医学免疫学CDC实验

CDC(complement dependent cytotoxicity test)
补体依赖的细胞毒性试验
实 验 原 理
细胞表面抗原与相应的抗体（IgG1~3或IgM）
特异性结合形成的免疫复合物，可通过经典途径
激活补体形成攻膜复合体而导致细胞膜穿孔。
因此，水溶性染料如台盼蓝可进入受损细胞， 不染色，为阴性反应。
CDC实Байду номын сангаас操作步骤
试剂 LC(μl) ALS(μl) PBS(μl) C(μl) PBS(μl) 第一组 第二组 LC＋ALS＋C LC＋ALS 50 50 50 50 37℃ 100 37℃ 孵育30 min
Ab: ALS
第三组 第四组 LC LC＋C 50 50
50
100 100 孵育30 min
免疫预防
Ag 人工自动 免疫
人工被动 免疫 Ab
第二节 免疫治疗
• 免疫增强剂：IL-2, IFN-γ, 中药
• 免疫抑制剂：糖皮质激素，中药
骨髓干细胞治疗， 单克隆抗体导向药物， 基因治疗，LAK, TIL
CDC实验结果
染成蓝色，为阳性反应；不带抗原的细胞，未损伤，
方法
胸腺细胞（ＬＣ）悬液制备
小组操作
个人滴片
胸腺细胞（ＬＣ）悬液制备
胸腺细胞悬液制备
颈椎脱臼法处死小鼠 消毒其胸腹部皮肤 暴露胸腔，分离出胸腺 镊子夹住胸腺反复轻轻研磨 单个细胞 PBS洗２次，1000rpm，10min 弃上清 加入5%小牛血清PBS制备细胞悬液 调节细胞浓度至3-4×107/ml 计数并检测细胞存活率
50
100
每组加台盼蓝50 μl ，
分别用不同吸嘴先混匀后取40 μl于高倍镜下观察。
第一节 免疫预防
概念：
1.人工主动免疫（artificial active immunization）: 用疫苗接种机体,使之产生特异性免疫,从而预防 感染的措施。 2.人工被动免疫（artificial passive immunization）: 给人体注射含特异性抗体的免疫血清或细胞因子 等制剂，以治疗或紧急预防感染的措施。