭铝片中间方框部分，擦完后立即将棉球投入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。

1.2贴纸法（适用于表面不平坦的设备和工器具接处面）将无菌规格纸（5X5厘米，纸质要薄而软）用无菌生理盐水泡湿后，于需测部分分别贴上两张，两张纸面积共50平方厘米，然后取下放入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米。

2检验方法2.1细菌总数的检验将上述样液充分振摇，根据卫生情况，相应地做10倍递增稀释，选择其中2-3个合适的稀释度作平皿倾注培养，培养基用普通营养琼脂，每个稀释度作2个平皿，每个平皿注入1毫升样液，于37C培养24小时后计菌落数。

结果计算表面细菌总数（cfu/cm2）=平皿上菌落的平均数X样液稀释倍数/30X22.2致病菌的检验沙门氏菌，参照GB4789.4进行金黄色葡球菌，参照GB7918.5进行4.检验合格标准：细菌总数10—100个/cm2，5.关键点：细菌总数W10个/cm2一般区域：细菌总数W100个/cm2三、人员手表面细菌污染情况的检验1.采样方法：用一支蘸有无菌生理盐水的棉拭子涂擦被检对象手的全部，反复两次，涂擦的时候棉拭子要相应地转动，擦完后，将手接触部分剪去，将棉拭子放入装有10毫升无菌生理盐水的试管内送检培养。

微生物检测方法微生物检测是指对环境、食品、药品、生物制品等中的微生物进行检测和监测的过程。

微生物检测的方法多种多样，根据不同的检测对象和要求，可以选择合适的方法进行检测。

下面将介绍几种常见的微生物检测方法。

首先，传统的培养方法是一种常见的微生物检测方法。

这种方法是将样品在适宜的培养基上培养一段时间，然后观察培养基上是否有微生物生长，根据生长的数量和形态来判断样品中是否存在微生物。

这种方法简单易行，但需要较长的时间，且对于某些难以培养的微生物可能无法检测出来。

其次，PCR方法是一种快速准确的微生物检测方法。

PCR方法是利用聚合酶链式反应技术，通过扩增微生物DNA片段来进行检测。

这种方法具有高度的特异性和敏感性，可以快速准确地检测出微生物的存在和数量。

但是，PCR方法需要设备和技术的支持，成本较高，且对样品的前处理要求较高。

另外，免疫学方法也是一种常用的微生物检测方法。

这种方法是利用抗体与特定的微生物抗原结合的原理进行检测。

免疫学方法具有高度的特异性和灵敏度，可以快速准确地检测出微生物的存在和数量。

但是，免疫学方法需要较长的培养时间，且受到环境因素的影响较大。

此外，基因测序技术也是一种新兴的微生物检测方法。

这种方法是通过对微生物的基因进行测序分析，来确定微生物的种属和数量。

基因测序技术具有高度的准确性和全面性，可以对微生物进行全面的检测和分析。

但是，基因测序技术需要较长的分析时间和复杂的数据处理，且对设备和技术要求较高。

综上所述，微生物检测方法有传统的培养方法、PCR方法、免疫学方法和基因测序技术等多种选择。

在实际应用中，可以根据检测对象和要求选择合适的方法进行检测。

随着科学技术的不断发展，相信微生物检测方法会更加快速、准确、全面，为微生物监测和控制提供更好的技术支持。

微生物检验基础知识
微生物检验是一种使用显微技术对微生物进行观察和测量的方法。

以下是微生物检验的基础知识：
1. 微生物的概念：微生物是微小的生物，通常需要使用显微镜才能看到。

它们包括细菌、病毒、真菌、藻类等。

2. 微生物检验的分类：微生物检验可以分为细菌检验、病毒检验、寄生虫检验和真菌检验等。

3. 微生物检验的方法：微生物检验的方法包括直接观察、分离培养、血清学试验、生化反应等。

4. 微生物检验的步骤：微生物检验的步骤包括采集样品、制备培养基、接种、培养、观察和鉴定等。

5. 微生物检验的应用：微生物检验在医学、环境监测、食品卫生等领域有广泛应用。

例如，在医学领域中，微生物检验可以帮助医生诊断疾病，监测感染情况，并选择合适的药物治疗。

在环境监测中，微生物检验可以用来检测水源、土壤等环境的污染情况。

6. 微生物的特点：微生物具有体积小、数量大、繁殖快等特点。

同时，它们也具有广泛的分布和多样的种类，可以在各种环境中生存和繁殖。

通过以上基础知识的学习，可以对微生物检验有一个基本的了解和认识。

如有更深入的学习需求，建议阅读微生物检验相关书籍或咨询专业人士。