淋巴瘤基因克隆性重排检测 PPT
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T细胞淋巴瘤TCRT基N重排特征分析及检测方法的优化摘要研究背景与目的淋巴瘤在组织和细胞形态学方面与高度反应增生性淋巴组织的鉴别诊断十分困难,容易造成误诊。
淋巴瘤病理诊断是临床病理工作的难题之一。
目前国内主要依靠以形态学为主、免疫组化为辅的诊断手段。
随着分子生物学的发展,从基因水平研究和分析诊断疾病的技术不断出现并且日趋成熟,为淋巴瘤诊断提供了有效工具。
淋巴瘤是由单克隆淋巴细胞增生所致,而反应增生性淋巴组织则来自于多克隆淋巴细胞,这是二者的重要区别。
编码免疫球蛋白(Ig)或T细胞受体(TCR)的基因经过重排以后,不同克隆之间的重排基因互不相同,因此,基因重排对淋巴瘤的诊断具有特异性价值。
以PCR技术为基础的方法以其简便、高效、廉价及适用面广而在淋巴瘤基因重排研究方面越来越受重视。
但不同研究文献中所采用的引物、PCR条件、PCR产物检测方法等都不尽相同,结果也有差异。
因此,难以找到适于常规临床病理诊断之用的标准程序。
Jurkat细胞是T细胞淋巴瘤基因重排研究中常用的阳性对照细胞,但有关Jurkat细胞基因重排的详细情况也未见报道。
假基因是Ig和TCR胚系DNA中常见的基因,有关假基因参与重排的情况以及在设计引物方面是否应将假基因包括在内也未见有关研究报道。
本实验以TCR基因重排为研究对象,通过优化引物选择、PCR条件及PCR产物的检测方法等,分析T细胞淋巴瘤基因重排检测的最佳方法。
同时,分析TCR基因重排的特点,为进一步研究TCR基因重排提供理论和技术支持。
方法1以TCRy基因重排为研究对象,选用通用引物TVG、VvI及TCR7家族特异性引物为工具。
用正交设计实验优化ⅥI引物的PCR条件。
另选一对TCR[j通用引物作为TCRy引物的补充和比较。
2利用PCR和测序研究Jurkat细胞基因重排情况,分析TCR基因重排的基本特点。
3PCR产物检测方法①利用TCR通用引物检测淋巴瘤克隆性基因重排阳性率,分别用琼脂糖电泳和SSCP分析PCR产物;②将PCR产物分别进行直接测序和克隆后测序,分析TCR基因重排的特点及探索测序方法在基因重排检测中的应用;⑧分析PCR产物中DNA的克隆数与SSCP中条带数目的关系。
淋巴瘤课件-(带目录)淋巴瘤课件一、引言淋巴瘤,一种起源于淋巴造血系统的恶性肿瘤,近年来在我国发病率逐年上升。
淋巴瘤的发病机制复杂,涉及遗传、环境、免疫等多个方面。
本课件旨在对淋巴瘤的病因、病理、临床表现、诊断和治疗等方面进行详细阐述,以提高大家对淋巴瘤的认识和防范意识。
二、淋巴瘤的病因与发病机制1.遗传因素:家族性淋巴瘤的发病率较高,遗传因素在淋巴瘤的发生中具有重要作用。
部分基因突变与淋巴瘤的发病密切相关,如BCL2、BCL6、C-MYC等基因。
2.环境因素:长期接触有害物质,如农药、染发剂、放射性物质等,可增加淋巴瘤的发病风险。
3.免疫因素:免疫系统异常是淋巴瘤发病的关键因素。
例如,HIV感染、器官移植后免疫抑制剂的使用等,均会增加淋巴瘤的发病风险。
4.感染因素:某些病原体感染,如EB病毒、幽门螺杆菌等,与特定类型的淋巴瘤发病有关。
三、淋巴瘤的病理分类1.霍奇金淋巴瘤:以Reed-Sternberg细胞为特征,约占所有淋巴瘤的10%。
可分为结节性淋巴细胞为主型和经典型两大类。
四、淋巴瘤的临床表现淋巴瘤的临床表现多样,主要表现为无痛性淋巴结肿大、发热、盗汗、体重下降等。
根据受累部位的不同,还可出现相应的症状和体征。
1.淋巴结肿大:无痛性、质地较硬,活动度差,可触及或不可触及。
2.肝脾肿大:部分患者伴有肝脾肿大,可导致腹胀、腹痛等症状。
3.结外侵犯:淋巴瘤可侵犯结外器官,如胃肠道、皮肤、骨骼等,出现相应症状。
4.全身症状:发热、盗汗、体重下降等。
五、淋巴瘤的诊断与鉴别诊断1.影像学检查:如CT、MRI等,可了解淋巴瘤受累范围及侵犯程度。
2.淋巴结活检:是确诊淋巴瘤的关键,包括细针穿刺活检和手术切除活检。
3.免疫组化:有助于明确淋巴瘤的病理类型和细胞来源。
4.骨髓穿刺:了解骨髓是否受累,评估病情严重程度。
5.鉴别诊断:需与淋巴结炎、淋巴结结核、恶性组织细胞病等疾病相鉴别。
六、淋巴瘤的治疗淋巴瘤的治疗原则为个体化、综合治疗。