交叉配血卡 操作规程

抗人球蛋白检测卡（交叉配血）标准操作规程一、目的：为规范交叉配血试验的技术操作，保证临床输血安全有效，特制定本规程。

二、适用范围：适用于输血科进行交叉配血试验。

三、职责：输血科技术人员负责交叉配血试验四、试剂及材料（一）试剂：抗人球蛋白检测卡（二）设备：专用离心机，专用孵育器，微量移液器（5-50ul）、普通离心机、玻璃或塑料试管、0.9%生理盐水等五、标本要求：（一）抽取受血者抗凝（抗凝剂为EDTA．K2）静脉血2-3ml，在3000r／min条件下离心5分钟备用。

（二）标本保存：血液样本必须密封，2-6℃保存7天。

（三）用于交叉配血必须是2-6℃保存3天以内的标本。

六、操作步骤：（一）交叉配血前，复检患者ABO和RH血型（二）在抗人球蛋白卡片上标明患者姓名（三）将受血者和献血者的红细胞和血清分离（四）取试管两支，用低离子溶液分别配患者和献血者0.5％-0.8％红细胞悬液（取分离血清后受血者底层红细胞8ul与0.9%生理盐水1mL配成0.8％受血者盐水悬液，取分离血清后供血者底层红细胞8ul 与0.9%生理盐水1mL 配成0.8％供血者盐水悬液）（五）交叉配血：主侧：患者血清50uL＋献血者红细胞悬液50uL次侧：献血者血清50uL＋患者红细胞悬液50uL（六）将卡放入37℃孵育箱15分钟（七）移出放入离心机5分钟，900rmp2分钟，1500rpm3分钟，取出观察结果。

七.结果观察：（一）阴性结果：主侧和次侧均不凝集，红细胞完全沉于凝胶管底部，配血相合。

（二）阳性结果：主侧和次侧均凝集，红细胞位于凝胶表面或中间，配血不相合。

（三）如果发生溶血，提示为阳性结果。

八．微柱卡式法凝集强度描述。

交叉配血操作规程交叉配血试验（凝聚胺法）[原理]凝聚胺试验是利用低离子溶液促进红细胞抗原与血清（浆）中的抗体反应，再利用凝聚胺引起红细胞间非免疫性的凝集，让已有抗体（IgG）反应的红细胞间的距离缩短。

距离缩短后更能引起已反应的抗体和别的红细胞产生反应形成免疫性的凝集。

而由凝聚胺所引起的非免疫性红细胞凝集反应可被后来加入的复悬液所中和而散开，如有免疫反应，凝集就不会散开，为阳性反应。

如没有免疫反应，凝集就会散开，为阴性反应。

交叉配血试验是在盐水介质的基础上加入凝聚胺，检测供患之间是否相合，患者血清（浆）中是否含有具临床意义的红细胞异体抗体。

[试剂组成]1，洁净试管，离心机，显微镜。

2，0.85% 氯化钠溶液：准确称取氯化钠（AR）8.5 g，用蒸馏水溶解并定容至1000 ml。

试剂启用后，有效期为：二周。

3，凝聚胺试剂*1 低离子介质溶液：含葡萄糖，乙二胺四醋酸-2钠及稳定剂。

*2 凝聚胺溶液：含凝聚胺，氯化钠及稳定剂。

*3 复悬液：含柠檬酸钠，葡萄糖及稳定剂。

*4 阳性对照血清：含抗D血清，氯化钠及稳定剂。

4，抗人IgG 血清。

[试剂保存和稳定性]1．凝聚胺试剂须保存在2-25℃。

2．有效期内可使用。

3．抗人IgG血清低温冰箱保存。

复溶后放2—4℃冰箱保存。

[标本收集和准备]1．抽取受血者静脉血3-4ml（操作中小心防止红细胞破损），放入一已贴标签干燥洁净的试管中为血清管(也可用EDTA-K2抗凝血液)，并将注射器中余下的少量血液配成2%红细胞生理盐水悬液，放入另一已贴标签干燥洁净的试管中为红细胞悬液管。

以上标本有效期为三天；若受血者抽取标本后，输用过血液或血液制品，且输用时间超过12 小时的，必须重新采集标本。

2．2% 红细胞悬液：用生理盐水洗涤红细胞3次。

根据下表进行红细胞悬液的配制。

悬液浓度（%）压积红细胞（滴）盐水（滴）----------------------------------------------------------------2 1 2ml(40)5 1 0.8ml(16)----------------------------------------------------------------[操作步骤]1．取出3支试管分别标记主，次及对照测试：主测管：加入病人血清（浆）2滴，再加入供血者3-5%红细胞悬液1滴，次测管：加入供血者血清（浆）2滴，再加入病人3-5%红细胞悬液1滴，对照管：加入2滴*4阳性对照血清，再加入供血者3-5%红细胞悬液1滴。

交叉配血试验标准操作规程（微柱凝胶抗人球蛋白法）1. 目的为规范微柱凝胶抗人球蛋白法在交叉配血试验中的应用，保证检测结果准确及临床输血安全有效，依据《输血实验室管理程序》的要求制定本规程。

2. 适用范围适用于医疗机构输血科作交叉配血试验。

3. 职责医疗机构输血科技术人员负责对交叉配血的试验。

4. 原理红细胞血型抗原与不完全抗体（IgG），在抗人球蛋白的桥梁作用下，经一定的离心力，产生特异性免疫凝集复合物或红细胞血型抗原与完全抗体（IgM）直接产生的特异性免疫凝集复合物，被排阻在具有三维空间网状结构的凝胶表层或凝胶颗粒间隙之中，判为阳性结果，表示待检血标本中含有相应红细胞血型抗原抗体；红细胞全部沉积于凝胶孔腔底部，即判断为阴性反应，表示待检血标本中无相应的红细胞血型抗原抗体。

5. 所需设备和试剂普通离心机、微注凝胶卡专用离心机、微柱凝胶卡专用孵育器、微量移液器、抗人球蛋白微柱凝胶卡6. 检测环境条件室湿应控制在18~27℃，湿度应保持30%~70%。

7. 操作步骤7.1先将供（受）血标本制备0.5%红细胞低离子介质（LIM）悬液。

7.2撕开卡的封膜，于反应胶中主（次）侧管加供（受）者 0.5% 红细胞LIM 悬液100μl，加入受（供）血者血浆或血清25μl（或50μl）。

7.3将检测卡37℃孵育15min取出，置离心机1800r/min离心1min,2500r/min离心1min。

7.4取出，判定结果，结果判定标准按下表：（可参照结果判定示图）检验结果的解释：阳性结果，表示受（供）血者血浆或血清中含供（受）血者红细胞血型抗原相应的抗体（不完全抗体IgG或完全抗体IgM），供受血者血液不相容。

阴性结果，表示供受血者血液相容。

8. 质量控制8.1微柱凝胶试剂卡在有效期内使用，每批试剂卡在使用前用已知阴、阳性对照确认其有效性。

8.1试剂质量控制方法8.1.1即作阴、阳性对照试验：撕开检测卡的封膜，于2个反应腔中分别加入已致敏IgG抗D的1%O型RhD(+)红细胞LIM悬液50μl、健康者1%O型RhD(+)红细胞LIM悬液50μl。

交叉配血操作规程交叉配血是一种常用的动物繁殖方法，通过将两个不同的个体进行交叉配对，以获得具有理想遗传特征的后代。

下面是一份交叉配血操作规程，详细介绍了交叉配血的具体步骤和注意事项。

一、前期准备1.确定需要交叉配血的两个个体，分别为雄性和雌性个体。

2.对选定的个体进行健康检查和基因型鉴定，确保它们身体健康且没有携带任何遗传疾病或缺陷。

3.确定交叉配血的时间和地点，保持环境整洁，避免外部因素对实验造成干扰。

4.准备必要的实验器材和试剂，包括培养皿、显微镜、匀浆器、移液器、生理盐水等。

二、交叉配血操作步骤1.检查个体性别：使用显微镜或基因鉴定方法，确认选定个体的性别。

2.打开个体体腔：以手术刀或麻醉剂等方法，在个体体腔中打开一个小孔，以便于之后的操作。

3.收集个体血液：用匀浆器缓慢吸取个体血液，将其置于培养皿中。

4.检查血液凝固情况：观察个体血液是否凝固，若已凝固则将其舍弃，重新收集血液。

5.将雄性血液与雌性血液混合：将取自雄性个体的血液与取自雌性个体的血液混合，保持培养皿中的血液充分混合。

6.观察交配反应：观察混合后的血液是否发生凝集或聚集，若出现凝集或聚集现象，说明雄性与雌性个体之间存在交配反应。

7.鉴定交配结果：使用显微镜或试纸等方法，对交配结果进行鉴定和记录。

8.存储交配后的血液：若需要保存交配后的血液供后续研究使用，将其分装于合适的容器中，并存放于低温环境中。

9.清理实验现场：将使用过的器材和材料进行清理和消毒，保持实验现场整洁。

三、注意事项1.交叉配血操作需要在无菌环境下进行，以避免外部微生物对实验的污染。

2.个体血液的收集应该尽量避免暴露在空气中，以免造成血液的凝固或氧化。

3.操作过程中要注意个体的安全，减少对个体的伤害。

4.需要保持操作的准确性和规范性，避免实验中出现误差。

5.实验后要对结果进行及时记录和分析，以便下一步的研究。

6.学习和了解相关法规和伦理要求，确保在动物实验中符合相关规定。